L-精氨酸对肝缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的　探讨L 精氨酸 (L Arg)对肝脏缺血再灌注 (I/R)损伤的保护及其机制。 方法雄性SD大鼠随机分为 :假手术组 (Sham ) :大鼠开腹游离肝十二指肠韧带 ,不阻断 ;对照组 (Con trol) :单纯入肝血流阻断 ;Arg组 :肝缺血前 5min ,从大鼠阴茎背静脉 (PDV )注射L Arg 2 0 0mg/kg体重 ;Arg +L组 :肝缺血前 10和 5min ,依次从大鼠PDV注射L 硝基精氨酸甲酯 (L NAME) 30mg/kg体重和L Arg 2 0 0mg/kg体重 ;fmk组 :肝缺血前 5min ,从大鼠PDV注射N 笨甲基氧化碳酰 缬氨酸 丙氨酸 天冬氨酸 氟化丙酮 (ZVAD fmk) 15mg/kg体重。各组入肝血流阻断时间为 40min ,比较各组的谷丙转氨酶 (ALT)、Caspase 3活性、肝细胞凋亡数和 7d生存率。 结果　肝缺血 40min再灌注 6h ,Arg组的 7d生存率显著高于对照组和Arg +L组 (P <0 .0 5 )。Arg组ALT、Cas pase 3活性和肝细胞凋亡数明显低于对照组和Arg +L组 (P <0 .0 1)。Arg组的Caspase 3活性和肝细胞凋亡数略高于fmk组和假手术组 (P >0 .0 5 )。结论　L Arg对肝脏I/R损伤有良好的保护作用 ,其保护机理可能是通过一氧化氮 (NO)作用于Caspase 3并使其失活 ,从而抑制肝细胞凋亡的发生而实现的。     

诱导型一氧化氮合酶在舒芬太尼预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在舒芬太尼预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 成年雄性SD大鼠30只,体重250～330 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为5组(n=6):假手术组(S组)只穿线,不结扎;心肌缺血再灌注组(I/R组)采用结扎左冠状动脉前降支30min,再灌注120 min的方法制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型;舒芬太尼预处理组(SF组)缺血前24 h经尾静脉输注舒芬太尼120μg/kg,输注时间30 min;舒芬太尼预处理+iNOS特异性抑制剂S-甲硫脲组(SF+SMT组)缺血前24 h经尾静脉输注舒芬太尼120μg/kg,缺血前10 min静脉注射SMT 10 mg/kg;SMT组缺血前10 min静脉注射SMT 10 mg/kg.于缺血前30 min、缺血30 min、再灌注120 min时记录HR和MAP,计算RPP(SP× HR).于再灌注120 min时取颈动脉血样2 ml,测定血浆NO浓度,随后取心脏制病理切片,测定缺血危险区(AAR)和梗死区(IS)体积,计算心肌梗死体积(IS/AAR),测定心肌iNOS表达.结果 与S组比较,余4组再灌注120 min时MAP和RPP降低,IS/AAR升高,I/R组和SMT组缺血30 min时MAP和RPP降低(P＜0.05);与I/R组比较,SF组、SF+SMT组和SMT组HR、MAP和RPP差异无统计学意义,SF+SMT组和SMT组IS/AAR和血浆NO浓度差异无统计学意义(P＞0.05),SF组IS/AAR降低,血浆NO浓度和心肌iNOS表达升高(P＜0.05).结论 iNOS参与了舒芬太尼预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的过程.

