维生素D3对三硝基苯磺酸诱导的大鼠结肠炎的作用

背景:维生素D(VitD)对炎症性肠病(IBD)的免疫调节作用日渐受到关注。目的:探讨VitD3对TNBS诱导的大鼠结肠炎的疗效及其机制。方法:66只雄性大鼠随机分为11组:空白对照组、TNBS组、5-ASA组、不同剂量VitD3组及其联合5-ASA组、活性VitD3组及其联合5-ASA组。除空白对照组外,其余10组以TNBS灌肠诱导结肠炎模型。造模后24 h,各组以不同药物灌胃进行干预。造模第10 d处死大鼠,评估疾病活动指数(DAI)、大体损伤、组织病理学评分,测定髓过氧化物酶(MPO)活性,以RT-PCR法检测T-bet、GATA-3 mRNA表达。测定血钙和血肌酐水平以监测不良反应。结果:与TNBS组相比,单次和连续大剂量VitD3联合5-ASA组大体损伤评分和组织病理学评分均明显下降(P<0.05);各药物干预组MPO活性均明显下降(P<0.001),T-bet mRNA表达无明显差异;5-ASA组、连续大剂量VitD3组GATA-3 mRNA表达明显升高(P<0.05)。连续大剂量VitD3组及其联合5-ASA组大鼠出现高钙血症,且连续大剂量VitD3组血肌酐水平明显高于其余各组(P<0.05)。结论:VitD3可通过调节T细胞免疫减轻TNBS诱导的实验性结肠炎。     

己酮可可碱对大鼠溃疡性结肠炎TNF-α及IL-1β表达的影响

目的:探讨己酮可可碱(PTX)对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠溃疡性结肠炎(UC)肠黏膜炎性细胞因子TNF-α及IL-1β表达的影响.方法:应用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇灌肠制备大鼠UC的模型.实验设正常对照组(C组)、TNBS损伤组(T组)、PTX治疗组(D组),从造模后第3天开始给予D组大鼠PTX腹腔注射治疗,C组、T组则注入等量生理盐水,bid,连用5 d.观察疾病活动指数(DAI).处死大鼠,应用RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)方法半定量检测技术,对UC大鼠结肠黏膜中TNF-α、IL-1βmRNA表达进行测定.结果:TNBS损伤组大鼠肠黏膜TNF-α、IL-1β mRNA的表达及DAI评分明显高于正常对照组和PTX治疗组(6.85±2.78 vs 0.45±0.11,1.85±2.01;1.02±0.16 vs 0.61±0.08,0.74±0.16;0.95±0.17 vs 0.57±0.07,0.64±0.13,均P<0.05),而PTX治疗组与对照组相比则无明显差异(均P>0.05).结论:UC的发生过程中炎性细胞因子TNF-α及IL-1β表达升高;己酮可可碱可能通过降低炎性细胞因子TNF-α及IL-1β的表达而发挥其干预作用.     

白芍总甙对大鼠实验性结肠炎Th17细胞相关因子的作用

目的:观察白芍总甙(TGP)对实验性结肠炎干预的治疗效果,探讨TGP对实验性结肠炎的抗炎作用.方法:40RSD大鼠以三硝基苯磺酸(TNBS)/醇溶液灌肠诱导结肠炎模型,均分为结肠炎模型组、正常对照组(0.9%NaCl溶液灌肠)、TGP组(100mg/kg)和5-ASA药物对照组(100mg/kg).连续灌胃14 d后行结肠大体损伤指数(CMDI)和组织学损伤指数(TDI)评分,ELISA检测血清IL-6、IL-17及IL-23水平,免疫组织化学SP法检测结肠组织TGF-β1与Foxp3的表达.结果:与结肠炎模型组相比,正常组CMDI、TDI,血清IL-6,IL-17及IL-23含量明显低,结肠组织TGF-β1和Foxp3含量明显高.5-ASA与TGP能显著降低CMDI和TDI(2.78分±2.11分,3.56分±1.94分 vs 6.88分±0.84分,均P<0.05;2.22分±0.83分,2.44分±1.51分 vs 5.63分±0.74分,均P<0.05),降低血清IL-6,IL-17和IL-23含量(5-ASA:t=5.998,2.438,2.670,均P<0.05;TGP:t=5.203,3.013,2.962,均P<0.05).升高结肠组织中TGF-β1和Foxp3(5-ASA:t=6.026,3.022,均P<0.05;TGP:t=6.198,2.734,均P<0.05).TGP组与5-ASA组无明显统计学差异.结论:TGP可能通过上调TGF-β1和Foxp3水平,促进Treg细胞的表达,抑制Th17细胞群的活化,下调IL-6,IL-17和IL-23的表达,减轻TNBS诱导的大鼠实验性结肠炎的症状和结肠炎性损伤.     

