基于血液代谢组学技术的甲氨蝶呤抗类风湿性关节炎作用机制研究

目的:采用代谢组学技术探究甲氨蝶呤抗类风湿性关节炎的作用机制.方法:采用佐剂性关节炎(AIA)方法复制大鼠类风湿性关节炎模型,采用经典足肿胀度指标评价模型复制程度,并给予甲氨蝶呤进行治疗.收集血液样本采用代谢轮廓技术表征疾病发生发展及给予药物干预后的代谢水平,采用MSE数据采集模式全成分获取各组大鼠的实验过程中的生物学...     

痹祺胶囊对类风湿性关节炎HCgp-39调控机制研究

<正>本课题围绕类风湿性关节炎(RA)的发病机制及中药抑制关节破坏作用的途径与靶点这一主题,综合临床、细胞学及动物实验,分别从形态学、细胞、     

痹祺胶囊治疗类风湿性关节炎疗效观察

[目的]观察痹祺胶囊对类风湿性关节炎治疗疗效。[方法]71例患者，口服痹祺胶囊，4例／次，3次／d，4～8周为1个疗程。[结果]71例患者，临床缓解8例，显效18例，有效22例，无效23例，总有效率为67．61％。活动期的35例患者总有效率为42.86％，稳定期的36例总有效率为91.67％。[结论]痹祺胶囊为治疗类风湿性关节炎的有效中药。     

痹祺胶囊治疗类风湿性关节炎36例

笔者于2000年9月～2003年9月，以天津达仁堂制药二厂生产的痹祺胶囊治疗类风湿性关节炎36例，疗效较好，报告如下。     

痹祺胶囊治疗类风湿性关节炎的药效学实验研究

类风湿性关节炎(RA)是以关节组织慢性炎症为主要表现的全身性疾病,致残率高,严重影响患者的生活质量。现仅以痹祺胶囊进行药效学实验,为评价其疗效机制提供依据。实验材料1·实验动物健康ICR小鼠,体质量(20±2)g。健康Wistar大鼠,雄性,体质量(180±20)g。以上动物均为Ⅱ级清洁级,由北京军事医学科学院实验室中心提供。2·药品试剂①药品:痹祺胶囊(天津达仁堂达二药业有限公司,批号041202),尼美舒利(苏州东瑞制药有限公司,批号050110)。②主要试剂:牛Ⅱ型胶原,购自Chondrex公司;弗氏完全佐剂,购自美国Sigma公司。实验方法1·对小鼠热板性…     

痹祺胶囊对兔骨关节炎软骨代谢的作用研究

目的：观察痹祺胶囊对骨关节炎软骨代谢的作用。方法：以Hulth法复制兔膝骨关节炎模型,对软骨组织行Mankin标准评分,设置空白组、假手术组,观测各组兔血清及尿液的羟脯氨酸含量,并设痹祺胶囊低、中、高浓度组及西药组以了解其疗效。结果：各治疗组间Mankin标准评分水平无差异,痹祺胶囊各剂量组血清、尿羟脯氨酸含量与模型组比较差异均有显著意义（P〈0.05）。结论：痹祺胶囊可通过促进骨修复或抑制软骨破坏而减低兔骨关节炎模型体内羟脯氨酸含量,对骨关节炎软骨代谢有明确的改善作用。     

痹祺胶囊治疗类风湿关节炎58例临床观察

类风湿关节炎是一种以关节病变为主的慢性全身性病变，临床上常见而难治。中医多循“痹证”进行辨证治疗。积极的早期诊断和治疗，可以提高临床治愈率和降低致残率。笔者采用痹祺胶囊治疗类风湿关节炎58例，取得比较满意的效果。     

基于GC-MS的针刺治疗类风湿性关节炎的代谢组学研究

目的:分析类风湿性关节炎(RA)患者血清内源性代谢物的变化,筛选差异性代谢物,观察针刺对差异性代谢物的调节作用,从代谢组学的角度探究针灸治疗RA的作用机制.方法:RA患者按随机数字表法分为针刺组及阳性药对照组,每组15例;同时收集健康体检者10例作为正常对照组.针刺组予双侧风池、阳池等穴针刺治疗,每次20 min,每天...     

