枸杞多糖对衰老小鼠原癌基因c—myc表达的影响

目的：探讨枸杞多糖抗衰老的分子机理。方法：采用老年小鼠和D－半乳糖致衰老小鼠两种衰老动物模型,分别连续灌服枸杞多糖2个月和1个月,应用半定量逆转录－聚合酶链式反应技术（RT－PCR）检测小鼠骨髓原癌基因c-myc表达的变化。结果：老年小鼠和D－半乳糖致衰老小鼠骨髓原癌基因c-myc表达是枸杞多糖抗衰老分子机理之一（P＜0．001）,给药后则可明显得到抑制（P＜0．05）。结论：抑制原癌基因c-myc表达是枸杞多糖抗衰老分子机理之一。     

从补肾生血药对衰老小鼠IL—2、IL—2R的效应探讨肾生髓与免疫调节的关系

目的探讨肾生髓与免疫调节的关系.方法采用老年小鼠和D-半乳糖致衰老小鼠两种衰老肾虚动物模型,分别连续灌服补肾生血药两个月和1个月,应用MTT法检测脾淋巴细胞增殖,放射免疫技术测定IL-2的含量,流式细胞技术分析L-2R的表达情况.结果老年小鼠和D-半乳糖致衰老小鼠脾淋巴细胞增殖能力、IL-2含量、IL-2R表达明显低于青年小鼠和正常对照小鼠(P＜0.001),给药后则可明显得到提高(P＜0.05～0.01).结论肾生髓与免疫调节密切相关,补肾生血药能增强机体的免疫功能.     

补肾生血解毒方对再生障碍性贫血小鼠白细胞生成的影响

目的：探讨补肾生血解毒方对理化因素致骨髓抑制造成再生障碍性贫血（AA）模型小鼠白细胞生成的影响。方法：BALB／C小鼠随机分为空白组、模型组和补肾生血解毒方小、中、大剂量组,除空白组以外其余各组小鼠以60Co一γ射线复合环磷酰胺致小鼠骨髓造血抑制,补肾生血解毒方小、中、大剂量组分别给予不同剂量中药灌胃,其余2组予等量生理盐水灌胃。血细胞计数仪检测小鼠外周血中白细胞（WBC）的改变,酶联免疫吸附测定（ELISA）检测外周血血清中粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）含量的差异,real—timePCR检测骨髓细胞中GM—CSF受体仪、B基因表达的改变。结果：与模型组比较,补肾生血解毒方可以明显提高AA模型小鼠外周血白细胞数量（小剂量作用14d）,显著增加外周血血清中GM—CSF含量和骨髓细胞中GM—CSF受体基因的表达。结论：补肾生血解毒方治疗AA发挥疗效作用．可能与提高GM—CSF活性和诱导造血细胞分化为成熟的白细胞．并促进其增殖、发挥免疫调节作用有关。     

补肾生血药对衰老小鼠Bcl-2mRNA表达的影响

“肾生骨髓”是中医肾生理功能的重要组成部分。因此,肾生髓理论的现代研究在肾本质研究中占有重要的地位。我们实验室自20世纪70年代末以来一直致力于肾生髓理论的现代研究,研究的重要成果之一是补肾生血药的研制成功。该药由熟地黄、何首乌、山茱萸、枸杞子、阿胶等11味中药组成,具有滋阴补肾,益髓生血等功能。20多年来,我们通过对补肾生血药的药效机理的研究,来阐述中医经典理论肾生髓的现代内涵。基因是决定生命结构和功能的最根本物质,与     

补髓生血冲剂对小鼠造血功能的实验研究

为了探讨补髓生血冲剂对再生障碍性贫血患的药物作用机理，对失血性贫血模型小鼠及环磷酰胺（CY）导致骨髓抑制模型小鼠进行治疗观察。对小鼠外周血WBC，RBC，Hb，网织红细胞（RC）及骨髓有核细胞（BMC），脾脏重量和多能造血干细胞（CFU－S）等指标进行检测，并与目前临床上常用的省优部优产品再障生血片进行了对比，以探讨补髓生血冲剂对小鼠造血系统的影响。结果表明补髓生血冲剂具有明显促进骨髓造血和脾脏髓外造血的作用，并且对升高WBC、RC、BMC及CFU－S等方面明显优于再障生血片。     

补肾生血和补肾调经方药对老龄雌性金黄地鼠生殖器官组织形态的影响

补肾生血复方中药由生地、熟地、龟板胶、山萸肉等１１味中药组成，具有补肾生髓、造血补血、滋阴填精补髓作用［１、２］，研究表明肾生髓理论的分子基础具有提高ＤＮＡ含量、ＤＮＡ聚合酶活性、ＤＮＡ甲基化水平、血红蛋白ｍＲＮＡ转录水平的作用［３、４］。补肾调经复...     

