哌仑西平脂质体抑制近视的初步观察

目的观察哌仑西平脂质体对鸡眼形觉剥夺性近视的疗效。方法1d龄鸡40只,随机分为Ⅰ正常组;Ⅱ单纯遮盖组;Ⅲ空白脂质体组;Ⅳ哌仑西平脂质体组。均以右眼为实验眼。在实验的2周、4周、6周检测4组动物右眼屈光度,并于6周时测量其眼轴长度和赤道部直径。结果2周和4周时,哌仑西平脂质体组与遮盖组和空白脂质体组屈光度比较无显著性差异(P>0.05),哌仑西平脂质体组和正常组屈光度比较差异显著(P<0.05)。6周时,哌仑西平脂质体组与遮盖组和空白脂质体组比较屈光度、眼轴长度有显著性差异(P<0.05),而赤道径无显著性差异(P>0.05),哌仑西平脂质体组和正常组比较各项指标差异显著(P<0.05)。结论哌仑西平脂质体混悬液滴眼能部分抑制近视的发生、发展,随着用药时间的延长,这种抑制效应愈明显。     

哌仑西平滴眼液治疗豚鼠形觉剥夺性近视

目的研究眼表局部使用选择性M1受体拮抗剂哌仑西平(pirenzepine,以下简称PIR)后对豚鼠形觉剥夺性近视眼的治疗作用及药物对眼部的刺激性和耐受性,探讨其临床应用前景。方法①药效学研究选取3周龄豚鼠10只,均右眼行眼睑缝合,左眼开放。随机分为两组:实验组(5只)右眼滴2%PIR滴眼液,对照组(5只)右眼滴0.9%氯化钠溶液。4周后检查屈光度数变化及眼轴长度,评价药效。②药物刺激性研究选取新西兰白兔8只,均左眼给2%PIR滴眼液,右眼给0.9%氯化钠溶液。分为两组:单次给药组一次性给药100μl后连续观察3 d;重复给药组连续给药8d,停药后再连续观察7 d。实验结束后摘除眼球做组织切片光镜检查。结果右眼遮盖4周后,0.9%氯化钠溶液组诱导出-2.1 D的相对近视(t=3.5,P<0.05),2%PIR滴眼液组屈光度变化差异无显著性(P>0.05)。2%PIR组实验前后眼轴长度变化差异也无显著性(P>0.05)。单次给2%PIR组在给药1 h后的评分与给药前相比差异有显著性(t=3.46,P<0.05),其余观察点的评分与给药前相比差异均无显著性。重复给药组实验前后的评分差异也无显著性(P>0.05)。组织学检查未发现明显的毒性反应。结论哌仑西平滴眼液能够有效抑制豚鼠形觉剥夺性近视的发展,眼部刺激性小、耐受性好,无明显眼部毒性反应。     

哌仑西平影响豚鼠实验性近视眼的研究

目的 探讨玻璃体腔注射选择性M_1受体拮抗剂哌仑西平对豚鼠形觉剥夺性近视眼视网膜、脉络膜、巩膜和虹膜-睫状体组织中M_1和M_4受体mRNA表达的影响.方法 采用随机分组设计的实验研究.1～2周龄的三色豚鼠24只,随机分为4组:正常对照组(N)6只,单纯形觉剥夺组(FDM)6只,药物对照组(S)6只,哌仑西平组(P)6只,均以左眼为实验眼,P组隔日玻璃体腔注射500μg哌仑西平;S组隔日玻璃体腔注射生理盐水.21 d后结束实验.提取各组眼视网膜、脉络膜、巩膜和虹膜-睫状体组织总RNA,半定量RT-PCR检测M_1和M_4亚型mRNA表达变化.3组间数据的比较采用单因素方差分析和Tukey post hoc检验.结果 21d时,FDM与N组相比较,FDM组眼轴相对延长0.29mm,产生相对近视-4.92 D,差异有统计学意义(P<0.001).P组与S组相比较,眼轴相对减少了0.30 mm,产生+0.88 D的相对远视,差异均有统计学意义(P<0.001).S组与FDM之间屈光度数的差异无统计学意义;而眼轴变化有统计学意义(S组相对延长0.08 mm,而FDM组相对延长0.29/mm).半定量PCR结果显示:P组与S组相比较,其视网膜、脉络膜和虹膜睫状体组织M_1和M_4亚型mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05).而在后极部巩膜组织,M_1和M_4亚型mRNA的表达较药物对照组显著性增加(P<0.05),其中M_1受体表达增加19.16%,M_4受体表达增加64.29%.结论 哌仑西平能够有效抑制豚鼠形觉剥夺近视的发展.巩膜组织M_1和M_4亚型及其胆碱能通路可能参与M受体拮抗剂抑制近视发展.     