基于网络药理学的痹祺胶囊治疗类风湿性关节炎的配伍规律研究

目的 基于网络药理学方法探讨痹祺胶囊的配伍规律,阐释其治疗类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）的机制内涵。方法 按照痹祺胶囊及其单味药材的功效将其分为益气养血组、活血通络组、抗炎镇痛组,并分别选取药材中的特征成分,依据反向药效团匹配方法和TCMSP、Uniprot等数据库预测化合物作用靶点,与通过OMIM、DisGeNet、GeneCards等数据库收集RA相关靶点相互交互,将交互靶点借助Omicsbean、STRING等数据库平台对获得靶点进行基因本体功能和京都基因与基因组百科全书通路富集分析,利用Cytoscape软件构建“药材-化合物-靶点-通路-功效”网络。结果 通过网络药理学预测,得到益气养血组11个成分的67个潜在靶点,蛋白质-蛋白质相互作用（protein-protein interaction,PPI）网络分析发现白蛋白、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEG...     

痹祺胶囊治疗类风湿关节炎远期疗效观察

[目的]观察中药痹祺胶囊治疗类风湿关节炎(RA)的远期疗效。[方法]痹祺胶囊治疗RA患者120例，随访3a，观察实验室指标及双手X线变化。[结果]痹祺胶囊治疗RA总有效率为80.83％，X线在3a内均无明显变化。[结论]中药痹祺胶囊治疗RA效果良好，能控制RA病情进展，阻止RA关节结构破坏进程，是治疗RA有效的方药。     

痹祺胶囊对类风湿性关节炎关键靶点的调节作用

目的 采用G蛋白偶联受体及酶活检测实验方法,探究痹祺胶囊对类风湿性关节炎关键靶点的调节作用,明确其作用机制。方法 选取与抑制滑膜炎症相关的靶点[环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、趋化因子受体4(C-C chemokine receptor type 4,CCR4)],与抑制血管翳生成相关的靶点[血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2/KDR)],与抑制基质降解相关的受体[基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)],以及与活血相关的靶点[凝血酶、磷酸二酯酶(cGMP-inhibited 3′,5′-cyclic phosphodiesterase,PDE3A)、肾上腺素受体α1(alpha-1A adrenergic receptor,ADRA1A)]为研究载体,通过胞内钙离子荧光和酶抑制剂检测技术...     

基于串联质谱标签定量蛋白质组学的痹祺胶囊治疗类风湿性关节炎的作用机制

目的 利用串联质谱标签（tandem mass tags,TMT）定量蛋白质组学技术研究痹祺胶囊治疗类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）的作用机制。方法 建立II型胶原蛋白诱导的RA大鼠模型,并给予痹祺胶囊进行干预,取对照组（C）、模型组（M）、痹祺胶囊0.4 g/kg给药组（BQ）的左膝关节组织,采用TMT定量蛋白质组学技术分析鉴定各组大鼠膝关节组织中的蛋白,以表达差异倍数≥1.2或差异倍数≤0.83且P<0.05筛选M vs C、BQ vs M、BQ vs C差异表达蛋白,并分析经痹祺胶囊干预后有回调趋势的差异表达蛋白。最后通过GeneCards、OMIN数据库检索RA疾病靶点,与回调蛋白进行交集分析得到与RA疾病相关的回调蛋白,对其进行基因本体（gene ontology,GO）功能和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析,明晰痹祺胶囊对RA的作用机制。结果 经痹祺胶囊干预后有121个差异蛋白具有回调趋势,其中38个与RA疾病相关,如β2整合素（integr...     

帕夫林胶囊联合甲氨蝶呤对类风湿性关节炎患者的临床疗效

目的研究帕夫林胶囊联合甲氨蝶呤对类风湿性关节炎患者的临床疗效。方法 96例患者随机分为对照组和观察组,每组48例,对照组给予甲氨蝶呤,观察组在对照组基础上加用帕夫林胶囊,疗程3个月。检测临床疗效、DAS28评分、VAS评分、关节疼痛个数及指数、关节肿胀个数及指数、生化指标(CCP、RF、ESR、CRP)、左/右手腕关节滑膜厚度、腕/手关节滑膜内血流信号、炎症因子(IL-17、IL-23、IL-10、TNF-α)、JAK/STAT信号通路相关蛋白(JAK、p-JAK、STAT3、p-STAT3)变化。结果观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组DAS28评分、VAS评分、关节疼痛个数及指数、关节肿胀个数及指数、生化指标、左/右手腕关节滑膜厚度、炎症因子低于对照组(P<0.05),腕/手关节滑膜内血流信号、JAK/STAT信号通路相关蛋白更高(P<0.05)。结论帕夫林胶囊联合甲氨蝶呤可通过激活JAK/STAT信号通路来有效降低类风湿性关节炎患者炎症因子水平,改善滑膜厚度。     

痹祺胶囊治疗胶原诱导型关节炎大鼠的作用机制研究

目的 探究痹祺胶囊对胶原诱导型关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠中软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)表达的影响.方法 随机选取10只SD大鼠作为对照组,其余大鼠建立CIA模型,CIA大鼠随机分为模型组,痹祺胶囊中、...     

