Kidd血型简介

195 1年Ａｌｌｅｎ在一新生儿溶血病患儿的母亲血清中发现一新的抗体 ,称抗 Ｊｋａ,检出相应的Ｊｋａ 抗原。该母亲姓Ｋｉｄｄ ,故被称为Ｋｉｄｄ血型。 195 3年检出Ｋｉｄｄ血型中的另一个抗原Ｊｋｂ,家系调查表明这两个抗原受控于同一座位上的二个显性基因。 195 9年Ｐｉｎｋ     

Kidd血型系统研究进展

Kidd(JK)血型是一种重要的红细胞血型系统,JK抗体结合补体产生溶血会导致严重的迟发性溶血性输血反应和新生儿溶血症,从分子水平了解Kidd血型的基因结构有助于对其正确定型和及早防治新生儿溶血症。近期的研究还表明,JK蛋白多肽链起着尿素转移因子作用,可能与肾单位尿素浓缩功能有关。本文主要对Kidd血型系统的蛋白质、基因结构以及基因分型方法等进行综述。     

广州地区Kidd血型系统基因频率调查

1951年Allen在1例新生儿溶血病中发现抗-Jka,1953年发现其对偶抗体抗-Jkb,随后发现这是一个独立的血型系统,命名为Kidd系统.我国已有Kidd系统血清学分型的研究文献,至今尚未见采用PCR-DNA技术分型的报告.笔者从基因水平分析广州地区中国汉族Kidd血型的多态性及特殊性.     

Kidd血型系统研究进展

Kidd(JK)血型是一种重要的红幼儿因型系统,JK抗体结合补体产生溶血会导致严重的迟发性溶血性输血反应和新生儿溶血症,从分子水平了解Kidd血型的基因结构有助于对其正确定型和及早防治新生儿溶血症,近期的研究还表明,JK蛋白多肽链起着尿素转移因子作用,可能与肾单位尿素浓缩功能有关,本文主要对Kidd血型系统的蛋白质,基因结构以及基因分型方法等进行综述。     

浙江汉族Kidd血型基因分型

?Kidd血型的鉴定多采用间接抗人球蛋白试验,且抗血清价格不菲.1994年,Oliv es等[1,2]克隆了编码尿素转移因子的HUT11 cDNA,并证实此即为编码Kidd血型系统抗原的Jk 基因.Jk基因位于18q12～21,Jka和Jkb在基因水平为G838A 变异,在蛋白质水平为Asp28 0Asn变异.笔者根据这一多态性,应用基因分型方法对浙江汉族Kidd血型基因频率进行了调查,现报道如下. 1 材料与方法     

流式细胞术检测弱表达D抗原的探讨

曾有报道采用流式细胞术定量分析红细胞膜D抗原密度(D antigen density),为此提出采用敏感的流式细胞术常规检测D抗原弱阳性表型,本研究旨在探讨其可行性。2010年至2011年间采用盐水法、间接抗人球蛋白试验(IAT)和吸收放散试验检测到6例D抗原弱阳性表型和7例DEL型样本,通过RHD基因定型、合子型分析和RHD基因序列测定,鉴定3例为弱D15型,3例为部分DVⅠ-Ⅲ型,7例为DEL型且均携带RHD1227A等位基因。取正常RhD阴性2例和正常Rh(D)阳性样本2例作对照,采用流式细胞术分别检测上述弱D15型、部分DVⅠ-Ⅲ型和DEL型,观察其平均荧光强度。结果表明,流式细胞术检测弱D15和部分D型DVⅠ样本的平均荧光强度与Rh(D)阴性对照有显著性差异(P<0.05),可判读为D抗原阳性;7例DEL红细胞样本的平均荧光强度与Rh(D)阴性对照均无显著性差异(P>0.05),检测结果均可判读为阴性,其中包括1例DEL,其红细胞样本的吸收放散检测结果为强阳性,即使IAT检测的结果也显示为"±",合子型分析显示为RHD+/RHD+纯合子,流式检测亦为阴性。结论:流式细胞术检测D抗原的敏感度与IAT相近,低于吸收放散试验;用于检测弱D或部分D型不如IAT简便实用,用于检测DEL型其敏感度不够。     

四川地区汉族人群Kidd血型系统基因频率调查

目的调查人类红细胞Kidd血型系统在四川地区汉族人群中的基因分布频率。方法采用PCR-SSP技术对198名随机供者红细胞Jka和Jkb抗原分型进行检测。结果检测到3种表现型,其中Jk(a+b-)47例、Jk(a+b+)86例、Jk(a-b+)65例。JKa基因频率为0.4546,JKb基因频率为0.5454。结论四川地区汉族人群的Jkb抗原表达高于Jka,Jk(a-b-)表型未能检测到。     

