验方祛斑汤对A375人黑素瘤细胞黑素合成的影响

目的 研究验方祛斑汤对A375人黑素瘤细胞株细胞增殖、酪氨酸酶活性和黑素合成的影响,探讨验方治疗黄褐斑的作用机制.方法四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定验方对细胞增殖的影响,用酶学方法测定对酪氨酸酶活性的影响,475nm比色法测定验方对黑素含量的影响.结果验方祛斑汤对体外培养的A375人黑素瘤细胞具有抑制细胞增殖,降低酪氨酸酶活性和黑素含量作用.结论该方能抑制黑素细胞黑素合成,这可能是其治疗黄褐斑的作用机制之一.     

消白合剂对人A375黑素瘤细胞株黑素合成的影响

目的观察消白合剂对人A375黑素瘤细胞生长、酪氨酸酶活性及黑素含量的影响。方法设消白合剂水提液体0．01、0．1、1、10g／L浓度实验组和空白对照组,体外观察对人A375黑素瘤细胞的增殖、酪氨酸酶的活性以及黑素含量的调节作用。四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定消白合剂对细胞增殖的影响,酶学方法测定对酪氨酸酶活性的影响,比色法（490nm）测定对黑素含量的影响。结果消白合剂在0．01～0．1g／L浓度范围内对细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素的合成有促进作用,而随着浓度的继续增高反而起抑制作用。结论消白合剂对人A375黑素瘤细胞株黑素的合成具有双向调节作用,临床运用时应该考虑到药物的量的优化。     

复方卡力孜然酊治疗小儿白斑及白癜风的疗效观察

白癜风是由皮肤及毛囊的黑素细胞内酪氨酸酶活性减退或消失，导致黑素粒(即黑色体)生成进行性减少或消失而引起的一种后天性原发性皮肤色素脱失症。维吾尔医称“白热斯”，在治疗白癜风方面维吾尔医积累了丰富的经验。     

277复方卡力孜然酊治疗小儿白斑及白癜风的疗效观察

白癜风是由皮肤及毛囊的黑素细胞内酪氨酸酶活性减退或消失,导致黑素粒(即黑色体)生成进行性减少或消失而引起的一种后天性原发性皮肤色素脱失症.维吾尔医称"白热斯",在治疗白癜风方面维吾尔医积累了丰富的经验.     

驱虫斑鸠菊对人黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及其基因表达水平的调节作用研究

目的:探讨驱虫斑鸠菊对人 A375黑素瘤细胞株分泌酪氨酸酶活性、黑素合成以及细胞内酪氨酸酶基因表达水平的影响。方法:采用酶学方法研究驱虫斑鸠菊对酪氨酸酶活性的影响;采用475 nm 比色法测定黑素含量;采用 TRIzol 试剂盒提取总 RNA,再用半定量逆转录聚合酶链反应扩增 cDNA,检测酪氨酸酶基因表达水平。结果:驱虫斑鸠菊可以增强 A375人黑素瘤细胞酪氨酸酶活性和黑色素合成能力,还可增强酪氨酸酶基因表达。结论:驱虫斑鸠菊可能从基因水平增强酪氨酸酶活性,促进黑素合成。     

加味七白膏对黑素瘤细胞酪氨酸酶活性、黑素合成影响的实验研究

目的 研究加味七白膏的美白作用机理及对酪氨酸酶活性、黑素合成的影响.方法 体外培养黑素瘤细胞,采用酶学方法测定酪氨酸酶活性,490nm比色法测定黑素含量.结果 中药水煎液对黑素瘤细胞酪氨酸酶活性、黑素合成均呈剂量依赖性抑制作用,各浓度组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05,或P<0.01).结论 加味七白膏美白作用机理之一可能为通过抑制酪氨酸酶活性达到减少黑素合成的目的 而起到美白作用.     

