苦豆子总黄酮对乙肝病毒复制的影响

目的:观察苦豆子总黄酮提取物(KDH)在体内、外对乙肝病毒复制的影响。方法:采用乙型肝炎病毒HBV转染人肝癌细胞Hep G2的2.2.15细胞系,检测KDH对乙肝病毒DNA(HBV-DNA)复制及表面抗原(HBs Ag)、e抗原(HBe Ag)分泌的影响;采用鸭乙肝病毒DHBV感染的雏鸭模型观察KDH对鸭乙型肝炎的治疗作用。结果:KDH(125-500)μg/m L浓度在2.2.15细胞培养中对HBV-DNA的复制有明显的抑制作用,其500μg/m L浓度对HBs Ag、HBe Ag的分泌有一定的抑制作用;其25mg/kg剂量口服可持续降低鸭乙肝模型血清中DHBV-DNA水平。结论:KDH可有效干预乙肝病毒的复制。     

复方贯叶金丝桃颗粒药效学研究

目的探讨复方贯叶金丝桃颗粒的药理作用.方法采用体外培养2.2.15细胞系感染乙肝病毒模型,鸭感染乙肝动物模型,用CCl4、D-氨基半乳糖胺(D-GL)、BCG LPS 3种肝损伤小鼠模型,用固相放射免疫测定、斑点杂交放射自显影检测、MTT等测定法,观察其对乙肝病毒复制、对动物模型肝脏保护作用及对免疫功能的影响.结果在2.2.15细胞培养中,125 μg/mL对HBsAg、HBeAg和HBV-DNA的平均抑制率分别为(29.8±2.3)%,(36.5±4.7)%和(30.3±8.8)%;在雏鸭乙肝模型中,4.0、6.0、8.0 g/kg,均可抑制血清DHBV-DNA复制,尤以8.0 g/kg作用更显著,作用较拉米夫定弱,但持效时间比其长.在CCl4、D-GL,BCG LPS三种肝损伤模型中,1.25,2.50,5.00g/kg,有降低AST、ALT和保护肝细胞的作用,体内可提高小鼠HC50量,体外在0.01～10mg/L范围内可提高T淋巴细胞增殖率.结论复方贯叶金丝桃颗粒有减少HBsAg、HBsAg分泌,抑制DHBV-DNA复制,保肝降酶和免疫调节作用.     

原卟啉钠体内外抗乙肝病毒作用研究

目的观察原卟啉钠体内外抗乙肝病毒作用。方法体内实验采用先天感染鸭乙肝模型，检测给药前、给药后5d、10天及停药后3d鸭血清DHBV-DNA的动态变化；体外实验采用2．2．15细胞为模型，检测用药后对细胞培养上清液中HBsAg和HBeAg的抑制作用。结果体内实验显示，给药第5，10d时鸭血清DHBV-DNA其OD值均明显低于给药前，差异有显著性意义（P〈0．05）；体外实验显示，原卟啉钠在所稀释的各浓度下，对细胞分泌HBsAg，HBeAg均有一定的抑制作用，对HBsAg，HBeAg的治疗指数分别大于188．7和64．5。结论原卟啉钠体内外均具有明显的抗乙肝病毒作用。     

肝必康胶囊体外抗乙肝病毒的实验研究

目的:观察肝必康胶囊对乙肝病毒的抑制作用.方法:采用HepG 2.2.15细胞的培养,MTT比色法检测药物对细胞的毒性,定量PCR检测HBV-DNA,ELISA法检测HBsAg、HBeAg的含量,研究肝必康胶囊对HepG 2.2.15细胞的毒性,HBsAg与HBeAg表达及HBV-DNA含量的影响.结果:肝必康半数细胞毒浓度(TC50)为4.677 mg/mL,最大无毒浓度(TC0)为0.118 mg/mL.各组在用药后72、144 h细胞上清中HBV DNA拷贝数降低,肝必康在0.1 mg/mL时抑制率最高.各组用药后细胞培养上清液中的HBsAg和HBeAg浓度显著降低.肝必康在0.1 mg/mL时抑制率最高.肝必康各组含药血清在用药后72、144 h细胞上清中HBsAg和HBeAg浓度显著降低,高剂量组抑制率最高.显示明显抗HBV的作用,TI均大于2.结论:肝必康胶囊体外培养细胞实验证实其有较强的抗乙肝病毒作用,且毒性较低.     

