Caapaae-3抑制剂对新生鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的：观察Caspase-3特异性肽类抑制剂AC-DEVD-CHO(acetyl-Asp-Glu-Val-Asp-aldehyde)对新生鼠缺氧缺血脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage．HIBD)的疗效。方法：建立HIBD模型后予新生鼠不同剂量AC-DEVD-CHO脑室注射，24h后用四肽荧光底物法检测鼠脑Caspase-3活性，确定最佳剂量。通过病理学、原位细胞凋亡检测等考察AC-DEVD-CHO对HIBD的疗效。结果：HIBD新生鼠患侧脑组织Caspase-3活性随注射AC-DEVD-CHO剂量增加而递减。至300—400ng时。差别已不明显。AC-DEVD-CHO 300ng治疗组HIBD新生鼠脑皮质、海马神经细胞凋亡百分率(30．2&;#177;11．2)％较生理盐水组(44．6&;#177;12．4)％明显降低。结论：Caspase-3抑制剂对新生鼠HIBD具有脑保护作用。     

脐血单个核细胞移植后缺氧缺血性脑损伤新生鼠组织学及远期行为学的改善

背景:脐血单个核细胞移植治疗缺血性脑损伤的研究多集中于成体脑卒中模型,且涉及脑内移植后细胞存活和脑损伤鼠远期疗效的文献甚少.目的:观察脐血单个核细胞侧脑室移植后,缺氧缺血性脑损伤新生鼠远期学习记忆能力、感觉运动功能及脑神经元数目的变化.设计、时间及地点:细胞学体内观察,于2006-12/2007-09在潍坊医学院分子影像学研究中心完成.材料:脐血来源于健康、足月妊娠产妇,由潍坊医学院附属医院产科提供,产妇均签署知情同意书.清洁级健康7 d龄SD新生鼠36只,随机分为正常对照组、脑损伤组、细胞移植组,12只/组.方法:Ficoll法分离培养脐血单个核细胞,移植前3 d体外行BrdU标记.脑损伤组、细胞移植组新牛鼠建立缺氧缺血性脑损伤模犁,造模后24 h,细胞移植组新生鼠于左侧侧脑室注入脐血单个核细胞悬液,共1x105个活细胞.正常对照组不做任何处理.主要观察指标:通过放射性迷宫检测新牛鼠空间学习记忆能力,通过足错误试验、肢体放置试验来检测新牛鼠感觉运动功能.采用免疫荧光法检测脐血单个核细胞脑内移植情况,尼氏染色榆测脑皮质与海马CA1区的神经元数量.结果:36只鼠均进入结果分析.移植后4周与脑损伤组比较,细胞移植组平均觅水时间缩短(P＜0.05),记忆错误次数减少(P＜0.01),两侧足错误次数芹值及两侧爪放置得分的差值均明显降低(Q=6.368,P＜0.01),但仍未达到正常水平.移植后8周鼠脑皮质BrdU阳性细胞广泛存在,细胞移植组脑皮质及海马CA1区神经元数量明显高于脑损伤组(P＜0.05或0.01).结论:脐血单个核细胞侧脑室移植可减轻缺氧缺血性脑损伤,显著改善脑损伤鼠的远期学习记忆及感觉运动功能,具有神经保护作用.     

