原发性肾病综合征患儿肝细胞生长因子及其受体的表达特征

目的 观察原发性肾病综合征(PNS)患儿肾组织肝细胞生长因子(HGF)及其受体c-Met的分布及表达,以及血清HGF水平,探讨其在PNS慢性进展中的作用.方法 处于PNS活动期的患儿45例.根据肾小管间质损伤程度分为无损伤组7例,轻度损伤组21例,中度损伤组12例,重度损伤组5例.20份正常血清和10例正常肾组织作为对照.应用免疫组织化学及图像分析法观察PNS患儿肾组织HGF、c-Met、转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达情况,同时应用双抗体夹心ELISA检测血清HGF水平.组间比较采用单因素方差分析.结果 重度损伤组PNS患儿肾组织HGF、c-Met蛋白表达水平明显低于轻度损伤组和中度损伤组(Pa＜0.05),与无损伤组比较差异无显著性意义(P＞0.05).PNS患儿肾组织HGF蛋白表达水平与c-Met蛋白表达水平呈显著正相关(r=0.704 P＜0.01).HGF蛋白表达水平与TGF-β1、α-SMA蛋白表达水平在重度损伤组中均呈显著负相关(r=-0.945,-0.992 Pa＜0.01),在轻至中度损伤组中均呈显著正相关(r=0.521, 0.603 Pa＜0.01).血清HGF水平与肾组织HGF、c-Met蛋白表达水平均呈显著正相关(r=0.721,0.601 Pa＜0.01).结论 PNS患儿肾组织HGF及其受体c-Met蛋白在损伤肾小管上皮细胞中表达一致增高,提示PNS患儿肾小管上皮细胞是HGF的主要作用部位.PNS患儿肾小管间质病变过程有HGF 与TGF-β1的共同参与,二者相关性的变化可能影响肾小管间质病变的结局.     

原发性肾病综合征患儿肾组织中pRb的表达及意义

目的探讨肾病综合征患儿肾组织视网膜母细胞瘤基因的蛋白产物pRb的表达水平及其与肾脏固有细胞增生之间的关系。方法以39例原发性肾病综合征患儿肾活检石蜡包埋肾组织及6例肾肿瘤肾切除患儿的正常肾组织作为研究对象,用免疫组织化学方法检测了pRb在肾组织的表达水平,并与肾病综合征患儿的病理类型、肾组织病理学积分及肾组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平进行比较。结果肾病综合征组肾小球内PCNA和pRb阳性细胞百分率、肾小管-间质内的PCNA阳性细胞百分率均明显高于对照组,且不同病理类型肾病综合征患儿的肾小球内PCNA和pRb阳性细胞百分率存在显著差异。肾小球内PCNA和pRb的阳性细胞百分率分别与肾小球的病理积分呈正相关,肾小球内pRb的阳性细胞百分率和PCNA阳性细胞百分率呈正相关。结论肾病综合征患儿肾组织pRb表达水平增加促进了肾脏固有细胞的异常增生。     