豚鼠形觉剥夺性近视视网膜早基因c-fos的动态表达

目的建立豚鼠形觉剥夺性近视(form-deprivationmyopia,FDM)动物模型,并对豚鼠形觉剥夺性近视形成及恢复过程中视网膜早基因c-fos的动态变化进行观察,研究豚鼠FDM中视网膜信号转导及抑制近视的可能分子机制。方法3周三色豚鼠40只,随机均分为4组:遮盖前组、单眼遮盖1周组、单眼遮盖2周组及去遮盖组。对各组进行视网膜检影和A超测眼轴,分别运用免疫组化和RT-PCR观察各组视网膜c-fos蛋白及mRNA的表达和变化。结果遮盖2周后,遮盖眼较对照眼呈高度相对近视(-8.8 D),视网膜c-fos表达明显下调,双眼屈光度、眼轴和视网膜c-fos的表达差异均有显著性(P<0.05);遮盖2周后,去遮盖1周,去遮盖眼较对照眼呈中度相对近视(-5.9 D),但去遮盖前后屈光度及眼轴差异无显著性(P>0.05),去遮盖眼较对照眼视网膜c-fos的表达明显上调,差异有非常显著性(P<0.01)。结论形觉剥夺能成功诱导豚鼠近视的发生及发展,并抑制视网膜c-fos的表达,而去除形觉剥夺可抑制近视的发展,并诱导视网膜c-fos的表达上调,证明c-fos的表达规律不仅反映外界视觉环境对眼的刺激,并与近视发展规律呈负相关,可能参与视网膜的信号转导和近视的抑制机制。     

哌仑西平对豚鼠离焦性近视的作用及机制

目的 评价眼表应用M1受体桔抗剂哌仑西平对豚鼠离焦性近视(lens-induced myopia,LIM)的作用,并探讨其作用机制.方法 健康2周龄雄性豚鼠40只,随机分为4组:单纯遮盖组(Ⅰ组)、氯化钠组(Ⅱ组)、哌仑西平组(Ⅲ组)、正常对照组(Ⅳ组),各组各10只.Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组豚鼠均右眼配戴-10.0 D透镜,左眼开放;Ⅳ组豚鼠双眼不做任何处理.Ⅱ、Ⅲ组豚鼠的右眼每天2次分别滴生理盐水溶液和30 g·L-1复方哌仑西平眼液.4周后检测4组豚鼠双眼屈光度、眼轴长度,免疫组织化学法检测豚鼠视网膜多巴胺转运蛋白(dopamine transporter,DAT)表达情况.结果 4周后,4组实验眼屈光度、眼轴长度、视网膜DAT阳性细胞个数分别为:Ⅳ组(0.40±1.05)D、(7.64±0.18)mm、(37.00 ±3.48)个,Ⅲ组(-2.15±1.02)D、(7.66±0.03)mm、(35.60±3.74)个,Ⅰ组(-4.70 ±0.39)D、(8.02±0.17)mm、(24.20 ±3.73)个,Ⅱ组(-4.05 ±0.75)D、(7.86 ±0.19)mm、(23.40±2.77)个,与Ⅲ和Ⅳ组相比,Ⅰ和Ⅱ组实验眼形成中高度近视、眼轴明显延长、视网膜DAT阳性表达也低,差异均有统计学意义(均为P<0.05);Ⅲ组与Ⅳ组相比,各项检测指标差异均无统计学意义(均为P>0.05).结论 哌仑西平滴眼液能有效抑制豚鼠LIM的发展,能阻止LIM眼视网膜DAT表达水平的下降.     

