帕金森病的秀丽隐杆线虫模型研究进展

帕金森病是第二大神经退行性疾病,病因及发病机制复杂,可能与年老、环境因素及遗传因素等有关,目前尚不能治愈。秀丽隐杆线虫因其独特的优势,逐渐成为研究帕金森疾病的重要模式生物。作者对近几年帕金森病的秀丽隐杆线虫转基因模型和化学因素诱导模型进行综述。     

秀丽隐杆线虫作为电离辐射模型的研究进展

随着放射治疗在肿瘤治疗中的地位日益显著,如何减轻放疗的副作用也逐渐成为研究的热点。秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）因其独特的优势成为一个良好的研究电离辐射的模型。近年来,国内外利用线虫模型对电离辐射特性的研究日益增多。本文简要综述了电离辐射对线虫的影响以及相关机制。     

秀丽隐杆线虫对益生菌鉴定研究进展

人和动物肠道中具有非常复杂而平衡的微生物群,这些微生物通常可以起到如下作用:(1)营养[1];(2)防御[2];(3)免疫调节[3];(4)促进生长、抗衰老及抑制肿瘤[4].突然改变膳食、紧张或使用抗生素会扰乱这种微生物群平衡,使宿主易患病及降低对食物的利用效率.益生菌具有重建自然平衡和使宿主恢复正常健康和营养状况的能...     

秀丽隐杆线虫神经免疫相互作用的研究进展

机体受外源病原体入侵时,会迅速激活固有免疫反应.免疫反应过强会导致炎症反应和组织损伤,过弱则会使机体受到感染.神经系统可通过释放神经递质、神经肽及激素来调节固有免疫反应的强度.与哺乳动物复杂的神经免疫系统结构相比,秀丽隐杆线虫的神经免疫系统结构简单,且易于进行遗传学、分子生物学和行为学分析等,因而被应用于神经免疫相互作用的研究.近年来,对秀丽隐杆线虫的研究发现,调节其固有免疫反应的神经通路主要是转化生长因子β通路、胰岛素信号通路和多巴胺通路.由于这些通路在进化上有许多保守之处,因而为高等生物神经免疫相互作用分子机制的研究提供了新思路.本文仅就近年来该领域的研究进展做一概述.     

神经酰胺在辐射诱导的秀丽隐杆线虫生殖细胞旁效应中的机制研究

目的 利用秀丽隐杆线虫为研究对象,以单粒子束为辐射源,从活体水平探究神经酰胺在辐射旁效应中的作用。方法 以野生型N2和突变体L4期线虫的后食道球为辐射部位,分别给予2 000个质子的辐照剂量,检测和分析成虫的生殖腺凋亡细胞以及基因表达水平。结果 定点辐射N2的后食道球可显著诱导线虫旁区生殖腺细胞凋亡的增加（t=9.007,P<0.05）,但在神经酰胺合酶基因突变体中未表现出这一现象（P>0.05）。实时定量PCR结果显示,辐射诱导N2和神经酰胺合酶基因突变体lagr-1（gk327）;hyl-1（ok976）线虫中凋亡核心通路基因egl-1和ced-13表达量的上升,但两品系线虫间的差异无统计学意义（P>0.05）;辐射可诱导N2和DNA损伤检验点突变体hus-1（op241）中hyl-1和lagr-1表达量的上升,且两品系间的差异无统计学意义（P>0.05）。非受体络氨酸激酶abl-1突变可显著增加辐射诱导的旁区细胞凋亡（t=13.241,P<0.05）,而当神经酰胺合酶基因与abl-1同时突变时,凋亡增加的现象被抑制（t=13.462,P<0.05）。结论 神经酰胺参与线虫体内辐射引起的旁区凋亡过程,且可能与凋亡核心通路中的促凋亡蛋白egl-1和ced-13以及DNA损伤响应通路中的HUS-1协同发挥作用。抑凋亡基因abl-1与神经酰胺合酶在凋亡过程中表现出拮抗关系。     