槐果碱体外对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg HBeAg的影响

目的:探讨槐果碱的体外抗乙型肝炎病毒作用。方法:采用HepG2.2.15细胞模型进行体外培养,给予不同浓度槐果碱,以拉米夫定作阳性对照,作用9天后检测上清液中HBsAg、HBeAg的分泌,观察药物对HepG2.2.15细胞分泌HBV病毒抗原的影响,同时以MTT法检测药物在体外对HepG2.2.15细胞的生长抑制作用,从而评价药物的抗HBV作用。结果:药物作用9天后,槐果碱对HepG2.2.15细胞的50%生长抑制率(TC50)为0.002M,对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg的50%抑制率(IC50)为4.9uM,其治疗指数(TI=TC50/IC50)为408.16;而拉米夫定对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg的抑制率在所选浓度范围内均低于50%。槐果碱对HepG2.2.15细胞分泌HBeAg的抑制率在所选浓度范围内均低于50%,但明显优于拉米夫定对HepG2.2.15细胞分泌HBeAg的抑制率。结论:槐果碱在体外具有显著的抑制HepG2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的作用,是一个高效低毒的抗乙肝病毒的有效药物。     

波棱素脂质体对乙肝病毒复制和抗原表达的影响

目的:以Hep G2.2.15细胞系为体外实验模型,研究波棱素脂质体体外抑制乙肝病毒的生物学活性。方法:MTT法检测药物对细胞的毒性,将不同安全浓度的波棱素脂质体及阳性对照药物拉米夫定(3TC)作用于此细胞系,同时实验设不加药物的细胞对照,给药3,6d后收集细胞培养上清液。采用ELISA法测定各组细胞培养上清液中HBs Ag,HBsAg水平,实时定量PCR检测HBV-DNA的含量。结果:波棱素脂质体对HepG2.2.15细胞的TC50为1443.68μg/ml。波棱素脂质体对HepG2.2.15分泌的HBs Ag和HBeAg的IC50分别为131.08μg/ml,109.50μg/ml,治疗指数为11.01和13.18。同时,浓度范围在25~200μg/ml时明显抑制HBV-DNA表达,最高抑制率达到55.04%。结论:波棱素脂质体具有一定的体外抑制乙肝病毒复制及抗原表达的作用。     

壮药三叶香茶菜抗乙型肝炎病毒作用有效部位的筛选研究

目的:对三叶香茶菜的抗乙肝病毒作用进行有效部位的筛选。方法:通过测定三叶香茶菜4种不同溶媒提取物的体外对Hep G2.2.15细胞的增殖抑制作用实验,确定其有效部位。结果:石油醚提取部位和乙酸乙酯提取部位对Hep G2.2.15细胞有明显的抑制作用。结论:石油醚提取部位和乙酸乙酯提取部位具有良好的体外抗乙肝病毒活性,是三叶香茶菜抗乙肝病毒作用的有效部位。     

新疆维药芹菜根提取物的不同部位对HepG2.2.15细胞DNA抑制作用的实验研究

目的:通过体外实验观察芹菜根不同部位的HepG2.2.15细胞DNA的抑制作用。方法:采用FQ-PCR法检测受不同部位萃取物处理后细胞内HBV-DNA的扩增曲线,对其提取物的不同部位体外抗HBV的作用进行研究。结果:加入正丁醇、乙酸乙酯部位高浓度的细胞与HepG2.2.15正常细胞相比,HBV-DNA的拷贝数降低,CT值明显升高。说明正丁醇、乙酸乙酯部位对HePG2.2.15细胞内HBV-DNA复制有抑制作用。结论:正丁醇、乙酸乙酯部位是芹菜根,是抑制HBV-DNA复制的有效部位。     