哌仑西平对鸡形觉剥夺性近视的作用

目的　观察选择性M1受体拮抗剂哌仑西平对鸡形觉剥夺性近视的疗效 ,初步探讨其作用机制。方法　 1d龄鸡 40只 ,随机分为 :正常组 (Ⅰ ) ;单纯遮盖组 (Ⅱ ) ;药物对照组 (Ⅲ ) ;哌仑西平组 (Ⅳ )。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组鸡的右眼用半透明眼罩遮盖 ,Ⅲ、Ⅳ组鸡的剥夺眼分别每日结膜下注射 0 1mol/L磷酸缓冲液和哌仑西平溶液 ;2周后检测 4组鸡的右眼屈光度、眼轴长度、赤道部直径 ,并对后极部巩膜行光镜、电镜观察。结果　哌仑西平组的各项指标较单纯遮盖组、药物对照组显著减低 (P <0 0 5 ) ,较正常组形成相对近视 ,眼轴长度、赤道部直径明显增大 (P <0 0 5 ) ;药物对照组与单纯遮盖组相比各项指标无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;组织学观察结果表明 ,哌仑西平组后极部巩膜的病理改变较单纯遮盖组明显减轻。结论　选择性M1受体拮抗剂哌仑西平能部分抑制近视的发生发展 ,可能是通过作用于巩膜发挥疗效的。     

不同浓度阿托品滴眼液对豚鼠形觉剥夺性近视的影响

目的探讨不同浓度阿托品滴眼液对单眼形觉剥夺幼年豚鼠的屈光发育的影响,并分析阿托品抑制近视的可能作用位点和机制。方法实验研究。将80只3周龄体质量在100 g左右的豚鼠随机分至5组：单眼形觉剥夺4周组（8只）、形觉剥夺加点药同时进行4周组（每个浓度各8只）、形觉剥夺2周后再加点药2周组（每个浓度各8只）、单纯点药4周组（每个浓度各6只）、空白对照组（6只）。阿托品粉剂溶于单蒸水配制成3个浓度的阿托品滴眼液：0.2%、1.0%、3.0%。每天早上8∶30-9∶00间点药。在实验前、实验2 周、实验4 周时测量各组豚鼠屈光力、角膜曲率、眼轴长度等相关生物学参数。实验4周结束后取豚鼠眼视网膜做冰冻切片,免疫荧光法标记豚鼠视网膜上表达胰高血糖素的细胞。采用配对样本t检验和重复测量的双因素方差分析进行数据分析。结果单纯形觉剥夺组,实验2周后实验眼屈光度较自身对照眼往近视方向发展,同时伴有玻璃体腔加深、眼轴延长,差异有统计学意义（t=-11.09、7.89、3.73,P<0.05）;4周后,差异更显著。形觉剥夺加点药同时进行的3个浓度组,实验2周后实验眼与自身对照眼的各屈光参数差异均无统计学意义,而2眼差值与单纯剥夺组比较,屈光度、玻璃体腔深度、眼轴长度差异均有统计学意义（F=26.335、6.479、6.910,P<0.05）;4周后,3个浓度组实验眼屈光度与自身对照眼比较均开始往近视方向发展,差异有统计学意义（t=-4.67、-7.54、-2.78,P<0.05）,同时玻璃体腔加深,眼轴延长,而2眼差值与单纯剥夺组比较,各屈光参数的差异仍有统计学意义（F=16.962、5.193、6.882,P<0.05）;但3个浓度组的组间两两比较显示,各参数实验前后差异无统计学意义。形觉剥夺2周后再加点药2周组,实验4周后各浓度组2眼差值与单纯剥夺4周组比较,各屈光参数差异均无统计学意义。各组豚鼠视网膜上均未标记出胰高血糖素表达阳性的细胞。结论在3%的浓度范围内,阿托品滴眼液能通过抑制玻璃体腔加深、眼轴延长从而部分抑制豚鼠形觉剥夺性近视的发生,且作用效果没有明显的浓度依赖性。但在近视形成后运用阿托品,并不能抑制近视的进展。胰高血糖素能途径没有参与阿托品对豚鼠近视发生发展的作用过程。     

