谷胱甘肽对顺铂致大鼠肾小管上皮细胞毒性的影响

目的 探讨顺铂对不同年龄大鼠肾小管上皮细胞的毒性及谷胱甘肽(GSH)对其影响。方法 从不同年龄的雄性大鼠分离的肾小管上皮细胞接种于96孔培养板，培养24h后加入一系列浓度的顺铂，或在加入顺铂前16和4h。分别加入GSH合成抑制剂：BSO和GSH的前体物半胱氨酸，再培养24h后用MTT方法检测细胞存活率。结果 顺铂对5、2月龄和3周龄大鼠肾小管上皮细胞半数抑制浓度(IC50)分别为243．42、178．16和159．06μmol／L；BSO能使3组IC50分别降低到1．62、1．30和1．47μmol／L，而半胱氨酸则可使3组IC50均大于5000μmol／L。结论 顺铂对不同年龄大鼠肾小管上皮细胞均具有明显的毒性，BSO和半胱氨酸可分别增强和减弱顺铂的毒性，间接证明细胞内GSH对顺铂所致大鼠肾小管上皮细胞毒性有保护作用。     

牛碘酸对顺铂引起的原代培养兔肾小管上皮细胞膜流动性的影响

目的：研究顺铂对培养的兔原代肾小管上皮细胞膜流动性的改变以及牛磺酸对肾小管上皮细胞膜的保护作用。方法：采用体外培养兔肾小管上皮细胞,顺铂损伤组用不同浓度的顺铂与肾小管上皮细胞共同孵育24h,牛磺酸保护组用不同浓度牛磺酸预先与肾小管上皮细胞孵育24h,然后再加入顺铂（26μmol/L）共同孵育24h,用DPH荧光探剂法测定细胞膜流动性。结果：顺铂13、26、52μmol/L能导致肾小管上皮细胞荧光偏振度（P）,各向异性（γ）和微粘度（η）显著下降（P＜0．01）,牛磺酸在10g/L时可逆转顺铂导致的P、γ和η的下降（P＜0．05）。结论：顺铂可引起体外培养的兔肾小管上皮细胞膜流动性增加,牛磺酸可降低膜流动性,具有膜稳定性。     

牛磺酸对顺铂引起的原代培养兔肾小管上皮细胞膜流动性的影响

目的 :研究顺铂对培养的兔原代肾小管上皮细胞膜流动性的改变以及牛磺酸对肾小管上皮细胞膜的保护作用。方法 :采用体外培养兔肾小管上皮细胞 ,顺铂损伤组用不同浓度的顺铂与肾小管上皮细胞共同孵育24h ,牛磺酸保护组用不同浓度牛磺酸预先与肾小管上皮细胞孵育24h ,然后再加入顺铂 (26μmol/L)共同孵育24h ,用DPH荧光探剂法测定细胞膜流动性。结果 :顺铂13、26、52μmol/L能导致肾小管上皮细胞荧光偏振度 (P) ,各向异性 (γ)和微粘度 (η)显著下降 (P<0.01) ,牛磺酸在10g/L时可逆转顺铂导致的P、γ和 η 的下降 (P<0.05)。结论 :顺铂可引起体外培养的兔肾小管上皮细胞膜流动性增加 ,牛磺酸可降低膜流动性 ,具有膜稳定性。     

还原型谷胱甘肽对不同药物所致肾细胞毒性的影响

还原型谷胱甘肽(GSH)是公认的细胞内氧化还原状态的调节剂，对毒物所致的氧化性损伤具有保护作用。肾小管上皮细胞具有极高活性的合成与分解GSH的酶以及介导完整的GSH三肽转运的膜运输蛋白，所以肾小管上皮细胞对GSH的代谢非常活跃。我们以往的研究表明，GSH对顺铂(CP)所致肾小管上皮细胞毒性有很大影响。多种药物对肾小管上皮细胞     

