模拟失重条件下小鼠骨组织尿卟啉原Ⅲ合酶通过增加破骨细胞活性促进骨量流失

目的 探究尿卟啉原Ⅲ合酶（UROS）对失重性骨丢失的影响。方法 将8只C57BL/6J雄性小鼠（9周龄分为对照组和尾吊组（HLU）,每组4只。小鼠尾吊28 d后,取小鼠后肢分别进行Micro CT和力学实验检测。利用旋转式细胞培养系统（RCCS）建立失重的破骨细胞模型,通过实时定量PCR(qPCR)和抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色明确失重导致破骨细胞活性的变化,qPCR和Western印迹检测UROS表达水平变化;构建UROS敲除RAW264.7稳定株,通过qPCR和TRAP染色进一步明确UROS缺失后破骨细胞活性的变化。结果 小鼠尾吊后骨组织骨量流失明显,UROS的蛋白表达水平显著上调;破骨细胞失重处理后,UROS的蛋白表达水平上调,并且破骨分化基质金属蛋白酶9、抗酒石酸酸性磷酸酶等表达水平上调。敲低UROS后,破骨细胞分化相关标志物表达水平显著下调。结论 失重应激条件下,破骨细胞中UROS表达水平上调,进而导致破骨细胞活性增强,骨吸收大于骨形成,从而导致骨量流失。     

下坡跑对生长期去卵巢小鼠骨BMP-2、Smad1/5和Runx2表达的影响

目的:研究下坡跑对生长期去卵巢后骨质疏松小鼠骨形成蛋白BMP-2及其信号转导蛋白Smad1/5和靶基因Runx2基因表达的影响.方法:24只4周龄雌性C57BL/6小鼠,适应性喂养1周后随机分为安静去卵巢组(C+OVX组)、运动去卵巢组(D+OVX组)和安静假手术组(C+SHAM组)3组.D+OVX组进行8周下坡跑,训练结束后C+OVX组和D+OVX组行去卵巢手术,C+SHAM组行假手术.术后正常喂养6周处死小鼠,采用RT-PCR检测骨BMP-2、Smad1/5和Runx2 mRNA表达;采用比色法检测血液生化指标;使用Hologic Discovery A骨密度仪检测前肢骨BMD.结果:与C+OVX组相比,D+OVX组BMP-2(P＜ 0.01)、Smad1 (P＜0.05)、Smad5(P＜0.01)和Runx2(P＜0.01)mRNA表达显著上调,磷离子浓度和BMD显著升高(P＜0.05),钙离子浓度显著降低(P＜0.05).与C+SHAM组相比,D+OVX组Runx2和Smad1mRNA表达显著下调(P＜0.05),ALP活性显著降低(P＜0.05),磷离子浓度显著升高(P＜0.05).与C+SHAM组相比,C+OVX组BMP-2(P＜0.05)、Runx2(P＜0.01)和Smad5 (P＜0.01)mRNA表达显著下调,ALP活性(P＜0.05)和BMD (P＜0.01)显著降低,磷离子浓度显著升高(P＜0.01).结论:BMP-2及其信号转导蛋白Smad1/5、靶基因Runx2基因表达水平较高可能是促进骨形成的生物学机制,下坡跑上调生长期去卵巢后小鼠BMP-2、Smad1/5和Runx2基因表达,可能与早期运动训练防治骨质疏松的机制有关.     

跑台运动对成年脊髓损伤小鼠运动功能及运动皮质mTOR信号通路的影响

目的 观察跑台运动对成年脊髓损伤小鼠运动功能及运动皮质哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路的影响。方法 30只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组与跑台运动组,每组10只。所有小鼠进行跑台运动预训练3 d后,模型组和跑台运动组小鼠予以C₅背侧皮质脊髓束、左侧皮质脊髓束及红核脊髓束钳夹损伤,假手术组仅剔除椎板。跑台运动组伤后7 d开始跑台运动,5 d/周,共4周。采用BMS评分、水平楼梯实验和圆筒攀爬实验评估小鼠运动功能恢复情况;Western blotting检测小鼠运动皮质脑源性神经营养因子（BDNF）、胰岛素样生长因子1（IGF-1）的表达,以及酪氨酸激酶受体B（TrkB）、胰岛素样生长因子1受体（IGF-1R）、蛋白激酶B（Akt）、核糖体S6蛋白（S6）的磷酸化水平;免疫荧光染色检测运动皮质神经元S6的磷酸化水平,评估皮质mTOR信号通路激活情况。结果 伤后模型组与跑台运动组小鼠BMS评分出现短暂下降（_P<0.0001）,并于伤后7 d恢复至基线水平。伤后3 d、1周、3周、5周,模型组和跑台运动组左前、左后肢错误...     