Toll样受体4在原发性肾病综合征患儿肾组织及外周血中表达的意义

目的探讨Toll样受体4(TLR4)在原发性肾病综合征(INS)患儿肾组织及外周血中的表达及意义。方法采集2015年10月至2018年6月在新乡医学院第一附属医院确诊为INS的78例患儿肾活检组织及21例儿童正常肾组织(对照组1),应用免疫组织化学方法检测标本中TLR4表达水平,比较INS不同肾脏病理类型、不同临床分型中TLR4表达水平的差异,分析其与24 h尿蛋白、血清清蛋白的相关性;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测INS患儿治疗前(活动期)及治疗后(缓解期)和23例健康儿童(对照组2)外周血中TLR4表达水平,比较INS不同肾脏病理类型、不同临床分型患儿血清中TLR4表达水平的差异,分析其与24 h尿蛋白、血清清蛋白的相关性;对INS患儿肾小管中TLR4的表达水平与血清TLR4的表达水平进行相关性分析。结果1.与正常肾组织TLR4水平[(0.93±0.26)%]比较,TLR4在各型INS患儿肾小球及肾间质的表达[系膜增生性肾小球肾炎(MsPNG)型:(0.93±0.21)%、局灶节段性肾小球硬化(FSGS)型:(1.02±0.25)%、膜性肾病(MN)型(1.03±0.09)%、微小病变(MCD)型(1.02±0.27)%]差异无统计学意义(F=0.741,P=0.562);而肾小管TLR4的表达水平明显增高[MCD型:(82.94±4.62)%、MN型:(63.54±1.98)%、MsPGN型:(42.32±2.97)%、FSGS型:(22.60±2.07)%],差异有统计学意义(F=1929.842,P<0.01),其中MCD型INS患儿肾小管TLR4表达水平较MN型、MsPGN型、FSGS型明显增高,差异均有统计学意义(均P<0.01);肾小管TLR4在临床分型为激素敏感型肾病综合征(SSNS型)肾脏组织中表达最高,在激素耐药型肾病综合征(SRNS)型表达最低,差异有统计学意义(F=220.951,P<0.01)。2.活动期INS患儿血清TLR4表达[MsPNG型:(143.36±12.99)ng/L、FSGS型(75.94±7.29)ng/L、MN型(210.22±14.66)ng/L、MCD型(283.93±21.58)ng/L]显著高于缓解期患儿[MsPNG型:(29.51±4.93)ng/L、FSGS型(15.66±3.78)ng/L、MN型(45.40±5.73)ng/L、MCD型(62.29±7.90)ng/L]及对照组2儿童[(0.69±0.33)ng/L],差异均有统计学意义(均P<0.01);且缓解期INS患儿血清TLR4的表达水平高于对照组2儿童,差异有统计学意义(F=286.287,P<0.01)。活动期及缓解期INS患儿血清TLR4的表达水平均以MCD型最高,其次为MN型,而FSGS型最低;血清TLR4在临床分型为SSNS型表达最高,SRNS型表达最低,差异有统计学意义(F=147.438,P<0.01)。3.INS患儿肾小管中TLR4的表达水平[(62.82±20.94)%]与其活动期血清中TLR4的表达水平[(213.26±73.33)ng/L]呈正相关(r=0.852,P<0.05);INS患儿肾小管及活动期血清TLR4的表达水平均与24 h尿蛋白水平[(123.05±33.55)mg/kg]均呈正相关(r=0.401、0.427,均P<0.05),与血清清蛋白水平[(19.54±3.55)g/L]均呈负相关(r=-0.602、-0.617,均P<0.05)。结论TLR4在INS患儿肾小管及血清中表达增高,且表达水平可能与不同肾脏病理类型及临床分型有关,与疾病活动具有相关性。     

Toll样受体4和Toll样受体7在儿童原发性肾病综合征患儿肾组织中的表达及意义

目的探讨Toll样受体(TLR)4、TLR7在儿童原发性肾病综合征(PNS)不同肾脏病理类型中的表达及临床意义。方法纳入110例确诊且经肾活检的PNS患儿,采用免疫组化方法检测肾组织中的TLR4、TLR7,以21例肾母细胞瘤患儿的正常肾组织为对照,分析比较PNS患儿与对照儿童间以及不同病理分型PNS患儿间,肾组织TLR4、TLR7表达的差异。结果不同病理类型PNS患儿和对照组之间肾小管中TLR4、TLR7表达的差异均有统计学意义(P0.01),其中肾小管TLR4表达水平以MCD型最高,其次MN型、MsPGN型、FSGS型,两两比较差异均有统计学意义(P0.05);而肾小管TLR7表达水平以MsPGN型最高,其次为MN型、MCD型、FSGS型,两两比较差异也均有统计学意义(P0.05)。结论 TLR4、TLR7在PNS患儿肾组织中表达增高,且其表达水平可能与病理类型相关。     

增殖细胞核抗原在原发性肾病综合征患儿肾组织的表达

目的 探讨肾病综合征(NS)患儿肾组织增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平及其与肾脏固有细胞增生间的关系。方法 以39例原发性NS患儿肾活检石蜡包埋肾组织及6例肾肿瘤肾切除患者正常肾组织为研究对象，用免疫组织化学方法检测PCIA在肾组织的表达水平，并与NS患儿的病理类型、肾组织病理学积分及肾活检的临床参数进行比较。结果 NS组肾小球和肾小管一间质内PCNA阳性细胞百分率均明显高于对照组，且不同病理类型NS患儿的肾小球内PCNA阳性细胞百分率存在显著差异。肾小球和肾小管一间质内P(NA阳性细胞百分率分别与肾小球和肾小管一间质的病理积分呈正相关，肾小球内PCNA阳性细胞百分率与血清胆固醇呈正相关，肾小管一间质内PCNA阳性细胞百分率与24h尿蛋白量呈正相关。结论 NS患儿肾组织PCNA表达水平增加促进肾脏固有细胞的异常增生，PCNA是判断原发性NS肾脏组织损伤程度和预后的敏感指标。     

