钆血卟啉单甲醚介导的光动力疗法治疗口腔舌鳞状细胞癌移植瘤的实验研究

目的:探讨钆血卟啉单甲醚（gadolinium coordinated hemetoporphyrin monomethyl ether,Gd-HMME）介导的光动力疗法（photodynamic therapy,PDT）对裸鼠口腔舌鳞状细胞癌（oral tongue squamous cell carcinoma,OTSCC）移植瘤的治疗效果,为今后的临床治疗提供理论依据。方法:选取36只BALB/c-nu裸鼠随机分为4组,分别为对照组、PDT组、Gd-HMME组和Gd-HMME-PDT组,每组9只。治疗后定期测量裸鼠体重以及肿瘤体积,14 d后各组随机处死裸鼠6只,计算抑瘤率和生命延长率,行苏木精-伊红（hematoxylin-eosin staining,HE）染色后病理形态学观察,评估Gd-HMME-PDT对移植瘤的治疗效果。结果:实验结果显示,各处理组的肿瘤体积均小于对照组,Gd-HMME-PDT组肿瘤体积减小最明显（P＜0.01）;PDT组、Gd-HMME组、Gd-HMME-PDT组的抑瘤率分别为3.17%、6.13%、59.62%。HE染色可见Gd-HMME-PDT组肿瘤细胞坏死和空泡性变,对照组及PDT组、Gd-HMME组均未见明显改变;PDT组、Gd-HMME组、Gd-HMME-PDT组的生命延长率分别为2.82%、7.04%、73.24%。结论:Gd-HMME-PDT对口腔舌鳞状细胞癌移植瘤的生长具有抑制作用,并且可以延长裸鼠的生存时间。     

顺铂联合HMME介导的光动力疗法对人鼻咽癌CNE-2细胞杀伤作用的观察

目的:探讨顺铂(DDP)联合血卟淋单甲醚HMME介导的光动力学疗法(HMME-PDT)对人鼻咽癌细胞(CNE-2)的杀伤作用.方法:实验分对照组、单独DDP组、单独PDT组和联合组.所用的DDP浓度为0.8和1.6 mg/L;光敏剂为HMME,剂量5 mg/L,光能量密度为1.2、2.4和4.8 J/cm2.联合组为不同剂量单独作用的组合.MTT法检测DDP和HMME-PDT单独或联合作用下24 h的细胞抑制率,并用金氏公式分析联合效应.HE染色光镜下观察处理前后细胞的形态学变化,Hoechst染色荧光显微镜观察细胞核.结果:金氏公式分析显示,0.8和1.6 mg/L的DDP与5 mg/L HMME,1.2、2.4和4.8 J/cm2能量密度的PDT,两者联合处理观察到协同或相加效应.HE和Hoechst染色均可见,联合组比单独处理组细胞形态学改变现象更明显.结论:DDP与HMME-PDT联合处理在一定剂量范围内可以协同杀伤CNE-2细胞.     

肺癌患者可溶性白细胞介素2受体和白细胞介素6的临床研究

采用酶联免疫吸附法对３０例肺癌患者和３０例健康者血清可溶性白细胞介素２受体和白细胞介素６水平进行观察。结果显示，肺癌患者血清ＳＩＬ－２Ｒ和ＩＬ－６水平明显升高，和正常对照组比较，差异非常显著。同时肺癌患者经化疗后血清ＳＩＬ－２Ｒ和ＩＬ－６水平随病情恶化而升高，病情缓解而下降，治疗前后比较有非常显著性差异。     

白细胞介素3基因疗法和白细胞介素6基因疗法的联合造血调控作用

本文研究了成纤维细胞介导的IL-3基因疗法，IL-6基因疗法，以及两者联合后对造血系统的影响，结果出现：单用IL-3基因疗法的小鼠白细胞总数，中性粒细胞，骨髓CFU-GM，CFU-MK等显著上升，但血小板上升程度较弱，单用IL-6基因疗法的小鼠血小板，中性粒细胞，骨髓CFU-GM．CF-MK等显著上升，     