雌激素对新生鼠缺氧缺血性脑损伤侧脑室区神经干细胞表达的影响

目的:观察雌激素对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)侧脑室区内源性神经干细胞表达的影响.方法:健康雄性7日龄SD大鼠80只,随机分为5组(n＝8):对照组(假手术组),缺氧缺血性脑损伤模型加橄榄油组,缺氧缺血性脑损伤模型加低浓度雌激素(10 μg/kg·d)组,缺氧缺血性脑损伤模型加中浓度雌激素(100 μg/kg·d)组,缺氧缺血性脑损伤模型加高浓度雌激素(1000 μg/kg·d)组,建立雌激素干预的浓度梯度.使用雌激素各组大鼠在制备缺氧缺血性脑损伤模型后给与每天1次颈部皮下注射雌激素,连用3天.同时,橄榄油组给与橄榄油做空白对照.取大鼠缺氧缺血性脑损伤后3天,7天为观察点.通过组织免疫荧光化学染色法,使用异硫氰酸荧光素(FITC)作为荧光二抗,检测大鼠侧脑室区神经干细胞标志物巢蛋白表达情况.结果:各组在荧光显微镜下侧脑室区均可见神经干细胞标志物巢蛋白存在所激发的绿色荧光.大鼠缺氧缺血性脑损伤后3天,对照组可见微弱的绿色荧光.与对照组比较,缺氧缺血性脑损伤模型加橄榄油组荧光增强(P＜0.05);使用雌激素各组雌激素浓度增加,绿色荧光明显增强(P＜0.01),高浓度雌激素组荧光强度最高.大鼠缺氧缺血性脑损伤后各组7天与3天比较,荧光强度减弱(P＜0.05),但组间变化趋势一致.结论:新生鼠侧脑室区有神经干细胞存在,缺氧缺血性脑损伤后有神经干细胞的增殖反应,以3天显著,7天时呈减弱趋势.雌激素对神经干细胞的增殖反应有促进作用.     

缺氧预处理对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠神经干细胞增殖的影响

目的探讨缺氧预处理（HPC）对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠神经干细胞增殖的影响,为HPC的保护机制提供依据。方法48只7d龄新生SD大鼠,随机分成4组：缺氧缺血组、HPC＋缺氧缺血组、假手术组、正常对照组,每组12只。缺氧缺血组在当天先行左侧颈总动脉结扎术,然后放入缺氧装置吸入8％氧气和92％氮气的混合气体2．5h,建立HIBD动物模型。HPC＋缺氧缺血组在术前1d先行HPC,即将大鼠放人密闭容器中通人8％氧气和92％氮气混合气体3h,第二天再依次同法建立HIBD动物模型。假手术组仅分离左侧颈总动脉,不结扎,也不做HPC。正常对照组未做任何处理。在建立动物模型后48h将全部动物同时处死。对各组新生大鼠脑皮质、室管膜下区、海马区的神经干细胞增殖的标记物一巢蛋白（nestin）的表达进行观察。结果HPC＋缺氧缺血组在皮质、室管膜下区、海马区nestin阳性细胞数量明显多于其他3组（P〈0．01或P〈0．05）,缺氧缺血组nestin阳性细胞数量也多于对照组与假手术组（P均〈0．05）,对照组nestin阳性细胞数量与假手术组比较无统计学差异（P〉0．05）。结论HPC对HIBD具有保护作用,可增加HIBD新生大鼠神经于细胞的增殖,以增加脑损伤的康复能力。     

高压氧对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的 从组织形态学和行为学来探讨高压氧（HBO）对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）的保护作用。方法 将117只健康7日龄Sprague—Dawley新生大鼠随机分为正常对照组（CON组）、HIBD组、高压空气治疗组（HBA组）和高压氧治疗组（HBO组）。采用Rice法制作HIBD模型。HBO组和HBA组于缺氧缺血处理后即行HBO或高压空气治疗，每天1次，共治疗7d。大鼠9日龄时采用原位缺口末端标记法（TUNEL法）检测皮质和海马细胞凋亡情况，14日龄时检测左／右脑重比值及体重增长率，30日龄时进行放射型迷宫觅水测试，试验结束后（35日龄）采用Nissl染色法检测海马CA1区锥体细胞密度。结果 ①HIBD组体重增长率和左／右脑重比值均明显低于CON组（P〈0．01）；HBA组与HBO组治疗后体重增长率均无明显改善，但左／右脑重比值均明显增加，尤其是HBO组（P〈0．01）。②与CON组比较，HIBD组皮质和海马中均存在大量的凋亡细胞，CA1区锥体细胞密度明显下降（均P〈0．01）；与HIBD组比较，HBO组凋亡细胞明显减少，CA1区锥体细胞密度明显增加（均P〈0．01）；HBA组凋亡细胞和CA，区锥体细胞密度均无明显改变。③行为学检测结果显示，HIBD组觅水时间、错误次数和重复次数均明显高于CON组（P〈0．05）；HBO组各项指标均明显低于HIBD组（P〈0．05），而HBA组改善不明显。结论 HBO治疗在近期内能够减轻脑组织缺血后损伤，对远期学习记忆功能的恢复也有良好的促进作用。     

