Keap1-Nrf2-ARE通路在阿尔茨海默病发病机制中的潜在作用

<正>阿尔茨海默病(AD)是严重的全球健康问题,发病率很高,而其发病机制假说众多,有Aβ级联假说、胆碱能假说、Tau蛋白异常磷酸化假说、神经炎症假说、金属离子紊乱假说等,但仍未能有效解释AD的发病过程。越来越多的文献表明Keap1-Nrf2-ARE信号通路与AD的病理变化之间可能存在联系。Kelch样ECH相关蛋白1 (Keap1)-核因子红系2相关因子2(Nrf2)信号通路被认为是多器官防御氧化应激的关键调控过程。通过探讨Keap1-Nrf2-ARE信号通路如何调控氧化还原分子以及与AD的联系,这可能有助于发现AD的发病机制以及一些靶向此途径的化合物,也可能可以提供新的治疗策略。     

Keap1-Nrf2/ARE信号通路介导黄连素调节氧化应激改善小鼠糖尿病肾病

目的 采用小鼠糖尿病肾病的模型并结合氧化应激,探讨黄连素改善糖尿病并发症中肾脏病变的作用和机制。方法 将糖尿病肾病（DN）小鼠分别灌胃给予二甲双胍（0.2g/kg）、黄连素低、中、高剂量（0.036、0.072、0.144g/kg）8周。检测血清中相应指标;检测肾脏中活性氧（ROS）及超氧化物歧化酶（SOD）水平,Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1（Keap1）、核因子E2相关因子2（Nrf2）及还原型辅酶Ⅱ氧化酶4（NOX4）蛋白表达;检测24h尿蛋白等指标。结果 黄连素可显著降低DN小鼠血糖,增加胰岛素分泌,降低24h尿蛋白、血清尿素氮和肌酐、上调SOD和Nrf2水平,下调ROS、Keap1及NOX4水平。结论 黄连素具有改善小鼠糖尿病肾病的作用,且中、高剂量作用较优,其相关机制可能与调控Keap1-Nrf2/ARE信号通路,从而改善氧化应激有关。     

Keap1-Nrf2/ARE信号通路在糖尿病脑缺血中的保护作用

当糖尿病脑缺血发生时机体立即启动抗氧化应激机制,此时内源性Keap1-Nrf2/ARE信号通路被激活,调控下游多种细胞因子、蛋白酶体及Ⅱ相解毒酶对缺血缺氧脑细胞启动抗氧化应激保护机制,对受损的脑细胞给予相应保护。启动抗氧化应激后Keapl-Nrf2在细胞质中解离,随后Nrf2进入核内与ARE相结合抑制氧化应激引起的脑细胞、缺血半暗带损伤以及氧化应激诱导的胰岛素抵抗,从而达到对糖尿病脑缺血的神经保护作用。本文将初步阐述该通路在糖尿病脑缺血中的作用机制。     

顺铂对T24膀胱癌细胞Keap1-Nrf2通路的影响

目的:探讨顺铂对人膀胱移行癌细胞(T24细胞)Keap1-Nrf2信号通路的影响。方法:分别将对照溶媒及浓度为0.1、1、10、30、90μg/m L顺铂溶液加入T24细胞进行培养24 h,用MTT法检测顺铂对T24细胞增殖抑制作用及半数抑制浓度IC50;对顺铂处理24 h后T24细胞胞质蛋白和细胞核蛋白进行提取,Western blotting分析T24细胞核内Nrf2蛋白表达情况,胞质Keap1蛋白表达情况和胞质典型二相酶GSTP1、NQO1的表达情况。结果:顺铂可明显抑制T24细胞增殖,半数抑制浓度IC50为37.74μg/m L;加入顺铂共培养后的T24细胞胞质Keap1蛋白表达量降低,核内Nrf2蛋白质、胞质内二相酶GSTP1、NQO1的表达量升高。结论:顺铂可激活Keap1-Nrf2信号通路,使T24细胞内Nrf2介导典型二相酶的表达升高。     

Nrf2-ARE信号通路在帕金森病中的作用

核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor2,Nrf2)/抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)信号通路是一种受氧化还原信号调节的重要抗氧化通路,其通路的激活在调控氧化应激、维持线粒体功能、抑制多巴胺能神经元铁死亡及恢复神经元功能等方面发挥重要作用,已逐渐成为近几年来帕金森病(Parkinson’s disease, PD)研究的热点。本文通过对近些年有关Nrf2-ARE通路的结构、功能及其在PD治疗中作用机制的实验结论进行分析、总结,为进一步明确其与氧化应激在PD发生发展中的关系、开发新的靶向Nrf2-ARE通路的PD相关治疗药物提供思路。     