血卟啉单甲醚对卵巢癌细胞系SKOV3的光动力学杀伤效应

背景与目的：光动力学治疗（photodynamic therapy,PDT）近年来逐渐成为一种新的可供选择的卵巢癌治疗手段。血卟啉单甲醚（hematoporphyrin monomethyl ether,HMME）是我国自主开发研制的一种新型光敏剂,本实验目的在于体外实验研究HMME在卵巢癌细胞系SKOV3细胞中的荧光显微成像,并验证其对SKOV3的光动力杀伤作用。方法：30μg／ml HMME与细胞孵育不同时间后,置于高灵敏度荧光显微镜与激光共聚焦显微镜下检测HMME荧光及其细胞内的定位,形态学软件分析其荧光强度;不同浓度（5—50μg／ml）HMME与细胞孵育3h后,以不同能量激光（1．5、3、6、12J／cm^2）照射,MTT比色法检测细胞的存活率;以5μg／ml、3J／cm^2,20μg／ml、6J／cm^2剂量处理细胞,4h及24h后分别收集细胞行Annexin V／PI双染色,流式细胞仪分析细胞死亡方式。结果：HMME呈红色荧光弥漫性分布于细胞浆内,细胞内荧光强度于用药3h后达到高峰。高浓度HMME单独使用可能对细胞具有暗毒性。而单独激光照射对细胞存活无影响。随着HMME浓度与激光剂量的增加,细胞存活率逐渐下降。当HMME浓度增高到≥40μg／ml时．加大药物浓度与激光剂量细胞存活率并不随之降低。流式细胞仪分析结果显示HMME光动力学处理后死亡细胞主要为坏死细胞。结论：HMME对SKOV3细胞具有光动力学杀伤效应。     

手术创伤对胸部肿瘤患者血清白细胞介素2受体、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α表达的影响

目的　观察胸部手术创伤对患者血清可溶性白细胞介素 2受体 (SIL 2R)、白细胞介素 6(IL 6)和肿瘤坏死因子 α(TNF α)表达的影响。方法　以患者自身为对照应用酶联免疫吸附法 (ELISA)于麻醉前、手术开始前、施术 2小时及术后 1、3、5天分别检测 2 0例胸部肿瘤患者外周血SIL 2R、IL 6和TNF α的表达。结果　麻醉后SIL 2R、IL 6和TNF α的表达与麻醉前相比均无显著变化 ,施术 2小时各指标均较麻醉前显著降低 :SIL 2R(P <0 .0 1 )、IL 6(P <0 .0 1 )、TNF α(P <0 .0 5) ,术后第一天均达高峰 (SIL 2R :P <0 .0 0 1、IL 6 :P <0 .0 0 1、TNF α :P <0 .0 1 ) ,之后逐渐降低 (术后第 3天 :SIL 2R :P <0 .0 1、IL 6 :P <0 .1、TNF α:P <0 .0 5) ,术后第 5天接近术前水平。结论　外周血SIL 2R、IL 6及TNF α动态变化反映了手术创伤对机体免疫状况的抑制程度 ,提示术后应采取措施提高患者的免疫功能     

乳腺癌患者血清可溶性白细胞介素-2受体和肿瘤坏死因子水平的观察

作者报道乳腺癌患者手术前后血清可溶性白细胞介素-2受体(Soluble intedeukin-2,SIL-2R)、肿瘤坏死因子(Tumornecrosis factor,TNF)水平的变化与病情发展的关系,现将结果报告如下. 1 临床资料     

肺癌患者可溶性白细胞介素2受体和白细胞介系6的临床研究

采用酶联免疫吸附法（ELISA）对30例肺癌患者和30例健康者血清可溶性白细胞介素2受体（SIL－2R）和白细胞介素6（IL－6）水平进行观察。结果显示，肺癌患者血清SIL－2R和IL－6水平明显升高，和正常对照组比较，差异非常显著（P＜0．01）。同时肺癌患者经化疗后血清SIL－2R和IL－6水平随病情恶化而升高、病情缓解而下降，治疗前后比较有非常显著性差异（P＜0．01）。提示肺癌患者存有免疫调控功能紊乱和细胞免疫功能低下。检测血清SIL－2R和IL－6可作为肺癌患者诊断的参考指标，治疗、预后的监测指标。     