吉法酯对三硝基苯磺酸诱导大鼠实验性结肠炎的作用

目的 观察吉法酯对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠实验性结肠炎髓过氧化物酶(MPO)、环氧合酶(COX)-1及COX-2表达的影响,探讨吉法酯对溃疡性结肠炎的治疗作用.方法 选用雌性健康SD大鼠40只,均分为A、B、C、D组.A、B、C三组大鼠采用TNBS/乙醇灌肠制作大鼠结肠炎模型.造模后第2天,A组每天给予0.9%氯化钠溶液1 ml灌肠;B组每天给予5-氨基水杨酸(5-ASA)1 ml灌肠(100 mg/kg);C组每天给予吉法酯1 ml灌胃.D组为正常对照组.分别于造模后第7天及第14天每组处死5只大鼠,按疾病活动指数(DAI)的评分标准进行大体损伤评分,HE染色进行组织损伤评分.同时取结肠病变部位组织,生化法检测MPO活性,免疫组化法检测COX-1与COX-2的组织表达.结果 与A组比较,B组和C组的DAI评分、大体损伤形态和组织学损伤评分及MPO活性均降低(P<0.05).与A组相比,B、C、D组第7天和第14天COX-1表达水平升高(P<0.05),分别为0.87±0.18和0.93±0.15比1.86±0.51和1.96±0.41,1.73±0.68和1.79±0.6以及1.91±0.34和1.99±0.45;COX-2水平降低(P<0.05),分别为3.50±0.23和3.06±0.27比1.53±0.19和0.73±0.15,1.73±0.94和0.86±0.29,0.24±0.18和0.18±0.16.D组COX-2表达极弱,与B、C两组间差异有统计学意义(P<0.05).结论 吉法酯对TNBS诱导的大鼠结肠炎有较好的治疗作用,其疗效与5-ASA相似,其作用机制可能是降低肠组织中MPO的活性和调节COX-1/COX-2表达.     

益生菌VSL#3对实验性结肠炎大鼠结肠黏膜Claudins蛋白表达的影响

目的 观察益生菌VSL#3对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠急性结肠炎的保护作用,以及对紧密连接蛋白Claudins（Claudin-1,-2,-3）在结肠黏膜上表达的影响。方法 24只健康雌性SD大鼠采用TNBS一次性灌肠法建立大鼠结肠炎模型,造模完成后第2天开始,8只大鼠每日给予2ml0.9％ NaC1溶液灌胃（TNBS组）,8只给予100 mg VSL#3（VSL#3组）,另8只给予200 mg 5-氨基水杨酸(5-ASA)灌胃（5-ASA组）。5只同级别未造模大鼠作为对照组每日给予0.9％ NaCl溶液灌胃,均持续1周并处死。处死时留取粪便标本并做细菌培养以检测肠道菌群的变化。通过观察腹泻、便血和体重情况计算疾病活动指数(DAI)。取结肠组织做HE染色,观察病理学改变;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肠组织髓过氧化物酶(MPO)的变化;量子点免疫荧光标记法检测Claudins在结肠黏膜的表达和分布。结果 与TNBS组比较,益生菌VSL#3和5-ASA治疗均能降低结肠炎大鼠明显升高的DAI和肠组织MPO水平,减轻结肠炎性反应评分。与对照组比较,结肠炎大鼠的肠道细菌计数发生改变,Claudin-1,-2,-3蛋白表达均明显增加（平均荧光强度分别为66.200±5.737、71.780±6.670、61:300土5.199,t值分别＝17.237、27.909和21.788;P值均＜0.01）;而与TNBS组和5-ASA组比较,VSL#3可调节肠道菌群平衡,增加Claudin-1,-3的表达（Claudin-1:75.550±8.717比66.200±5.737和67.080±5.401;t＝9.348,8.469;P值均＜0.05;Claudin-3:68.820±7.443比61.300土5.199和59.830±5.930;t＝7.519,8.988,P值均＜0.05),降低Claudin-2的表达(58.740±6.457比71.780±6.670和66.870±5.791;t＝13.033,P＜0.01;t＝8.123,P＜0.05)。结论 益生菌VSL#3可能通过改变Claudins蛋白的表达,增强肠黏膜屏障功能,从而发挥缓解急性结肠炎性反应的作用。     