褐藻素通过调控Nrf2/Keap1通路缓解糖尿病大鼠心肌肥大

目的 探索褐藻素（FX）对糖尿病心肌病的保护效应和作用机制。方法 腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,进行分组：糖尿病组（DM）、褐藻素干预糖尿病组（DM+FX）和二甲双胍干预糖尿病组（DM+Met）,另取正常大鼠给予正常喂养作为正常组（Con）。造模成功后连续12周每日灌胃给药,褐藻素组每日给予200 mg/kg褐藻素灌胃,二甲双胍组每日给予230 mg/kg灌胃,糖尿病组同步灌胃生理盐水。HE染色观察各组大鼠心脏细胞肥大情况;Western blot法检测大鼠心脏中纤维化蛋白TGF-β1和FN蛋白表达水平。H9C2细胞分为3组：正常糖组（NG,5.5 mmol/L葡萄糖）、高糖组（HG,45 mmol/L葡萄糖）和褐藻素干预高糖组（HG+1 μmol/L FX）。FITC标记的鬼笔环肽检测大鼠心肌细胞H9C2表面积变化;qRT-PCR法测定各组细胞肥大因子ANP、BNP和β-MHC基因表达变化;Western blot法检测各组大鼠心脏组织和H9C2细胞中Nrf2、Keap1、HO-1、SOD1蛋白表达水平;DCFH-DA探针检测细胞内活性氧水平变化。结果 褐藻素改善糖尿病大鼠心肌纤维化和心肌细胞肥大,同时上调心脏组织中Nrf2和HO-1蛋白表达,抑制Keap1蛋白表达（P<0.05）。褐藻素可抑制高糖诱导H9C2心肌细胞表面积增加,降低ANP、BNP和β-MHC的mRNA表达水平（P<0.05）。褐藻素可促进高糖诱导的H9C2细胞中Nrf2入核,上调下游靶蛋白SOD1和HO-1蛋白表达（P<0.05）来增强细胞抗氧化能力,降低细胞内活性氧的水平。结论 褐藻素具有良好的抗糖尿病心肌纤维化和心肌细胞肥大作用,同时上调Nrf2信号通路并促进下游抗氧化蛋白SOD1和HO-1的表达,降低活性氧水平。     

Nrf2-ARE信号通路影响糖尿病心肌梗死氧化应激的机制研究

目的：对糖尿病心肌梗死大鼠氧化应激进行研究,探讨Nrf2-ARE信号通路在其中的作用机制。方法：取清洁级别SD雄性大鼠共60只,对40只行2型糖尿病模型制备,取20只进入糖尿病组(DM组),20只进行前降支结扎制备成糖尿病合并心肌梗死模型进入糖尿病合并心肌梗死组(DMI组),余20只健康大鼠作为空白组。喂养1 w后,对三组大鼠的心肌组织活性氧(ROS)、活性氮(RON)及过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、血红素氧化酶1(HO-1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)表达情况进行比较,对Nrf2-ARE信号通路与糖尿病心肌梗死大鼠氧化应激的相关性应用Pearson法进行分析。结果：DM组和DMI组大鼠心肌组织HO-1、Nrf表达水平与空白组相比较呈逐渐降低,且DMI组降低更为显著(F=28.432、20.501,均P<0.001);DM组和DMI组大鼠心肌组织ROS、RON、CAT、SOD表达水平与空白组相比较呈逐渐升高,且DMI组升高更为显著(F=25.922、41.336、75.895、27.423,均P<0.001);Pearson法分析结果表明,糖尿病心肌...     