095 维药驱虫斑鸠菊治疗白癜风的研究与应用

白癜风是由于皮肤和毛囊内的黑素细胞内酪氨酸酶活性减低或消失,导致黑素颗粒(即黑素体)生成的进行性减少或消失而引起的局限性或泛发性脱色素性病变,是一种后天的原发性皮肤色素脱失症,而非继发于其他皮肤病之后遗留的脱色素性病变。维吾尔医称为“白热斯”、“阿克拜来斯”,     

养颜青娥丸对小鼠B-16黑素瘤细胞株黑素合成和酪氨酸酶的影响

 目的：研究养颜青娥丸对小鼠B-16黑素瘤细胞株细胞增殖、黑素合成的影响及对细胞内酪氨酸酶的影响。 方法：四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定养颜青娥丸对细胞增殖的影响；酶学方法研究养颜青娥丸对酪氨酸酶活性的作用；470 nm比色法测定合成黑素含量A值。结果：研究发现养颜青娥丸对黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性有抑制作用，对合成黑素含量有降低作用；组方单味药中杜仲、沙苑子、制首乌对黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性有抑制作用，对合成黑素含量有降低作用；补骨脂、核桃肉对黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性有促进作用，对合成黑素含量有增加作用。结论：养颜青娥丸对黄褐斑可能有一定的治疗作用，但治疗机制不能单纯用生化学、酶学改变来解释。     

补骨脂对A375人黑素瘤细胞增殖及黑素合成的影响

目的探讨含补骨脂大鼠血清对A375细胞增殖及合成黑素功能的影响。方法体外培养A375人黑素瘤细胞,于对数生长期添加不同浓度含补骨脂大鼠血清,分别采用MTT法和NaOH法检测细胞增殖及合成黑素的情况。结果补骨脂高、中、低剂量含药血清组较空白血清组有明显促增殖作用,在20%的添加浓度时,高、中、低3个剂量含药血清组随着剂量的增加,黑素含量也明显升高(P0.01)。结论补骨脂含药血清有促进A375黑素瘤细胞增殖作用,并使A375人黑素瘤细胞合成黑素增加。     

山茱萸水提取物对黑素瘤细胞与角质形成细胞共培养模型黑素合成的影响

目的:考察山茱萸水提取物对体外构建的人黑素瘤细胞(A375)与角质形成细胞(Hacat)单层混合共培养模型黑素合成的影响。方法:将山茱萸水提取物制备成含生药0.75～12 g.L-15个质量浓度,细胞给药,通过MTT法、NaOH裂解法、多巴氧化法分别测定给药前后A375细胞与Hacat细胞共培养模型的细胞活力、黑素含量和酪氨酸酶活性。结果:与空白对照组相比,6,3,1.5,0.75 g.L-1山茱萸水提取物对共培养体系的细胞增殖率影响不大,对共培养体系黑素生成均有显著差异(P<0.01),对共培养体系酪氨酸酶活性有差异(P<0.05或P<0.01);与阳性对照药物熊果苷相比,6,3 g.L-1山茱萸水提取物对共培养体系黑素生成有显著差异(P<0.01),作用强于熊果苷,1.5,0.75 g.L-1山茱萸水提取物对共培养体系黑素生成无差异;与阳性对照药物熊果苷相比,6,3,1.5,0.75 g.L-1山茱萸水提取物对共培养体系酪氨酸酶活性无差异。结论:山茱萸水提取物能够通过抑制酪氨酸酶活性来抑制A375细胞和Hacat细胞共培养体系的黑素合成,为临床使用山茱萸治疗黄褐斑提供了实验依据。     