5-ASA对TNBS结肠炎大鼠血中性粒细胞凋亡及血清IL-8水平的影响

目的:观察5-ASA对三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠诱发的结肠炎大鼠血中性粒细胞凋亡及血清IL-8水平的影响, 并探讨5-ASA治疗炎症性肠病(IBD)的作用机制.方法:成年SD大鼠30只, ♀, 随机分成A、B、C组, A组为正常对照组, B、C组采用TNBS/乙醇灌肠制作大鼠结肠炎模型. B组每天给予生理盐水1 mL灌肠, C组每天给予5-ASA溶液(200 mg/kg)灌肠, 连续7 d. 经过处理后评定各组大鼠一般状况、结肠大体损伤及结肠组织学损伤; 在全麻下心脏采血, 分别通过流式细胞术检测血中性粒细胞凋亡率及通过酶联免疫吸附法检测血清中IL-8浓度.结果:与A组比较, B组的DAI评分、大体损伤评分和组织学损伤评分及血清IL-8水平均显著升高(2.74±0.437分vs 0.27±0.346分,5.10±1.101分vs 0.50±0.527分, 4.70±0.949分vs 0.44±0.458分, 720.97±71.718 ng/L vs129.88±18.399 ng/L, 均P<0.01), 而C组(1.34±0.385分, 1.70±0.483分, 1.50±0.850分,392.84±43.628 ng/L)明显低于B组(均P<0.01);与A组比较, B组中性粒细胞凋亡率明显降低(30.54%±4.036% vs 56.13%±5.188%,P<0.01), 而C组(48.89%±4.522%)明显高于B组( P<0.01).结论:5-ASA灌肠对结肠炎大鼠具有显著的治疗作用, 其机制可能与其降低血清IL-8水平及诱导血中性粒细胞凋亡有关.     

垂盆草对实验性结肠炎的保护作用及其机制研究

[目的]观察垂盆草干预三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的结肠炎模型大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素2(IL-2)、IL-10的改变,探讨垂盆草是否对结肠炎具有保护作用及其可能作用机制。[方法]30只SD大鼠随机分为3组;模型组及干预组经肛灌入TNBS/乙醇,对照组灌入0.85%氯化钠。造模后干预组给予垂盆草灌胃,对照组及模型组给予0.85%氯化钠,检测炎症活动指数(DAI)、大体形态损伤指数(CMDI)、组织学损伤指数(TDI)的改变,免疫组化检测结肠TGF-β1的表达,ElISA法检测血清IL-2、IL-10。[结果]干预组结肠TGF-β1表达平均光密度(0.21±0.02)较模型组(0.19±0.01)升高;干预组血清IL-10浓度(34.00±6.56)pg/ml较模型组(27.61±4.28)pg/ml升高;干预组血清IL-2浓度(66.70±3.51)pg/ml较模型组(66.70±3.51)pg/ml降低(均P<0.05)。干预组大鼠的DAI、CMDI及TDI与模型组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。[结论]垂盆草对TN-BS诱导的实验性结肠炎具有保护作用,可能通过调控T细胞分泌TGF-β1、IL-2、IL-10等细胞因子发挥作用。     

