虎杖提取物对模型大鼠滑膜组织黏附分子与核转录因子表达的影响

目的研究虎杖提取物防治急性痛风性关节炎的作用机理。方法采用尿酸钠结晶(MSU)致急性痛风性关节炎大鼠模型,应用免疫组化法测定黏附分子(ICAM-1)和核转录因子(NF-κBp65)蛋白的阳性表达面积和积分光密度值,观察虎杖提取物对滑膜组织中ICAM-1和NF-κBp65表达的影响。结果正常组有少量表达,模型组I-CAM-1和NF-κBp65蛋白表达显著增加,虎杖提取物360mg/kg组可显著减少ICAM-1和NF-κBp65蛋白的阳性表达面积及积分光密度值。结论虎杖提取物可能是通过抑制大鼠滑膜组织中ICAM-1和NF-κBp65的异常表达与激活来发挥对痛风性关节炎的防治作用。     

清热排毒胶囊对急性痛风性关节炎模型大鼠核因子κB和白细胞介素-1β的影响

目的：观察清热排毒胶囊对尿酸钠晶体（MSU）诱导的急性痛风性关节炎模型大鼠核因子κB（NF-κB）和白细胞介素-1β（IL-1β）的影响,探讨其防治急性痛风性关节炎的作用机理。方法60只SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、双氯芬酸钠缓释片组（戴芬组）及清热排毒胶囊高、中、低剂量组,各治疗组予相应药物灌胃7 d,于第5日灌胃给药1 h后采用MSU溶液踝关节腔注射制备大鼠急性痛风性关节炎模型。各组大鼠于造模后48 h处死并取材。光镜下观察各组大鼠踝关节滑膜组织的病理形态学改变,ELISA测定各组大鼠踝关节浸出液中NF-κB和IL-1β的表达水平。结果与模型组比较,清热排毒胶囊各剂量组和戴芬组大鼠踝关节浸出液中 NF-κB 和 IL-1β的表达水平均显著降低（P＜0.05,P＜0.01）。病理观察结果显示,清热排毒胶囊可减轻模型大鼠踝关节滑膜组织充血、水肿及炎性细胞浸润,并改善滑膜增生等病理改变。结论清热排毒胶囊通过抑制大鼠踝关节组织中NF-κB和IL-1β的表达来发挥抗炎作用。     

梁金菇多糖对人脐血单个核细胞生成白介素-2的影响

[目的]研究梁金菇多糖(LJPS)对脐血单个核细胞(CBMC)分泌白细胞介素-2(IL-2)和IL-2mRNA表达的影响,探讨梁金菇多糖的增强免疫和抗肿瘤活性,为中国栽培的梁金菇药用价值的开发提供实验依据。[方法]采用放射性免疫法检测LJPS对CBMC分泌IL-2的影响,并应用RT-PCR法检测LJPS对CBMCIL-2mRNA表达的影响。[结果]LJPS单独或与植物血凝素(PHA)联合应用均能够促进CBMC分泌内源性IL-2(P<0.05和P<0.01),分泌高峰为48h左右,并且两者均能促进CBMCIL-2mRNA的表达,表达高峰为24h左右。[结论]梁金菇多糖能够促进CBMC内源性IL-2的分泌及IL-2mRNA的表达。     

加味桂芍知母汤对大鼠佐剂性关节炎滑膜白细胞介素细胞因子基因表达的影响

目的检测IL-1β、IL-6在类风湿性关节炎动物模型的表达，探讨加味桂芍知母汤（加味汤）对其的作用机制。方法将32只大鼠随机分为正常、模型、激素、加味汤4组，采用PCR微板核酸杂交-ELISA方法检测滑膜IL-1β、IL-6的mRNA表达水平。结果加味汤组和激素组IL-1β、IL-6的mRNA表达水平无显著性差异（P〉0．05），而与模型组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论模型组早期IL-1β、IL-6mRNA表达水平是上调的，加味汤可以抑制其转录和表达，有利于病情的缓解。     