谷胱甘肽酯对顺铂毒性的防护作用

顺铂是一种广泛使用的抗癌药,但具有一定的毒性,如:抑制 DNA、RNA 和蛋白质的合成以及氨基酸的转运,还可与半胱氨酸、谷胱甘肽上的巯基结合抑制许多含巯基的酶。本文观察了小鼠预先用 buthioninesulfoximine(BSO,一种γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶抑制剂)以及谷胱甘肽和谷胱甘肽单异丙酯处理后对顺铂毒性的防护作用。实验按以下程序进行:将顺铂溶于生理盐水后10min内给小鼠腹腔注射;在给顺铂前16.5h 和5.5h 皮下注射 BSO(3mmol/kg);这些小鼠在     

丹皮酚与顺铂联用对人骨肉瘤细胞MG-63增殖、凋亡及PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的:研究丹皮酚与顺铂联用对人骨肉瘤细胞MG-63增殖、凋亡的影响及可能的作用机制.方法:取对数生长期MG-63细胞,分为空白对照组、顺铂组(4μmol/L)、丹皮酚组(50 mg/L)和低、中、高浓度联用组(50、100、200 mg/L丹皮酚+4μmol/L顺铂).采用CCK-8法检测经药物作用24、48、72 h...     

顺铂前药纳米载药系统联合丁硫氨酸亚砜亚胺增强肿瘤化疗效果的研究

目的 合成4种顺铂前药并考察其自组装能力，制备聚乙二醇（PEG）化顺铂前药纳米粒，联合丁硫氨酸亚砜亚胺（BSO）用于肿瘤的共同治疗。方法 以顺铂为原料药，合成4种顺铂前药（C6-Pt、C10-Pt、C12-Pt、C18-Pt）；采用一步纳米沉淀法筛选出自组装能力较强的顺铂前药，制备纳米粒；完成纳米粒的外观形态、稳定性、粒径、Zeta电位及体外药物释放考察；CCK-8法考察顺铂、C12-Pt NPs对MCF-7、B16F10、LLC、4T1的细胞毒性，以B16F10为细胞模型测定BSO的无毒浓度及C12-Pt NPs和BSO联用的最佳摩尔比，考察顺铂、顺铂/BSO、C12-Pt NPs、C12-Pt NPs/BSO对B16F10细胞的生长抑制作用；试剂盒法测定顺铂、顺铂/BSO、C12-Pt NPs、C12-Pt NPs/BSO处理B16F10细胞24 h后的胞内GSH水平。结果 成功合成4种顺铂前药（C6-Pt、C10-Pt、C12-Pt、C18-Pt）；顺铂前药质量浓度为1 mg·mL^-1时，仅有C12-Pt能自组装成为纳米粒（C12-Pt NPs）；C12-Pt NPs粒径分布均匀，具有较好的长期稳定性和血浆稳定性；在含0、1 mmol·L-1 DTT的PBS（pH 7.4）缓冲液中纳米粒释药缓慢，在含10 mmol·L-1 DTT的PBS（pH 7.4）缓冲液中，72 h内药物释放率可达76%；C12-Pt NPs对4种肿瘤细胞的抑制作用强于顺铂；对于B16F10细胞，BSO未表现出明显毒性；当顺铂前药、BSO摩尔比为1∶40时对肿瘤细胞抑制作用最强，表明BSO对顺铂前药具有较好的化疗增敏作用；与顺铂相比，顺铂/BSO、C12-Pt NPs、C12-Pt NPs/BSO处理后B16F10细胞中GSH水平均显著下降（P＜0.001）。结论 C12-Pt NPs制剂学性质良好，C12-Pt NPs对多种肿瘤细胞均具有较强的生长抑制作用，BSO能够有效增强C12-Pt NPs对肿瘤的杀伤效果。     

