基因工程HER2/CD3双特异抗体抑制乳腺癌生长的实验研究

近年来人们对难治性乳腺癌发生、发展相关生物学因素的认识不断深入。其中癌基因HER2/neu在乳腺癌诊断和免疫治疗中的研究进展最为显著。我们在成功建立BT-474人乳腺癌模型的基础上,探讨了抗HER2×抗CD3双特异抗体(HER2×CD3BsAb)与正常人外周血淋巴细胞联合应用对过度表达HER2     

HER2基因在乳腺癌中的研究进展

乳腺癌的侵袭转移是乳腺癌病人死亡的主要原因,但迄今为止,尚未发现包括乳腺癌在内的肿瘤侵袭转移特异性的基因.作为与乳腺癌的转移预后密切相关的基因之一,Er-B-2（HER2）受体的过表达是乳腺癌的发病机制的独立危险因子,成为目前研究的热点之一,同时它在基因特异性治疗乳腺癌及其术后新辅助治疗方面也有很大的应用前景.     

抗PSA/抗CD3两种双特异性单链抗体的活性研究

目的:研究并比较已成功构建的抗PSA/抗CD3两种双特异性单链抗体的生物学活性。方法:利用流式细胞仪和51Cr释放试验评价抗PSA/抗CD3双特异性单链抗体的抗原亲和活性和体外介导杀伤靶细胞的效果。建立前列腺癌裸鼠模型,分为非治疗组、对照组、双特异性单链抗体(BsAb)组和多价双特异性单链抗体(mBsAb)组,分析两种双特异性单链抗体在体内介导细胞毒T细胞对肿瘤细胞杀伤的能力。结果:流式细胞仪结果显示:BsAb与LNCaP细胞和Jurkat细胞的阳性结合率分别为56.3%和55.4%;mBsAb与LNCaP细胞和Jurkat细胞的阳性结合率分别为74.0%和83.0%。在体外,有细胞毒T细胞存在时两种抗体均可引起前列腺癌细胞的裂解,裂解效率分别与抗体浓度和T细胞与靶细胞比例呈正相关。与对照组比较,接种前列腺癌细胞的裸鼠在体内注射激活的细胞毒T细胞的同时分别接受两种抗体的治疗后,肿瘤生长均明显受到抑制(P<0.05)。在亲和力、体外杀伤和体内抑制肿瘤生长等方面,mBsAb的活性明显优于BsAb。结论:抗PSA/抗人CD3 BsAb及其四聚体均具有良好的生物学活性,单链抗体四聚体的形成可以明显改善抗体的生物学活性。     

C-erbB-2过度表达对乳腺癌术后化疗选择的影响

C—erbB-2为人类原癌基因，也称HER-2／neu，位于第17对染色体长臂21位（17q21），编码1255个具有跨膜酪氨酸激酶活性的生长因子受体，是表皮生长因子受体家族成员之一，分子量约为185kD，因此又被称为p185。C—erbB-2在正常组织中不表达或微量表达，人类肿瘤组织如乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、输卵管癌、宫颈癌、前列腺癌、胃癌、唾液腺癌、舌癌、头颈部鳞癌、非小细胞性肺癌，C—erbB-2过度表达的约30％。临床评估C—erbB一2表达状态，主要通过免疫组化法（IHC）和原位荧光原位杂交法（FISH），IHC检测为C—erbB-2（＋＋＋）或IHC检测为C—erbB-2（＋＋）／FISH检测为（＋）者，确定为C—erbB-2过度表达。C—erbB一2是乳腺癌重要的分子生物学标记，其表达过度与否不仅在乳腺癌发生、发展、转移和预后中起重要作用，对乳腺癌的化疗也具有十分重要的临床参考价值。     

c-erbB-2的过度表达对乳腺癌预后及治疗的影响(文献综述)

c- erb B- 2 / HER2 / neu的过度表达对乳腺癌患者不仅有提示预后的作用 ,更能用于指导临床用药 ,具有独特的应有优势。     

乳腺癌组织中HER2基因的扩增和表达及其临床意义

目的:比较免疫组化法(IHC)检测HER2蛋白表达和荧光免疫原位杂交法(FISH)检测HER2基因扩增在评价乳腺癌HER2状态时的差异性、相关性,及其临床意义。方法:分别用IHC及FISH法检测石蜡包埋乳腺癌组织中的HER2蛋白表达及HER2基因扩增状况,并进行分析。结果:100例乳腺癌组织中,HER2蛋白表达(+++)者25例,其中23例(92%)有HER2基因扩增;HER2蛋白表达(++)者12例,其中2例有HER2基因扩增;HER2蛋白表达(+)者10例,其中1例有HER2基因扩增;HER2蛋白表达(-)者53例,其中2例有HER2基因扩增。IHC与FISH结果的总符合率为85%,吻合度一般,呈正关关系(χ2=42.5,P0.0001)。结论:IHC可作为HER2状态的初步筛查方法,而HER2蛋白表达阳性(+++)则可代表HER2状态。     

三阳性与HER2过表达型乳腺癌患者新辅助化学药物治疗的疗效对比

目的 对比三阳性乳腺癌（triple positive breast cancer,TPBC）与人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)过表达型乳腺癌患者的临床病理特征以及接受新辅助化学药物治疗（neoadjuvant chemotherapy,NACT）后的疗效差异。方法 回顾性收集2019年1月至2021年7月期间西南医科大学附属医院收治的符合本研究入组条件的TPBC和HER2过表达型乳腺癌患者,比较二者的临床病理特征及接受NACT后的疗效差异,同时采用logistic回归多因素分析影响NACT疗效的风险因素。HER2过表达型乳腺癌为HER2阳性、雌激素受体（estrogen receptor,ER）和孕激素受体（progesterone receptor,PR）阴性,TPBC为HER2、ER和PR均为阳性。疗效评价指标采用病理完全缓解（pathological complete response,pCR）,即原发灶及腋窝淋巴结均无乳腺浸润性癌细胞成分但允许乳腺内有导管内癌的成分存在（ypT0/isypN0）...     

抗前列腺特异抗原航CD3双特异性单链抗体四聚体的制备

本实验旨在构建人IgG3上游铰链区／p53四价功能域融合基因和抗前列腺特异抗原／抗CD3双特异性单链抗体的基础之上，进一步制备该双特异性单链抗体的四聚体。     

抗前列腺特异抗原/抗人CD3双特异性单链抗体基因在HeLa细胞中的表达及亲和活性测定

目的　在HeLa细胞中表达抗前列腺特异抗原 (PSA ) /抗人CD3双特异性单链抗体(scFv)融合基因 ,并进行亲和活性测定。方法　在已经构建抗PSA/CD3双特异性scFv融合基因基础上 ,将融合基因克隆入真核表达载体pSecTag2 B中 ,并转染HeLa细胞进行表达。表达产物纯化后 ,用流式细胞仪进行亲和活性测定。结果　经SDS PAGE和Western印迹实验证实 ,表达产物的Mr约为 65 0 0 0。纯化后经流式细胞仪检测 ,可特异性地结合PC 3细胞和人外周血单个核细胞(PBMC)。结论　获得了可与PC 3细胞和PBMC特异结合的抗PSA/CD3双特异性scFv ,为进一步临床应用奠定了基础。