Abstract：

Objective To investigate the role of inducible nitric oxide synthase (iNOS) in reduction of myocardial ischemia-reperfusion (I/R) injury by sufentanil preconditioning in rats. Methods Thirty adult male SD rats, weighing 250-330 g, were randomly divided into 5 groups ( n =6 each): sham operation group (group S),I/R group, sufentanil preconditioning group (group SF), sufentanil preconditioning + a specific inhibitor of iNOS S-methyl thiourea (SMT) group (group SF+ SMT) and S-methyl thiourea group (group SMT). In I/R,SF,SF+SMT and SMT groups, myocardial I/R was produced by occlusion of left anterior descending coronary artery for 30 min followed by 120 min reperfusion. Group SF received 30 min infusion of sufentanil 120 μg/kg via caudal vein 24 h before ischemia. Group SF + SMT received infusion of sufentanil 120 μg/kg via caudal vein 24 h before ischemia and then SMT 10 mg/kg was injected 10 min before ischemia. In group SMT, SMT 10 mg/kg was injected 10min before ischemia. MAP and HR were recorded at 30 min before ischemia, at 30 min of ischemia and at the end of reperfusion. The rate-pressure product (RPP) was calculated. Arterial blood samples were obtained immediately at the end of reperfusion to determine the plasma concentration of NO. Then the animals were sacrificed and myo cardial tissues were obtained to determine the area at risk (AAR), infarct size (IS) and iNOS expression. IS/AAR was calculated. Results Compared with group S, MAP and RPP were significantly decreased, while IS/AAR was significantly increased at 120 min of reperfusion in the other four groups, and MAP and RPP were significantly decreased at 30 min of ischemia in I/R and SMT groups ( P ＜ 0.05). Compared with group I/R, no significant change was found in HR, MAP and RPP in SF, SF + SMT and SMT groups, and in IS/AAR and plasma NO concentrations in SF + SMT and SMT groups ( P ＞ 0.05), but IS/AAR was significantly decreased, and the plasma NO concentration and iNOS expression were significantly increased in group SF ( P ＜ 0. 05). Conclusion iNOS is involved in reduction of myocardial I/R injury by sufentanil preconditioning in rats.     

一氧化氮对大鼠肝缺血-再灌注损伤中肝细胞凋亡的影响

目的探讨一氧化氮对肝缺血-再灌注损伤及肝细胞凋亡的影响。方法在一氧化氮合酶（NOS）增强剂和抑制剂条件下,观察大鼠肝缺血-再灌注后1、3、6、24h肝的血清门冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）变化,同时进行肝细胞胞浆诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达及肝细胞凋亡的免疫组织化学分析。结果在再灌注6h点AST、ALT、肝细胞凋亡水平上,L-精氨酸（L-arg）组值分别为（341.88±111.24）IU/L、（311.75±139.41）IU/L和2.80±1.79,显著低于L-硝基精氨酸甲酯（L-NAME）组（2080.88±241.98）IU/L、（1153.00±110.92）IU/L和5.50±0.71（P值均＜0.05）。而L-arg组的肝细胞内iNOS表达灰度值152.07±3.46显著高于L-NAME组灰度值180.45±4.46（P＜0.05）。结论一氧化氮可减少肝缺血-再灌注损伤后肝酶的释放,抑制肝细胞的凋亡,改善肝缺血-再灌注损伤。     

体外循环中应用L—精氨酸防治心肌再灌注损伤的临床研究

目的:评价L－精氨酸在体外循环中防治心肌再灌注损伤的效果。方法：20例体外循环心脏手术病人，随机分为对照组（C组，n=10）和用药组（D组，n=10），均灌注泠晶体停搏液行心肌保护。D组于心肌恢复灌注30分钟内给与L－精氨酸200mg/kg。测定病人术前、心肌缺血期和再灌注24小时内各时点血浆中丙二醛（MDA）和肌酸磷酸激酶同功酶（CK－MB）的浓度，并观察术后24小时血压、心率等指标的变化。结果：心肌再灌注前，两组MDA和CK－MB水平无差异。D组于再灌注30分钟后各时点血浆MDA和CK－MB水平较C组明显降低，特别是峰值降低明显（P＜0.01），且CK－MB于再灌注后24小时接近术前水平。D组病人术后循环状况也好于C组。结论：体外循环中应用L－精氨酸可减少心肌再灌注损伤。     