基于代谢组学的速效救心丸抗心肌缺血作用机制研究

目的 研究速效救心丸对心肌缺血大鼠的保护作用及对血浆代谢物的影响,初步探讨其干预心肌缺血的代谢途径和可能机制。方法 采用垂体后叶素建立大鼠心肌缺血模型,通过病理组织切片和肌酸激酶（creatine kinase,CK）、丙氨酸转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）、羟丁酸脱氢酶（hydroxybutyrate dehydrogenase,HBDH）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）生化指标评估速效救心丸对心肌缺血大鼠的保护作用;采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用（UHPLC-QTOF/MS）技术对血浆进行代谢组学研究,筛选潜在生物标志物并富集代谢通路。结果 速效救心丸可明显改善心肌缺血大鼠心脏组织病理变化;显著降低血浆CK、AST、HBDH、LDH活性（P<0.05、0.01）,升高SOD活性（P<0.05、0.01）。代谢组学分析共筛选到39个潜在生物标志物,...     

基于体外细胞模型的痹祺胶囊药效物质基础研究

目的 探究痹祺胶囊祛风除湿、活血止痛功能的药效物质基础。方法 通过建立脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7体外炎症模型、细胞核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factorκB ligand,RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(macrophage-stimulating factor,M-CSF)与RAW264.7细胞共培养建立破骨细胞分化模型、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞RA-HFLS增殖模型,分别探讨痹祺胶囊发挥抗炎活性、抑制破骨细胞形成、抑制RA-HFLS细胞增殖的作用机制及药效物质基础。MTS法检测细胞增殖活性,ELISA法检测细胞上清中一氧化氮(nitric oxide,NO)、TNF-α和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量,TRAP染色法检测破骨细胞分化数量,流式细胞术检测细胞凋亡情况,RT-qPCR法检测细胞中组织蛋白酶K(cathepsin K...     

基于~1H-NMR代谢组学的还贝止咳方对咳嗽变异性哮喘豚鼠的干预作用

目的采用~1H-NMR代谢组学方法,探讨还贝止咳方对鸡清白蛋白(OVA)致豚鼠咳嗽变异性哮喘(CVA)模型的作用机制。方法采用ip 4%OVA和ip 2%Al(OH)3制备豚鼠CVA模型,观察还贝止咳方(5、10、20 g/kg)对CVA豚鼠辣椒素引咳后的影响。给药结束后,取豚鼠右侧中叶肺组织进行~1H-NMR检测,采用多元统计分析方法探讨该方对CVA的干预作用。结果还贝止咳方能显著提高CVA豚鼠的咳嗽潜伏期,降低其咳嗽次数(P0.01),并能明显减少肺灌洗液中的炎症因子(P0.05)。与对照组相比,模型组豚鼠肺组织的亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、α-葡萄糖、乙酸、谷氨酸、甲硫氨酸、丙酮酸、琥珀酸、3-羟基丁酸酯、氧化谷胱甘肽、肌酸、乙醇胺、胆酸、甘氨酸、甘油磷酰胆碱、谷氨酰胺、甜菜碱、磷酸乙醇胺、β-葡萄糖、精氨酸水平升高,而乳酸、磷酸甲基酯的水平降低,给予还贝止咳方后能不同程度回调这24个潜在的差异代谢物。结论还贝止咳方可能通过调控能量代谢、氨基酸代谢等途径来治疗CVA。     

HPLC-UV-MS法同时测定痹祺胶囊中7个有效成分

目的 建立高效液相色谱:紫外-串联质谱法同时测定痹祺胶囊(马钱子、川芎、片草、丹参、白术、三七、党参等)中7个有效成分的方法.方法 采用HPLC法,Zorbax-C18色谱柱(4.6 mm× 100 mm,1.8 μm);流动相乙腈-0.1％甲酸水溶液梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;进样5μL; DAD波长切换模式;柱温40℃.Finnigan电喷雾离子阱多级质谱仪,正/负离子检测模式;ESI喷雾电压±4.5 kV;鞘气(N2)压力为276 kPa;辅助气(N2)体积流量为3.3 L/min;毛细管温度350℃;毛细管电压±19 v;扫描范围m/z100 ～ 850 amu.结果 士的宁、马钱子碱、甘草苷、丹酚酸B、甘草酸、隐丹参酮和丹参酮ⅡA在相应的质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数均大于0.9996;平均加样回收率(n=6)在90.25％～99.11％之间,RSD均小于2.91％.结论 本方法简便快捷、精密度高、重复性好,适用于痹祺胶囊的质量控制.