镁离子在支气管哮喘气道重塑中的作用研究

目的:探讨镁离子在支气管哮喘(下称哮喘)豚鼠气管重塑中的作用机制。方法:将50只雄性豚鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B1组)、哮喘模型延续组(B2组)、高镁组(B3组)、低镁组(B4组)。用卵清蛋白复制哮喘气管重塑模型。观察血清镁离子浓度、气管壁各层厚度及脏器体重比。结果:1B1组血清镁离子浓度明显低于A组(P<0.05),气管壁各层厚度明显大于A组(P<0.01)。2B3组血清镁离子浓度明显大于B2组(P<0.05),气管壁各层厚度明显小于B2组(P<0.05)。3B4组小气管平滑肌厚度大于B2组(P<0.05)。结论:血清镁离子在哮喘豚鼠气管重塑中起调节作用。     

肥大细胞对慢性实验性哮喘小鼠气道反应性和气道炎症的影响

目的 研究肥大细胞在慢性实验性哮喘小鼠气道病理改变过程中的作用.方法 遗传性肥大细胞缺失W/Wv小鼠、正常 / 小鼠和培养骨髓肥大细胞重建的W/Wv小鼠分设对照组和实验组.实验组小鼠用10μg OVA 2次致敏,17 d后用1% OVA气道激发,每周1次,共7周,检测其肺组织中肥大细胞数量、气道反应性和肺组织的病理改变.结果 OVA致敏和激发可引起 / 和肥大细胞重建的W/W'小鼠肺组织中肥大细胞数量明显增加,气道反应性增强,肺组织炎性病理改变明显;而OVA致敏和激发的W/W'小鼠的上述指标改变不明显.结论 肥大细胞参与了OVA诱导的小鼠气道高反应性、肺组织炎症细胞浸润过程.     

激素抵抗型哮喘小鼠动物模型的实验性研究

目的探索建立激素抵抗型支气管哮喘小鼠动物模型的有效方法。方法普通级BALB/C雌性小鼠30只,随机均分为5组。正常对照（NC）组直接处死,非治疗哮喘（NTA）、激素治疗敏感哮喘（SSA）、气管重塑（AR）、激素抵抗型哮喘（SRA）组均采用卵清白蛋白（OVA）致敏、激发造模,SSA、SRA组予地塞米松（DEX）干预,AR、SRA组连续雾化9周。行肺泡灌洗液（BALF）细胞计数、肺组织切片细胞分类计数、气管壁及平滑肌厚度图像分析。结果SRA组在实验末期出现持续性喘息,DEX干预后喘息不缓解。NTA、AR、SRA组肺内炎症细胞浸润程度、气管壁程度较NC组严重,SRA组肺内嗜酸性粒细胞、淋巴细胞浸润及AR程度较SSA组严重（P<0.05）,AR组BALF细胞计数及AR程度较NTA组严重（P<0.05）,SRA组与AR组比较,仅肺内嗜酸性粒细胞数明显升高（P<0.01）。结论本研究建立SRA小鼠动物模型的方法切实可行。     

地塞米松对豚鼠哮喘模型肥大细胞和类胰蛋白酶的影响

目的:探讨地塞米松对豚鼠哮喘模型肺组织中肥大细胞及血浆类胰蛋白酶含量的影响。方法:将30只雄性豚鼠分为哮喘模型、地塞米松治疗和健康对照组,用卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏和雾化吸入激发建立哮喘豚鼠模型。镜下观察肺组织肥大细胞数量及脱颗粒现象。运用UniCAP100全自动体外变应原检测仪测定豚鼠血浆类胰蛋白酶含量。结果:哮喘模型组豚鼠肺高倍视野肥大细胞数、脱颗粒百分率及血浆类胰蛋白酶含量分别为14.87±4.67个,42.85±5.99%,119.78±12.50均明显高于对照组(2.38±0.52个,24.91±9.79%,88.78±4.74,P<0.01);地塞米松治疗组豚鼠肺高倍视野肥大细胞数、脱颗粒百分率及血浆类胰蛋白酶含量分别为6.63±1.41个,25.33±6.14%,92.10±7.11,显著低于哮喘模型组(P<0.01)。结论:肥大细胞类胰蛋白酶参与了哮喘的致病过程;而糖皮质激素在哮喘中的抗炎作用可能是通过抑制肥大细胞类胰蛋白酶的释放而实现的。     

肥大细胞在哮喘中的作用

<正>支气管哮喘是由嗜酸性粒细胞、肥大细胞和T淋巴细胞等多种炎症细胞参与的气道慢性炎症。这种炎症使易感者对各种激发因子具有气道高反应性,并可引起气道狭窄,表现为反复发作的喘息、呼吸困难、胸闷或咳嗽等症状,常在夜间和（或）清晨发作、加剧。常常出现广泛多变的可逆性气流受限,多数患者可自行缓解或经治疗缓解。本文对肥大细胞在哮喘中的作用,特别是肥大     