形觉剥夺性近视豚鼠巩膜形态学观察

目的观察形觉剥夺性近视豚鼠眼后极部巩膜的改变。方法4周龄豚鼠14只,随机分为正常对照组(Ⅰ组),形觉剥夺(FD)组(Ⅱ组)。Ⅱ组豚鼠右眼采用半透明眼罩遮盖的方法建立形觉剥夺近视模型,2周后检测其屈光度、眼轴长,并观察后极部巩膜组织的光镜、电镜改变。结果2周后剥夺眼屈光度相对于对照眼及年龄匹配对照组分别为-3.1 D±1.60 D,-3.2 D±1.72 D(P<0.01)。剥夺眼眼轴相对于对照眼(7.90 mm±0.13 mm、7.87 mm±0.17 mm,P<0.01)和正常眼(7.90 mm±0.13 mm、7.70 mm±0.16 mm,P<0.05)明显延长。剥夺眼后极部巩膜组织变薄,胶原纤维直径变小,纤维间空间增大。结论形觉剥夺刺激豚鼠眼巩膜组织变薄,其改变与人类近视巩膜组织改变相似。     

视网膜对形觉剥夺性近视鸡巩膜MMP-2的调控

目的建立鸡形觉剥夺性动物模型,通过观察用庆大霉素破坏小鸡视网膜后,后极部巩膜基质金属蛋白酶Ⅱ(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的变化,探讨视网膜在形觉剥夺性近视(formdeprivation myopia,FDM)发生、发展中的影响作用。方法48只白色来亨鸡(鸡龄2d,SPF级)分为A、B、C、D4组,每组12只,其中A组、B组在第2d即行双眼半透明眼罩遮盖同时行右眼玻璃体内1次注射庆大霉素400μg;C组仅右眼玻璃体内1次注射庆大霉素400μg不予遮盖,左眼不作处理为自身对照;D组不作任何处理,为正常对照组。在第3周末,对全部小鸡行检影验光测屈光度后,将A、C2组鸡处死,迅速摘除双眼球,测量其前后径。并随机取出2只送病理组织切片;B组摘除双眼眼罩后继续饲养3周,在第6周末对B、D2组行检影验光后将其处死,摘除双眼球测量眼球前后径。用7mm直径环钻钻取后极部巩膜组织,研磨离心后取上清液作为标本,对所有标本采用ELISA(即酶联免疫吸附)试剂盒测定MMP-2活性浓度。所有数据经过EXCEL和SPSS统计软件进行处理。结果第3周末,A、B两组双眼屈光度之间均具有显著性差异(P<0·001),C组和D组双眼屈光度间无显著性差异(P=0·088,0·920),且A、B2组与C组双眼屈光度比较均分别具有显著性差异(P<0·001);A组双眼眼轴测量值具有显著性差异(P<0.01),C组双眼眼轴未见显著性差异(P>0.05),A组与C组比较时,右眼眼轴无显著性差异(P>0.05),而左眼间差异具有显著性(P<0.001);第6周末,B组去遮盖后双眼屈光度及眼轴测量值之间均无显著性差异(P>0.05),且与D组比较差异亦无显著性意义(P>0.05),但B组去遮盖前后双眼屈光度之间具有明显显著性差异(P<0.001)。ELISA结果显示,除了A组双眼后级部巩膜MMP-2含量自身对照及与其他各组比较均有显著性差异外(P<0.001),另外3组之间差异均无显著性意义(P>0.05)。结论视网膜色素上皮层在形觉剥夺性近视的发生发展过程中起着非常重要的作用,破坏视网膜色素上皮层能一定程度的减轻近视的发展程度。     

哌仑西平眼部离子导入治疗近视的药效学研究

目的观察哌仑西平眼部离子导入治疗近视的药效，为哌仑西平的临床使用提供实验依据。方法出生3周的花色豚鼠81只,随机分为9组，其中7组以单眼眼睑缝合法建立形觉剥夺性近视模型。在进行近视诱导的同时,9个组别分别接受如下处理：3组进行形觉剥夺眼的哌仑西平电场促透（离子导入），其中包括高、中、低三种不同的电流强度（PIRx-MD）；1组为形觉剥夺眼的空白对照组高电流强度离子导入（Vehicle0．3-MD）；1组为无电场促透的哌仑西平局部滴眼（PIR-MD）；1组为无电场促透的阿托品局部滴眼（At-ropine-MD）；1组为单纯形觉剥夺对照组（Normal-MD）；其余2组未建立形觉剥夺，作为对照。处理时间30d。检验指标包括屈光度、眼球前后径、眼球重量和组织病理学。结果Normal-MD和Vehicle 0．3-MD组实验眼诱导出-4．64D和-4．33D的近视,哌仑西平离子导入的3组分别诱导出-2．15D、-0．17D、-1．30D的近视；Normal-MD组实验眼的眼球前后径在实验结束时较对照眼增加0．3mm。哌仑西平离子导入的3组分别增加-0.1mm、0mm、-0．1mm：Normal-MD组眼球重量较对照眼增加0．02g,哌仑西平离子导入的3组分别增加0g、0g、-0．02g。两者之间差异均有统计学意义。所有实验眼光镜病理检查未发现异常改变。结论哌仑西平眼部离子导入抑制实验性近视效果明显优于局部滴眼,和阿托品作用类似；同时不引起眼组织的病理改变。     