骨桥蛋白对RANKL诱导破骨细胞分化的影响

 目的 初步探讨骨桥蛋白对破骨细胞体外分化的影响。方法 体外培养小鼠破骨前体RAW264.7细胞,RANKL诱导刺激其分化为破骨细胞,并加入骨桥蛋白进行干预。MTT法及TRAP染色分别检测破骨细胞细胞增殖及前体破骨细胞分化情况,RT-PCR检测RANK的mRNA表达水平。结果 骨桥蛋白可明显促进RAW264.7细胞向破骨细胞分化、增加细胞增殖,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05),并使破骨细胞特征性基因RANK的mRNA表达上调约2.67倍。结论 骨桥蛋白可能通过影响RANK/RANKL信号通路促进RAW264.7细胞分化为破骨细胞,有望成为防治骨质疏松等骨相关疾病的新靶点。
     

力学拉伸强度对破骨细胞形成和分化的影响

目的 探讨早期力学拉伸强度对破骨细胞形成和分化的影响. 方法 对采用巨噬细胞集落刺激因子和破骨细胞分化因子诱导的RAW 264.7细胞分别施加0,1 000,1 500,2 000,2 500和5 000με的力学拉伸3 d.于培养第7天观察各组破骨细胞形态、计数及检测前体细胞增殖,并于培养第4,7天检测各组细胞培养液中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性. 结果 2 500με组的破骨细胞形成数量明显减少,5 000με组的破骨细胞数量显著增加;2 000,2 500 με组前体细胞增殖明显,5 000με组前体细胞增殖显著降低;1 000,1 500με组与静态组在破骨细胞形成数量和前体细胞增殖方面差异无统计学意义.与静态组相比,应变组第4,7天培养液的破骨细胞TRAP活性均降低. 结论 早期力学因素可直接影响破骨细胞的形成和分化,较高强度的生理载荷可抑制破骨细胞形成,病理过载促进破骨细胞的形成,而低强度载荷几乎不影响破骨细胞形成;早期力学载荷可抑制破骨细胞分化.     

PI3K/Akt信号通路在磷酸三钙磨损颗粒诱导小鼠颅骨溶解中的作用

目的:研究PI3K/Akt信号通路在磷酸三钙(tricalcium phosphate,TCP)磨损颗粒诱导小鼠颅骨溶解中的作用。方法:36只雄性ICR小鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(TCP)和LY294002处理组,每组12只。取TCP磨损颗粒30 mg置于颅顶后缝合皮肤构建小鼠颅骨溶解模型。LY294002处理组小鼠于术后第2天颅顶局部注射PI3K抑制剂LY294002(5 mg·kg~(-1)),每周3次;假手术组小鼠颅骨顶仅注射生理盐水,注射时间与LY294002一致。2周后处死动物取骨膜和颅骨。通过Micro-CT分析小鼠颅骨溶解情况、骨密度(bone mineral density,BMD)和骨矿含量(bone mineral content,BMC);HE染色观察颅骨表面炎症反应及破骨细胞(osteoclasts)形成;Real-time PCR检测骨组织中破骨细胞生成标志物抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)、组织蛋白酶K(cathepsin K,Cst K)、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB kigand,RANKL)和c-Fos的m RNA水平;ELISA检测骨膜中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6等水平;Western Blotting检测颅骨组织Akt、p-Akt Ser473和p-AktThr308等蛋白表达变化。结果:Micro-CT和组织形态学分析结果显示,PI3K抑制剂LY294002能明显抑制TCP磨损颗粒诱导小鼠颅骨溶解和破骨细胞形成(P<0.05),增加BMD和BMC含量(P<0.05);下调破骨细胞生成标志物TRAP、Cst K、RANKL和c-Fos等m RNA水平(P<0.05),并抑制炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的释放(P<0.05);而且LY294002显著减弱TCP磨损颗粒诱导的Akt信号蛋白活化,导致p-Akt S-er473和p-AktThr308等蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论:PI3K/Akt信号通路参与调控TCP磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解,可作为假体周围骨溶解和关节松动的治疗靶标。     

