乙型肝炎病毒蛋白对核酶剪切作用的影响

惭型肝炎病毒蛋白对核酶剪切作用的影响。方法 利用计算机辅助设计针对乙型肝炎病毒Ｃ基因的三个单一核酶构建Ｒｚ１核酶自剪切转录载体（ｐＧＥＭＲｚ１）,观察单一核酶（Ｒｚ１）对靶ＲＮＡ的切割作用及乙型肝炎病毒观察单一核酶（Ｒｚ１）对靶ＲＮＡ的切割作用及乙型肝炎病毒蛋白对核酶剪切作用的影响。结果 核酶自剪切转录载体体２上转录后,在顺式核酶发生自剪切后可将目的核酶正确地释放出来,计算机设计的单一核酶体外可剪     

抗乙型肝炎病毒特异联合型核酶的体外切割作用

目的：探讨单一及多位点核酶对乙型肝炎病毒靶ＲＮＡ的切割作用。方法：利用计算机辅助设计针对乙型肝炎病毒Ｃ基因的三个单一核酶及特异联合型核酶,构建三个核酶各自及三个核酶串联的自剪切转录载体（ｐＧＥＭＲｚ１２３）观察单一及串联核酶（Ｒｚ１２３）对靶ＲＮＡ的切割作用。结果：构建的串联核酶自剪切转录载体体外转录后,在顺式核酶发生自剪切后可将目的核酶正确地释放出来,计算机设计的单一核酶体外可剪切靶ＲＮＡ,串联     

抗HPV16E7－ribozyme的体外制备与活性鉴定

通过体外转录结合乙醇沉淀，建立了体外大量制备抗ＨＰＶ１６Ｅ７－Ｒｚ的方法。切割实验表明，ｒｉｂｏｚｙｍｅ可在体外准确和有效地切割Ｅ７靶ＲＮＡ，形成８５ｎｔ和８６ｎｔ大小的切割产物。体外制备的ｒｉｂｏｚｙｍｅ的切割活性、Ｋｍ和ｋｃａｔ值与人工合成的相似。结果说明，体外制备的ｒｉ－ｂｏｚｙｍｅ具有特异的催化切割活性。     

抗HPV16E7—ribozyme的体外制备与活性鉴定

通过体外转录结合乙醇沉淀，建立了体外大量制备ＨＰＶ１６Ｅ７Ｒｚ的方法，切割实验表明，ｒｉｌｂｏｚｙｍｅ可在体外准确和有效地切割Ｅ７ａｆｃｎＲＮＡ，形成８５ｎｔ和８６ｎｔ大小的切割产物，体外制备的ｒｉｂｏｚｙｍｅ的切割活性、Ｋｍ的ｋｃａｔ值民人工合成的相似。结果说明，体外制备的ｉｉｂｚｙｍｅ具有特殊的催化切割活性。     

c—myc基因特异核酶的设计及其对靶mRNA的切割

目的：针对ｃ－ｍｙｃ基因第二外显子部分序列设计核酶，探讨生理温度下核酶的切割活性，方法：计算机模拟分析ｃ－ｍｙｃ基因第二外显子部分二级结构，选择核酶切位点，设计核酶，分别构建ｃ－ｍｙｃ基因第二外显子部分序列和核酶体外转录载体并经双脱氧末端终止法测定核酶序列正确无误，体外转录核酶和靶ＲＮＡ分子，生理温度下测定核酶切割活性，结果：所设计的核酶可有效地切割靶ｍＲＮＡ分子。结论：所设计的核酶在生理温度下具     

抗肿瘤核酶的研究进展

20世纪 8 0年代初 ,由美国科学家Ｃｅｃｈ和Ａｌｔ ｍａｎ发现了核酶 (Ｒｉｂｏｚｙｍｅ) ,它是一类具有生物催化活性的ＲＮＡ分子 ,可通过碱基配对特异性地与靶ＲＮＡ底物结合 ,定点切割ｍＲＮＡ靶分子 ,是一类很有希望的基因功能阻断剂 ,被形象地称为“分子剪刀”。它在抗病毒、抗肿瘤等领域的应用研究是目前基因治疗中的一个热点。本文简述核酶在抗肿瘤应用中的研究进展。1　核酶抗ｒａｓ基因ｒａｓ癌基因在细胞发育和肿瘤发生中起重要作用。ｒａｓ基因家族有Ｈ -ｒａｓ、Ｎ -ｒａｓ和Ｋ -ｒａｓ ,它们编码的蛋白质参与信号传导途径。肿…     

丁型肝炎病毒基因组核酶的反式剪切活性

目的 观察丁型肝炎病毒２种基因组核酶（ＨＤＶ ｇｅｎｏｍｉｃ ｒｉｂｏｚｙｍｅ，ｇ Ｂｚ）是否存在式剪切活性。方法 合成ｇ。．Ｒｚ７４、ｇ．Ｒｚ５５的ＣＤＮＡ，克隆人质粒ｐＧＥＭ－４Ｚ，体外转录获取核酶ＲＮＡ，同时从质粒Ｒｚ２７７Ｂ上转嫌出同源性底物ＲＮＡ，以β－３２ｐ－ＵＴＰ标志，再将核酶与底物按比例混合，在一定条件下观察是否出现的剪切作用，结果 启动反应３０ｍｉｎ后，可以观察到的切产物，９０ｍ     

抗肿瘤多药抗性核酶转录质粒的构建及其体外切割研究

目的 探讨体外核酶对肿瘤多药抗性相关基因ｍｄｒｌ ｍＲＮＡ的锤头状核酶（ｒｉｂｏｚｙｍｅ），并构建抗ｍｄｒｌ－ｒｉｂｏｚｙｍｅ和靶分子的体外转录质粒，进行体外切割实验。结果 发现抗ｍｄｒ１－ｒｉｂｏｚｙｍｅ能较好地切割ｍｄｒｌ－ｍＲＮＡ。结论 抗肿瘤多药性核酶的体外研究为基体内应用提供了参考，ｒｉｂｏｚｙｍｅ有可能成为逆转肿瘤多药抗性的新药物。     

抗HBVC基因核酶自剪切转录载体的构建

抗ＨＢＶＣ基因核酶自剪切转录载体的构建＊连建奇１周永兴１金由辛２（１第四军医大学唐都医院传染科西安７１００３８２中国科学院上海生物化学研究所）关键词乙型肝炎病毒Ｃ基因核酶自剪切中图号Ｒ５７５．１核酶（Ｒｚ）是一类具有酶特异性的ＲＮＡ分子，它能够序列特...     

针对bcl—2RNA核酶体外切割反应的琼脂糖凝胶电泳

用琼脂糖凝胶电泳检测外ｂｃｌ－２ｃＤＮＡ和ＲＺＤＮＡ转录物与鉴定核酸的体外切割活性，方法：琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果：琼脂糖凝胶电泳可见核酶和ｂｃｌ－２ＲＮＡ转录物及其切割ｂｃｌ２ＲＮＡ后的产物，结论：琼脂糖凝胶电泳是一种可用于外转录物与初步鉴定核酸切割活性的简便方法。