促红细胞生成素对新生鼠缺氧缺血性脑损伤细胞凋亡的影响

目的：观察给予外源性重组人红细胞生成素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经细胞凋亡的影响。 方法：实验于2005—03／06在解放军第四军医大学病理实验室进行。①取新生7dSD大鼠72只，随机分为3组（n=24），假手术组、模型组和促红细胞生成素组，各组又分为造模后6，24，48，72h组4个亚组，每组6只大鼠。②促红细胞生成素组和模型组大鼠结扎右颈动脉，手术后即刻分别腹腔内注射重组人红细胞生成素注射液（10U／g）及同体积生理盐水，手术后2h两组大鼠吸人体积分数为0．08氧气和体积分数为0.92氮气的混合气体2h，建立缺氧缺血脑损伤新生鼠模型及促红细胞生成素治疗模型。假手术组分离动脉不结扎，不缺氧。③各组大鼠在造模后相应时间点断头处死，采用TUNEL法检测大脑海马区神经细胞凋亡情况。 结果：经补充后72只进入结果分析。①模型组6h右侧海马CA1区出现凋亡细胞[（19．10&;#177;5．90）个]，24h显著增高，48h达高峰[（65．70&;#177;8．33）个]后逐渐下降，但72h仍高于假手术组[（28．70&;#177;5．74），（0．60&;#177;0．84）个，F=71．587，P〈0．01]。②促红细胞生成素组各个时间点CA1区的凋亡细胞数均少于模型组（P〈0．01），尤其在24h最明显[（28．20&;#177;7．77），（60．30&;#177;7．75）个，t=-9．251，P〈0．01]。 结论：外源性重组人红细胞生成素能抑制缺氧缺血性脑损伤后的神经细胞凋亡，对脑组织确有保护作用。     

促红细胞生成素干预缺氧缺血性脑损伤新生鼠神经干细胞巢蛋白的表达

背景:巢蛋白是一种存在于神经干细胞的特异性抗原,在神经系统发生病变或损伤引起再生时广泛表达,因此巢蛋白表达常用作判定神经系统发生病变或损伤后能否促进神经再生的一种手段.目的:从神经再生和神经干细胞激活的角度,探讨外源性促红细胞生成素对新生鼠缺氧缺血性脑损伤后神经干细胞巢蛋白表达的影响.方法:结扎大鼠右侧颈总动脉和8%低氧暴露2 h制备新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型.对照组仅游离右侧颈总动脉,不予结扎和缺氧处理.干预组大鼠缺氧缺血后立即腹腔注射重组人促红细胞生成素5 000 IU/kg,1次/d,连用3 d.缺氧缺血性脑损伤组大鼠缺氧缺血后连续腹腔注射等量生理盐水溶液3d.每组随机取8只分别于术后4,7,14d处死.应用免疫组化方法和计算机图像分析技术检测不同时点海马齿状回巢蛋白标记阳性细胞的变化.结果与结论:各时点缺氧缺血性脑损伤组巢蛋白阳性细胞数较对照组增加(P<0.05);各时点干预组巢蛋白阳性细胞较对照组和缺氧缺血性脑损伤组均增加(P<0.05).3组大鼠海马齿状回区巢蛋白阳性细胞数均于术后7 d达高峰.结果提示早期给予重组入促红细胞生成素可促使新生鼠缺氧缺血性脑损伤后海马齿状回区巢蛋白表达增加,促进神经干细胞的增殖再生,在缺氧缺血性脑损伤后神经再生、修复中发挥一定的保护作用.     