紫花地丁抗乙型肝炎病毒的实验研究

目的:观察紫花地丁水浸出物抗乙型肝炎病毒的作用。方法:以HepG2.2.15细胞作为体外实验模型,50μg/ml拉米夫定(3TC)和不加药培养液作为阳性、阴性对照,给予含有0.12、0.6、3mg/ml紫花地丁浓度的培养液处理3、6、9天后,通过MTT法观察药物对细胞生长的影响;采用Real-time PCR法和ELISA法检测细胞上清液中HBV DNA和HBsAg、HBeAg的含量。体内试验选1日龄麻鸭,人工感染DHBV后随机分为7组:紫花地丁水浸出物1.2、6、30mg/kg.d,3TC 1mg/kg.d和紫花地丁水浸出物1.2mg/kg.d联合用药,对照组采用生理盐水和2mg/kg.d 3TC。每组5只,每天灌胃给药1次,连续10天,观察药物对DHBV的作用。结果:紫花地丁所有实验浓度对HepG2.2.15细胞均无毒性,且对HBsAg、HBeAg都有一定的抑制作用。其中0.6mg/ml组对HBsAg的抑制作用随着培养时间延长逐渐增强,第9天达到35.4%。3mg/ml组对HBeAg的抑制率在第6天最高,达到38.6%。紫花地丁水浸出物能有效地抑制HBV DNA复制,最高抑制率达到86.1%;3mg/ml组在第9天抑制率仍有42.3%,明显高于3TC(24.2%)。在体内试验中发现6mg/kg.d紫花地丁水浸出物具有抑制DHBV复制作用。结论:紫花地丁在体内、外试验中均有抗HBV活性作用。     

鸡矢藤挥发油体外抗乙型肝炎病毒作用研究

目的 对鸡矢藤挥发油抗HBV作用进行体外抗病毒实验研究.方法 采用水蒸气蒸馏法提取鸡矢藤挥发油,以HepG 2.2.15细胞为实验对象,检测鸡矢藤挥发油对HepG 2.2.15肝癌细胞株的细胞毒性.并在最大无毒浓度下观察鸡矢藤挥发油对HepG 2.2.15细胞表达HBsAg,HBeAg的影响.结果 鸡矢藤挥发油在31～2 000 mg/L的浓度范围内,对HepG 2.2.15细胞有明显抑制作用,TC50为1 550 mg/L, TC0为500 mg/L.在最大无毒浓度下,鸡矢藤挥发油对HBsAg最大抑制率为72.49%,治疗指数为6.74,对HBeAg最大抑制率为23.64%.结论 鸡矢藤挥发油对HepG2.2.15细胞HBsAg,HBeAg分泌有较好抑制作用.     

加味四逆散体外抗乙型肝炎病毒的实验研究

目的:研究加味四逆散体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。方法:通过加味四逆散作用于体外培养的2.2.15细胞株,观察其对细胞的毒性和对HBsAg和HBeAg分泌的抑制效果,以评价其抗HBV作用。结果:加味四逆散对2.2.15细胞的半数毒性浓度(TC50)为>200mg/mL;对2.2.15细胞分泌的HBsAg,HBeAg的半数抑制浓度(IC50)分别为<3.12mg/mL和43.68mg/mL;治疗指数(TI)分别为>64.12和>4.58。结论:加味四逆散在体外细胞培养中对HBsAg和HBeAg均有较强的抑制作用。     

广西藤茶提取物TTF抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的观察从广西藤茶中提取出的一有效部位TTF抗鸭乙型肝炎病毒的作用。方法选1日龄北京雏鸭,人工感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV)动物模型,应用斑点杂交法观察TTF对鸭血清鸭乙型肝炎病毒DNA(DHBV-DNA)的影响。结果DHBV感染鸭在感染后第7天口服TTF药物治疗,75~150mg/kg组2次/d,10d对鸭血清DHBV-DNA水平有一定的抑制效果;300mg/kg组,对感染鸭血清DHBV-DNA水平的抑制作用显著,停药3d未见明显的反跳现象。结论TTF可明显抑制DHBV-DNA复制,提示TTF有抗HBV的作用。     