辛伐他汀联合顺铂对人非小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用

目的研究辛伐他汀联合顺铂对人非小细胞肺癌A549细胞的抑制作用,并探讨其作用机制。方法采用MTT法检测0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L顺铂和3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L辛伐他汀对A549细胞增殖抑制率的影响;考察2.5μmol/L顺铂与3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L辛伐他汀联用对A549细胞增殖抑制作用的协同效果;Annexin V-FITC/PI双染后流式细胞术检测5μmol/L顺铂与25μmol/L辛伐他汀联合应用对对A549细胞凋亡率的影响;分光光度法检测辛伐他汀(25μmol/L)联合顺铂(2.5μmol/L)对A549细胞caspase-3活性的影响。结果辛伐他汀或顺铂对A549细胞的增殖有显著的抑制作用,随着浓度的增加、时间的延长,呈时间、剂量相关性,其抑制作用增强(P0.01)。顺铂(2.5μmol/L)与不同浓度(3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L)辛伐他汀联用对A549细胞的增殖有抑制作用,随着时间的延长,辛伐他汀剂量的增加,两者联用抑制作用呈增强的趋势(P0.01),2.5μmol/L顺铂联用辛伐他汀25μmol/L的抑制作用具有协同效果。25μmol/L辛伐他汀和2.5μmol/L顺铂能有效地诱导A549细胞的凋亡,而且两者联合使用可以显著增加A549细胞的凋亡率。25μmol/L辛伐他汀联合2.5μmol/L顺铂应可以显著增加A549细胞的caspase-3酶活性。结论辛伐他汀能够显著增强顺铂对A549细胞增殖抑制、诱导凋亡的作用,可能通过上调caspase-3活性诱导A549细胞凋亡。     

补骨脂酚对HepG2的细胞毒性及BSEP、NTCP、FXR、CYP7A1的影响

目的 观察补骨脂酚对体外HepG2细胞的毒性和对胆汁酸转运体的影响。方法 用MTT法检测不同浓度补骨脂酚作用于HepG2细胞2、6和24 h对细胞增殖的影响,计算相应IC50值,并检测细胞培养基中AST和ALP活性。用实时定量PCR检测BSEP、NTCP、FXR和CYP7A1的mRNA。结果 HepG2细胞的存活率与补骨脂酚终浓度和作用时间呈负相关,在62.5~187.5μmol/L之间有良好的量效关系。补骨脂酚作用HepG2细胞6 h的IC50=177.9μmol/L,24 h的IC50=41.6μmol/L。补骨脂酚作用24 h的细胞毒性明显,细胞培养基中的AST和ALP活性显著升高,而60μmol/L的环孢菌素A(CsA)几乎可以完全对抗补骨脂酚对HepG2细胞的抑制作用。实时定量PCR检测表明,补骨脂酚作用于HepG2细胞2 h时BSEP被抑制,而24 h时BSEP、NTCP、FXR和CYP7A1的mRNA增加。结论 补骨脂酚对HepG2细胞的细胞毒性可能需要通过线粒体,并可能与其影响肝细胞胆汁酸转运有关。     

七叶皂苷HK-2细胞毒性的氧化应激机制

目的进一步研究七叶皂苷肾细胞毒性的氧化应激机制及谷胱甘肽(GSH)对七叶皂苷毒性的保护作用。方法以人肾近曲小管上皮细胞(HK-2)为模型,荧光探针法检测七叶皂苷钠(SA)0,10,15,20和25μmol·L-1处理2h后细胞内活性氧(ROS)含量变化;分别用N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)1,5和10mmol·L-1,丁硫氨酸亚砜亚胺(BSO)0.5和2.5mmol·L-1预处理HK-2细胞4h,然后加入SA20μmol·L-1作用24h,DTNB法测定预处理后及加入SA后细胞内GSH的含量;MTT法测定经NAC5mmol·L-1或BSO2.5mmol·L-1预处理及未经预处理的HK-2细胞与SA10,15,20,25,30和40μmol·L-1作用24h后的细胞存活率,并计算IC50值。结果 SA15,20和25μmol·L-1作用2h后,HK-2细胞内ROS含量显著高于正常对照组(P<0.01)。与正常对照组1×106个细胞内的GSH含量(5.1±1.2)nmol相比,BSO2.5mmol·L-1及NAC10mmol·L-1预处理后1×106个细胞内的GSH含量2.8±0.8和(2.7±2.3)nmol均显著降低(P<0.05),其他预处理组GSH含量无显著变化。除NAC10mmol·L-1外,各预处理组与SA20μmol·L-1作用24h后GSH含量显著降低(P<0.01)。与未经预处理的SA20,25和30μmol·L-1细胞存活率〔(83±5)%,(69±5)%和(54±6)%〕相比,经BSO2.5mmol·L-1预处理后,对应的细胞存活率显著降低,分别为〔(69±6)%,(40±13)%和(25±15)%〕(P<0.05),NAC预处理对细胞存活率无显著影响;未经预处理及NAC和BSO预处理的SA的IC50分别为31.3±1.7,23.6±2.7和(34.2±1.5)μmol·L-1。结论七叶皂苷通过氧化应激途径发挥肾细胞毒性,细胞内谷胱甘肽可对其氧化损伤起到保护作用。     