中国神方补肾生血药抗衰老分子机理的研究

本文就补肾生血药作用的分子基础作了深入研究。结果表明，补肾生血药能明显提高老龄大鼠ＤＮＡ合成代谢水平，提高骨髓有核细胞内ＤＮＡ、核酸含量，明显提高ＤＮＡ聚合酶活力，该药还能提高鼠肝ＤＮＡ甲基化酶活力及ＤＮＡ甲基化水平     

百合多糖抗氧化作用研究

百合多糖200、400mg/kg ig,可使D－半乳糖致衰老小鼠血中SOD、CAT及GSH－Px活力升高,血浆、脑匀浆和肝匀浆中LPO水平明显下降。     

益髓生血颗粒对不同发育阶段小鼠α-血红蛋白稳定蛋白表达的影响

目的：探讨益髓生血颗粒对不同发育阶段小鼠α-血红蛋白稳定蛋白(alpha-hemoglobin stabilizing protein,AHSP)表达的影响。方法：分别提取正常成年小鼠骨髓、孕鼠(孕21 d)和胎鼠(孕14 d)胎肝胎脾有核细胞总RNA,采用real-time RT-PCR方法检测中药益髓生血颗粒干预后对不同发育阶段小鼠的α-珠蛋白稳定蛋白基因表达的影响。结果：中药干预后,胎鼠(孕14 d)、孕鼠(孕21 d)的AHSP基因表达无明显改变,而成年鼠骨髓AHSP基因表达明显上调。结论：益髓生血颗粒治疗β-地中海贫血的可能分子机制之一,是通过促进AHSP基因的表达,减少游离 α-珠蛋白的沉积,遏止其对红细胞的毒害作用,减少溶血发生而达到治疗效果。     

益髓生血颗粒对辐射损伤小鼠骨髓细胞周期的影响

目的:观察补肾生血药益髓生血颗粒对骨髓细胞周期的影响,探讨其可能的造血调控机制。方法:将78只雄性昆明种小鼠随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、G-CSF组(C组)、益髓生血颗粒高剂量组(D组)、益髓生血颗粒中剂量组(E组)、益髓生血颗粒低剂量组(F组),每组13只。采用60Co-γ射线全身一次性照射造成小鼠骨髓急性损伤模型。造模前,先预防给药2 d,D-F组分别按12,6,3 g.kg-1.d-1灌胃益髓生血颗粒,A～C组给予等量蒸馏水。造模第2天,C组按30μg.kg-1.d-1皮下注射G-CSF注射液,其余各组给药方法同预防给药,连续14 d。收集各组小鼠骨髓有核细胞,采用流式细胞仪检测骨髓细胞周期的分布情况。结果:与正常组相比,模型组G0/G1期细胞比例为(67.6±7.1)%,明显降低;S期细胞比例为(25.3±5.7)%,G2/M期细胞比例为(7.1±1.8)%,均明显增加(均P<0.001);细胞增殖指数为(32.4±7.1)%,明显升高(P<0.001)。与模型组相比,益髓生血颗粒高剂量组G0/G1期细胞比例为(62.2±3.6)%,明显降低(P<0.05);细胞增殖指数为(37.8±3.6)%,明显升高(P<0.05);益髓生血颗粒各剂量组处于S期的细胞比例分别为(29.1±2.7)%,(29.2±4.8)%,(29.5±3.9)%,均明显升高(均P<0.05)。结论:补肾生血药益髓生血颗粒可通过促进骨髓细胞由G0/G1期进入S期而明显促进细胞增殖。     