红花注射液对溃疡性结肠炎大鼠IL-4和IL-1β表达的影响

目的:观察红花注射液(injection of carthamus tinctorius,ICT)对2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)所致大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的治疗作用,并通过观察ICT对大鼠结肠黏膜白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)蛋白及mRNA表达的影响,初步探讨其治疗UC的作用机制.方法:30只Wistar大鼠随机分为实验组、模型组和对照组3组,每组各10只,其中实验组和模型组大鼠分别用TNBS灌肠,以复制UC模型,同时实验组给予ICT干预治疗.疗程结束后,观察疾病活动指数(disease activity index,DAI),剖取大鼠8cm结肠,进行结肠大体形态评分,将标本进行HE染色,并进行组织学损伤评分;采用免疫组织化学染色及RT-PCR检测结肠IL-4和IL-1β蛋白及mRNA的表达.结果:实验组与模型组相比,UC大鼠的DAI、结肠黏膜的大体形态及组织学损伤明显改善(均P<0.05),实验组IL-4蛋白及mRNA的表达与正常对照组相比无显著性差异(P>0.05),与模型组相比显著升高(P<0.05);模型组及实验组IL-1β蛋白及mRNA的表达较正常对照组显著升高(P<0.05),而实验组较模型组显著降低(P<0.05).结论:ICT对TNBS法诱导的大鼠UC有治疗作用,其机制可能是通过上调抗炎因子IL-4的释放和抑制促炎细胞因子IL-1β的表达而起作用.     

徐长卿对三硝基苯磺酸诱导的大鼠结肠炎的作用

目的:探讨徐长卿对2,4,6-三硝基苯磺酸(trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS)诱导的大鼠结肠炎的作用.方法:将40只♂SD大鼠随机分为4组:正常组、模型组、徐长卿组和巴柳氮组.除正常组外,其余3组大鼠均以TNBS灌肠造模.灌肠24h后,徐长卿组开始每天给予徐长卿4g/kg;巴柳氮组给予巴柳氮钠1g/kg灌胃治疗10d.每天观察大鼠一般情况,给药结束后,观察大鼠结肠大体损伤及病理,酵素免疫分析法(enzyme-linked immunosorbant assay,ELISA)检测肠组织肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白介素(interleukin,IL)-1β及IL-10水平.结果:两治疗组体质量较模型组增加,但差异无统计学意义;两治疗组疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分较模型组明显下降(0.70±1.06,0.67±0.71vs2.38±1.51,P<0.05).徐长卿组、巴柳氮组结肠大体损伤及病理评分较模型组显著下降(1.05±0.83,1.06±0.85vs2.94±0.94;1.65±1.67,2.00±1.80vs6.00±1.67,均P<0.01).徐长卿组较模型组TNF-α、IL-1β水平明显降低(P<0.01),IL-10水平无统计学差异.巴柳氮组较模型组TNF-α、IL-1β、IL-10水平均明显降低(P<0.01).结论:徐长卿能有效改善TNBS诱导的大鼠结肠炎,其机制可能与调节细胞因子水平有关.     

溃疡性结肠炎大鼠血清白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-4动态表达规律

目的探讨溃疡性结肠炎(UC)大鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-4的动态表达规律。方法将60只大鼠随机分为空白组10只、乙醇组10只,模型组40只(3、7、14、21 d各10只),采用TNBS/乙醇灌肠法制备溃疡性结肠炎大鼠模型,于制模后3、7、14、21 d 4个时间点采用ELISA法检测大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-4水平,光镜观察结肠组织形态并评分。结果制模后3 d大鼠结肠出现炎症和溃疡,且随着时间推移而加重,7~14 d溃疡和炎症最为严重,21 d溃疡和炎症已经有所修复。模型组各时间点大鼠血清促炎因子IL-1β、TNF-α均高于空白组和乙醇组,抗炎因子IL-4水平均低于空白组和乙醇组,以7 d和14 d升高或降低更为显著(P0.05、P0.01);7、14 d组与3d组比较,IL-1β、TNF-α水平进一步升高(P0.01),而IL-4水平进一步降低(P0.01);21 d组与7、14 d组比较,IL-1β、TNF-α水平下降,而IL-4水平则升高(P0.05)。结论促炎因子IL-1β、TNF-α和抗炎因子IL-4在UC发病中起重要作用,UC的发病及严重程度与促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-4的动态表达及失衡密切相关。     