新疆北疆地区维吾尔族、回族人群Kidd血型基因频率调查

目的对新疆北疆地区维吾尔族、回族人群Kidd血型基因频率调查,评估随机输血中Kidd血型不配合引起的输血反应的风险。方法采用流行病学方法调查764人Kidd血型,其中维吾尔族512人、回族252人。用血清学盐水介质法测定红细胞JKa和JKb抗原。结果共检测到3种表现型:JK(a+b+)、JK(a+b-)、JK(a-b+),未检测到JK(a-b-)表现型。维吾尔族JKa基因频率为0.5429,JKb基因频率为0.4571;回族JKa基因频率为0.4504,JKb基因频率为0.5496;1。结论新疆北疆地区维吾尔族JKa抗原表达高于JKb;回族JKa抗原表达低于JKb。回族与维吾尔族Kidd血型基因频率不同,并具有各自的特点。     

西安地区献血者19种红细胞血型抗原资料库的建立及临床意义

随着 ABO血型试剂的标准化和实验技术的完善 ,ABO血型系统输血的同型输注以及输血反应得到有效的防范。由于各血液中心对献血者只做ABO血型的检查 ,近年来 ABO以外抗体所引起的输血反应问题被日益重视。对于具有 ABO以外抗体患者的输血 ,常不能及时提供相合的血液。提示建立献血者多种血型抗原已知的资料库 ,为临床提供各种血型的血液 ,及时救治患者是必要的。为解决这一临床问题 ,本中心对献血者进行 1 9种红细胞血型抗原的检查 ,并建立了资料库。材料与方法1　样本来源　西安地区随机无偿献血者 ,进行详细的个人资料登记 (住址、联…     

流式细胞术快速鉴定ABO血型亚型

目的 建立流式细胞术快速鉴定ABO血型亚型的实验方法。方法 用荧光素(FITC)标记多人份人源抗-A、抗-B,与受检RBC上的相应抗原结合,利用流式细胞仪快速、特异地分辨每个细胞(生物颗粒)获得细胞的散点图,以RBC设定“门”,用Cell quest verl 2.2软件分析,对照管作“mark”,得测定管阳性细胞的百分率。结果 A型RBC其抗A-FITC百分率为97.40％±0.62％,抗B-FITC百分率为0.40％±0.15％;B型RBC其抗A-FITC百分率为0.42％±0.14％,抗B-FITC百分率为98.36％±0.55％。阴性细胞的x±s=0.43％±0.13％,阳性界值>0.85％(>x±3s)。11例ABO亚型FCM测定结果与血清学方法确认的结果完全一致。结论 流式细胞术鉴定ABO亚型的方法,较之常规的血清学方法,具有简便、快速、结果客观、重复性好之优点。     

利用红细胞Kidd血型基因实时荧光定量PCR法监测个体嵌合状态

本研究建立红细胞Kidd血型基因实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术以监测个体嵌合状态。根据红细胞Kidd血型等位基因的差异设计TaqMan MGB探针和特异性引物,进行实时荧光定量PCR检测个体嵌合状态,利用倍比稀释的方法模拟个体DNA嵌合状态并进行敏感性分析。结果表明,实时荧光定量PCR法可有效区分JK*A和JK*B等位基因。人工嵌合JK*A和JK*B的DNA标本实测值与理论值无显著差异(P>0.05)。在104个嵌合型细胞中存在156个供者型细胞时,该方法可有效检出供者型细胞。结论:建立的红细胞Kidd血型基因实时荧光定量PCR法检测嵌合体具有可行性,可以在一定范围内用于定量监测嵌合样本。     

猪红细胞血型抗原修饰异种输血的研究进展

异种器官移植所取得的突破性进展为异种输血的研究带来了曙光。人与猪的红细胞的血清学和生物化学特性有许多相似之处，因此猪就成为实现异种输血最具有可能性的红细胞供体，猪红细胞上存在异种抗原，包括αGal抗原和non-αGal抗原。αGal抗原和人血清中天然存在的抗αGal抗体结合后引起的免疫排斥反应在抗体介导的凝集反应中起主要作用。但是non-αGal抗原和人血清中天然存在的抗non-αGal抗体结合引起的免疫排斥反应作用也不能低估，经特定修饰，改造以及的猪红细胞，是来源丰富的异种血源。     

应用流式细胞术对自身免疫性溶血性贫血患者自身抗体掩盖下血型同种抗体检测的研究

目的 在自身免疫性溶血性贫血(自免溶贫)患者血样的检测中,自身抗体往往易被同种抗体掩盖,本研究试图通过对流式细胞术与传统血清学方法的比较研究,分析两者对自身抗体中混合同种抗体的检测能力差异,为自免溶贫患者输血前检测提供更敏感可靠的方法.方法 随机选择使用5例人源抗-D及4例抗-E分别与经验证不具血型特异性的自身抗体按比...     