γ射线对人外周血单核细胞向破骨样细胞诱导分化的影响

目的 探讨电离辐射对人外周血单核细胞来源的破骨细胞体外诱导分化的影响。方法 将人外周血采用密度梯度离心法获得单核细胞,经核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导培养24 h,分别给予0、0.75和2 Gy的¹³⁷Cs γ射线照射,第7天行TRAP染色后计数TRAP阳性多核破骨细胞,第10天取象牙骨片基质行甲苯胺蓝染色观察骨吸收陷窝形成;qRT-PCR检测破骨细胞特征标志物组织蛋白酶K和integrin β3的mRNA表达水平;ELISA法检测培养上清液中TRAcP-5b含量。结果 0.75 Gy照射组TRAP染色阳性多核破骨细胞计数显著多于对照组(0 Gy)(t=3.451,P<0.05),组织蛋白酶K和integrin β3的mRNA表达水平明显上调(t=2.343、2.728,P<0.05),且培养液中TRAcP-5b浓度明显增加(t=3.631,P<0.05)。而2 Gy照射组的TRAP染色阳性多核破骨细胞计数少于对照组,并伴有组织蛋白酶K和integrin β3的mRNA表达水平下调、培养上清液中TRAcP-5b浓度下降,但差异无统计学意义。结论 电离辐射可改变人外周血单核细胞破骨样细胞分化趋势,小剂量照射时可促进破骨细胞分化和骨吸收活性,而较大剂量照射后破骨细胞分化和骨吸收活性均降低。     

运动、利骨素协同药物预防去卵巢大鼠骨矿物元素代谢失衡的作用

目的:观察运动、利骨素和药物(尼尔雌醇,CCE3)预防去卵巢大鼠骨矿物元素代谢失衡的协同作用。方法:将健康4月龄雌性SD大鼠30只随机分成5组:假去卵巢组(A)、去卵巢组(B)、去卵巢 CCE3(全量)组(C)、去卵巢 CCE3(半量) 利骨素组(D)和去卵巢 CCE3(半量) 利骨素 运动组(E)。CCE3全量按0.6ml/100g体重灌胃,利骨素混悬液按3.0ml/kg体重灌胃,运动用大鼠专用跑台中等强度,即每天连续匀速跑45min,16m/min,跑道倾角0°,持续10周。采用IRIS/AP等离子体发射光谱仪测定各组大鼠骨矿物元素含量。结果:B组大鼠骨Ca、S、Mg、Mn、Zn含量显著低于A组(P<0.05)。C组、D组和E组大鼠骨Ca、S、Mg、Mn、Zn含量显著高于B组(P<0.05),C组和E组骨P含量显著低于B组(P<0.05)。E组大鼠骨Ca、S、Mg、Co、Mn含量显著高于C组和D组(P<0.05)。结论:运动、利骨素和CCE3对预防去卵巢大鼠骨矿物元素代谢失衡有协同作用。     

体外诱导培养人破骨细胞样细胞的研究

目的：通过多因子诱导人外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cell，PBMC），培养人破骨细胞样细胞（Osteoclast-like cell，OLC）。方法：分离人PBMCs，加入不同浓度核因子-κB受体活化剂配体（Receptor activator of NF-κB ligand，RANKL）、巨噬细胞集落刺激因子（Macrophage colony stimulating factor，M-CSF）和1α，25（OH）2D3诱导培养。结果：诱导培养14d后，部分PBMCs分化为多核、抗酒石酸酸性磷酸酶（Tartrate-resistant acid phosphatase，TRAP）染色阳性并具有骨吸收功能的破骨细胞样细胞。结论：多因子诱导人PBMCs是培养人OLC的好方法。     

耐力训练对动脉粥样硬化ApoE~(-/-)小鼠主动脉NF-κB和MMP-9表达的影响

目的:探讨耐力训练对动脉粥样硬化(AS)载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠主动脉核因子-κB(NF-κB)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响及其在抗AS中的作用。方法:36只8周龄ApoE-/-小鼠随机分为14周AS模型组(H组)、26周AS模型组(HH组)、14周造模+12周运动干预组(HE组),每组12只,均饲以高脂膳食饲料。HE组小鼠经14周高脂饲养形成AS后,开始在活动跑台上进行12周耐力训练(13 m/min,60min/次,每周5次)。另选取12只8周龄C57BL/6J小鼠作为对照组(N组),饲以标准饲料。制备主动脉根部冰冻切片,行HE染色观察主动脉病理变化,行原位杂交法测定主动脉NF-κB mRNA表达,行免疫组化法测定主动脉NF-κBp65及MMP-9蛋白表达,其表达量用阳性细胞%表示。结果:①14周高脂膳食后H组小鼠发生AS;HH组较H组病变加重,而HE组较HH组病变减轻。②HH组小鼠主动脉NF-κB mRNA及NF-κBp65阳性细胞%均显著高于N组,而HE组显著低于HH组(P<0.01)。③HH组小鼠主动脉MMP-9阳性细胞%显著高于N组,而HE组显著低于HH组(P<0.01)。结论:耐力训练降低AS小鼠主动脉NF-κB表达和MMP-9表达,发挥抗AS作用,可能是运动防治AS的机制之一。     