甘草酸二铵对大鼠结肠炎的抗炎作用机制研究

目的建立大鼠急性期结肠炎模型,观察甘草酸二铵(DG)对大鼠结肠炎的治疗作用,并探讨其抗炎机制。方法雌性SD大鼠分为实验组、模型组和正常对照组,每组10只。实验组、模型组大鼠用冰乙酸灌肠建立急性期结肠炎模型,实验组给予40 mg.kg-1.d-1DG干预治疗。观察疾病活动指数(DAI)、组织学变化及髓过氧化物酶(MPO)活性,免疫组化法检测核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达。结果实验组、模型组和正常对照组的DAI评分分别为3.5±0.6,7.1±0.8和0.5±0.4;组织学评分为3.5±0.9,6.1±1.0和1.0±0.5;MPO活性为0.72±0.08,2.02±0.10和0.22±0.04;TNF-α阳性率分别为(35.2±8.2)%,(62.5±10.1)%和(7.9±5.7)%;ICAM-1阳性率为(34.3±8.2)%,(60.2±8.3)%和(9.1±3.4)%;NF-κB阳性率为(23.3±9.2)%,(44.5±8.9)%和(9.6±4.4)%。与模型组相比,实验组的DAI、组织学及MPO活性显著改善,实验组的TNF-αI、CAM-1和NF-κB的表达显著降低,经one-way ANOVA及SNK-q检验,差异有统计学意义(P值均<0.01)。结论DG可显著改善大鼠结肠炎症,其机制可能是通过影响炎症反应的信号通路NF-κB活化及ICAM-1、TNF-α的产生和表达来抑制炎症反应。     

IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β1和Foxp3在实验性结肠炎中的表达

目的 观察2、4、6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠结肠炎模型中结肠Foxp3、TGF-β1的表达及外周血清IL-17、IL-23和IL-6的表达,以探讨Th17细胞在IBD的作用.方法 10只SD大鼠以三硝基苯磺酸(TNBS)/L醇溶液灌肠诱导结肠炎模型.另取10只大鼠作为正常对照组(0.9%NaCl溶液灌肠).干预2周后行结肠大体损伤指数(CMDI)和组织学损伤指数(TDI)评分,以酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清白介素-6(Interteukin 6,IL-6)、IL-17和IL-23水平,以免疫组化方法(SP法)检测结肠组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和叉头样转录因子-3(Foxp3)表达.结果 与正常组相比,结肠炎模型组CMDI和TDI显著升高(P<0.01),血清IL-6、IL-17和IL-23水平明显升高(P<0.05),结肠组织TGF-β1和Foxp3明显降低(P<0.05).结论 在TNBS诱导的大鼠实验性结肠炎中,IL-6可能通过介导T细胞向Th17或Treg细胞的分化,促进或抑制肠道炎症.     