无铅汽油染毒对小鼠神经行为和神经递质的影响

目的 研究汽油染毒对小鼠神经行为和单胺类神经递质及其代谢产物的影响。方法 选用80只昆明小鼠，随机分成4组，用无铅汽油静式染毒90d，分别于染毒前和染毒第30、60、90天时测定其自由活动情况及学习和记忆能力，并于染毒第90天时测定其纹状体中儿茶酚胺类神经递质及尿中其代谢产物含量。结果 染毒60d后小鼠自由活动计数增加；染毒30d后水迷宫和跳台法学习能力均下降，且都存在剂量一效应关系；染毒90d后中、高剂量组纹状体单胺类神经递质及尿中单胺类神经递质代谢产物含量均下降。结论 长期无铅汽油接触可以引起小鼠神经行为的改变，其机制可能与单胺类神经递质及其代谢产物的含量减少有关。     

新型涂碳式聚氯乙烯膜苯海拉明选择电极的研制与应用

以苯海拉明与碘的分子缔合物为电活性物的涂碳式 PVC膜苯海拉明选择电极。测定了盐酸苯海拉明片的含量。电极的线性响应范围 3 .2× 10 - 2 ～ 2 .6× 10 - 5mol/L ,级差电位为 2 9m V/p C,检测限为 1.6× 10 - 5mol/L。该电极响应迅速 ,重现性好 ,方法简便 ,结果与药典法相符。     

脑脊液CK-BB测定在诊断细菌性脑膜炎中的意义

测定了怀疑为中枢神经系统感染的 85例患儿脑脊液中 CK-BB浓度。其中 ,经确诊无中枢神经系统感染患儿 17例 ,病毒性脑膜脑炎患儿 36例 ,细菌性脑膜炎患儿 32例。以上病例均常规作脑脊液检查 ,同时留取 3毫升脑脊液作 CK-BB浓度测定。结果显示 ,脑脊液中 CK-BB可作为鉴别细菌性脑膜炎和病毒性脑膜脑炎的一项可靠指标。     

敌鼠钠对大鼠的胚胎毒性

目的观察敌鼠钠对孕大鼠的胚胎毒性作用.方法在孕大鼠着床期、早孕和中孕期经口1次性灌胃不同剂量的敌鼠钠,然后观察敌鼠钠对孕鼠的胚胎毒性.结果敌鼠钠对孕鼠的胚胎着床无影响.敌鼠钠5.00、2.50和1.25mg/kg的剂量使大鼠各孕期的平均活胎数显著下降(P＜0.001,P＜0.01和P＜0.05),敌鼠钠对孕鼠着床期、早孕和中孕期的半数致死胎有效剂量(ED50)分别为(3.326±1.461)、(1.849±0.814)和(1.602±0.676)mg/kg.结论敌鼠钠具有胚胎毒性,可影响大鼠的妊娠作用.     

脉络丛对铅的屏障作用及其病理形态学观察

目的：观察脉络丛对铅的屏障作用及其病理形态学改变。方法：给3个实验组兔子每公斤体重分别腹腔岑5'2550mg的Pb的醋酸铅溶液，对照组注射生理盐水。注射后4和24h处死动物，采集脑脊液、大脑皮质、侧脑室脉络丛、血液、肝脏和肾皮质样品。经浓硝酸和过氧化氢湿式消化后，用原子吸收分光光度计测定组织样品中铅浓度。脉络丛样品经冲洗、固定后，制成组织切片，用光镜、电镜观察脉络丛的病理形态学改变。结果：组织铅浓度从高到低依次为肝、肾皮质、侧脑室脉络丛、血液、大脑皮质和脑脊液。脑脊液中铅浓度最低；3个剂量组的脉络丛铅浓度都明显地高于大脑皮质和脑脊液铅浓度。光镜见脉络丛上皮细胞肿胀，颗粒变性，严重的呈坏死性改变。电镜见脉络丛上皮细胞溶酶体增加，线粒体肿胀。结论：侧脑室脉络丛对铅有屏障作用，能阻止铅从血液进入脑脊液和脑组织。但当染铅达到一定剂量时，脉络丛本身也发生一定的病理形态学改变。     