白细胞介素-2治疗恶性肿瘤的临床研究报告

本研究应用低剂量（≤２×１０６Ｕ／日）白细胞介素┐２（ＩＬ┐２）共治疗９８例各种类型的恶性肿瘤。方法２５例病人接受了单用ＩＬ┐２治疗（皮下、瘤体内、胸腔或腹腔内注射）；５９例病人接受了ＩＬ┐２与化疗或放疗联合治疗；１４例病人接受了ＩＬ┐２与ＥＡＬ细胞联合胸腔或腹腔灌注治疗。结果显示单用ＩＬ┐２对恶性实体瘤的有效率为１３．７％（２／１５，无ＣＲ病例），对恶性胸腹水的有效率为６０％（６／１０，ＣＲ１０％）；ＩＬ┐２与ＥＡＬ细胞联合胸腹腔内灌注对恶性胸腹水的有效率为８５．７％（１２／１４。ＣＲ５０％）；单用ＩＬ┐２治疗后Ｔ４／Ｔ８比值升高并有统计学意义，ＩＬ┐２与化疗或放疗联合应用治疗后Ｔ４／Ｔ８比值无明显变化，提示ＩＬ┐２具有增强机体免疫功能作用。结论本研究对ＩＬ┐２化疗或放疗联合能否提高近期疗效问题尚不能作出评价；本研究所采用的ＩＬ┐２剂量的毒副反应主要是发热、畏寒、疲乏，其毒副反应一般较轻，病人易于承受，未出现毛细血管渗漏现象     

白细胞介素-2对急性白血病细胞表达P170和LRP的影响

我们用白细胞介素-2联合化疗药物治疗难治性和复发性急性白血病58例，检测了患者P-糖蛋白(P170)和肺耐药相关蛋白(LRP)的白血病细胞含量，探讨其逆转白血病细胞多药耐作用及其临床意义。     

HMME介导的光动力疗法对骨肉瘤细胞的杀伤效应及机制研究

目的探讨血卟啉单甲醚介导的光动力疗法（HMME-PDT）对骨肉瘤LM-8细胞增殖与凋亡的影响及其机制。方法将LM-8细胞与不同浓度的HMME（10、20、30gg／m1）共同孵育,4h后,给予不同能量密度的激光（3、6、9J／cm2）照射,同时设空白组（无光敏剂也无光照）、暗毒组（无光照但加入光敏剂）、激光组（不加光敏剂但给予光照）。MTT法检测细胞存活率,采用AnnexinV-FITC／PI染色的流式细胞分析法检测LM-8细胞凋亡和周期情况,Hoechst33342染色法观察细胞凋亡,实时定量PCR（QRT-PCR）分别检测Caspase-3、Bcl-x、p53、RelAmRNA表达水平,免疫印迹（Westernblotting）分别检测caspase-3、Bcl-X、p53、RelA蛋白的相对表达量。结果HMME-PDT能显著抑制骨肉瘤LM-8细胞增殖,且杀伤效应随着HMME浓度及能量密度的增高而增强。然而单独光照或单独给予光敏剂孵育,对骨肉瘤LM-8细胞均无杀伤作用。流式细胞术检测发现凋亡率显著增高,10μg/mlHMME组为（12．3±2．82）％,20μg/mlHMME组为（20．67±5．58）％,30gg／mlHMME组为（42．53±4．641％,凋亡率与空白组比较,结果分别为（f=-2．889,P=0．045）、（f=-4．418,P=0．014）、（t=-5．780,P=0．04）。周期结果显示：G0／G1期细胞明显增高、s期细胞明显降低,301ag／ml组G0／G1期为（50．09±3．151％、S期为（28．17±1．10）％,与空白对照组比较,结果分别为（t=-6．081,P=0．004）、（t=5．852,P=0．004）。HMME-PDT处理LM-8细胞后径Hoeehst33342染色后呈现出典型的凋亡改变（如：核固缩、细胞变圆等）。QRT-PCR和Westernb10ring结果显示：HMME-PDT可显著上调Caspase-3mRNA和蛋白相对表达量且表达量随着HMME浓度增高而增高。而HMME-PDT可明显下调Bcl-x、p53、RelAmRNA和蛋白相对表达量且表达量随着HMME浓度增高而降低。结论在体外HMME-PDT对骨肉瘤LM-8细胞有显著的杀伤效应,其杀伤效应与Caspase-3、Bcl-x、p53和RelA密切相关。     