4-氨基水杨酸对大鼠实验性结肠炎中性粒细胞趋化、活化及凋亡的影响

目的 观察4-氨基水杨酸(4-ASA)对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠实验性结肠炎炎症损伤、肠组织一氧化氮合酶(iNOS)表达、血中性粒细胞(PMN)凋亡及血清白细胞介素(IL)-8水平等的影响,探讨4-ASA对炎症性肠病(IBD)的治疗作用及机制.方法 40只SD大鼠分为正常对照组(n=10)和实验组(n=30),实验组建立大鼠结肠炎模型.建模第5天将实验组按照处理方式分为实验对照组(n=10,0.9%氯化钠1 ml灌肠),5-ASA组[n=10,5-ASA液(200 mg/kg)1 ml灌肠]和4-ASA组[n=10,4-ASA液(200 mg/kg)1 ml灌肠].连续治疗7 d后处死动物,取病变段肠组织,行结肠大体损伤及结肠组织学损伤评分;生化法检测髓过氧化物酶活性;免疫组化法检测肠组织iNOS表达量;流式细胞术检测血PMN凋亡率;酶联免疫吸附法检测血清IL-8浓度.结果 经4-ASA治疗7d后,4-ASA组大鼠体重明显较实验对照组增加(P<0.01,t=14.09);疾病活动指数评分、大体评分、组织学评分和MPO活性显著较实验对照组降低(t值分别=7.87、18.37、6.66和19.60,P值均<0.01).而5-ASA组与4-ASA组间上述各指标差异均无统计学意义(P值均>0.05).实验对照组肠组织iNOS表达率为(73.55±5.15)%,较正常对照组显著增加[(5.95±1.45)%,t=39.93,P<0.01)];5-ASA和4-AsA组大鼠肠组织iNOS表达率分别为(37.80±3.82)%和(42.27±3.52)%,均较实验对照组显著降低(t值分别=17.62和15.76,P值均<0.01).实验对照组血清IL-8的平均浓度明显高于正常对照组(t=25.25,P<0.01);5-ASA和4-ASA组明显低于实验对照组(t值分别=12.31和11.57,P值均<0.01).实验对照组血PMN凋亡率明显低于正常对照组(t=11.48,P<0.01);5-ASA和4-ASA组凋亡率明显高于实验对照组(t值分别=7.51和10.47,P值均<0.01).结论 4-ASA灌肠对实验性结肠炎大鼠具有显著的治疗作用,其治疗机制可能与降低PMN的趋化与激活、上调血PMN凋亡率、减少肠组织局部损伤因子有关.     

复方黄柏液对大鼠TNBS结肠炎的治疗机制探讨

背景：临床上采用复方黄柏液保留灌肠辅助治疗溃疡性结肠炎（UC）疗效满意,但其作用机制尚不清楚。目的：探讨复方黄柏液对三硝基苯磺酸（TNBS）诱发的大鼠结肠炎模型炎症损伤的治疗作用及其可能机制。方法：40只成年雌性Sprague-Dawley大鼠随机分成四组,正常对照组不予处理,其余三组以TNBS／乙醇溶液灌肠制作结肠炎模型后．分别予0．9％NaCl溶液1ml、5-氨基水杨酸（5-ASA）200mg／kg和复方黄柏液1ml灌肠,连续14d。治疗后评估大鼠疾病活动指数（DAI）以及结肠大体、组织学损伤情况;检测结肠组织髓过氧化物酶（MPO）活性和白三烯B4（LTB4）含量;心脏采血,流式细胞术检测中性粒细胞凋亡率。结果：与正常对照组相比,TNBS模型组DAI、结肠大体和组织学评分、结肠组织MPO活性和LTB。含量均显著升高,血中性粒细胞凋亡率显著降低（P〈0．01）;5-ASA治疗组和复方黄柏液治疗组上述指标均较TNBS模型组显著改善（P〈0．01）,两组间差异则无统计学意义。结论：复方黄柏液灌肠对大鼠TNBS结肠炎具有明显治疗作用,促进中性粒细胞凋亡、清除结肠局部损伤因子（MPO、LTB。）可能为其作用机制之一。     

清肠栓对溃疡性结肠炎大鼠Toll样受体表达的影响

[目的]研究清肠栓对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠组织TLR1、TLR2、TLR3及TLR4表达的影响,探讨其免疫调节机制。[方法]将40只SD大鼠随机分为正常组(C组)、模型组(M组)、清肠栓组(QCS组)、美沙拉嗪组(5-ASA组)。造模期间,C组给予蒸馏水,其余组予5%DSS自由饮用6d制备UC模型。药物干预期间,QCS组、5-ASA组分别予相应药物灌肠7d。观察大鼠的一般情况、疾病活动指数(DAI)、结肠指数、结肠组织病理学改变及结肠组织TLR1、TLR2、TLR3及TLR4的表达情况。[结果]1与C组比较,M组DAI评分显著升高(P<0.05);QCS组DAI评分较M组显著下降(P<0.05)。2与C组比较,M组TLR2、TLR4的表达显著升高(P<0.05);与M组比较,QCS组、5-ASA组TLR2、TLR4的表达较M组显著下降(P<0.05)。3各组间的TLR1及TLR3表达差异无统计学意义。[结论]清肠栓对UC有较好的疗效,其作用机制可能是通过下调TLR2、TLR4的表达,影响核因子-κB(NF-κB)的活化,最终减轻机体炎症反应。     