Optimization of the system of medical service of students of Cadet Schools of the Ministry of Defense of the Russian Federation

One of the factors of the successful military career guidance Cadet schools students is preserving and promoting their health. Medical support of children and adolescents aged 10-17 years should include the full range of medical and preventive measures defined for this group. The state of providing outpatient care for pupils at the Cadet School in St. Petersburg was studied. These results show that full medical care in accordance with the standards can be based only on children's health clinics. It is important that the organization of medical support pupils cadet schools should be cooperate with civilian health care.     

带状疱疹83例误诊原因分析

带状疱疹是由水痘—带状疱疾病毒引起的皮肤科常见疾病。其主要的病理损害,一是受累神经的严重炎症性浸润,继而导致受侵犯神经节内神经细胞变性、坏死;二是皮肤的水泡。迅速抑制神经节和相应的感觉神经纤维的充血、水肿和坏死,防止粘连形成,达到迅速镇痛、改善皮损,缩短病程及防止后遗症的发生是治疗的关键。因而,尽早明确诊断,     

Estimation of accumulated dose of radiation by method of ESR-spectrometry of dental enamel of mammals

ESR-spectrometry was used to investigate radiation-induced paramagnetic centers in enamel of mammals: carnivores (polar bear and fox), ungulates (reindeer, European bison, moose), and man. Values at half the microwave power saturation of the radiation signal, P_1/2, evaluated at room temperature, was found to range from 16 to 26 mW for animals and man. A new approach to discrimination of the radiation induced signal from the total ESR spectrum of reindeer enamel is proposed. ‘Dose-response’ dependencies of enamel of different species mammals were measured within the dose range from 0.48 up to 10.08 Gy. Estimations of ‘radiosensitivity’ enamel of carnivores and ungulates showed good agreement with radiosensitivity enamel of man by ESR method.     

Analysis of the results of the international comparison of activity measurements of a solution of Fe

The results of an international comparison of activity measurements of a solution of ⁵⁵Fe organized by the BIPM in 2005 are reported and analysed. This exercise, which follows the procedures of the CIPM mutual recognition arrangement to update older comparisons, is a renewal of the comparison organized by the BIPM that took place in 1978. A EUROMET comparison was organized in 1996 specifically to compare activity measurements of a ⁵⁵Fe solution by means of liquid-scintillation techniques. Results of these three comparisons are presented and discussed in this paper.

The radionuclide solution was provided by the NPL, which also distributed the samples to the participants. The activity of the ampoules was measured by 16 laboratories using 12 methods producing 25 results. Some general considerations on uncertainty assessments pertaining to the different techniques used are drawn. The outcome of four different estimators is compared from which the presence of at least one outlier can be confirmed. Further measurements should be made to try to reduce the discrepancy between the results. To date the outcome of the present comparison does not show an improvement to that of the 1996 comparison.     

Evaluation of the results of various technics of non-surgical therapy of varicocele

A new method of non-surgical treatment of varicocele syndrome is described: it consists in sclerotherapy of spermatic vein by trans-femoral percutaneous catheterization with balloon-catheters. In 8 cases venous thrombosis has been induced by direct electric clotting. The techniques and a 6 months follow-up are discussed. It is pointed out that this procedure should be considered as the method of choice for tubular lesions and sub-fertility prophylaxis in young people and in childhood.     

延迟性脾破裂误漏诊原因分析

目的探讨延迟性脾破裂误漏诊原因和预防措施.方法回顾性分析总结12例延迟性脾破裂中的诊断和误漏诊的经验与教训.结果本组延迟性脾破裂的误漏诊5例(41.66%).对多发伤与脾破裂并存可能认识不足,外伤史轻微或伤员隐瞒外伤史,缺乏腹痛-缓解-突然再腹痛的典型病史,缺乏“对冲性脾破裂”力学分析和整体化诊断思路等为其误漏诊的主要原因.结论详细的外伤史和全面系统检查,重视腹以外多发伤掩盖腹内脏器伤及延迟性脾破裂可能.确立外伤-腹内脏器伤-脾破裂整体化诊断思路.不间断地辅以B超检查脾形态学变化和腹内有无积液,腹腔穿刺确定有无血腹、X线胸腹部检查观察左侧胸肋角和膈肌运动情况、必要时CT检查以尽早发现脾包膜下血肿,降低延迟性脾破裂误漏诊率.