白热斯油处方搽剂及其组分对人G-361细胞活力与产生黑色素能力的影响

探讨维吾尔医白热斯油处方搽剂及其单味药、即:补骨脂、白花丹、黄芥子、黑种草子和駆虫斑鳩菊生药材水提物等通过对G-361细胞存活率、增殖以及黑色素产生的影响。对维医白癜风专用12种处方水提物进行酪氨酸酶激活实验、根据激活率(OD值)进行排序并定位。用MTT法检测不同浓度白热斯油处方搽剂及其组分药材水提物、对G-361细胞72 h细胞存活率、增值以及黑色素产生进行观测。经检测、对维吾尔医12种治疗白癜风专用药材水提物酪氨酸酶激活率超出200%的有4个专用处方、白热斯油为第3位,高于其它9种处方(P<0.001)。各药材及各浓度72 h培养细胞存活率与对照组之间相比无显著性差异(P>0.05)。72 h培养细胞增殖和黑素产生能力与对照组相比有显著性差异、分别为P<0.05和P<0.01、而且最佳浓度集中在125μg/m L和62.5μg/m L、其中后者较为稳定。白热斯油处方及其组分药材水提物在适宜浓度,对72 h培养G-361细胞有增殖作用、使黑色素含量增加、且细胞存活率正常、未发现明显的细胞毒性作用。     

小柴胡汤对黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及黑素合成的影响

目的 观察小柴胡汤在黑素瘤细胞及黑素瘤细胞与HaCaT细胞共培养体系中对黑素瘤细胞增殖、酪氨酸酶活性、黑素合成过程的作用.方法 培养黑素瘤细胞及黑素瘤细胞与HaCaT细胞共培养体系,以熊果苷为对照组,利用MTT法、多巴氧化法、NaOH法测定细胞活力,酪氨酸酶活性及黑素的含量.结果 小柴胡汤40 ug/ml以上的小柴胡汤水煎液可明显抑制黑素瘤细胞和共培养细胞活力(P＜0.01);小柴胡汤水煎液对黑素瘤细胞及共培养细胞中酪氨酸酶活性、黑素合成均呈剂量依赖性抑制作用,各浓度药品组与对照组比较均有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01);小柴胡汤对于黑素瘤细胞中酪氨酸酶活性、黑素生成的抑制作用与其对于共培养细胞中黑素生成及酪氨酸酶活性的抑制作用无差别(P＞0.05),其功效优于阳性对照熊果苷组.结论 小柴胡汤在黑素瘤细胞及黑素瘤细胞与HaCaT细胞共培养体系中对黑素瘤细胞增殖、酪氨酸酶活性、黑素合成有较强的抑制作用.     

酪醇和胡椒碱对小鼠B16黑素瘤细胞黑素合成及c-KIT、TRP-2蛋白表达的促进作用

目的:研究酪醇和胡椒碱对小鼠B16黑素瘤细胞干细胞因子受体(c-KIT)、酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)蛋白表达的影响,探讨其影响B16黑素瘤细胞生物学活性的分子机制.方法:采用MTT法测定细胞增殖,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,氢氧化钠裂解法测定黑素含量,免疫组化法检测c-KIT和TRP-2蛋白的表达.结果:浓度为25μg/ml的酪醇作用后,B16黑素瘤细胞酪氨酸酶活性、黑素合成能力均增强(P<0.05),c-KIT和TRP-2蛋白表达量分别比空白对照组增加9.50%(P<0.05)和9.16%(P<0.01);浓度为12.5μg/ml的胡椒碱对B16黑素瘤细胞增殖(P<0.05)、酪氨酸酶活性(P<0.01)、黑素合成(P<0.05)均有促进作用,c-KIT和TRP-2蛋白表达量分别比空白对照组增加8.81%和10.58%(P<0.05).结论:酪醇和胡椒碱均能促进小鼠B16黑素瘤细胞的黑素合成,胡椒碱具有促进细胞增殖作用,其部分机制可能是通过上调酪氨酸酶活性和c-KIT、TRP-2蛋白表达而发挥作用.     