β-淀粉样蛋白致大鼠行为学改变及对海马核因子-κB和一氧化氮合酶表达的影响

目的研究β-淀粉样蛋白(amyloid-beta protein,Aβ)对大鼠学习记忆功能及海马区内核因子kB(NF-kB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达的影响及其相互关系。探讨NF-kB在阿尔茨海默病(AD)发病中的可能作用。方法采用大鼠侧脑室立体定向注射Aβ25-35的方法建立AD的动物模型,通过Morris水迷宫检测大鼠学习、记忆能力,通过免疫组化的方法观察Aβ25-35对大鼠海马区内NF-kB及iNOS蛋白表达的影响,并分析NF-kB与iNOS表达的关系。结果大鼠经侧脑室立体定向注射10μmol／L Aβ25-35 5μl后,(1)模型组大鼠Morris水迷宫检测逃避潜伏期(3 d分别为42．19±12．29,31．28±20．59,23．91±8．05)较对照组(3 d分别为27．35±14．96,13．17±6．79,13．01±6．38)明显延长(P<0．05或P<0．01);(2)模型组大鼠海马区内NF-kB蛋白表达(29．40±4．01)及iNOS蛋白表达(34．42±5．99)较空白对照组(分别为23．36±2．31和11．56±4．09)均有明显升高(P<0．01),(3)NF-kB与iNOS阳性细胞密度具有显著相关性(r=0．453,P< 0．05)。结论Aβ能够明显降低大鼠短期学习记忆能力,并诱导大鼠海马区内NF-kB和iNOS的蛋白表达增强,同时NF-kB与iNOS的表达呈正相关关系。提示NF-kB和iNOS均参与了由Aβ诱导的炎性反应过程,NF-kB可能是iNOS表达的介导因子之一。     

姜黄素对三硝基苯磺酸诱导的结肠炎模型细胞因子的影响

目的探讨姜黄素对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的实验性结肠炎的疗效,并研究肠黏膜、脾细胞和血清中细胞因子的变化。方法45只Sprague-Dawley大鼠经直肠注入TNBS(100 mg/kg)诱导肠炎模型。实验动物分为阴性对照组、模型组(TNBS)和姜黄素治疗组(30 mg·kg~(-1)·d~(-1),腹腔注射)。RT-PCR测定肠黏膜细胞因子表达水平,流式细胞术测定脾细胞内干扰素(IFN)-γ和白细胞介素(IL)-4,ELISA法测定血清中IFN-γ和IL-4。结果姜黄素治疗前后肠黏膜大体评分(3．9±1．0比2．2±0．7),髓过氧化物酶(MPO)活性[每毫克蛋白(15．0±2．6)U比(7．3±1．4)U],肠黏膜中Th1类细胞因子IFN-0γ(1．02±0．07比0．06±0．02)、IL-12 mRNA相对表达水平(0．29±0．05比0．11±0．01)和IFN-γ/IL-4比值(11．44±0．97比0．38±0．10),脾细胞中IFN-γCD4~+细胞百分比(31．7±7．5比21．1±3．7)和IFN-γ/IL-4 CD4~+比值(19．9±5．1比6．1±1．8),血清中IFN-γ质量浓度[(1528±159)pg/ml比(513±14)pg/ml]和IFN-γ/IL-4比值(19．5±4．1比4．2±0．6)均降低(P＜0．05或P＜0．01)。且姜黄素治疗前后肠黏膜中Th2类细胞因子IL-4 mRNA(0．09±0．01比0．15±0．04)和IL-10 mRNA相对表达水平(0．28±0．08比0．63±0．12),脾细胞中IL-4 CD4~+细胞百分比(1．6±0．5比3．4±1．1)和血清IL-4质量浓度[(81±1 5)pg/ml比(124±20)pg/ml]升高(P＜0．05或P＜0．01)。结论姜黄素能治疗TNBS诱导的肠炎,其机制可能与调节肠道局部和机体Th1/Th2平衡有关。     