蜂针对佐剂性大鼠关节炎滑膜细胞因子基因表达的影响

目的 :检测IL 1 β、IL 6在类风湿性关节炎 (RA)的表达 ,探讨蜂针治疗RA的作用机理。方法 :将 40只大鼠随机分为四组 ,采用PCR微板核酸杂交 ELISA方法检测滑膜IL 1 β、IL 6的mRNA表达水平。结果 :蜂针组和激素组IL 1 β、IL 6的mRNA表达水平无显著性差异 ,而与模型组比较有显著性差异。结论 :RA早期IL 1 β、IL 6的mRNA表达水平是上调的 ,蜂针治疗后可以抑制其转录和表达 ,有利于RA病情的缓解     

不同浓度青藤碱对大鼠滑膜细胞因子mRNA表达的影响

目的：观察不同浓度的青藤碱(SIN)体外作用对佐剂性关节炎(从)大鼠滑膜细胞TNF-αmRNA、IL-1 β mRNA、IL-10 mRNA表达的影响。方法：以佐剂性关节炎大鼠为模型，收集滑膜细胞培养，随机分为5组：正常对照组，从组，AA SIN 30μg／mL，AA SIN 60μg／mL，AA SIN 120μg／mL，反转录PCR检测TNF-α mRNA、IL-1b mRNA、IL-10 mRNA的表达。结果：佐剂性关节炎后滑膜细胞内TNF-α mRNA、IL-1 β mRNA、IL-10 mRNA的表达均显著升高，青藤碱在一定的浓度范围内呈浓度依赖性抑制TNF-α mRNA、IL-1b mRNA的表达，而对IL-10 mRNA的抑制效应与浓度无关。结论：青藤碱可能通过降低滑膜细胞内TNF-α mRNA及IL-1 β mRNA的表达而发挥治疗AA的效应。     

红藤虎杖复方免煎剂对急性痛风性关节炎模型小鼠细胞因子表达的影响

目的观察红藤虎杖复方免煎剂对急性痛风性关节炎模型小鼠细胞因子的表达,并探讨其可能作用机制。方法将KM雌雄性小鼠各36只,称重后随机分成空白组、模型组、阳性组和中药高、中、低剂量组,正常饲养1周后,连续灌胃5 d,第6天在小鼠踝关节注射尿酸钠诱导急性痛风性关节炎模型。测定足趾容积、HE染色观察滑膜组织病理形态,以及ELISA法检测IL-1β、TGF-β1、TNF-α、IL-1、IL-8、IL-1Ra在踝关节滑膜组织中的表达。结果与空白组比较,模型组右足趾容积明显增加;IL-1、IL-1β、IL-8、TNF-α水平均显著增高(P<0.01);IL-1Ra、TGF-β1较空白组增高(P<0.05)。与模型组比较,阳性组、中药高、中剂量组右足趾容积明显降低;IL-1、IL-1β、IL-8、TNF-α水平均显著性降低(P<0.01);TGF-β1、IL-1Ra水平均显著性增高(P<0.01)。与阳性组比较,中药高剂量组IL-1显著降低((P<0.01);中药高、中剂量组IL-1β、TNF-α较阳性组降低(P<0.05);中药高、中剂量组IL-8、IL-1Ra、TGF-β1与阳性组比较无显著性差异(P>0.05);HE染色观察显示高剂量组滑膜组织炎症浸润改善明显。结论红藤虎杖复方免煎剂能治疗小鼠急性痛风性关节炎,其作用机制可能与MSU诱导的促炎细胞因子及抗炎细胞因子的产生有关,且高剂量效佳。     