基于实时定量PCR技术的秀丽隐杆线虫肠道食物菌鉴定方法

目的：建立基于实时定量PCR技术的秀丽隐杆线虫肠道食物菌鉴定方法。方法采用实时定量PCR （ real-time quantitative polymerase chain reaction ，qPCR）分别对1、20、50只线虫进行肠道食物菌检测，分析成虫期和衰老期线虫肠道食物菌的变化情况。结果 qPCR可检测到单只线虫肠道食物菌含量，可准确反映不同样本之间肠道食物菌含量的变化。结论基于qPCR技术的线虫肠道食物菌鉴定方法可对线虫肠道食物菌进行准确定量，具有成本低、灵敏度高、特异性好的优势。     

秀丽隐杆线虫识别辐射损伤小鼠尿液的研究

目的 研究秀丽隐杆线虫（简称线虫）对照射后小鼠尿液的趋向性及与照射剂量和时间的关系。 方法 按照区组随机法将168只C57/BL6小鼠分为对照组和照射组,对照组为未照射的小鼠;照射组为使用137Cs γ射线进行全身照射后的小鼠,剂量率为0.84 Gy/min。（1）照射后不同时间点的爬行实验：将小鼠分为7.5 Gy照射组和对照组,每组12只,于照射后0、2、4、8、12、24、48、72 h收集尿液;（2）不同剂量照射后的爬行实验：将小鼠分为2、4、6 Gy照射组和对照组,每组12只,于照射后24 h收集尿液。（3）时间与剂量之间的正交实验：将小鼠分为2、4、6 Gy照射组和对照组,每组12只,于照射后4、8、24 h收集尿液。（4）风扇实验和加热实验：将小鼠分为7.5 Gy照射组和对照组,每组12只,于照射后24 h收集尿液,分别将尿液用风扇吹风和加热后进行爬行实验。线虫培养至L3幼虫期,将其分别和每组小鼠的尿液滴至培养皿的不同区域,于体视显微镜下观察并计算每个区域中线虫的百分数。2组间的比较采用独立样本t检验和配对t检验。 结果 （1）照射后不同时间点的爬行实验：7.5 Gy照射后8 h时线虫开始出现聚集,与对照组相比,照射组在照射后8、12、24、48、72 h时线虫的百分数差异均有统计学意义（t=4.073~67.518,均P<0.01）。（2）不同剂量照射后的爬行实验：与对照组相比,2、4、6 Gy照射组区域线虫的百分数均增加[（29.33±5.79）%对（69.58±7.00）%、（11.58±3.60）%对（84.42±5.55）%、（9.08±2.19）%对（88.58±3.45）%],且差异均有统计学意义（t=11.955、30.320、51.463,均P<0.001）。（3）时间与剂量之间的正交实验：在照射后8、24 h,2、4、6 Gy照射组小鼠尿液的线虫百分数与对照组相比,差异均有统计学意义（t=17.628~133.349,均P<0.001）。（4）风扇实验和加热实验：风扇实验结果显示,照射组和对照组的线虫百分数均增多,但二者的差异无统计学意义（t=1.250,P>0.05）;加热实验结果显示,小鼠尿液加热前后整体重量的差异有统计学意义[（1.060±0.028） g对（1.051±0.026） g,t=11.814,P<0.001],照射组和对照组的线虫百分数均增多,但二者的差异无统计学意义（t=0.585,P>0.05）。 结论 线虫对照射后小鼠尿液中挥发性代谢物具有趋向性,且可辨别低剂量照射。     

以秀丽隐杆线虫为模型的电离辐射损伤研究进展

秀丽隐杆线虫（简称线虫）作为一种经典模式生物,已被广泛应用于辐射损伤研究领域。电离辐射在线虫体内造成的损伤与脊椎动物相似,主要体现在DNA损伤、活性氧水平上升、衰老加速和生殖系统受损等。以线虫作为电离辐射动物模型的研究已经在辐射损伤领域中取得很多突破。电离辐射引起的线虫衰老受多种因素影响,包括错误的蛋白表达、脂质代谢的改变等。电离辐射可诱导线虫生殖细胞凋亡、细胞周期阻滞和DNA损伤。以线虫作为电离辐射动物模型的研究对高等生物的辐射效应研究有重要意义。笔者简要综述了以线虫为模型的辐射损伤研究进展。     