槐定碱体外抗乙肝病毒的实验研究

目的 观察槐定碱对HepG 2.2.15细胞分泌HbsAg、HBeAg和Pre-S1的影响,探讨槐定碱的体外抗乙型肝炎病毒作用.方法 采用HepG 2.2.15细胞模型进行体外培养,给予不同浓度槐定碱,作用9天后收集上清液,用MTT法观察槐定碱对HepG 2.2.15细胞的抑制作用,用ELISA法检测上清液中HBsAg、HBeAg和Pre-S1的分泌,观察药物对HepG 2.2.15细胞分泌HBV病毒抗原的影响,从而评价药物的抗HBV作用.结果 槐定碱对HepG 2.2.15细胞的半数毒性浓度(TC50)为6.86E-3M.在该浓度下对HBsAg和HBeAg的50%抑制浓度(IC50)分别为0.339 mmol和0.356 mmol,治疗指数分别为20.21和19.26;浓度为0.001 mmol时对Pre-S1的抑制率为62.20%.结论 :槐定碱具有一定的抗HBV作用,属低毒有效药物.     

单味中草药体内外抗乙肝病毒疗效的系统评价

目的系统评价单味中草药抗乙肝病毒(HBV)体内外实验的疗效。方法电子检索Pub Med、中文期刊全文数据库(CNKI)截至2014年10月发表的中英文文献,制定纳入排除标准并利用Excel表提取数据。体外实验提取单味中药提取物对HBV宿主细胞半数细胞毒性浓度(CC50)和抑制HBV DNA、HBV e抗原(HBe Ag)和表面抗原(HBs Ag)的半数有效浓度(IC50)及治疗指数(TI);体内实验提取药物对感染鸭模型血浆中的鸭乙肝病毒DNA抑制率。结果纳入的122篇文献中报道了从82种中草药中提取出的176种提取物或化合物有抗HBV效应,而其中24种草药中提取的13种物质和11种提取物的混合物对Hep G2.2.15细胞具有较低细胞毒性,同时可对细胞培养上清中HBV DNA、HBe Ag和HBs Ag的释放产生强大的抑制效应。7种中草药提取物中的4种对感染鸭血浆中的鸭乙肝DNA水平抑制率超过50%。此外,大黄与黄芩中提取出来的8-O-β-D-葡萄糖大黄素和汉黄芩素这两种化合物有较强的抗HBV能力。结论通过总结和分析细胞和动物模型中单味中草药抗HBV的研究,为探究传统中草药治疗乙肝的研究和中草药抗HBV新药的开发提供新的方向。     

槐定碱体外抗乙肝病毒的实验研究

目的观察槐定碱对HepG2.2.15细胞分泌HbsAg、HBeAg和Pre-S1的影响,探讨槐定碱的体外抗乙型肝炎病毒作用。方法采用HepG2.2.15细胞模型进行体外培养,给予不同浓度槐定碱,作用9天后收集上清液,用MTT法观察槐定碱对HepG2.2.15细胞的抑制作用,用ELISA法检测上清液中HBsAg、HBeAg和Pre-S1的分泌,观察药物对HepG2.2.15细胞分泌HBV病毒抗原的影响,从而评价药物的抗HBV作用。结果槐定碱对HepG2.2.15细胞的半数毒性浓度(TC50)为6.86E-3M。在该浓度下对HBsAg和HBeAg的50%抑制浓度(IC50)分别为0.339mmol和0.356mmol,治疗指数分别为20.21和19.26;浓度为0.001mmol时对Pre-S1的抑制率为62.20%。结论:槐定碱具有一定的抗HBV作用,属低毒有效药物。     

苷泰胶囊抗乙肝病毒的实验研究

目的观察苷泰胶囊对乙肝病毒复制的抑制作用。方法使用鸭乙肝炎病毒使1日龄的北京鸭感染,造模7 d后给药(ig),使用斑点杂交法检验用药后(5、10 d)及停药5 d后血清中的DHBV DNA含量;以转染的2.2.15细胞为模型,分别加入不同浓度的苷泰胶囊药液,分别以酶联免疫法及斑点杂交法检测培养上清液中的HbsAg,HbeAg及HBV DNA的水平。结果 (1)用药后10 d和停药后3 d鸭血清中的DHBV DNA水平显著低于给药前(P<0.01,P<0.05);(2)苷泰胶囊可以明显地抑制2.2.15细胞HbsAg、HbeAg的分泌(P<0.01,P<0.05),其半数抑制浓度分别为1 158.92μg/mL和1 794.14μg/mL;(3)苷泰胶囊明显地抑制2.2.15细胞HBV-DNA的复制,其半数抑制浓度为701.27μg/mL。结论实验结果表面苷泰胶囊对2.2.15细胞及鸭乙肝病毒感染的模型均具有一定抑制作用并呈剂量依赖性。     