光动力作用对人乳腺癌细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的实验研究

目的：探讨光动力作用（PDT）对人乳腺癌细胞Bax和Bcl-2的影响。方法：体外培养的人乳腺癌细胞MDA—MB-231，分别在PDT作用不同时间后，用免疫组织化学法检测促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达情况。结果：Bax蛋白表达在所有组无明显差异（P〉0．05），Bcl-2蛋白表达自PDT后6h起显著下降（P〈0．01）；PDT后6hBax／Bcl-2比值依次递增，且有统计学意义（P〈0．05）。结论：光动力作用可诱导人乳腺癌细胞发生凋亡，其机制可能与Bax和Bcl-2蛋白表达的比值有关。     

光动力作用对人乳腺癌细胞增殖的实验研究

目的：探讨光动力疗法（PDT）对人乳腺癌细胞增殖的影响。方法：以人乳腺癌细胞株MDA-MB-231为研究对象,以血卟啉衍生物（HpD）为光敏剂,630nm波长的激光为光源,MTT法绘制MDA-MB-231PDT后不同时间的生长曲线。流式细胞仪检测PDT对人乳腺癌细胞阻滞的细胞周期,免疫组化观察PDT对增殖细胞核抗原（PCNA）的影响。结果：生长曲线示PDT对人乳腺癌细胞增殖有明显的抑制作用;PDT作用后早期（12h）G0/G1期比例明显高于对照组（P〈0.05）,且呈时间依赖性变化;免疫组化示：实验组PDT后各时间段PCNA阳性细胞蛋白表达率较对照组阳性表达率明显下降（P〈0.01）。结论：光动力疗法可阻滞人乳腺癌细胞增殖,其机制可能与PDT阻滞细胞于G0/G1期和降低PCNA的表达有关。     

光动力作用对人乳腺癌细胞增殖的实验研究

目的:探讨光动力疗法(PDT)对人乳腺癌细胞增殖的影响。方法:以人乳腺癌细胞株MDA-MB-231为研究对象,以血卟啉衍生物(HpD)为光敏剂,630nm波长的激光为光源,MTT法绘制MDA-MB-231PDT后不同时间的生长曲线。流式细胞仪检测PDT对人乳腺癌细胞阻滞的细胞周期,免疫组化观察PDT对增殖细胞核抗原(PCNA)的影响。结果:生长曲线示PDT对人乳腺癌细胞增殖有明显的抑制作用;PDT作用后早期(12h)G0/G1期比例明显高于对照组(P<0.05),且呈时间依赖性变化;免疫组化示:实验组PDT后各时间段PCNA阳性细胞蛋白表达率较对照组阳性表达率明显下降(P<0.01)。结论:光动力疗法可阻滞人乳腺癌细胞增殖,其机制可能与PDT阻滞细胞于G0/G1期和降低PCNA的表达有关。     

血卟啉光动力对人胆管癌细胞转移潜能影响实验研究

目的：探讨血卟啉衍生物介导的光动力疗法（hematoporphyrinderivative,HPD-PDT）对人胆管癌细胞增殖和侵袭的影响。方法：体外培养人胆管癌细胞系QBC939,经系列浓度的HPD处理,并应用半导体激光治疗仪给予不同强度的光照,CCK-8试剂盒检测HPI〉PDT对人胆管癌细胞增殖的影响;Transwell小室（Matrigel侵袭实验）检测HPD-PDT对人胆管癌细胞体外侵袭能力的影响;酶联免疫吸附试验（enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA）检测细胞培养上清液中分泌的VEGF-C浓度变化;RT-PCR检测细胞中VEGF_CmRNA的表达变化;SP免疫组化染色观察细胞中VEGF-C蛋白的表达变化。结果：CCK-8检测结果显示,HPD-PDT在体外能够抑制QBC939细胞生长,当HPD质量浓度4μg／mL和光照剂量5J／cm2时,实验组A450值为1．54l7±0．0983,明显低于空白对照组的2．0278±0．1986,P〈0．01;细胞生长抑制率达到23．97％,且随着激光能量密度及光敏剂浓度的增加,其抑制作用也越明显。体外侵袭实验结果显示,实验组穿过Matrigel胶的细胞数为13．33±1．155,明显少于空白对照组的31．67±2．517,P〈O,01;ELlSA结果显示,实验组上清液中分泌的VEGF-c浓度为（1558．24l7±97．）143）ng／L,低于空白对照组的（1716．3750±45．0472）ng／L,P〈0．05;RT—PCR结果显示,实验组VEGF_CmRNA／hGAPDH的比值为0．7009±0．1872,明显低于空白对照组的1．5425±0．1078,P〈0．01;SP免疫组化染色结果显示,实验组VEGF—C蛋白表达阳性的细胞百分率为24．52％±2．22％,明显低于空白对照组的56．94％±3．38％,P〈0．01。结论：HPD-PDT能够抑制人胆管癌细胞QBC939的增殖活性及体外侵袭能力,并有可能通过下调VEGF-C因子的表达进一步抑制胆管癌的生长和转移。     