抗血管内皮生长因子玻璃体内注射对形觉剥夺性近视豚鼠视网膜中多巴胺水平的影响

目的 探讨抗血管内皮生长因子融合蛋白康柏西普(Conbercept)玻璃体内注射对形觉剥夺性近视(FDM)豚鼠视网膜中多巴胺(DA)水平的影响.方法 选取3周龄三色豚鼠60只,按照随机数字表法分为空白对照组、FDM组、FDM+生理盐水组、FDM+Conbercept组,每组15只.空白对照组豚鼠双眼不作任何处理,其余3...     

形觉剥夺时限对豚鼠近视形成的影响

目的　研究不同形觉剥夺时限对豚鼠实验性近视度数的影响。方法　将 2 0只 4周龄豚鼠分为 4组 ,Ⅰ组为对照 ,不做任何处理。Ⅱ～Ⅳ组单眼遮盖 4周 ,其中Ⅱ组持续遮盖 ,Ⅲ～Ⅳ组每天定时去除遮盖 ,时间分别为 1、4h ,实验前、后分别用检影镜和A超测眼屈光度数及眼轴长度。结果　 4周后 ,Ⅱ、Ⅲ组遮盖眼均发生轴性近视 ,近视度数的差异有显著意义 (P <0 .0 5 )。与对照组相比 ,Ⅱ组遮盖眼形成 - 5 .4 9D近视 ,并伴有眼轴的明显增长 ,非遮盖眼呈 0 .76D的相对远视。每天定时去除遮盖者近视度数明显降低 ,去遮盖 1h可使近视度数降低 5 0 % ,4h者不形成近视。去遮盖组眼轴长度较持续遮盖组短。结论　短时间去遮盖可逆转长期遮盖形成的形觉剥夺性近视。     

哌仑西平对鸡形觉剥夺性近视的疗效及作用机制

目的初步探讨选择性M1受体拮抗剂哌仑西平抑制近视的作用机制.方法 1日龄鸡40只,随机分为4组,Ⅰ组为正常组;Ⅱ组为单纯遮盖组;Ⅲ组为药物对照组;Ⅳ组为哌仑西平组.Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组右眼用半透明眼罩遮盖,Ⅲ、Ⅳ组鸡的剥夺眼分别每日结膜下注射0.1 mol/L的磷酸缓冲液和10%哌仑西平溶液;2周后检测4组动物右眼屈光度数、眼轴长度和赤道部直径.提取鸡眼巩膜纤维层的RNA和蛋白质,利用逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法检测基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶2抑制剂（TIMP-2） mRNA和蛋白质表达水平的改变.结果哌仑西平组的各项指标较单纯遮盖组、药物对照组显著减低 （P〈0.01）,较正常组形成相对近视,眼轴长度、赤道部直径明显增大;药物对照组与单纯遮盖组相比各项指标无统计学意义（P〉0.05）,与遮盖组相比,哌仑西平组鸡眼巩膜纤维层MMP-2 mRNA和蛋白质表达水平显著下降 （P〈0.01）,而TIMP-2的表达水平显著升高 （P〈0.01）.结论选择性M1受体拮抗剂哌仑西平能部分抑制近视的发生发展,可能是通过调节巩膜纤维层MMP-2和TIMP-2的表达而发挥疗效的.     