高压氧治疗对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠内源性神经肝细胞增殖的影响

目的探讨高压氧（HBO）治疗缺氧缺血性脑损伤新生大鼠后,内源性神经干细胞增殖的动态变化。 方法将7日龄Sprague-Dawley新生大鼠随机分为正常对照组（对照组）、缺氧缺血脑损伤组（模型组）与HBO治疗组（HBO组）。采用经典的Rice-Vannucci法制作缺氧缺血性脑损伤模型,HBO组在脑损伤后3 h内进行HBO治疗,治疗压力为2个绝对大气压,稳压60 min,每日1次,连续7 d。分别于HBO治疗后第3小时、第21小时、第3天、第7天和第14天,采用5-溴-2-脱氧脲苷（BrdU）/巢蛋白免疫荧光双重标记法动态检测缺血侧侧脑室室管膜下区与海马齿状回内源性神经干细胞增殖的动态变化;采用Western blot法检测缺血侧大脑半球巢蛋白的动态变化。 结果HBO组室管膜下区与海马齿状回BrdU+/巢蛋白标记的神经干阳性细胞数分别于HBO治疗后第3小时及第21小时显著增加,第7天达最高水平,并显著高于模型组和对照组（P<0.01）,第14天BrdU+/巢蛋白阳性细胞数开始下降,仍高于模型组和对照组（P<0.01）;巢蛋白的Western blot分析发现,缺血侧大脑半球巢蛋白于HBO治疗后第21小时开始增加,第7天达峰值后下降。 结论缺氧缺血性脑损伤后3 h内给予HBO治疗,可以促进缺氧缺血性脑损伤新生大鼠内源性神经干细胞的增殖。     

缺氧缺血性脑损伤鼠半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1的表达及其意义

目的研究新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)mRNA的表达及其意义.方法将112只新生7 d Wistar大鼠随机分为假手术对照组以及HIBD后3、8、24 h以及3、6和14 d组,每组16只.其中8只应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测病变侧脑皮质caspase1 mRNA的表达情况;另外8只进行脑组织苏木素-伊红(HE)染色,在光镜下观察脑组织病理变化.结果假手术对照组中有少量caspase-1 mRNA表达,HIBD 24 h组其表达水平开始增加(与假手术对照组比较P<0.01),6 d达高峰(与其余各组比较P均<0.01),14 d时其表达下降,但仍高于假手术对照组(P<0.01).组织病理学检查发现,HIBD后24 h～6 d神经元大量变性、坏死、丢失,同时胶质细胞显著增生.结论 HIBD后caspase-1 mRNA的表达增加,其变化规律与光镜观察到的脑损伤进展时间完全吻合,提示caspase-1可能参与了新生鼠HIBD的病理损伤过程.     

硫酸镁对新生儿缺氧缺血性脑损伤的保护作用研究

目的观察硫酸镁对新生儿缺氧缺血性脑损伤(HIBD)是否有保护作用。方法对93例新生儿HIBD随机分为硫酸镁治疗组和对照组,于生后7、14天进行行为神经测定评价,并评估心、肾、肺功能损害情况。结果治疗组较对照组神经功能明显改善,且重要脏器功能损害发生率减少。结论硫酸镁对HIBD神经损伤具有显著的保护作用,值得临床推荐。     

缺血缺氧性脑病致部分图画失认症1例报道

报道1例缺血缺氧性脑病导致部分图画失认伴其他认知功能障碍患者.     

脑微血管内皮细胞黏附分子表达与缺血性脑损伤研究进展

脑微血管内皮表达的细胞黏附分子在生理上参与脑组织正常结构和功能的维持，保证内皮细胞层的连续性、通透血脑屏障等功能．在病理过程中具有介导炎性细胞向正常或炎症组织移动或定位等功能．其中由脑微血管内皮细胞表达的免疫球蛋白超家族和选择素家族两类黏附分子与缺血性脑损伤的发生、发展有密切关系。作者对脑微血管内皮细胞表达的黏附分子与缺血性脑损伤的研究进展进行了综述。     

缺氧缺血性脑损伤后针康法对幼鼠学习记忆能力及海马微管相关蛋白-2表达的影响

目的探讨针康法对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)幼鼠学习记忆能力及海马微管相关蛋白-2(MAP-2)的影响.方法将80只Wistar幼鼠随机分为5组:假手术组、模型组、头穴丛刺组、环境刺激组和针康组,每组16只.每组再按造模后14 d、28 d分别处死分为2个亚组,每组8只.采用结扎左侧颈总动脉,吸入氧体积浓度为8%的氧氮混合气体,制作HIBD新生动物模型.采用Morris水迷宫评价幼鼠学习、记忆能力,免疫组化法检测海马MAP-2阳性细胞的表达.结果水迷宫实验结果显示:模型组逃避潜伏期时间延长,穿台次数减少.在定位航行、空间探索能力方面头穴丛刺组、环境刺激组和针康组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05).在定位航行、空间探索能力方面针康组分别与头穴丛刺组、环境刺激组比较有统计学意义(P<0.05).免疫组化榆结果显示:头穴丛刺组、环境刺激组、针康组海马CA1区MAP-2的表达均多于模型组(P<0.05),海马CA1区MAP-2表达针康组较头穴从刺组、环境刺激组表达增加(P<0.05).结论针康法能提高HIBD幼鼠学习记忆能力,其分子机制可能与海马CA1区MAP-2阳性细胞的表达水平增加有关.     