益气活血法治疗气虚血瘀型IgA肾病机理探讨

IgA肾病是最为常见的原发性肾小球疾病,国内发病率占原发性肾小球疾病的35%~55%。其病理特征为以IgA或IgA为主的免疫复合物在肾小球系膜区沉积,临床表现为反复发作的镜下血尿或肉眼血尿、不同程度的蛋白尿,可伴有水肿及高血压,甚至出现肾功能不全。IgA肾病无专门的中医病名,通常根据患者临床表现的不同,将其归属于“尿血”、“尿浊”、“水肿”、“腰痛”等范畴。中医学认为IgA肾病的病机为本虚标实,气虚及瘀血阻络是最为常见的证型,益气活血法可贯穿IgA肾病治疗的始终。现本文就益气活血法治疗气虚血瘀型IgA肾病的机理进行探讨,旨在为IgA肾病的临床治疗提供思路。     

益气活血法治疗糖尿病肾病的研究新进展

从三个方面论述益气活血法治疗糖尿病肾病中医研究新进展，即发病研究、临床研究、基础研究。指出益气活血法在临床上治疗糖尿病肾病中取得了明显疗效，值得推广。     

益气养阴活血通络方治疗2型糖尿病肾病临床研究

目的:观察益气养阴活血通络方治疗2型糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者的临床疗效,分析其对患者血清胱抑素C、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及血尿酸的影响。方法:70例2型糖尿病肾病患者随机均分为观察组和对照组。对照组给予常规西医基础治疗,观察组则在此基础上给予益气养阴活血通络方。比较两组临床疗效,分析两组治疗前后血清胱抑素C、TNF-α、血尿酸及微量白蛋白的变化。结果:两组临床疗效相比,观察组治疗后显效率和有效率均显著高于对照组(χ~2=4.24、9.55,P0.05);治疗后两组的空腹血糖、餐后2小时血糖、血尿氮和血肌酐较治疗前均有所改善,但组间比较,差异无统计学意义(P0.05);治疗后,观察组各指标较治疗前均下降显著(P0.05),且与对照组相比,差异有统计学意义(P0.05),对照组仅血清胱抑素C较治疗前有明显下降(P0.05)。结论:益气养阴活血通络方治疗DN可有效提高疗效,降低血清胱抑素C、TNF-α和血尿酸水平,改善患者肾脏功能并缓解病情。     

益气活血泄浊方治疗中晚期糖尿病肾病临床研究

目的:观察益气活血泄浊方治疗糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的临床疗效。方法:45例Ⅲ~Ⅳ期DN患者随机分为对照组(常规治疗)、中药组(常规治疗+益气活血泄浊方)、肾衰宁组(常规治疗+肾衰宁颗粒),每组15例,2个月为1个疗程,共3个疗程,并随访2个月。结果:中药组治疗后,中医证候疗效及积分显著升高,24小时尿蛋白定量、尿微量白蛋白(urinary microalbumin,UAER)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、空腹血糖(fasting blood-glucose,FBG)、餐后2小时血糖(2 hour postprandial blood glucose,2 h PG)、糖化血红蛋白水平(hemoglobin A1c,HbA1c)、收缩压(systolic blood pressure,SBP)、舒张压(diastolic blood pressure,DBP)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDLC)、转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)、尿单核细胞趋化蛋白-1(urine monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)、肾血浆流量(renal plasma flow,RPF)显著降低,高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDLC)显著升高,中药组以上指标与另外两组相比,差异均具有统计学意义(P0.05),丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotrnsferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartic aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)无显著性差异。结论:益气活血泄浊方治疗中晚期DN疗效显著,能够延缓病情,提高肾脏功能。     

益气养阴补肾活血方治疗早期糖尿病肾病的临床研究

目的:观察益气养阴补肾活血方治疗早期糖尿病肾病的临床疗效。方法:将100例早期糖尿病肾病患者按随机数字表法分为对照组和观察组,每组各50例。对照组给予常规西医治疗,观察组在对照组的基础上给予益气养阴补肾活血方治疗,比较两组临床治疗有效率、治疗前后血管内皮素水平(ET)、24小时尿蛋白定量(Upro)、糖化血红蛋白(HbAlC)、血脂水平及不良反应发生率。结果:对照组有效率为64.00%,观察组有效率为94.00%,两组有效率比较,差异有统计学意义(P<0.01);经治疗后,观察组与对照组ET、Upro、HbAlC、总胆固醇及三酰甘油水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组不良反应发生率为24.00%,观察组为10.00%,两组不良反应发生率比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:益气养阴补肾活血方剂治疗早期糖尿病肾病疗效显著,安全性高。     