胰岛素样生长因子1受体反义寡核苷酸对豚鼠形觉剥夺性近视眼的抑制作用

目的观察豚鼠形觉剥夺性近视眼后极部视网膜胰岛素样生长因子1受体（insulin-like growth factor 1 receptor,IGF-1R）基因表达水平的动态变化,以及IGF-1R反义寡核苷酸玻璃体腔注射对形觉剥夺性近视眼屈光度及眼轴长度的影响,探讨视网膜IGF-1R在实验性近视眼发病中的作用。方法3周龄的三色豚鼠64只,随机均分为8组（每组8只）,A组：单眼遮盖7d;B组：未遮盖7d;C组：单眼遮盖14d;D组：未遮盖14d;E组：单眼遮盖14d后去遮盖7d;F组：未遮盖21d;G组：单眼遮盖14d＋玻璃体腔注射40μg（20μl）IGF-1R正义寡核苷酸;H组：单眼遮盖14d＋玻璃体腔注射40μg（20μl）IGF-1R反义寡核苷酸。检测各组的近视屈光度、眼轴长度以及后极部视网膜IGF-1R mRNA和蛋白质的表达水平。结果遮盖14d后实验眼眼轴明显延长,形成近视,去遮盖7d后,近视屈光度减低,眼轴增长减缓;随着遮盖时间的延长,后极部视网膜IGF-1R表达水平明显上调,去遮盖后,表达水平降低（P=0.000）。形觉剥夺14d后,IGF-1R正义寡核苷酸注射眼的眼轴长度 、近视屈光度以及后极部视网膜IGF-1R表达水平与单纯遮盖组无显著差异（P=0.664,0.797,0.312,0.117）;但IGF-1R反义寡核苷酸注射眼的近视屈光度显著减低,眼轴变短,后极部视网膜IGF-1R mRNA和蛋白质表达水平均明显下调（P=0.000）。结论形觉剥夺能上调豚鼠眼后极部视网膜IGF-1R的表达水平,去遮盖后,豚鼠近视屈光度减低,眼轴增长减缓,后极部视网膜IGF-1R的表达水平下调。利用反义寡核苷酸技术抑制视网膜IGF-1R基因的表达,可以抑制近视的发展。     

豚鼠进展性近视眼巩膜中Smad3和Ⅰ型胶原的动态表达变化

背景 巩膜重塑过程中导致眼轴的伸长是轴性近视进展的主要病理机制之一.研究证实转化生长因子β1(TGF-β1)参与巩膜重塑过程,而Smad3是TGF-β1的下游信号转录基因之一,探讨其在近视眼巩膜重塑过程中的作用对于近视发病机制和防治研究具有重要意义. 目的 研究近视眼巩膜重塑过程中Smad3和Ⅰ型胶原的表达情况,探讨TGF-β1-Smad3-Collagen Ⅰ信号途径在近视巩膜胶原重塑中的作用.方法 将出生后7d的豚鼠75只任意分为空白对照组(25只)和形觉剥夺性近视(FDM)组(50只).FDM组豚鼠采用半透明乳胶遮盖左眼的方法制备单眼FDM模型,右侧未遮盖眼作为自身对照.FDM组分别遮盖2、4、6周,另一组动物遮盖4周后去遮盖1周,分别于遮盖前及上述时间点采用检影法测量各组豚鼠双眼屈光度,采用A型超声手动模式测量豚鼠眼轴长度.于上述时间点分别处死5只豚鼠并制备巩膜组织切片,分别采用免疫组织化学法及逆转录PCR法检测各组豚鼠巩膜组织中Smad3和Ⅰ型胶原蛋白及其mRNA的相对表达量.结果 遮盖前空白对照组与FDM组豚鼠屈光度均为远视状态,差异无统计学意义(P＞0.05),空白对照组豚鼠远视屈光度逐渐下降,而FDM组豚鼠在遮盖前,遮盖2、4、6周及遮盖4周后去遮盖1周屈光度从(+2.09±0.31)D逐渐改变为(-1.23±0.69)、(-4.17±0.59)、(-7.07±0.56)和(-4.30±0.58)D,眼轴长度从(5.93±0.39)mm逐渐改变为(6.62±0.36)、(7.30±0.34)、(7.99±0.32)和(7.21±0.36) mm,与空白对照组比较,遮盖后各时间点FDM组豚鼠近视度明显升高,眼轴测量值明显增加,差异均有统计学意义(均P＜0.01).与自身对照组比较,遮盖2周、4周、遮盖4周后去遮盖1周及遮盖6周时FDM组近视度均明显升高,眼轴明显增长,差异均有统计学意义(均P＜0.05).遮盖前空白对照组与FDM组豚鼠后极部巩膜组织中Ⅰ型胶原和Smad3蛋白及其mRNA相对表达量的差异均无统计学意义(均P＞0.05),FDM组豚鼠遮盖2、4、6周及遮盖4周后去遮盖1周巩膜组织中Ⅰ型胶原和Smad3蛋白及其mRNA相对表达量均明显低于空白对照组和自身对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).豚鼠巩膜组织中Ⅰ型胶原蛋白与Smad3蛋白及其mRNA相对表达量均呈明显正相关(蛋白:r=0.993,P＜0.05;mRNA:r =0.954,P＜0.05). 结论 FDM豚鼠模型眼随着遮盖时间的延长近视度明显增加,眼轴明显增长,豚鼠巩膜组织中Smad3和Ⅰ型胶原的表达相应减弱,且Smad3和Ⅰ型胶原表达量的变化趋势高度一致.Smad3和Ⅰ型胶原可能通过TGF-β1-Smad3-Collagen Ⅰ信号途径参与近视眼巩膜重塑过程的调控.     