当归提取物对黑素瘤细胞与角质形成细胞共培养模型黑素合成的影响

目的:考察当归水提取物对体外构建的人黑素瘤细胞( A375)与角质形成细胞(HaCaT)共培养模型黑素合成的影响.方法:分别培养A375细胞与HaCaT细胞,A375细胞与HaCaT细胞以1∶2的比例接种于培养板后加入MEM培养基培养24 h.用MEM将当归提取物制备成0.1 ～2g·L-15个质量浓度,细胞给药作用48 h,采用MTT法、NaOH裂解法、多巴氧化法分别测定给各组A375细胞与HaCaT细胞共培养模型的细胞活力、黑素含量和酪氨酸酶活性.结果:与阴性对照组相比,2,1,0.5 g·L-1当归提取物对共培养细胞的增殖有显著促进作用(P＜0.01);2,1,0.5,0.25 g·L-1当归提取物对黑素合成有显著的抑制作用(P ＜0.05或P＜0.01),呈现浓度依赖性的抑制作用趋势;当归提取物各浓度组对酪氨酸酶活性均有显著抑制作用,2,1 g·L-1组的抑制作用弱于熊果苷组(P＜0.01),0.5,0.25,0.125 g·L-1组与熊果苷组作用相当.结论:当归水提取物能够通过抑制酪氨酸酶活性来抑制A375细胞和HaCaT细胞共培养体系的黑素合成,为临床使用当归治疗黄褐斑提供了实验依据.     

马钱苷对黑素瘤细胞与角质形成细胞共培养模型黑素合成的影响

目的：探讨马钱苷对黑素瘤细胞A375与角质形成细胞Hacat共培养模型黑素合成的影响。方法：将A375细胞和Hacat细胞构建共培养模型,以不同浓度马钱苷进行干预,通过MTY法、NaOH裂解法、多巴氧化法分别测定共培养模型的细胞增殖率、黑素含量和酪氨酸酶活性。结果：与阴性对照组相比,马钱苷10-mol／L、1016moL／L和10-7mol／L组对共培养细胞增殖率无显著性差异（P〉0．05）。马钱苷10-mol／L和10。mol／L组对共培养模型黑素合成及酪氨酸酶活性有极显著性差异（P〈0．01）。与阳性对照组相比,马钱苷10。moL／L组对共培养模型酪氨酸酶活性有极显著性差异（P〈0．01）,马钱苷10山mol／L和10。mol／L组对共培养模型黑素合成无显著差异（P〉0．05）。结论：马钱苷可能通过抑制酪氨酸酶活性减少共培养模型黑素合成。     

欧前胡素治疗黄褐斑作用机理研究

目的:研究欧前胡素对人黑素瘤细胞(A375细胞)合成黑素的影响,探讨白芷主要成分欧前胡素对黄褐斑治疗作用机理。方法:试验分为空白对照组、雌二醇阳性对照组和欧前胡素浓度为1、10、20、40、60、80μmol·L~(-1)给药组,用上述各组处理A375细胞,用MTT法、Na OH裂解法、多巴氧化法和RT-PCR法检测A375细胞活性、黑素含量、酪氨酸酶(TYR)活性、酪氨酸酶相关蛋白-1、2(TRP-1、TRP-2)、MAPK通路细胞外信号调节酶1、2(ERK1、ERK2)以及氨基末端激酶2(JNK2)的信使RNA表达。结果:阳性对照组对A375活性无影响(P0.05);欧前胡素浓度在40μmol·L~(-1)以上时,可导致A375细胞大量凋亡(P0.01);浓度在1~20μmol·L~(-1)时,对A375细胞黑素合成及TYR活性有明显抑制作用(P0.05或P0.01),浓度为20μmol·L~(-1)的欧前胡素对A375细胞TYR、TRP-1、TRP-2、ERK1、ERK2及JNK2的mRNA表达具有显著抑制作用(P0.05或P0.01)。结论:欧前胡素可通过抑制A375细胞中TYR活性或阻断黑素合成信号的传导,治疗或预防黄褐斑。     

维吾尔医新药白热斯Ⅱ号治疗122例白癜风临床观察

目的观察维吾尔医新药白热斯Ⅱ号对白癜风的治疗效果.方法对122例白癜风患者,随机分为两组,分别采用白热斯Ⅱ号(治疗组)和驱虫斑鸠菊丸(对照组)治疗白癜风疗效对比.结果白热斯Ⅱ号治疗白癜风有效率达90.7%,驱虫斑鸠菊丸有效率达76%.结论维吾尔医新药白热斯Ⅱ号治疗白癜风疗效满意,使用安全、简便,具有推广使用价值.     