L—精氨酸与心肌缺血／再灌注损伤

血管内皮细胞合成和释放的一氧化氮（ＮＯ）在体内参与多种生理病理过程,在心血管系统中具有重要的舒张血管,抗粒细胞、血小板粘附和聚集作用。在心肌缺缺血／再灌注过程中,内皮细胞合成和释放ＮＯ减少。补充ＮＯ前体－－Ｌ－精氨酸,调节内生ＮＯ合成和释放,可望烬肌缺血／再灌注损伤的预防和治疗提供新的方法。     

L-精氨酸对肺移植早期再灌注损伤保护作用的实验研究

再灌注损伤是肺移植早期非特异性移植肺功能衰竭的主要原因之一〔１〕。我们实验观察肺保存过程中，肺血管内皮源性一氧化氮（ＮＯ）改变及ＮＯ合成前体Ｌ精氨酸（ＬＡｒｇ）对肺移植早期再灌注损伤的保护作用，并探讨其可能机制。材料和方法　杂种成年犬，雌雄不拘，体重８．０～１５．０ｋｇ，氯胺酮（１０ｍｇｋｇ）麻醉，气管插管呼吸机调节呼吸（呼吸频率２０次分，一次换气量２０ｍｇｋｇ）。开胸后结扎奇静脉，静脉注射肝素（４０ＩＵｋｇ）后结扎上、下腔静脉，切开左心耳，以４０ｃｍ落差，４℃ＥｒｕｏＣｏｌｌｉｎ…     

一氧化氮在七氟醚预处理减轻兔心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的 评价一氧化氮在七氟醚预处理减轻兔心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 健康雄性新西兰大白兔40只,体重2.1～2.9 kg,随机分为5组(n=8):缺血再灌注组(IR组)、七氟醚预处理组(SEV组)、L-NAME组、七氟醚预处理+L-NAME组(SL组)和L-NAME+七氟醚预处理组(LS组).采用结扎冠状动脉前降支45 min,再灌注3 h的方法制备兔心肌缺血再灌注模型.SEV组吸入1.7%七氟醚30 min,洗脱15 min行预处理后制备模型;L-NAME组静脉注射一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NAME 1 mg/kg,5 min后制备模型;SL组七氟醚预处理后,静脉注射L-NAME 1 mg/kg,5 min后制备模型;LS组静脉注射L-NAME 1 mg/kg,5 min后行七氟醚顶处理,制备模型.于模型制备前即刻(T0)、心肌缺血45 min(T1)、再灌注60 min(T2)、120 min(T3)、180 min(T4)时记录HR、MAP、左室收缩压(LVSP)和左室收缩压最大上升速率(+dp/dtmax),于T4时抽取股动脉血3 ml,测定血浆心肌肌钙蛋白T(cTnT)浓度、心肌磷酸肌酸激酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)活性,取心室肌组织,测定心肌缺血危险区(AAR)和梗塞区(IS)面积,并计算IS/AAR.结果 与IR组比较,SEV组缺血再灌注时+dp/dtmax升高,血浆cTnT浓度、CK-MB和LDH活性和心室肌IS/AAR降低(P<0.05),其余组上述指标差异均无统计学意义(P0.05).结论 一氧化氮参与了七氟醚预处理减轻兔心肌缺血再灌注损伤,一氧化氮可能是其保护作用中某一通路上的信号分子.     

左旋精氨酸对体外循环缺血再灌注损伤心肌的保护作用

目的 探讨左旋精氨酸对体外循环（ＥＣＣ）下心肌缺血再灌注损伤的防护作用。方法 １６例ＥＣＣ下行心脏手术患者分成对照组和治疗组,分别于主动脉阻断前、开放后２小时、４小时、８小时测定血浆一氧化氮（ＮＯ）水平、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）和肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）活性。结果 主动脉开放后不同时点,对照组ＮＯ水平显著下降,ＬＤＨ,ＣＰＫ活性明显增强,与阻断前比较差异均有显著性（Ｐ〈０．０５和Ｐ〈０．０１）;治疗组Ｎ     