早期2型糖尿病肾病患者加用益气活血补肾方治疗前后的肾脏超声动态变化的观察

目的观察益气活血补肾方治疗早期2型糖尿病肾病患者肾脏超声的动态变化。方法参照MogenSen诊断标准,选择2型糖尿病肾病Ⅲ期患者作为研究对象,对照组给予常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上加用益气活血补肾方治疗,治疗时间为4个月。检测患者尿微量白蛋白,作为判断疗效的依据;同时,采用彩色多普勒超声观察肾脏主肾动脉（master renal arteries,MRA）、肾锥体叶间动脉（interlobar renal arteries,IRA）及肾窦部段动脉（segmental renal arteries,SRA）的收缩期最大流速（systolic velocity,Vs）、舒张期最低流速（diastotic velocity,Vd）、血流阻力指数（resistance index,RI）。结果治疗组患者尿微量白蛋白取得更好的控制效果,肾脏彩色多普勒超声提示MRA、IRA及SRA的Vs、Vd、RI改善程度明显好于对照组。结论加用益气活血补肾方治疗可以有效的提高早期2型糖尿病肾病患者的肾脏血流灌注,抑制病情进展。     

从“治未病”角度探讨糖尿病肾病的防治

从＂未病先防＂和＂既病防变＂两个方面探讨＂治未病＂理论在糖尿病肾病防治中的作用,以期延长糖尿病患者的寿命,提高糖尿病患者的生活质量。     

AGEs-RAGE信号通路在糖尿病肾病中的作用机制及中医药研究进展

糖尿病肾病是临床常见的糖尿病并发症,是导致终末期肾脏病的主要原因之一,也是糖尿病患者致死的重要因素之一。晚期糖基化终末产物(advanced glycosylation end products,AGEs)-糖基化终末产物受体(receptor of AGEs,RAGE)信号通路是糖尿病肾病发生发展的重要一环,在糖尿病肾病中的作用机制主要有激活核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB),刺激产生血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF),刺激转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的产生,诱导单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)表达的增强,激活P21肾素-血管紧张素导致细胞功能紊乱,激活烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶引起氧化应激等。中医药治疗糖尿病肾病具有整体调节和多通道、多靶点的优势,可通过阻断AGEs-RAGE信号通路改善糖尿病肾病进展。目前研究存在的问题主要有:AGEs-RAGE下游机制复杂,未完全阐明,其与一些关键因子如NF-κB、VGEF、TGF-β1、MCP-1基因的关系还有待进一步研究证实;单味中药和中药复方的活性成分治疗糖尿病肾病的临床研究和动物实验较多,但针对AGEs-RAGE信号通路的研究较少;目前实验大多于体外进行,其机制和作用靶点尚未明确。今后的研究中,需进一步完善实验设计,深入了解AGEs-RAGE信号通路的作用机制,以期为糖尿病肾病的中西医结合治疗提供一定参考。     

益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠肾功能及足细胞的影响

[目的]观察益气养阴活血方(Yiqi Yangyin Huoxue Recipe)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾功能及足细胞的影响。[方法]将32只雄性SD大鼠随机分为正常组和DN造模组,DN造模组采用腹腔注射链脲佐菌素(strepotozotocin,STZ)方法制备DN大鼠模型。将造模成功的24只大鼠均分为模型组、中药组和厄贝沙坦组。中药组以益气养阴活血方水煎液10mL/(kg·d)灌胃,厄贝沙坦组以厄贝沙坦混悬液10mL/(kg·d)灌胃,正常组和模型组予以等体积的蒸馏水灌胃。8周后处死大鼠,并分别检测肾脏指数(kidney index,KI)、空腹血糖(fasting blood-glucose,FBG)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平;电镜观察肾小球足细胞超微结构变化。[结果]与正常组比较,模型组KI明显增高(P0.01);与模型组比较,中药组和厄贝沙坦组KI降低(P0.01)。与模型组比较,中药组和厄贝沙坦组大鼠FBG、SCr和BUN水平显著降低(P0.01,P0.05)。与正常组比较,电镜下模型组肾小球基底膜明显增厚,基底膜内有少量电子致密物沉积,足细胞数量减少,足突广泛融合甚至消失,足突裂孔数减少,细胞质中线粒体减少、空泡变性、脂滴沉积;中药组基底膜与正常组相近,足细胞损伤较模型组和厄贝沙坦组轻,形态上总体规则,仅有足突部分融合;厄贝沙坦组基底膜部分增厚,足突部分融合甚至消失。[结论]益气养阴活血方能有效降低DN大鼠FBG水平,改善DN大鼠肾功能,并且减轻足细胞损伤程度从而减缓肾脏病变进程,提示其对肾脏具有保护作用。