枯草杆菌二联活菌对溃疡性结肠炎大鼠的作用及机制

目的探讨枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊(美常安)对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠促炎症性细胞因子白细胞介素(IL)-1β和细胞黏附分子CD44表达的影响及其作用机制。方法采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法灌肠建立UC大鼠模型。将SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、美常安治疗组。观察各组疾病活动指数(DAI)、结肠组织病理学评分(HPS)。造模及美常安干预7 d后处死大鼠,取结肠行HE染色,观察镜下结肠病理变化。RT-PCR法检测各组大鼠肠黏膜细胞因子IL-1βmRNA表达,流式细胞仪检测各组大鼠结肠组织中黏附分子CD44的含量。结果模型组较正常对照组大鼠结肠黏膜可见脓性分泌物、糜烂及溃疡,美常安干预后显著改善UC大鼠结肠黏膜的病理变化,DAI和HPS评分下降显著,并明显降低UC大鼠IL-1βmRNA和CD44的表达(P<0.05)。结论枯草杆菌二联活菌可能通过下调UC大鼠IL-1βmRNA和CD44的表达而发挥干预作用。     

日本血吸虫卵对小鼠溃疡性结肠炎保护机制的探讨

目的探讨日本血吸虫卵对小鼠溃疡性结肠炎保护作用的免疫调节机制。方法以10 000个日本血吸虫卵经腹腔注射免疫小鼠4次,每次间隔1周,末次免疫后6 d用三硝基苯磺酸(TNBS)诱导结肠炎模型,观察虫卵免疫组和未免疫组小鼠的细胞因子和调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)亚群CD4+CD25+Foxp3+水平的变化。结果未经虫卵免疫的小鼠经TNBS诱导后结肠炎症状明显,细胞因子IFN-γ水平高达3.47±0.87 ng/ml,IL-4I、L-5和IL-10水平则较低分别为146.06±45.76 pg/ml,140.32±39.01 pg/ml,385.91±134.89 pg/ml;经虫卵免疫的结肠炎小鼠的炎症得到明显控制,IFN-γ表达被明显抑制其水平为1.53±0.51 ng/ml,IL-4I、L-5和IL-10水平显著升高分别为598.50±135.90 pg/ml,217.86±77.82 pg/ml,799.651±197.93 pg/ml。经虫卵免疫的结肠炎小鼠脾脏CD4+CD25+FoxP3+T细胞亚群比例为(3.55±0.81)%,显著高于未免疫组结肠炎小鼠的(2.31±0.39)%。结论日本血吸虫卵免疫对TNBS诱导的结肠炎小鼠具有保护作用,其保护性机制可能与CD4+CD25+FoxP3+T细胞对Th1过度反应的反馈性调节有关。     

TNBS诱导结肠炎大鼠Foxp3表达及其机制初探

目的 观察2、4、6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的SD大鼠结肠炎模型结肠Foxp3、TGF-β1的表达及外周血IL-2、IL-10的变化,初步确定Foxp3在IBD中的作用及机制.方法 20只SD大鼠随机分组,三硝基苯磺酸/乙醇灌肠造模,观察炎症活动指数(DAI)、大体形态损伤、组织学改变及免疫组化检测结肠Foxp3及TGF-β1、ELISA法检测血清IL-2、IL-1.结果 模型大鼠结肠黏膜组织Foxp3阳性的细胞数4.040±1.088低于对照组6.920±1.834,P＜0.05;模型组结肠黏膜组织TGF-β1光密度值0.186±0.013低于对照组0.231±0.034,P＜0.05;模型组大鼠血清IL-10浓度(27.61±4.28 pg/m1)低于对照组(40.46±4.77 pg/na),P＜0.05;模型组大鼠血清IL-2浓度(66.70±3.51 pg/m1)高于对照组(50.39±3.92 pg/m1),P＜0.05.结论 Foxp3可能通过TGF-β1、IL-2、IL-10在IBD的发展过程中发挥作用.