原发性肾病综合征患儿肾组织中p18的表达及意义(英文)

目的：肾脏固有细胞的异常增生是肾小球硬化发展的病理基础,细胞增生又受细胞周期调控物质的调节。本研究通过探讨肾病综合征患儿肾组织细胞周期调节蛋白p18的表达水平及其与肾脏固有细胞增生之间的关系,为抑制肾脏固有细胞的异常增生,延缓肾脏病的慢性进展开辟新的途径。方法：以39例原发性肾病综合征患儿［8例微小病变(MCD),15例系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN),7例膜增生性肾小球肾炎(MPGN),9例局灶节段性肾小球肾炎(FSGS)］肾活检石蜡包埋肾组织及6例肾肿瘤肾切除病人的正常肾组织作为研究对象,用免疫组织化学方法检测了p18在肾组织的表达水平,分析其与肾病综合征的病理类型及肾组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达的关系。结果：肾病综合征组肾小球内PCNA阳性细胞百分率(28.6%±3.4%)明显高于对照组(10.8%±3.4%)(P<0.05),p18阳性细胞百分率(35.8%±4.0%)明显高于对照组(6.1%±1.9%)(P<0.05);肾病综合征组肾小管-间质内的PCNA阳性细胞百分率(68.3%±11.6%)明显高于对照组(12.6%±2.6%)(P<0.05)。不同病理类型肾病综合征患儿的肾小球内PCNA阳性细胞百分率存在显著差异,分别为MCD 23.6%±4.6%,MsPGN 40.2%±5.1%,MPGN 27.5%±3.6%,FSGS 34.6%±5.1%(均P<0.05);不同病理类型肾病综合征患儿的肾小球内p18阳性细胞百分率存在显著差异,分别为MCD 25.2%±4.3%,MsPGN35.7%±7.1%,MPGN 37.7%±4.0%,FSGS 40.1±6.4%(均P<0.05)。肾小球内p18的阳性细胞百分率和PCNA阳性细胞百分率成正相关(r=0.6632,P<0.05)。结论：肾病综合征患儿肾组织p18表达水平增加可能起促进异常增生的肾脏固有细胞消退的作用。［中国当代儿科杂志,2004, 6(5): 373-376］     

儿童原发性肾病综合征肾组织瞬时受体电位阳离子通道蛋白6表达及意义

目的探讨原发性肾病综合征(PNS)患儿肾组织中瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)的表达与足细胞损伤的关系及其临床意义。方法获取18例PNS患儿的肾组织,常规切片染色光镜观察肾脏组织病理改变,电镜观察足细胞的结构变化,分别用q PCR和免疫组化测定组织中TRPC6 m RNA和蛋白的表达,并将TRPC6 m RNA表达分别与血清白蛋白(Alb)、肌酐(Cr)、三酰甘油(TG)、胆固醇(Tch)、补体C3水平及24 h尿蛋白定量和评估的肾小球滤过率(e GFR)进行相关性分析。结果 PNS患儿肾组织中TRPC6蛋白表达较对照组上调,差异有统计学意义(P0.05)。PNS患儿肾组织中TRPC6 m RNA的相对表达量与肾组织TRPC6蛋白表达呈显著正相关(r=0.508,P0.05),与血清Alb、Cr、TG、Tch、补体C3、e GFR水平以及24 h尿蛋白定量无相关性(P0.05)。结论 PNS患儿的病理类型仍以足细胞病变为主,其肾小球足细胞中TRPC6蛋白表达升高。TRPC6检测可能有助于足细胞病变诊断。     