D—半乳糖致衰老小鼠记忆与海马突触形态学变化

目的探讨D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆与海马突触界面结构可塑性变化的关系.方法用开场行为和Y-迷宫分辨学习记忆行为分别检测D-半乳糖衰老模型小鼠自发活动和学习记忆行为的变化,然后用电镜和计算机图象分析仪观测小鼠海马CA3区GrayⅠ型突触界面结构参数的变化.结果 D-半乳糖致衰老小鼠在新异环境中的自发活动和探究行为明显减少,学习记忆功能显著降低;记忆保持率(%)由76.8±9.3下降为68.6±9.4(P＜0.05);同时衰老小鼠出现海马突触后致密物质(PSD)厚度明显变薄(33.30±6.58,P＜0.01),突触间隙宽度显著增大(20.32±1.83,P＜0.05)等突触界面超微结构的改变.结论 D-半乳糖致衰老小鼠脑功能的减退可能与其改变海马突触界面超微结构有关.     

动物勃起模型研究抗雄激素对勃起功能的影响

目的　应用阿朴吗啡 (APO)诱导大鼠阴茎勃起模型 ,探讨抗雄激素对阴茎勃起功能的影响及其可能机制。方法　SD雄性成年大鼠随机分为 3组 ,伪手术组、睾丸切除组及非手术组。用已建立的APO诱导大鼠阴茎勃起模型观察睾丸切除、睾酮恢复及抗雄激素氟他胺对阴茎勃起和呵欠反应的影响。结果　各剂量APO(2 0、40、80、160 μg kg)均能引起伪手术组大鼠出现阴茎勃起和呵欠反应 ,但不能引起睾丸切除组大鼠出现阴茎勃起反应 ,睾丸切除组呵欠次数与伪手术组比较也显著减少 (P <0 0 5 )。给予睾酮后阴茎勃起功能部分恢复 ,呵欠次数恢复到伪手术组水平。氟他胺 (5 0mg kg)能引起阴茎勃起次数显著减少 (P <0 0 5 ) ,但对呵欠次数无明显影响。结论　阴茎勃起功能是雄激素依赖的 ,抗雄激素氟他胺能引起勃起功能障碍 ,APO诱导大鼠阴茎勃起模型可以用来初步筛选抗雄激素     

镉对大鼠促肾上腺皮质激素释放因子的影响

目的观察镉对大鼠中枢和外周促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)水平的影响.方法CdCl2和CdCl2+α-hCRF(α螺旋CRF)染毒大鼠,中枢下丘脑和外周血浆中的CRF含量.结果CdCl2组动物下丘脑CRF含量均高于对照组(P＜0.05),并伴随着染镉剂量升高(r=0.6803,P＜0.05);外周血浆CRF含量各组间无统计学差异(P＞0.05).CdCl2+α-hCRF组下丘脑CRF含量与CdCl2组间无统计学差异(P＞0.05),但高于对照组(P＜0.05);外周血浆CRF水平有升高趋势.提示α-hCRF能减轻镉对中枢CRF的影响.结论镉可引起下丘脑CRF含量升高,受体拮抗剂α-hCRF能改善镉的中枢毒作用.     

谷胱甘肽转移酶T1基因型与苯中毒遗传易感性

目的　探讨谷胱甘肽转移酶T1(GSTT1)基因多态与苯中毒遗传易感性的关系。方法　应用聚合酶链式反应 (PCR)方法对 3 5例苯中毒病例、44例苯作业工人及 2 6例正常对照组的GSTT1的基因型进行了检测。结果　苯中毒患者组GSTT1缺失基因型频率为 60 % ,明显高于正常对照组的 46 15 %和苯作业工人组的 40 91% ,但未出现统计学意义(P >0 0 5 )。结论　GSTT1基因多态与苯中毒遗传易感性无关。但由于例数不多 ,这一结果有待于进一步研究证实