虎杖与茵陈不同配比对急性痛风性关节炎大鼠模型的影响及部分机制研究

目的:痛风属于内科疾病的常见病、多发病,本文拟建立成熟的急性痛风性关节炎动物模型,考察虎杖与茵陈不同配比对其的影响,为临床合理用药提供实验依据。方法:建立急性痛风性关节炎大鼠模型60只,将大鼠分为空白组,模型组,阳性组(秋水仙碱1mg/kg组),虎杖配茵陈1∶1(5g/kg)组、1∶2(7.5 g/kg)组、1∶3(10 g/kg)组,各组10只,以HE染色法观察组织病理学变化,采用绕线法检测各组大鼠右后足踝关节的足趾容积,测量治疗前后足趾容积变化;采用Elisa试剂盒检测大鼠血清TNF-α、IL-1β指标的含量变化,RT-PCR检测TLR2、TLR4基因的表达。结果:HE染色法显示,虎杖与茵陈不同配比对急性痛风性关节炎大鼠模型的炎症状况有所改善,其中1∶3配伍组在病理组织变化最为明显,与模型组比较具有显著差异;足趾容积结果显示,虎杖与茵陈1∶3组优于其余各组;Elisa检测结果显示,模型组血清中TNF-α、IL-1β水平较高,虎杖与茵陈不同配比均能有效抑制炎性介质的释放,且1∶3组优于其余各组;RT-PCR检测结果显示,虎杖配伍茵陈为1∶3组的TLR2、TLR4基因的表达水平上较其余配伍用药组显著降低。结论:虎杖配伍茵陈为1∶3时能有效降低炎性介质水平,发挥治疗作用最佳,其机制可能与抑制TLR2、TLR4基因的表达从而阻断信号转导通路,降低炎性因子释放,达到抗炎的作用。     

清热利湿方联合洛索洛芬钠片治疗急性痛风性关节炎的疗效观察及对细胞因子的影响

目的 观察清热利湿方联合西药洛索洛芬钠片治疗急性痛风性关节炎湿热瘀阻证的疗效及对患者细胞因子的影响.方法 将92例急性痛风性关节炎湿热瘀阻证患者随机分为治疗组46例、对照组46例.对照组采用洛索洛芬钠片治疗,治疗组在对照组西药治疗基础上联合清热利湿方加减治疗.观察中医证候积分,中医证候疗效,采用视觉模拟评分法(VAS)...     

忍冬藤颗粒对急性痛风性关节炎模型大鼠形态学及关节软骨IL-1β的影响

目的:研究忍冬藤颗粒治疗急性痛风性关节炎模型大鼠抗炎消肿止痛的效果并对其机理进行探讨。方法:给予大鼠乙胺丁醇(189mg/kg)和腺嘌呤(1.26g/kg)灌胃,每天1次连续3周诱导高尿酸血症模型,然后在此基础上以大鼠的右踝关节外侧后方为穿刺点,针尖斜向前上方与胫骨成45°角刺入关节腔,每只注射0.2ml尿酸钠溶液,连续3天。同时各干预组大鼠分别灌胃忍冬藤颗粒23.8g/kg、11.9g/kg、5.95g/kg,别嘌呤醇0.455g/kg(第3周开始,连续1周),秋水仙碱18.9mg/kg(第4周开始.连续1周)进行干预。实验结束后,观察忍冬藤颗粒对模型大鼠关节肿胀、步态、炎症的影响,检测大鼠关节软骨中的IL-1β的表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠关节肿胀增加(6.20±0.19),关节炎症(5.25±1.04)、跛行步态评分(5.25±1.04)增高,关节软骨IL-1β表达水平上升(12.33±1.36);与模型组比较,药物干预24h、48h、72h后,忍冬藤颗粒各组大鼠关节肿胀度周径明显减小,其中忍冬藤颗粒11.9g/kg剂量组对关节肿胀度的疗效更好(4.51±0.25);与模型组比较,给药后72h后,秋水仙碱(18.9mg/kg)+别嘌呤醇(0.455g/kg)组可以明显降低关节炎症程度,给药48、72h后,忍冬藤各剂量组可以明显降低关节炎症评分,其中忍冬藤颗粒11.9g/kg剂量组降低炎症评分效果更优(1.00±1.07);与模型组比较,给药后24h、48h、72h后,忍冬藤颗粒各剂量组可以明显降低步态评分(1.00±1.07);与模型组比较,秋水仙碱(18.9mg/kg)+别嘌呤醇(0.455g/kg)、忍冬藤颗粒各剂量组大鼠血清IL-1β表达明显降低,其中忍冬藤颗粒11.9g/kg(6.16±0.70)、23.8g/kg(6.96±0.79)剂量组IL-1β表达降低效果最优。结论:忍冬藤颗粒可以起到抗炎消肿止痛的功效,对急性痛风性关节炎模型大鼠有着明显的治疗作用,其作用机制可能是抑制炎症关节IL-1β致炎因子的生成而实现的。     