重组人胰岛素样生长因子2对豚鼠眼球发育的调控作用及其与形觉剥夺的关系

目的 对豚鼠非遮盖眼和形觉剥夺性近视（form- deprivation myopia,FDM）眼玻璃体腔注射重组人胰岛素样生长因子2（recombinant human insulin-like growth factor,rhIGF-2）,观察rhIGF-2对两组豚鼠眼屈光度、眼轴长度及视网膜－脉络膜内源性IGF-2 表达水平的影响,探讨rhIGF-2对豚鼠眼球发育的调控作用以及该调控作用与形觉剥夺的关系。方法 选取3周龄的三色豚鼠80只,随机均分为2组。A组为非遮盖组,分为A1～A5组,每组8只：A1组为空白对照组;A2组为阴性对照组,单眼玻璃体腔注射20 ul牛血清白蛋白;A3～A5组为rhIGF-2注射组,注射量分别为1 ng、10 ng、100 ng（20 ul）。B组为单眼遮盖组,分为B1～B5组,各组遮盖眼处理同A1～A5组。实验第14天测量遮盖眼屈光度和眼轴长度,检测视网膜－脉络膜IGF-2 的表达水平。结果 非遮盖组中,rhIGF-2注射组（A3、A4、A5组）的屈光度、眼轴长度与对照组（A1、A2组）之间差异无统计学意义（P〉0.05）; 但A4、A5组的IGF-2 水平明显低于对照组（P=0.000）,A3组与对照组差异无统计学意义（P〉0.05）;A3、A4、A5组内源性IGF-2表达水平与rhIGF-2注射量呈负相关（r=-0.940,P=0.000）。单眼遮盖组中,B4、B5组与对照组（B1、B2组）相比,近视屈光度增加,眼轴延长,内源性IGF-2表达水平下降（P=0.000）,而B3组与对照组之间差异无统计学意义（P〉0.05）;B3、B4、B5组的屈光度及内源性IGF-2 表达水平与rhIGF-2注射量呈负相关（r=-0.832,-0.858,P=0.000）,眼轴长度与rhIGF-2注射量呈正相关（r=0.863,P=0.000）。结论 rhIGF-2玻璃体腔注射对豚鼠非遮盖眼的屈光度和眼轴长度无影响,但可使形觉剥夺眼近视屈光度增加,眼轴延长,其效应呈浓度依赖性。rhIGF-2可下调豚鼠眼视网膜－脉络膜内源性IGF-2的表达,效应呈浓度依赖性。提示rhIGF-2在形觉剥夺存在的条件下?     