5-Aminolevulinic Acid -Mediated Photodynamic Therapy of Human Glioma Cells In Vitro

OBJECTIVE To investigate the effect of 5-aminolevulinic acid (ALA)-mediated photodynamic therapy (PDT) on U251 human glioma cells in vitro.treated with ALA, a typelioma cells were routinely cultured and then of photosensitizer, at various concentrationsfollowed by light irradiation. The PDT-induced phototoxicity of the cells was determined by a MTT assay. In addition, cells were treated with ALA at a fixed concentration and subjected to various doses of light irradiation.RESULTS With the same light dosage (25.0 J/cm^2), the cell survival rates were 70.16% 5.02%, 50.19% 4.79%, 34.97% 5.34%, 27.04% 4.34%, and 24.26% 2.76% at ALA concentrations of 0.25, 0.5, 1.0, 2.0, and 4.0 mM,respectively (F =279.88, P =0.0000). But the survival rates of the cells incubated with 2.0 mM ALA compared to those with 4.0 mM ALA (27.04% 4.34% vs 24.26% 2.76%) showed no significant difference (P=0.611). At a single ALA concentration, the cell survival rates were 83.48% 6.79%,68.09% 6.02%, 33.75% 6.70%, 23.34% 5.08% and 15.14% 3.60% for light doses of 6.25, 12.5, 25.0, 50.0, and 100 J/cm2, respectively (F=422.03,P=0.0000). Without exposure to light, however, the cell survival rates were 96.64% 6.56%, 97.71% 5.48%, 98.10% 6.25%, 99.44% 7.02%, and 95.86% 7.80% for ALA concentrations at 0.25, 0.5, 1.0, 2.0, and 4.0 mM,respectively (F =0.68, P=0.6085). Without ALA in the medium, the cells urvival rates were 98.74% 6.20%, 96.49% 7.13%, 97.60% 5.94%,95.70% 4.86%, 98.08% 6.26% for light doses of 6.25, 12.5, 25.0, 50.0, and 100 J/cm2, respectively (F=0.6400, P=0.6368).CONCLUSION The PDT damage to the U251 cells increased with ALAconcentration within a relative lower range, but then plateaued at higherconcentrations. PDT damage was proportional to the doses of irradiatedlight. Without ALA, the light alone caused no photodynamic damage andALA itself was nontoxic. The ALA-induced PDT appears to be a promisingtherapy for glioma.     

Significance of interleukin-6 (IL-6) in breast cancer (review)

Cytokines are factors that are known to have both tumor-promoting and inhibitory effects on breast cancer growth depending presumably on their relative concentrations and the presence of other modulating factors. Different cytokines play an important role in controlling the immune system. Interleukin-6 (IL-6) is a pleiotropic cytokine with obviously tumor-promoting and tumor-inhibitory effects. Here, we review the role of IL-6 in in vitro experiments of breast tumor cells, in breast tumor tissues (BTs) and assess its potential as a prognostic indicator in breast cancer patients. A literature search was conducted using PubMed, restricted to articles published in English language. In summary, results regarding the effect of IL-6 on breast tumor cells and on BTs are not unique indicating both tumor-promoting and inhibitory effects of IL-6. Concerning patients’ serum IL-6 levels, data are surprisingly unique showing IL-6 to be a negative prognosticator in breast tumor patients.     

姜黄素在光动力与声动力治疗恶性肿瘤中的研究进展

姜黄素作为一种中药在亚洲一些国家的使用已经有上千年。近年来发现姜黄素还是一种具有光敏活性的物质,可以用于光、声动力治疗恶性肿瘤。光动力疗法和声动力疗法作为无创的治疗手段,通过激活靶细胞内的增敏剂,与周围的氧反应产生活性氧,诱导细胞凋亡、坏死。本文就近年来姜黄素在光动力与声动力治疗恶性肿瘤中的研究进展进行综述。