秀丽隐杆线虫双突变株系hif-1（ia04）;glb-13（tm2825）的制备与鉴定

目的以秀丽隐杆线虫为模式生物研究珠蛋白（globin）13（glb-13）的生理作用,以回交2次的glb-13（tm2825）突变株系和hif-1（ia04）构建线虫双突变株系hif-1（ia04）;glb-13（tm2825）。方法 glb-13（tm2825）与野生型N2株系交配获得glb-13（tm2825）的雄虫,再与N2的雌雄同体线虫进行交配,回交2次后,通过单只线虫基因组PCR法鉴定出交配后的纯合体。使用hif-1（ia04）和野生型线虫N2进行交配得到hif-1（ia04）的雄虫,然后再与glb-13（tm2825）雌雄同体线虫交配,通过单只线虫基因组PCR法鉴定出交配后的纯合体。结果获得hif-1（ia04）;glb-13（tm2825）双突变株系。结论通过线虫交配回交可以使突变株系线虫保持稳定性状,而突变株系之间的交配可以制备出双突变株系,为深入开展glb-13的功能研究奠定了物质基础。     

人源胞红蛋白转基因秀丽线虫的制备与鉴定

目的：为了以秀丽线虫为模式生物研究人源胞红蛋白（human cytoglobin,hCGB）的生理功能,构建hCGB的秀丽线虫表达载体,并通过显微注射的方法制备转基因线虫。方法：将通过RT-PCR获得的hCGB的cDNA序列亚克隆到pFX-unc-119表达载体中,通过显微注射的方法获取染色体外转基因线虫,采用紫外线（UV）照射的方法,筛选获得整合到染色体中的株系,并采取Western印迹和免疫组织化学法鉴定外源基因的表达。结果与结论：成功地构建了hCGB基因的表达载体并获得了3个hCGB的转基因线虫株系,同时获得了3个作为功能对照研究的增强型绿色荧光蛋白（EGFP）转基因线虫株系,为深入开展胞红蛋白的功能研究奠定了基础。     

Coupling of oxidative stress responses to tricarboxylic acid cycle and prostaglandin E2 alterations in Caenorhabditis elegans under extremely low-frequency electromagnetic field

Purpose: With all-pervasive presence of extremely low-frequency electromagnetic field (ELF-EMF) in modern life, ELF-EMF has been regarded as an essential factor which may induce changes in many organisms. The objective of the present study was to investigate the physiological responses of Caenorhabditis elegans (C. elegans) to 50?Hz, 3?mT ELF-EMF exposure.

Materials and methods: Worms were exposed to ELF-EMF from the egg stage until reaching the fourth larva (L4) stage. After exposure, expressions of the tricarboxylic acid (TCA) cycle enzymes were examined by qRT-PCR and western blot analysis. Two lipid metabolites were detected by GC-MS. Reactive oxygen species (ROS) level was detected by dichlorofluorescein staining and worm antioxidant system was investigated by enzymatic activity analysis, including detection of the superoxide dismutase and catalase (CAT) activity and the total antioxidant capacity (T-AOC).

Results: The TCA cycle enzyme, fumarase was found with decreased expression under ELF-EMF exposure. And arachidonic acid (ArA) and prostaglandin E₂(PGE₂) showed elevated concentrations, with increased expression of prostaglandin E₂ synthase (PGES-2) in ELF-EMF exposed worms. Significant elevation of ROS level was identified accompanied with the significant depression of T-AOC in response to ELF-EMF.

Conclusions: Our results suggested that exposure to 50?Hz, 3?mT ELF-EMF in C. elegans can elicit disruptions of the TCA cycle metabolism and PGE₂ formation, coupling ELF-EMF-induced oxidative stress responses. Our study probably will attract increasing attentions to the controllable application of ELF-EMF associated with health and disease.     