Comparison of form-deprived myopia and lens-induced myopia in guinea pigs

AIM: To study the efficacy difference between form-deprived myopia (FDM) and lens-induced myopia (LIM), the degree of myopia, axial length and pathological changes of the posterior sclera from guinea pigs were evaluated.METHODS: Four-week pigmented guinea pigs were randomly assigned into 3 groups, including normal control (n=6), FDM group with monocular cover (n=11) and LIM group with monocular -7D lens treatment (n=11). FDM group was form-deprived while LIM group was lens-induced for 14 d. Refractive error and axial length were measured prior to and post treatment, respectively. Morphological changes of sclera were examined using both light and electronic microscopes.RESULTS: After 14d treatment, refractive errors for FDM group and LIM group were -3.05±0.71D and -2.12±1.29D, respectively, which were significantly more myopic than that of normal controls and fellow control eyes (P<0.01). As for axial length, it was 7.93±0.03 mm for FDM group and 7.89±0.06 mm for LIM group, which were significantly longer than both normal and fellow controls (P<0.01). With respect to both refractory error and axial length, the differences between FDM group and LIM group were not significant (P>0.05). Under light microscope, both FDM group and LIM group showed thinned sclera, disarrangement of fibrosis and enlarged disassociation between fibers. Consistently, ultrastructural examination showed degenerated fibroblasts and thinned fibers in posterior sclera.CONCLUSION:Following two weeks of myopia induction in guinea pigs, with regard to the degree of myopia, axial length and pathological alterations, there was no significant difference between FDM and LIM models. Therefore, FDM and LIM are equally effective and useful as a model of experimental myopia and guinea pigs are ideal animals for induction of experimental myopia because their high sensitivity to both form-deprivation and lens-induction.     

形觉剥夺性近视豚鼠视网膜中神经生长因子及其受体的表达

目的 探讨视网膜神经生长因子（NGF）及其受体（TrkA）在豚鼠形觉剥夺性近视（FDM）视网膜中的表达.方法 对出生7 d豚鼠以半透明眼罩遮盖右眼2个月制备FDM动物模型,左眼作为对照.遮盖前及遮盖2、4、8周后,检影验光检测双眼屈光度,A型超声测量双眼眼轴长度.免疫组织化学和逆转录一聚合酶链式反应（RT-PCR）检测视网膜NGF和TrkA的表达变化.结果 形觉剥夺使豚鼠眼轴增长,近视屈光度增加,遮盖眼与对照眼相比屈光度差异有统计学意义（P＜0.01）.遮盖眼NGF与TrkA免疫活性逐渐降低,NGF与TrkAmRNA表达下调,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 NGF和TrkA可能参与调控FDM的形成.     

去调节后远视性光学离焦对幼年豚鼠眼球发育过程的影响

目的研究去调节后豚鼠眼球对不同离焦信号的识别及其对眼球发育过程的影响。方法实验研究。将120只1周龄体重约100 g幼年豚鼠按离焦程度及调节随机分为6组（初始每组20只,最终参与数据分析保留调节未离焦组为20只,其余名组均为15只）：保留调节未离焦组、去调节未离焦组、-2 D离焦组、-4 D离焦组、-6 D离焦组、-8 D离焦组（所有离焦组均为双眼去调节后戴镜,保留调节组使用生理盐水点眼,去调节组使用1%阿托品滴眼液点眼,均为每天1次）。此外另取5只相同批次豚鼠予以左眼去调节、右眼保留调节处理后跟踪测量对比双眼瞳孔直径变化,以观察睫状肌麻痹效果。实验开始前3 d予1%阿托品滴眼液点双眼以达到睫状肌麻痹效果完全后双眼配戴镜片,保留调节组使用生理盐水点眼作为对照。于实验开始后当天和实验开始3周后分别检测其角膜曲率半径、屈光度以及眼轴长度变化,结果取右眼数据。数据分析采用独立样本t检验、方差分析、相关分析、回归分析以及重复测量分析。结果2个未离焦组间的各项眼球发育参数变化值相近,差异无统计学意义。所有离焦组内角膜曲率半径变化值的差异均无统计学意义。去调节后豚鼠屈光度均向远视度数减少的方向发展,但相对于去调节未离焦组,所有离焦组均产生了相对性近视,且差异均有统计学意义（F=8.826,P<0.01）;同时随着离焦程度的增加,相对性近视以及眼轴增长的幅度也随之增大。去调节未离焦组、轻中度去调节离焦组（-2 D、-4 D）分别与高度去调节离焦组（-8 D）对比,它们之间的屈光变化值及眼轴变化值的差异有统计学意义。结论与去调节未离焦组比较,远视性光学离焦使去调节的幼年豚鼠形成相对性近视,其幅度随离焦程度增大而增加,相对性近视与离焦程度之间存在相关性;眼轴长度也呈现出相同的趋势。在去调节情况下,豚鼠眼球能仍够识别远视性离焦信号并进行对焦生长。