诱导性一氧化氮合酶在大鼠肝缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨诱导性一氧化氮合酶（iNOS）在大鼠部分肝缺血再灌注损伤中的作用.方法 选取雄性Sprague-Dawley大鼠30只,体重225～250 g,随机分成氨基胍（AG）组、脂多糖（LPS）组、对照组.每组均按相同方法建立70%的肝缺血再灌注损伤模型（缺血1 h,再灌注6 h）,取再灌注大鼠肝组织及血清样本.氨基胍（AG）组（n=10）：术前30 min尾静脉注射AG 100 mg/kg（质量浓度10 kg/L）;脂多糖（LPS）组（n=10）：术前30 min尾静脉注射LPS 10 mg/kg（质量浓度1 kg/L）;对照组（n=10）：术前30 min尾静脉注射生理盐水（10 μL/kg）.检测血清谷氨酸转氨酶（ALT）水平,实时荧光定量PCR测定肝组织iNOS mRNA的表达,Western blot测定肝组织iNOS蛋白的表达,考马斯法测定肝组织匀浆丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性,HE染色光镜下组织学观察等.结果 AG组与对照组相比,肝组织中iNOS mRNA表达量明显下降（P〈0.05）,iNOS蛋白表达量明显下降（P〈0.05）;ALT和MDA明显下降（P〈0.05）;SOD明显升高（P〈0.05）;肝细胞水肿较轻,排列相对整齐.LPS组与对照组相比,肝组织中iNOS mRNA表达量明显升高（P〈0.05）,iNOS蛋白表达量明显升高（P〈0.01）;ALT和MDA明显升高（P〈0.05）;SOD则明显降低（P〈0.05）;肝细胞水肿,排列紊乱,并且出现水样变性.结论 iNOS 升高会加重缺血再灌注损伤,这一过程可能通过改变氧化还原状态实现.     

L-精氨酸对肢体缺血/再灌注损伤的保护效果

试验旨在了解L-精氨酸对肢体缺血/再灌注损伤是否也有保护作用。资料与方法选取　ASAⅠ～Ⅱ级30例下肢骨折病例,无心血管、内分泌及神经系统疾病,止血带加压时间需1～1.5h。随机分为A组(对照组)15例,男10例,女5例,年龄18～50岁;B组(L-精氨酸组)15例,男11例,女4例,年龄18～51岁;另设C组15例。男10例,女5例,年龄18～48岁(腰椎间盘髓核     

大剂量抑肽酶对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的　探索大剂量抑肽酶对缺血再灌注离体鼠心的影响。方法　32只雄性SD大鼠随机均分为抑肽酶组(A),对照组(B)。制成离体鼠心工作模型,分别用含有抑肽酶（1×106KIU/L）和不含抑制肽酶的克氏液灌注30min,缺血停搏40min,复灌30min。缺血前及再灌注期间测定血液动力学指标、肌磷酸激酶含量、心脏干湿重比,对心肌超微结构作定性观察。结果　再灌注后,A组心功能、冠脉流量的恢复、超微结构的改善明显优于B组,肌磷酸激酶含量明显低于B组（P＜0.05）。结论　大剂量抑肽酶对缺血再灌注心肌有保护作用。     

地氟醚预处理对缺血再灌注心肌的保护作用

目的 从细胞生化、心脏收缩性能和心肌细胞超微结构等方面来探讨地氟醚对心肌缺血再灌注损伤的影响。方法 采用改良Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ离休大鼠心脏模型,将３０只大鼠随机分成３组：对照组（Ｃ）、缺血再灌注组（Ｉ－Ｒ组）和地氟醚组（Ｄ组）,每组各１０只,常温全心停灌３０分钟,再灌注３０分钟。结果 停灌前给１ＭＡＣ的地氟醚可以明显降低心肌丙二醛（ＭＤＡ）含量,促进心脏收缩功能的恢复和减轻心肌组织超微结构的损     