诃子醇提物抗HBV的体外实施研究

目的:体外观察诃子抗HBV的作用。方法:以2.2.15细胞为靶细胞,实验共进行11天。采用酶联免疫吸附试验测定诃子对培养上清液HBsAg、HBeAg的抑制作用。结果:诃子醇提物浓度为6.25mg/ml地,对HBsAg、HBeAg抑制率分别为99.67％、71.40％。同一浓度下诃子对细胞的破坏率为30.65％。以HBsAg、HBeAg为指标,治疗指数分别为208.33、3.42。结论:在无毒浓度下,诃子醇提物在2.2.15细胞上有显著的体外抗HBV作用。     

六月青含药血清对HepG2.2.15细胞系HBsAg与HBeAg表达的影响

目的 观察六月青(Liuyueqing,LYQ)含药血清的体外抗乙型肝炎病毒的作用.方法 以MTT法检测药物在体外对HepG2.2.15细胞的生长抑制作用,采用酶联免疫法(ELISA法)检测HepG2.2.15细胞上清液中HBsAg、HBeAg的滴度.结果 LYQ含药血清对HepG2.2.15细胞50%生长抑制率的给药剂量为11.56 g·(kg·d)-1;而对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg 50%生长抑制率的给药剂量为0.178 g·(kg·d)-1,其治疗指数(TI)为64.94;另外,LYQ含药血清对HBeAg抑制作用不明显.结论 LYQ含药血清在体外有显著的抗HBV的作用,且毒性较低.     

柴莪退热栓抗病毒实验研究

目的:用现代实验学方法对柴莪退热栓体内外抗流感病毒的实验观察,探讨柴莪退热栓抗流感病毒作用的机理,为临床治疗病毒性上呼吸道感染提供实验依据.方法:接种流感病毒FM1株于MDCK(狗肾细胞),观察柴莪退热栓体外抗流感病毒作用;体内抗病毒实验以病毒滴鼻感染小鼠,观察柴莪退热栓对肺指数、血凝滴度的影响.结果:体外实验通过毒性实验观察到药物煎剂在MDCK上的半数毒性浓度为12.5mg/mL,在该浓度下,药物对甲型流感病毒无抑制作用.体内实验研究表明柴莪退热栓的肺指数抑制率为20%,提示本药在体内有明显的抗病毒作用.结论:柴莪退热栓的抗病毒作用可能需要体内免疫机制的参与.     

中国圆田螺多糖体外抗乙肝病毒的实验研究

目的:探讨中国圆田螺多糖(PCC)体外抗乙肝病毒的生物学活性.方法:以HepG2 2.2.15细胞系为体外实验模型.MTT法检测细胞毒性,将不同安全浓度的PCC及阳性对照药物3TC作用于此细胞系,实验同时设不加药物的细胞对照,第9天收集细胞培养上清液.采用ELISA法测定各组细胞培养上清液中HBsAg,HBeAg水平,荧光探针定量PCR检测HBV-DNA含量.结果:PCC在HepG2 2.2.15细胞培养中的TCo为1g·L-1,TC50 ＞10 g·L-1,对细胞毒性较小.PCC对HepG2 2.2.15细胞HBsAg,HBeAg分泌的IC50分别为0.501,0.401 g·L-1,SI分别为＞19.96和＞24.94.PCC可以有效抑制HBsAg,HBeAg的分泌,且PCC对HBeAg的抑制效果优于HBsAg.PCC在0.1,1g·L-1(P＜0.05)对HepG2 2.2.15细胞中的HBV-DNA有明显的抑制作用.结论:中国圆田螺多糖具有一定的体外抗HBV活性,且毒性较小,具有良好的应用前景.