快速FLAIR序列像与常规T2WI在中枢神经系统疾病中应用的对比研究

目的：探讨快速液体误减翻转恢复序列（fast fluid attendated inversion recovery，fast FLAIR序列）像在中枢神经系统疾病中的应用价值。方法：本组100例不同中枢神经系统疾病的患者同时行快速FLAIR序列像及常规T2WI检查，并对所得的图像进行对比分析。结果：80例不同中枢神经系统疾病患者中，T2WI显示189个病灶，而fastFLAIR序列像显示244个病灶。20例腔隙性脑梗塞病人中，T2WI显示108个病灶，而fastFLAIR序列像只显示57个病灶。结论：fastFLAIR序列像与常规T2WI在显示不同中枢神经系统疾病方面各具优势，针对不同的病变应选择性地运用fast FLAIR序列像。     

一家系2例遗传性压迫易感性神经病报道

目的 报道一家系2例遗传性压迫易感性神经病(HNPP),以提高对本病的认识及诊断水平。方法 2例均行详细肌电图、运动及感觉神经传导速度、运动神经远端潜伏期测定。1例行腓肠神经活检,标本分别在光镜或电镜下观察。结果 例1临床表现为反复的压迫或牵拉后肢体无力和麻木。例2为例1父亲,临床无发病,查体有周围神经病表现。2例电生理检查示广泛性神经传导速度减慢,特别是周围神经嵌压部位运动传导速度减慢更明显,运动神经远端潜伏期延长,包括临床未受累的神经。腓肠神经活检电镜见大多数有髓纤维髓鞘增厚,有的髓鞘向轴索内突出,轴索未见异常。无葱皮样改变。无髓纤维未见显变。结论 神经电生理检查是诊断HNPP重要的筛选手段,确诊有赖于腓肠神经活检的典型病理表现。     

飞秒激光在角膜疾病中的应用进展

飞秒激光对组织的光致解离作用具有低能量、微损伤以及空间定位精确的特点,非常适合于角膜组织的超精细切割。本文就飞秒激光的作用机制及在角膜病领域的临床应用进行综述。     

Magnetic resonance microscopy imaging of posterior interosseous nerve palsy

Posterior interosseous nerve palsy, also called deep radial nerve syndrome, is a neuropathy caused by radial nerve entrapment or compression at the level of the supinator muscle. Although imaging studies are not necessary for diagnosing this syndrome because of its characteristic clinical manifestations, the causes of palsy, which include mass lesions, or precise anatomical findings can sometimes be demonstrated by imaging. Magnetic resonance (MR) findings of posterior interosseous nerve palsy have been described as involving atrophy of related muscles caused by denervation, a common secondary change of this nerve disorder. We present a case in which the swollen posterior interosseous nerve itself could be directly depicted by MR imaging using a 4.7-cm microscopy coil in a patient with neuropathy.     

磁敏感加权成像在中枢神经系统的临床应用和前景

磁敏感加权成像是利用不同组织间磁化率不同而产生图像对比的一项新技术.和磁共振的其他技术相比,磁敏感加权成像最大的优势在于清晰显示颅内静脉结构及铁沉积,因此目前最多应用于中枢神经系统血管病变及变性疾病的诊断和研究.但在外伤、肿瘤等疾病中的价值也在不断被挖掘.     

分离型脑裂畸形与先天性脑穿通畸形囊肿的CT鉴别诊断

目的：提高ＣＴ对分离型脑裂畸形与先天性脑穿通畸形囊肿的鉴别能力。材料与方法：搜集３６例具有大脑半球低密度灶与侧脑室及蛛网膜下腔相通ＣＴ征象，临床资料符合先天性脑发育畸形者。依据畸形的发病机制分析其影像特征，以病灶边缘有带状灰质密度衬边为确诊脑裂畸形的依据，鉴别分离型脑裂畸形与脑穿通畸形囊肿。结果：脑裂畸形１０例；脑穿通畸形囊肿２６例。分析病灶形态发现脑裂畸形与脑穿通畸形囊肿有特征性差异，前者病灶形态为两边内凹的双抛形，最窄处离开脑腔、室端；而后者为球形或扇形，最窄处位于脑腔、室端。前者多伴发其他畸形（主要为透明隔缺如），后者均为单一畸形。结论：分离型脑裂畸形与先天性脑穿通畸形囊肿的病灶形态具有特征性差异，有助于避免当灰质衬边带影显示不清时可能导致的误诊。另外，由于脑裂畸形在胚胎期发生较脑穿通畸形囊肿早，因此畸形较严重，且伴发其他畸形的可能性明显增多。