肾上腺髓质素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨肾上腺髓质素(Adm)1-50对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法 利用离体心脏缺血再灌注模型,24只雄性SD大鼠心脏随机分为A、B、C、D 4组,每组6只。心脏缺血60 min后。A组用氧合KH液再灌注60 min,B、C、D组分别用氧合KH液加Adm1-5010~(-9)、10~(-8)、10~(17) mol/L再灌注15 min,再用KH液灌注45 min。观察Adm 1-50对大鼠心脏功能、代谢和结构的影响。结果 Adm1-50呈剂量依赖性增加再灌注心脏冠脉流量(CF)、左室发展压(LVDP)、左室压力上升和下降最大变化速率(±dp/dt_(max)),再灌注末磷酸肌酸激酶同工酶(CKMB)漏出量减少,A组(31.5±3.3)U/L分别与C组(24.3±3.0)u/L、D组(19.3±3.2)U/L比较,差异有显著性(P<0.01)。透射电镜观察结果显示,Adm1-50处理组心肌细胞损伤较对照组减轻。结论 Adm1-50具有扩张冠脉血管,改善心功能,减轻心肌缺血再灌注损伤的作用。     

微小RNA与心肌缺血/再灌注损伤研究进展

背景 近年研究表明微小RNA(microRNA,miR)参与了心肌缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,I/RI)的进程. 目的 综述miR参与心肌I/RI的研究进展. 内容 概述miR及与心肌I/RI有关的miR的作用,并作展望.趋势 miR与心肌I/RI密切相关.以miR为靶点的治疗将可能被用于心肌保护.     

一氧化氮在缺血预处理保护大鼠移植肝脏再灌注损伤中的作用

目的　探讨一氧化氮 (NO)在缺血预处理 (IP)保护大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤中的作用。方法　采用SD大鼠原位肝移植动物模型 ,供肝冷保存时间为 10 0min ,无肝期 2 5min。12 8只大鼠随机分成 4组 (n =32 ) :A组 (对照组 )、B组 (IP组 )、C组 [腺苷 (Ade)组 ]、D组 [NO合成抑制剂N L 精氨酸甲基脂 (NAME)组 ]。其中各组的半数用于观察存活率 ,另一半用于移植肝脏再灌注 2h后取血及肝脏检测。结果　IP组和Ade组的 1周存活率、胆汁分泌量、抗氧化酶活力及血清NO水平均明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、肿瘤坏死因子(TNF)及肝组织中的过氧化物含量均明显低于对照组 (P <0 .0 5 )。肝组织损伤以窦状内皮细胞为主 ,并且是以凋亡的方式发生死亡 ,IP组和Ade组窦状内皮细胞损伤明显轻于对照组 (P <0 .0 0 1) ;NAME组的各种观察结果与对照组相近 (P >0 .0 5 )。结论　IP能够通过增加NO的合成来减轻再灌注早期窦状内皮细胞所受到的损伤 ,改善微循环 ,提高移植肝脏的功能。     

Inhibition of nitric oxide synthase reduces renal ischemia/reperfusion injury

BACKGROUND: The role of nitric oxide (NO) production because of inducible nitric oxide synthase (iNOS) in the pathogenesis of renal ischemia/reperfusion (I/R) injury is unclear. In this study the roles of both iNOS and NO were characterized in a rat model of renal I/R injury. In addition, the effect of iNOS inhibition on renal function was evaluated. METHODS: Sprague-Dawley rats underwent 45 min of left renal ischemia and contralateral nephrectomy followed by various periods of reperfusion and renal function analysis [plasma creatinine, fractional excretion of sodium (FENa), creatinine clearance (CrCl), and measurement of plasma and urine NO levels]. In addition, the effect of treatment with 1400W, a highly selective iNOS inhibitor, was evaluated. RESULTS: Renal dysfunction peaked at 48 h after reperfusion and immunohistochemistry studies revealed iNOS expression in the vasculature (3 h) and renal tubules (48 h) after reperfusion. Renal function improved significantly in treated animals compared to controls [creatinine of 1.1 v. 1.9 mg/dl (P < 0.05) and CrCl of 0.54 v. 0.31 ml/min (P < 0.05), respectively]. In addition, FENa was decreased by 50%, plasma NO levels were significantly lower (32.7 v. 45.7 micromol/L, P < 0.01), and deposition of nitrotyosine in the tubules of treated rats was less than in control animals. CONCLUSIONS: These data support the hypothesis that iNOS and NO are involved in the pathogenesis of renal I/R injury and suggests that use of iNOS inhibitors may be a valuable therapeutic strategy clinical situations where renal I/R may be prevalent.     