肝细胞生长因子与转化生长因子-β在肾脏病患儿肾组织中的表达

目的探讨肝细胞生长因子（HGF）与转化生长因子-β（TGF-β）在儿童。肾组织中的表达和二者的关系及这二种因子与肾脏病理变化之间的关系。方法依据肾组织在光镜下的病变程度不同，61例肾病患儿分为对照组（26例，临床诊断为单纯薄基底膜肾病患儿）、实验组I[22例，临床诊断为肾病综合征（NS），光镜病变不明显，电镜诊断为局灶性节段性肾小球硬化（FSGS）患儿]、实验组Ⅱ（13例，临床诊断为NS，光镜即诊断为FSGS患儿）；采用免疫组织化学法（SP法：链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法）检测各组患儿肾组织中HGF、TGF-β的表达，并进行半定量计算及统计（应用显微镜观察细胞行单盲读片）。以胞质出现棕黄色染色为阳性信号，肾小球系膜区域随机选取10个高倍镜视野，肾小管间质区随机选取10个高倍镜视野；采用IMS医学图像分析软件，测定所选切片中的HGF和TGF-β的阳性面积占每个分析视野总面积的比值和阳性强度值；TGF-β和HGF的表达水平采用免疫组织化学指数表示（免疫组织化学指数=阳性面积比&#215;阳性强度值）。结果1．HGF及TGF-β在各组患儿肾组织中均有表达；2．FSGS病理改变的肾组织可见HGF及TGF-β表达明显增高（Pa〈0．05）；3．TGF-β在3组中的表达随肾脏病理表现加重而增加明显（P〈0．05）；4．FSGS肾病患儿肾组织中HGF与TGF-β的表达呈负相关，在肾小管间质区更明显（Pa〈0．01）。结论HGF可能延缓儿童FSGS的病变进展。     

粘附分子在肾病综合征患儿周围血和肾组织的表达

细胞粘附分子（ＣＡＭｓ）介导的细胞间、细胞与细胞外基质粘附机制在多种形式的肾小球肾炎、血管炎、小管间质性炎症中的重要作用已引起特别关注。我们以免疫荧光标记单克隆抗体,对肾病综合征（ＮＳ）患儿观察了ＣＡＭｓβ２整合素（ＣＤ１８）、Ｐ选择素（ＣＤ６２Ｐ）...     

儿童原发性肾病综合征瘦素及受体水平变化

目的检测儿童原发性肾病综合征（PNS）血清瘦素（leptin）、可溶性瘦素受体（sOBR）滴度,探讨外周组织瘦素受体（OBR）mRNA表达强弱对血清sOBR、leptin状态的影响。方法分别采用ELISA、RT-PCR法检测23例未经激素治疗的PNS患儿空腹血清、尿液leptin和sOBR水平、以及外周血单个核细胞（PBMC）上OBR基因表达水平,并与在年龄、性别、体重指数（BMI）均匹配的15例门诊正常体检儿童比较。结果空腹血清总leptin水平。肾病组与对照组相当,尿leptin。肾病组高于对照组;肾病组血清sOBR水平明显低于对照组,尿sOBR检测值两者差异无显著性;血清中代表游离leptin水平的游离leptin指数（FLI）肾病组高于对照组;PBMC上OBR基因表达强度。肾病组低于对照组。结论PNS患儿血清leptin总水平正常,sOBR水平降低,致使机体实际发挥生物学作用的游离leptin增多;其中血清sOBR减少与PNS患儿外周组织OBR基因表达减少有关。     

原发性肾病综合征患儿动态血压与肾损害的关系

目的 研究原发性肾病综合征(PNS)患儿24 h动态血压监测(ABPM)数值的异常变化,探讨PNS患儿24 h动态血压(ABP)与肾损害指标的关系,从而揭示血压对肾脏的损害机制.方法 采用动态血压监测仪对114例PNS患儿进行24 h动态血压监测,与随机血压(CBP)比较,并分析血压与肾损害的关系.结果 114例PNS患儿ABP与CBP呈现不同的组合关系,从而出现不同的分类诊断,而且ABPM敏感度高.通过ABPM发现隐匿性高血压和白大衣性高血压,尤其隐匿性高血压发病率高.ABPM发现PNS患儿24 h动态血压节律的减低.非杓型血压(non-dipper)发病率高.PNS患儿的ABP均值、负荷、非杓型血压与肾损害密切正相关.结论 ABPM与CBP存在不平行性,ABPM具有更高的阳性率,更能反映血压变化趋势.ABPM的应用有利于发现24 h动态血压节律减低的non-dipper患儿,给积极防治肾损害提供依据.     