虎杖的体外抑菌作用研究

目的探讨虎杖的体外抑菌作用。方法用K-B纸片扩散法。100%虎杖浸出液滤纸片对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、甲型链球菌、乙型链球菌抑菌作用进行了研究。结果虎杖对以上细菌均有明显抑菌作用。结论虎杖在体外有明显抑菌作用。     

中药虎杖中抗癌活性物质研究

目的:为虎杖药用价值的开发利用提供科学据依。方法:在生物活性测定指导下,从虎杖中分离得到一种较高抗癌活性的物质,并且用液质联用、红外光谱、紫外全扫描等方法鉴定其结构。MTT法测定它对L-02、HepG2、SHZ-888、MCF-7、MCF-7/ADM等细胞的抑制作用并用HE染色法观察其作用MCF-7/ADM细胞48 h、72 h后的肿瘤细胞形态学变化。结果:分离得到的物质为顺、反式-白藜芦醇,它能特异性抑制多种肿瘤细胞的生长,而对正常肝细胞毒性很小。同时,首次发现其对耐阿霉素的MCF-7乳腺癌细胞有直接的细胞毒性。结论:白藜芦醇是虎杖中一种活性强、低毒的抗癌物质。     

The effects of Polygonum cuspidatum extract on wound healing in rats

Aim of the study

Polygonum cuspidatum has long been used as a traditional medicine inducing wound healing. In this study, the extract from the Chinese medicinal herb Polygonum cuspidatum was investigated on its wound healing activity, in order to obtain an accurate elucidation of its traditional use value.

Materials and methods

After creating wound healing model on the back of rats, the extract from the Chinese medicinal herb Polygonum cuspidatum was applied. Wound healing rates were calculated at 3, 7, 14, and 21 days after the wounding, and tissues were harvested at 1, 3, 7, 14 and 21 days for histological and immunohistochemistry analysis. The stages of wound granulation tissues were evaluated histopathologically. The expression of TGF-β1 was determined by immunohistochemically.

Results

Wound healing rates were significantly higher at 3, 7, 14 and 21 days in the extract group than in the control (p < 0.05). Histological results showed more well-organized bands of collagen, more fibroblasts and hair follicle and less inflammatory cells in the extract group. The immunohistochemical results revealed that TGF-β1 increased in the extract group on day 1, 3 and 7 post-wounding (p < 0.05).

Conclusion

The present study has shown that the extract from the Chinese medicinal herb Polygonum cuspidatum possesses wound healing activity, and thus provided the evidence for its traditional use value.     

虎杖的化学成分研究

目的对虎杖根及根茎的化学成分进行研究。方法采用硅胶柱色谱进行分离,通过化学和波谱分析方法鉴定化合物结构。结果从其乙醇提取物的乙醚部分分离得到7个化合物,分别鉴定为大黄素甲醚(Ⅰ)、大黄素(Ⅱ)、黄葵内酯(Ⅲ)、β-谷甾醇(Ⅳ)、齐墩果酸(Ⅴ)、香豆素(Ⅵ)和2-乙氧基-8-乙酰基-1,4-萘醌(Ⅶ)。结论化合物Ⅶ为新化合物,命名为虎杖素A(cuspidatumin A),Ⅲ为首次从虎杖中分得。     