肢体远隔缺血后处理联合吗啡后处理增强对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

目的 评估联合应用肢体远隔缺血后处理(remote ischemic postconditioning,RIP)和吗啡后处理能否获得增强的心肌保护作用. 方法 采用大鼠在体心肌缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,I/RI)模型,采用随机数字表法将60只大鼠分为6组(每组10只):空白对照组(Sham组)、缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)组(I/R组)、缺血预处理(ischemic preconditioning,IPC)组(IPC组)、肢体RIP组(RIP组)、吗啡后处理组(M组)以及联合应用肢体RIP和吗啡后处理组(M+RIP组).实验中连续监测心律失常情况,计算缺血期和再灌注早期的心律失常评分,检测血清肌酸激酶同工酶(creatine kinase MB,CK-MB)和心脏肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponin Ⅰ,cTnⅠ)浓度,并采用伊文蓝和氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride,TTC)双重染色法测定心肌梗死面积. 结果 I/R组、IPC组、RIP组、M组和M+RIP组的心肌梗死面积分别是(56.0±9.1)％、(23.9±5.5)％、(40.4±11.1)％、(47.7±9.3)％和(27.2±6.7)％.与I/R组比较,M+RIP组再灌注早期心律失常发生率和心律失常评分、血清CK-MB和cTnⅠ浓度以及心肌梗死面积均明显降低(P＜0.05);这些参数在IPC组和M+RIP组之间差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 在大鼠在体心肌I/RI模型,联合应用肢体RIP和吗啡后处理可获得增强的心肌保护作用,其心肌保护作用类似于IPC.     

小儿先心病手术中心肌缺血再灌注损伤的肌钙蛋白I特异性变化

目的：探讨小儿先天性心脏病（先心病）矫治术后肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）的变化及与心肌细胞损伤程度的相关性。方法：1999年6月至2000年5月，45例先天性心脏畸形矫治术病儿中，男30例，女15例。随机分为3组，每组15例，Ⅰ组为心肌未缺血组；Ⅱ组心肌缺血时间大于60min组；Ⅲ组为心肌缺血时间大于60min。术前3组间病儿的性别、年龄、体重、身高、心胸比率及左心室功能无明显差别。分别于切皮前、开放循环后（Ⅰ组为手术结束后）30min，6、12、24、48、72、96、120、144h取病儿静脉血，检测肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、cTnⅠ；同时应用描记心电图判断是否心肌梗死出现。Ⅱ、Ⅲ组病儿应用光、电镜检测，观察开放循环后，心肌组织超微结构的变化。结果：cTnI活性随心肌缺血时间延长而明显增加，差异具有显著性，而在心肌无缺血损伤时变化不明显；Ⅱ、Ⅲ组CK-MB在术后24h内无明显差别，48h后出现显著性差异；LDH则随缺血时间延长活性有增加，但差异无显著性；且在心肌无缺血时，CK-MB、LDH的活性也发生变化。电镜下观察，随着缺血时间越长，Ⅲ组心肌超微结构明显改变，线粒体明显肿胀、肌浆网空泡化、肌丝断裂、核染色质周边化。术后3组病儿的心电图无明显改变。结论：cTnⅠ可以作为小儿先心病畸形矫治术中评价缺血再灌注损伤的敏感而特异指标，且其血浆浓度的改变与心肌缺血再灌注损伤程度呈正相关，为临床研究术中心肌保护效果提供可靠的依据。