Glucocorticoid receptor and vascular endothelial growth factor in nephrotic syndrome

AIM: The aim of the study was to assess plasma and urine concentrations of vascular endothelial growth factor (VEGF) in nephrotic syndrome children (NS) depending on the total dose of glucocorticoids (GC) and the percentage of lymphocytes with glucocorticoid receptor expression (CD3/GCR). METHODS: We examined 51 children (2-15 years), allocated to three groups: group I: 13 children with the first NS onset, group II: 13 children with NS relapse, group C: 25 healthy children. The NS patients were examined: (A) before treatment and (B) 4-5 weeks after prednisone administration at a dose of 60 mg/m2/24 h. Plasma and urinary VEGF levels were determined using the immunoenzymatic ELISA method. Flow cytometry was applied to assess CD3/GCR expression. RESULTS: Higher plasma and urinary VEGF concentrations were noted in NS children before treatment (A), as compared to control subjects (C). Following prednisone therapy (B), VEGF level was reduced but it was still higher than in the control group. Positive correlation was observed between VEGF and protein in the urine (group I r = 0.660, P < 0.05, group II r = 0.818, P<0.01) and a weak positive correlation between VEGF in plasma and urine (group I r = 0.531, P<0.05, group II - r = 0.581, P<0.05). CD3/GCR expression was lower in group II. In both groups, the correlation between plasma VEGF and CD3/GCR was positive (P<0.05).Conclusions: 1. Plasma and urinary VEGF levels increase during nephrotic syndrome onset. 2. Glucocorticoid treatment reduces plasma and urinary VEGF levels in NS children.     

肾病综合征并肾静脉血栓形成的高危因素和预防

肾静脉血栓形成 (renalveinthrombosis,RVT)是肾病综合征 (nephroticsyndrome ,NS)常见并发症之一 ,文献报道其发生率为 5 %～ 6 2 % ,平均 35 %。此类病人多数由于缺乏症状而被漏诊 ,预后不佳。提高对其认识 ,对改善NS预后有重要意义。充分认识RVT的危险因素 ,有助于提高RVT的诊断水平 ,并可为预防提供临床依据。　　一、肾脏病理类型不同病理类型的NS中RVT的发生率是不同的 ,肾脏病理类型是NS并RVT的一个重要危险因素。文献报道 ,膜性肾病并RVT发生率超过 5 0 %。笔者回顾分析有关膜性肾病并RVT的前瞻性研究资料 ,16 3例膜性…     

原发性肾病综合征患儿脂肪因子的表达及与高脂血症相关性研究

目的 探讨原发性肾病综合征(primary nephrotic syndrome,PNS)患儿治疗前后脂肪因子的表达变化及其与血脂的相关性,以及脂肪因子在PNS患儿高脂血症中的作用.方法 选取2015年3月至2018年3月确诊为PNS初发或激素停药6个月以上复发的PNS患儿90例为研究对象,另选取同期行健康体检的儿童3...     

Vascular endothelial growth factor in children with nephrotic syndrome treated with cyclosporine A

AIM: To assess the effect of cyclosporine A (CyA) on the level of vascular endothelial growth factor (VEGF) in the plasma and urine of nephrotic syndrome children. METHODS: The study material consisted of 15 children (F 6, M 9; group I) who were subjected to the following examinations: A) at the time of proteinuria relapse, before treatment with CyA, B) after 3 mo, C) after 6 mo, and D) after 12 mo of CyA administration with prednisone and convertase inhibitor. The control group (II) contained 20 healthy children. The immunoenzymatic ELISA method (R&D Quantikine) was used to determine plasma and urinary VEGF levels, while the immunofluorescence method was applied to assess CyA concentration in the plasma. The statistical program Statistica 6.0 was used for statistical analysis of the results. RESULTS: In the present study, plasma VEGF level in examination A was higher than in the control group (p<0.01). After proteinuria regression (B), it did not differ from the level observed in healthy children (p>0.05). After 6 and 12 mo of CyA administration, VEGF concentration increased and was higher than in the control group (p<0.05). In all the examinations, urinary excretion of VEGF was higher than in the control group, increasing proportionally with the duration of treatment and plasma CyA level. A positive correlation was observed between plasma and urinary VEGF levels and between VEGF and CyA concentrations in the plasma. CONCLUSION: Long-term CyA treatment of nephrotic syndrome children leads to an increase in plasma and urinary VEGF.