实验性小鼠肺纤维化过程中IL-31mRNA的动态表达及意义

目的:探讨博莱霉素(BLM)致肺纤维化小鼠各时期肺组织中白细胞介素31(IL-31)mRNA的表达规律及其意义。方法:将48只雄性昆明种小鼠随机分为对照组(n=24)和实验组(n=24)。分别给予生理盐水和博莱霉素(5mg/kg)一次性气管内灌注,于灌注第7、14、21和28天处死小鼠,取肺组织,应用RT-PCR法测定其中的IL-31mRNA的相对转录水平。结果:1实验组肺组织中IL-31mRNA表达水平在第7、14、21天均高于对照组(P<0.05)。2实验组中IL-31mRNA表达从第7天开始升高,第21天达到高峰。结论:IL-31在肺纤维化形成过程中存在高表达,尤其在介导中后期肺纤维化进程中发挥重要作用。     

肥大细胞在哮喘气道损伤及重塑中的作用机制

过敏性哮喘是机体将原本正常的免疫识别过程无限放大的过敏性炎症反应所导致的疾病.由于气道的损伤及重塑既是哮喘的特征又直接关系到哮喘的发展和预后.本文就过敏性炎症效应阶段的核心细胞-肥大细胞在哮喘时气道损伤和重塑中的作用机制做一综述.     

藜草花粉特异性致敏哮喘动物模型的制备

目的:建立藜草花粉粗制变应原诱导的小鼠变态反应气管炎症动物模型。方法:制备藜草花粉粗制变应原,将40只BALB/c小鼠,分为:1空白对照组、2低剂量组、3中剂量组、4高剂量组,每组10只。分别通过HE染色观察小鼠肺部炎症和黏液分泌;观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和细胞分类;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BALF、脾组织匀浆上清的IL-4、IFN-γ和血清抗原特异的IgE、IgG1抗体。结果:随着抗原浓度的升高肺部病理改变呈明显的变态反应炎症;BALF中的细胞总数、巨噬细胞数、EOS计数、IL-4、血清抗原特异性IgE抗体、IgG1抗体也逐步升高并明显高于空白对照组(P<0.05);BALF、脾组织匀浆上清的IFN-γ与空白对照组相比却反而下降(P<0.05)。结论:藜草花粉成功构建小鼠变态反应气道炎症动物模型。     

重水对高岭土诱导小鼠脑积水发展的影响

目的:研究重水(D2O)对高岭土诱导小鼠脑积水发展的影响。方法:将枕大池中注射高岭土的小鼠分为两组:H组,术后一直喂养自来水;D组:在注射高岭土后喂养30%的重水。将枕大池中注射蒸馏水的小鼠组作为阴性对照(Sham)组。结果:注射高岭土后28d内重水对脑积水的发展和软脑膜纤维化和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达有抑制作用,D组的脑室扩张程度以及颅内软脑膜纤维化程度均比H组要小(P<0.05)。结论:应用D2O可以抑制高岭土诱导的小鼠脑积水的发展、颅内软脑膜纤维化以及TGF-β1的表达。     

实验性哮喘小鼠免疫细胞的ADCC作用

目的 :探讨支气管哮喘的发病机制。方法 :在小鼠 OVA支气管哮喘模型的基础上 ,分离哮喘鼠和正常鼠脾脏各种免疫细胞 ,包括单核 /巨噬细胞、树突状细胞、B细胞、CD3+ T细胞、CD4+ T细胞和 CD8+ T细胞 ,并以细胞增殖法和改良的 MTT比色法检测上述各种细胞的抗体依赖的细胞介导细胞毒效应 ( antibody dependentcell- mediated cytotoxicity,ADCC)。结果 :支气管哮喘小鼠上述各种细胞自然状态下的 ADCC作用均较健康对照组减弱 ( P<0 .0 5 )。结论 :免疫细胞自然状态下 ADCC作用减弱可能作为支气管哮喘免疫功能紊乱的一部分参与了哮喘的发病     

芦荟凝胶对豚鼠哮喘的作用研究

目的:探讨芦荟凝胶对豚鼠过敏性哮喘的影响。方法:将豚鼠随机分为哮喘组、芦荟组和正常组3组,用10%卵清蛋白(OVA)生理盐水200mg/kg合并等体积1mg/ml氢氧化铝致敏豚鼠,两周后抗原OVA第2次攻击,复制豚鼠哮喘模型;芦荟组隔天芦荟灌胃两周,其余两组生理盐水灌胃。对比观察其行为学差异和血中嗜酸性粒细胞(EOS)数目的差异。结果:芦荟组嗜酸性粒细胞数目较哮喘组明显降低(P<0.05),且其哮喘症状有明显差异(P<0.05)。结论:芦荟凝胶可有效减轻豚鼠的哮喘症状。     