补肾益髓生血法再障大鼠含药血清对大鼠造血祖细胞增殖分化及其机制的影响

目的：探讨补肾益髓生血法再障大鼠含药血清对大鼠骨髓造血祖细胞增殖分化及其机制的影响。方法：60Co-γ射线联合环磷酰胺建立再障大鼠模型,以正常对照组、模型组、康力龙组、益髓生血组、温肾生血组和滋肾生血组复方中药灌胃大鼠,制备其含药血清培养正常大鼠骨髓细胞,培养体系中含药血清比例为20豫,进行骨髓造血祖细胞集落形成单位（CFU）计数;收集集落细胞,RT-PCR 检测红系GATA-1 mRNA及粒系PU.1 mRNA表达。结果：与正常对照组相比,模型组骨髓有核细胞显著减少（P<0.01）,造血祖细胞红系集落形成单位（CFU-E）、红系爆式集落形成单位（BFU-E）和粒单核系造血祖细胞集落（CFU-GM）数目均明显降低（P<0.01）,GATA-1、PU.1 mRNA表达显著降低（P<0.01）;与模型组相比,各个治疗组大鼠骨髓有核细胞升高,造血祖细胞CFU-E、BFU-E 和CFU-GM 数目显著增加（P<0.01）;滋肾生血组CFU-E、BFU-E明显优于益髓生血组（P<0.01）;滋肾生血组CFU-GM优于益髓生血组、温肾生血组。各治疗组GATA-1、PU.1 mRNA表达明显高于模型组（P<0.01）;滋肾生血组GATA-1 mRNA表达明显高于益髓生血组、温肾生血组（P<0.05）;滋肾生血组PU.1 mRNA表达高于益髓生血组、温肾生血组。结论：补肾益髓生血法可能通过增加GATA-1、PU.1 mRNA表达而促进骨髓造血祖细胞增殖分化,其中滋肾生血法优于益髓生血法和温肾生血法。     

刺梨对衰老小鼠肾脏损伤保护作用的形态计量学研究

目的：观察刺梨对D－半乳糖致衰小鼠肾脏损伤的保护作用。方法：小鼠颈背部皮下注射D－半乳糖建立衰老模型，同时刺梨保护组灌服刺梨汁，36d后取肾脏制备光镜和透射电镜样品观察并进行形态计量学分析。结果：衰老模型组肾小体硬化率明显高于刺梨保护组（P＜0．05）。衰老模型组肾小体基底膜增厚，内皮细胞穿孔增大，分别与刺梨保护组和正常对照组比较，差异显著（P＜0．01）。结论：刺梨对D－半也糖致衰小鼠肾脏损伤具有保护作用。     

补气生血精胶囊对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制干预效应的实验研究

目的:观察补气生血精胶囊干预环磷酰胺致小鼠骨髓抑制的效应.方法:将60只小鼠随机分为空白对照组、骨髓抑制模型组(简称模型组)、贞苠扶正胶囊组、补气生血精胶囊低、中、高剂量组6组,每组10只.分别灌胃给药(20mL/kg),一日1次,连续11天,空白对照组及模型组给予等容积蒸馏水.除空白对照组外,其余各组均于第8、9两天腹腔注射环磷酰胺(100mg/kg),给药第12天摘取眼球取血,计数白细胞数, 取股骨进行骨髓有核细胞计数.结果:模型组小鼠骨髓有核细胞及外周血白细胞显著低于空白对照组(P<0.05);补气生血精胶囊低、中、高剂量组骨髓有核细胞及白细胞数显著高于模型组(P<0.05).结论:补气生血精胶囊能够明显升高环磷酰胺致骨髓抑制小鼠骨髓有核细胞、外周血白细胞.     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓AKT磷酸化水平的影响

目的：观察补髓生血颗粒对CAA患者骨髓单个核细胞中AKT磷酸化水平变化,探讨补髓生血颗粒治疗CAA的作用机制。方法：将30例CAA患者予以补髓生血颗粒治疗6个月,另取28例健康志愿者作为正常对照组。采用蛋白质印迹方法（Western-blot）观察CAA患者治疗前后骨髓单个核细胞中pAKT-Ty308的表达水平。结果：CAA患者治疗前骨髓单个核细胞pAKT-Ty308的表达低于正常对照组（P〈0.05）,经补髓生血颗粒治疗后,pAKT-Ty308的表达有所上升,与治疗前比较有显著性差异（P〈0.05）。结论：CAA患者骨髓单个核细胞PAKT-Ty308的水平均呈低水平表达,提示pAKT与CAA发病密切相关,补髓生血颗粒可能通过调节PAKT-Ty308的表达来改善CAA骨髓造血微环境。     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓NF-κΒ/p65表达的影响