血液病患者ABO血型抗原减弱及其输血对策

目的探讨血液病患者ABO血型抗原减弱与疾病的关系,以制定相应的输血措施。方法查阅1993-2005年所有ABO血型抗原减弱患者的病历,记录诊断及输血情况,随机选择同期血型抗原正常表达患者为对照组,比较两组患者的输血情况,并进行统计学处理。结果12年间共查出57例血型抗原减弱患者,其中AML41例、CML3例、MDS10例、MF3例。均予同型血输注,疗效与对照组相比差异无显著性。结论ABO血型抗原减弱在血液病患者中较常见,最多见于急、慢性非淋巴细胞白血病及骨髓增生异常综合征,随疾病缓解,减弱的血型抗原可恢复正常。输血时以输同型血为原则,不必输“O”型洗涤红细胞。     

流式细胞术测定红细胞存活率的方法建立

目的 :建立应用流式细胞术测定红细胞体内存活率的方法。方法 :献血者Rh表型ccDEE ,受血者为CCDEE ,以抗 c为一抗结合ccDEE的红细胞 ,两群细胞按设定的比例混合 ,以山羊抗人标记荧光素的IgGab段为二抗连接抗 c ,经流式细胞仪测定ccDEE表现型红细胞在两群细胞中所占的比例 ,并与实际的比例进行相关性比较。结果 :已知两群细胞数的比例与流式细胞仪测定的比例的相关系数r =99.87。结论 :流式细胞术技术可以体外测定红细胞体内的存活率     

动员外周血CD34阳性细胞流式细胞术测定中的策略探讨

探索用流式细胞术测定动员外周血中CD34^ 细胞的简便有效的方法，以便在干细胞动员中进行有效的动态监测，及时收取干细胞，把握最佳移植效果，将经药物动员的移植供的外周血用CD34和CD45荧光抗体标记，用红细胞裂解液将红细胞裂解后经流式细胞仪检测，运用恰当的分析窗口，有效的设门分析结合干细胞的生物学特性，确定CD34^ 细胞在窗口中的确切位置，统计CD34^ 细胞在有核细胞中的比例，结果表明，通过本方法可有效地测定0.05%-0.1%的CD34^ 细胞的相对含量，在药物动员的第5或6天，多数患外周血中CD34^ 细胞达到峰值，某些患外周血中CD34^ 细胞可超过1%，结论：通过标记中的有效阻断和多参数分析，本方法可对动员外周血中微量的CD34^ 细胞进行有效的动态监测，对适时采集干细胞进行移植提供了重要的参考。     

探讨流式细胞术检测胞浆抗原的方法及其在白血病免疫分型中的意义

为探讨用流式细胞术检测胞浆抗原的方法及其在免疫分型中的意义，采用三色或四色直接免疫荧光标记法检测56例患17种膜抗原表达，并采用4种透膜剂处理细胞后用流式细胞仪测定胞浆（c)CD3,CD22,CD79a，CD13，CD33及髓过氧化物酶（MPO）的表达。结果显示，用FACS透膜液处理细胞后，胞浆抗原的阳性百分比最高，而细胞的光散射（SSC）及CD45的荧光强度不变。18例急性髓细胞白血病（AML）患，16例MPO阳性；4例T－ALL患，虽然膜cCD3阴性，而胞浆cCD3均为阳性；13例B－ALL患中，9例cCD22阳性。对5例B－ALL检测了cCD79a，结果全部阳性。38例急性白血病（AL）患中，18例表达1个系列以上的膜标记；在21例急性非淋巴细胞白血病（ANLL）患中，8例表达CD7；17例ALL中，7例CD13阳性。经胞浆抗原检测后，只有2例分别符合双表型和混合型AL特点，提示cCD3,cCD22,cCD79a和cMPO为系列特异性标志，对诊断及鉴别双表型或双克隆AL尤为重要。     

采用熔解曲线分析法检测红细胞Duffy血型抗原Fy-a/b基因型

本研究建立用于红细胞Duffy血型抗原Fy-a/b基因分型的熔解曲线分析方法。根据β-actin和Fy-a/bmRNA序列设计并合成引物,建立实时荧光多重PCR-熔解曲线分析法,并用该方法与常规PCR-SSP法同时检测中国成都地区198名献血者Duffy血型抗原Fy-a/b的基因型。结果表明,熔解曲线分析法和常规PCR-SSP法的基因分型结果完全一致。198名中国成都地区献血者中Fya(+)178例(89.9%),Fya(+)Fyb(+)杂合子19例(9.6%),Fyb(+)1例(0.5%),Fya基因频率0.947,Fyb基因频率0.053,符合中国人Duffy血型分布特点。结论:本研究成功建立了红细胞Duffy血型抗原Fy-a/b基因分型的熔解曲线分析方法,该方法适用于大规模Duffy血型基因分型。中国成都地区的献血者Duffy血型基因以Fya为主。     

流式细胞术在检测血小板无力症中的意义

血小板上含有丰富的GPⅡ-Ⅲa,在血小板聚集时,GPⅡb-Ⅲa复合物上的纤维蛋白原受体与纤维蛋白原结合。血小板无力症(Glanzmann’s thrombasthenia,GT)患者是GPⅡb-Ⅲa复合物的质或量的缺陷所致血小板聚集异常。通常用聚丙烯酸胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western印迹等方法检测膜糖蛋白,但操作烦琐、费时费试剂。流式细胞术(FCM)及特异性单机的应用使血小板膜GP检测有了新突破,特别是纤维蛋白原结合试验使变异型GT的诊断成为可能。我们用FCM检测12例GT患者及其家属的血小板膜GP及纤维蛋白原结合并与SDS-PAGE和Western印迹做比较,以探索FCM方法对GT诊断的价值和意义。