虎杖浓缩片对小鼠实验性肝损伤的保护作用

目的研究虎杖浓缩片对四氯化碳(CCl4)致小鼠肝损伤的影响。方法虎杖浓缩片连续给予小鼠7 d(2.50,1.25,0.25 mg/kg),用CCl4造成急性肝损伤,测定各组小鼠血清中ALT和AST的活性以及检查肝组织的病理改变。结果虎杖浓缩片能显著降低CCl4肝损伤小鼠的ALT(P<0.01)和AST(P<0.01),减轻肝组织变性、坏死程度,缓解肝脏病理改变。结论虎杖浓缩片对CCl4所致小鼠肝损伤具有保护作用。     

侗医药松杖方对类风湿关节炎患者滑膜细胞STAT3炎症信号表达的影响

目的:探讨松杖方对RA患者滑膜细胞(RAFS)凋亡及STAT₃相关蛋白ROR-γt、SOCS-3、pSTAT₃表达的影响。方法:取对数生长期RAFS,分为空白对照组、雷公藤多苷组、来氟米特组、松杖方高、中、低剂量组共六组,分别给以相应含药血清或空白血清干预24 h后,观察细胞形态,流式细胞术分析RAFS的凋亡情况,免疫印迹法检测ROR-γt、SOCS-3、pSTAT₃的表达情况。结果:空白组滑膜细胞持续增殖,各给药组细胞不同程度变形及凋亡。与雷公藤多苷组、来氟米特组比较,松杖方中剂量组RAFS凋亡率相似,松杖方高剂量组凋亡率最高,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,各含药血清干预组RAFS中ROR-γt、pSTAT₃的表达量均下降(P<0.05),松杖方高剂量组ROR-γt、pSTAT₃的表达量最低,与雷公藤多苷组及来氟米特组比较差异有统计学意义(P<0.05)。各组RAFS中SOCS-3的表达量差异未见统计学意义(P>0.05)。结论:松杖方可抑制ROR-γt、pSTAT₃的基因表达,抑制炎症信号的传导,促进RAFS凋亡,阻断RA滑膜炎症持续发生。     

聚酯型儿茶素对人外周血单核细胞免疫反应的影响

目的 研究聚酯型儿茶素对人外周血单核细胞免疫反应的影响。方法 采用MTT法测定淋巴细胞增殖反应和IL－2活性,采用免疫细胞化学和间接免疫荧光测定IL－2R的水平,采用和放射免疫法细胞内cAMP浓度。结果 50,150,500μg/mL聚酯型儿茶素对人外周血单核细胞增殖有明显的促进作用,亦可促进经植物血凝素（PHA)在化的人外周血单核细胞产生IL－1及表达IL－2R。此外,聚酯型儿茶素可明显降低人外周血单核细胞内cAMP浓度,也可对抗前列腺素E1（PGE1）升高cAMP的作用。结论 聚酯型儿茶素对人具有明显的免疫增强作用,其机制与促进IL－2的诱发及其受体的表达,降低细胞内cAMP水平有关。     

不同提取方法对虎杖中蒽醌类成分及其抗氧化活性影响的研究

目的研究不同提取方法对虎杖蒽醌类成分及其抗氧化作用的影响。方法采用回流、索氏、微波及超声四种提取方法,测定四种提取液中的游离蒽醌和总蒽醌的含量;采用DPPH,FRAP两种方法测定其抗氧化活性,并分析蒽醌类成分和抗氧化活性之间的关系。结果在对游离蒽醌的测定中以索氏法为最高(0.53%),其次为超声(0.45%),各种方法之间相比差异显著(P<0.05);在对总蒽醌的测定中,结果如下:索氏(1.16%)>超声(1.15%)>微波(1.04%)>回流(0.80%);抗氧化活性测定发现,以回流液的抗氧化能力最强,其次是微波,二者与超声和索氏的相比有显著性差异(P<0.05);相关性分析发现,蒽醌的含量与抗氧化活性呈显著的负相关(P<0.01)。结论不同提取方法影响虎杖蒽醌类成分和抗氧化活性,蒽醌类成分和抗氧化活性之间具有负相关的关系。