目的：观察补髓生血颗粒对CAA患者骨髓单个核细胞中NF-κΒ磷酸化表达水平的影响,探讨补髓生血颗粒治疗CAA的作用机制。方法：40例CAA患者给予补髓生血颗粒治疗6个月,采用蛋白质印迹方法（Western-blot）观察CAA患者骨髓单个核细胞中NF-κΒ/p65的表达水平。结果：治疗前CAA患者骨髓单个核细胞NF-κΒ/P65表达水平低于正常对照组（P〈0.05）,经补髓生血颗粒治疗后,NF-κΒ/P65表达有所上升,与治疗前相比具有显著性差异（P〈0.05）。结论：CAA患者骨髓单个核细胞中的NF-κΒ/p65呈低水平表达,NF-κΒ/p65的异常表达可能参与CAA的发病机制过程,从而引起骨髓造血信号转导的异常。补髓生血颗粒可能通过调节NF-κΒ/p65的表达来改善CAA骨髓造血微环境。     

补髓生血颗粒对溶血性贫血小鼠骨髓及外周血细胞的影响

目的:观察补髓生血颗粒对溶血性贫血小鼠骨髓及外周血的影响,为临床应用提供理论依据.方法:通过皮下注射盐酸苯肼的方法造成实验用小白鼠溶血性贫血动物模型,分别经口给予补髓生血颗粒(实验组)及再障生血片(对照组)等,观察两组动物的骨髓有核细胞数(BMC)、网织红细胞(RC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、白细胞(WBC)、血小板(PLT).结果:补髓生血颗粒能够增加溶血性贫血小鼠的RBC、Hb、WBC及PLT,并能降低BMC、RC.结论:本药对小鼠溶血性贫血的恢复有显著促进作用.     

"益髓生血灵"对不同发育阶段小鼠血红蛋白珠蛋白表达的影响

目的:探讨益髓生血灵对不同发育阶段小鼠珠蛋白表达的影响。方法:分别提取正常成年小鼠骨髓、孕鼠(孕21d)和胎鼠(孕14d)胎肝胎脾有核细胞总RNA,采用real-time PCR方法检测中药益髓生血灵干预后对不同发育阶段小鼠的βminor基因(类似于人γ-珠蛋白基因)表达的影响。结果:中药干预后,胎鼠(孕14d)的βminor珠蛋白基因的表达没有明显改变;孕鼠(孕21d)和正常成年鼠造血组织βminor珠蛋白基因的表达量明显提高,与对照组相比存在显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论:益髓生血灵治疗β-地中海贫血的分子机制之一,是可能改变珠蛋白程序性表达,开启在出生前本应关闭的γ-珠蛋白基因,增加HbF的合成而达到治疗效果。     

抵当汤治疗老年期血管性痴呆的实验研究

抵当汤灌胃给药可显改善D－半乳糖亚急性衰老小鼠和老年大鼠的学习记忆能力，提高血清和大脑皮层组织超氧化物歧化酶活力，降低血清和大脑皮质丙二醛含量，抑制亚急性衰老小鼠胸腺指数的下降，改善老年大鼠血液流变学和微循环。     

复方补脾肾中药对环磷酰胺所致的造血抑制小鼠骨髓有核细胞,CF …

观察复方补脾肾中药补肾阴方和补肾阳方对造血抑制小鼠骨髓造血的影响。方法：以环磷酰胺１２０ｍｇ／ｋｇ给昆明种小鼠连续腹腔注射３ｄ，造成骨髓抑制模型，以补肾阴方和肾阳方连续灌胃１０ｄ，以骨髓有核计数法骨髓有核细胞，以骨髓造祖细胞培养方法培养粒－单系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）和成纤维祖细胞（ＣＦＵ－Ｆ）。结果：两方均能提高骨髓有核细胞数和ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｆ集落形成率、补肾阳方优于补肾阴方。     

采用细胞CT分析技术研究补肾生血药保护骨髓作用的分子基础

采用细胞CT技术，分析了补肾生血药对经致死剂量(60Co750rad)照射的小鼠骨有核细胞的保护和抗辐射作用。采用激光扫描、光学切片0．6μ、三维重组、动态旋转120度．DNA荧光强度分布图象分析。结果发现,经60Co致死剂量照射后，小鼠骨髓原红细胞严重破坏．从PI荧光染色、实时激光扫描、共焦三维重组动态旋转图象上发现细胞核DNA的荧光物质凝聚、断裂，其荧光强度与未经照射的对照组有明显区别；而补肾生血药组小鼠骨髓原红细胞结构完整，细胞核DNA荧光物质密集、无断裂，其荧光强度分布与未照射的空白对照组一样。结果表明补肾生血药对维持骨髓原红细胞核的DNA结构完整具有明显地保护作用。