染料木素对A375细胞黑素合成及相关细胞信号通路调控作用的初步探讨

目的:研究染料木素对A375细胞黑素合成的影响,并探讨MAPK信号通路与此作用的相关性。方法:以人黑素瘤细胞A375为研究对象,将不同浓度的染料木素作用于A375细胞48 h,另设空白组,采用MTT法检测细胞活性;Na OH裂解法检测黑素量;多巴氧化法检测酪氨酸酶(TYR)活性;RT-PCR法测定酪氨酸酶(TYR),酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1)和酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)以及MAPK信号通路关键胞外信号调节激酶1(ERK1),ERK2,c-Jun氨基末端激酶2(JNK2)mRNA的表达。结果:与空白组比较,染料木素在安全剂量(10-1,10-2,10-3μmol·L-1)下均可明显抑制A375细胞黑素合成及TYR活性(P0.01),1μmol·L-1染料木素明显下调A375细胞TYR,TRP-2,TRP-1(P0.05,P0.01)mRNA表达,以及ERK1,ERK2,JNK2(P0.05,P0.01)mRNA表达。结论:染料木素可通过抑制TYR活性和/或下调TYR,TRP-1及TRP-2 mRNA表达,抑制A375细胞的黑素合成,此作用与抑制ERK1,ERK2,JNK2的表达有关。     

复色2号方对鼠黑素瘤B16细胞酪氨酸酶的影响

目的:探讨复色2号方治疗白癜风的分子学作用机制。方法:采用MTT法测定复色2号方对B16细胞增值的影响,在酶标仪下测定并记录B16细胞增殖情况;采用酪氨酸酶多巴速率氧化法测定复色2号方对酪氨酸酶活性的影响;采用NaOH裂解法测定B16细胞黑素含量。结果:复色2号方药物浓度在1～1000g/L对黑素瘤B16细胞增殖无统计学意义(P0.05),但对酪氨酸酶活性和黑素合成有统计学意义(P0.05),呈浓度依赖性。结论:复色2号方对黑素瘤B16细胞增殖无影响,但对酪氨酸酶活性和黑素合成有较强的剂量相关性促进作用,可以达到治疗白癜风的目的。     

不同质量分数高良姜素对人黑色素瘤A375细胞黑素合成及相关基因表达的影响

目的研究不同质量分数高良姜素对人黑色素瘤A375细胞黑素合成及酪氨酸酶基因(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1)、酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)mRNA和蛋白表达的影响。方法采用MTT法测定细胞增殖,左旋多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,NaOH裂解法测定黑素合成,采用RT-PCR法、Western-blotting法检测A375细胞中TYR、TRP-1、TRP-2mRNA和蛋白表达。结果 90%高良姜素浓度为1.0～10.0μmol/L对A375细胞具有显著的促增殖作用(P<0.01),而在浓度为20.0μmol/L时,无促A375细胞增殖作用(P>0.05),浓度为0.5～20.0μmol/L均能促进酪氨酸酶活性的升高(P<0.05、0.01),浓度为1.0～20μmol/L具有显著促进黑素升高的作用(P<0.05、0.01),且随着浓度的增加呈增强趋势;99%高良姜素浓度在0.5～20.0μmol/L具有显著促进A375细胞增殖和酪氨酸酶活性升高作用(P<0.01),而对黑素合成无促进作用(P>0.05)。90%高良姜素对TYR、TRP-1 mRNA表达基本无影响,1.0μmol/L时上调TRP-2 mRNA表达(P<0.05);99%高良姜素能上调TYR、TRP-1及TRP-2 mRNA表达;二者均促进TYR蛋白表达,但对TRP-1及TRP-2蛋白表达基本无影响。结论 99%高良姜素能够促进A375细胞增殖及酪氨酸酶活性升高,可能是通过上调TYR、TRP-1、TRP-2的mRNA表达和TYR蛋白表达实现的;而90%高良姜素能够显著促进细胞增殖、酪氨酸酶活性升高及黑素增加,表明90%高良姜素能够促进黑素的合成,但不是通过调节TYR、TRP-1、TRP-2的mRNA表达,可能是通过促进TYR蛋白表达实现的。