新生幼鼠缺血缺氧性脑损伤模型的实验研究

目的探讨缺血缺氧脑损伤的新生鼠功能及形态学改变情况。方法出生7 d的健康Wistar幼鼠25只,分为对照组(n=12)和模型组(n=13)。模型组结扎一侧颈总动脉,置8%氧气、92%氮气缺氧箱内2 h,对照组切开幼鼠颈部皮肤后缝合,不置于缺氧环境。出生4周时进行行为学、水迷宫及病理学检测。结果模型组后足重复间距长于对照组(P<0.05),平衡木通过时间明显长于对照组(P<0.01);水迷宫实验逃避潜伏期明显长于对照组(P<0.01)。大体观察发现,模型组损伤侧脑组织体积变小、萎缩。HE染色发现,损伤侧脑室周围细胞肿胀,细胞数量较对侧少;损伤侧大脑皮层神经细胞明显减少,神经细胞变性坏死,胶质细胞反应性增生。结论应用一侧颈总动脉结合缺氧的方法可复制新生乳鼠缺血缺氧模型。     

纳络酮加脑活素治疗新生儿缺氧缺血性脑病

目的 :观察纳络酮加脑活素治疗新生儿缺氧缺血性脑病 (HIE)的临床疗效。方法 :将本院出生的 10 3例HIE新生儿随机分为治疗组 5 2例 ,对照组 5 1例。对照组在综合治疗的基础上加用脑活素治疗。治疗组在对照组的基础上再给予纳络酮 ,两组脑活素用法均为 5ml加入 10 %葡萄糖 5 0ml,静脉滴注 ,1次 /d ,疗程 14d ;治疗组纳络酮0 .1mg/kg·d-1,加入 10 %葡萄糖 5 0ml,静脉滴注 ,疗程 7d ;观察近期疗效。结果 :治疗组显效 2 9例 ,有效 2 0例 ,无效 3例 (其中死亡 1例 ,放弃治疗 2例 ) ,有效率 94 % ;对照组显效 2 2例 ,有效 16例 ,无效 13例 (其中死亡 4例 ,放弃治疗 9例 ) ,有效率 74 % ,两组总有效率相比差异有高度显著性 (χ2 =7.6 6 ,P <0 .0 1)。结论 :纳络酮加脑活素联合治疗新生儿HIE疗效显著优于单用脑活素     

拉莫三嗪治疗新生大鼠缺氧缺血性脑水肿的实验研究

拉莫三嗪(Lamotrigine,LTG)是一种强效抗癫痫药,实验研究表明LTG可对脑外伤、神经变性疾病及癫痫持续状态等导致的神经损害产生保护作用[1-3]。但对新生鼠缺氧缺血性脑水肿的作用未见报导。本实验通过建立新生鼠缺氧缺血性脑损伤的动物模型,研究LTG对缺氧缺血24h脑水肿的治疗作     

Tei指数在新生儿窒息后心肌损害中的临床应用价值

目的探讨Tei指数评价新生儿窒息后心肌损害患儿心脏功能及其临床意义。方法行常规超声心动图检查测量正常足月新生儿60例、重度窒息和轻度窒息后心肌损害足月新生儿生后24-48h内各40例的左心室射血分数（EF）、二尖瓣口舒张期血流E峰、A峰及E／A比值、左心室Tel指数。结果Tel指数重度窒息组较轻度窒息组及正常对照组明显增高（P均〈0．01）,轻度窒息组较正常对照组明显增高（P〈0．01）;重度窒息组、轻度窒息组及正常对照组的EF、E峰、A峰及E／A值比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Tei指数能简便、敏感地检测新生儿窒息后心肌损害患儿左心室的整体收缩与舒张功能。     

A NeuroD1 AAV-Based Gene Therapy for Functional Brain Repair after Ischemic Injury through In Vivo Astrocyte-to-Neuron Conversion

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