豚鼠膀胱Cajal样细胞缺失模型的建立

目的:探讨通过体内阻断c-kit信号途径来建立豚鼠膀胱Cajal样细胞缺失模型的方法。方法:选取新生豚鼠20只,随机分成实验组、对照组。实验组在出生24h内的豚鼠腹腔内隔天注射c-kit抗体(ACK2)100μg,共5次,对照组腹腔内注射生理盐水,于第10天取膀胱。然后将两组豚鼠膀胱制作冰冻切片行免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜观察。结果:10d后实验组与对照组豚鼠逼尿肌中Cajal样细胞在激光共聚焦显微镜下比较:实验组膀胱逼尿肌中Cajal样细胞数量减少甚至消失(P<0.01),Cajal样细胞二聚体消失(P<0.01)。结论:通过阻断c-kit信号通路可以成功建立豚鼠膀胱Cajal样细胞缺失模型。     

阿托伐他汀在C57BL/6小鼠肺纤维化ROCKⅡ信号通路中的作用

目的:探讨阿托伐他汀对小鼠肺纤维化模型的治疗作用及ROCKII信号转导通路在肺间质纤维化发病中的机制。方法:将60只小鼠随机分为正常对照组,肺纤维化模型组(M),阿托伐他汀(5、10、20、40mg)干预组(B+A5、B+A10、B+A20、B+A40)。应用HE染色、免疫组化、Western-Blot方法,检测ROCKII的表达。结果:经阿托伐他汀干预后,形态学:B+A组纤维化较M组减轻(P<0.01)。免疫组化:B+A组的ROCKⅡ蛋白表达较M组减少(P<0.01);Western-Blot:B+A组ROCKⅡ蛋白表达量减少(P<0.01)。结论:阿托伐他汀可减轻小鼠肺纤维化ROCKII信号通路的通路表达。     

大鼠趋化素样因子1mRNA在哮喘大鼠肺组织中的表达

目的观察大鼠趋化素样因子1(rCKLF1)的mRNA在支气管哮喘大鼠肺组织的表达。方法将30只SD大鼠分为对照组(N组)及哮喘组,根据激发时间(1d、3d、7d、14d)不同将哮喘组分为A、B、C、D4组。哮喘激发后取右肺中叶提取组织总RNA。逆转录后行实时荧光定量PCR。了解rCKLF1mRNA的表达。结果rCKLF1在哮喘大鼠的肺组织中表达上调,并呈动态变化,7d达峰值,为正常的12.2倍。结论CKLF1与哮喘的病理生理过程有关。     

ERK1/2与实验性慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道平滑肌增殖的分子机制研究

目的:探讨ERK1/2信号在烟熏实验性慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道重塑平滑肌增殖的分子机制。方法:取大鼠模型肺组织分别提取RNA、蛋白以及行组织病理学检查。RT-PCR检测TGF-β1、ET-1条带;Masson染色检测各组支气管管腔的内周长(Pi)、平滑肌层面积(WAm)、支气管壁面积(WAt);Western Blot检测各组标本TGF-β1、ET-1、ERK1/2和p-ERK1/2。结果:烟熏2周后气道平滑肌层和支气管壁厚度较健康对照组和U0126对照组明显增厚(P<0.05),TGF-β1、ET-1以及ERK1/2蛋白磷酸化表达均增加,予U0126干预后,气道平滑肌增殖和支气管壁厚度逐渐减轻,ERK1/2蛋白磷酸化受到抑制,呈剂量依赖性。结论:烟熏可以刺激大鼠气道平滑肌慢性炎症和平滑肌增殖,ERK1/2是COPD气道平滑肌增殖信号传导的主要途径。TGF-β1参与了ERK1/2信号系统对气道重塑平滑肌增殖的调控。MEK1的特异性阻断剂U0126能有效干预COPD气道平滑肌细胞增殖的分子信号调节。     

采用IV型胶原酶建立小鼠脑出血模型

目的:用脑内注射胶原酶方法建立小鼠脑出血模型。方法:在动物脑立体定位仪下将不同剂量Ⅳ型胶原酶0.5μl注射到昆明小鼠左侧纹状体处,分别在术后24h对小鼠运动功能进行检测,并对出血部位脑组织进行尼氏染色,光镜观察染色结果来验证模型制作是否成功。结果:术后小鼠即表现右侧肢体运动功能障碍。形态学观察证实左侧纹状体内血肿形成,且在一定范围内,出血灶大小与肢体偏瘫症状发展过程基本一致。不同个体间相同单位的胶原酶出现的血肿体积和部位基本一致。结论:应用Ⅳ型胶原酶脑内注射方法建立的小鼠脑出血模型,是一种方法简单,效果可靠,易于大批量制作的动物模型。脑内注射0.02U的IV型胶原酶制备的脑出血模型能较好满足实验要求。