A型主动脉夹层组织Beclin1及微管相关蛋白1轻链3的表达及意义

目的 探讨自噬相关蛋白Beclin1及微管相关蛋白1轻链3(LC3)在A型主动脉夹层组织中的表达及意义。方法 选取因A型主动脉夹层(AD)而于我院行手术治疗患者术中切除的主动脉壁组织标本20例作为AD组,以尸检者的正常胸主动脉(NA)壁组织标本10例作为对照。采用免疫组化染色及蛋白质印迹技术检测血管组织中Beclin1及LC3蛋白的定位及表达差异。结果 A型主动脉夹层主动脉壁组织中Beclin1及LC3蛋白主要定位表达于血管平滑肌细胞,且含量高于正常对照组织(P<0.05)。结论 A型主动脉夹层主动脉壁中血管平滑肌细胞的自噬活性明显增强,可能与疾病的发生发展相关。     

血管性痴呆大鼠海马CA1区自噬及微管相关蛋白1轻链3的表达

目的 观察血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠海马CA1区自噬及微管相关蛋白1轻链3 (microtubule-associated protein 1 light chain 3,MAP1LC3,LC3)的表达,探讨自噬在血管性痴呆发病中的可能作用。方法 大鼠随机分为假手术组(sham组)、血管性痴呆模型组(VD组)和Wortmannin自噬抑制剂组(WM组),每组又随机分为模型制备后1、2、4、8、12周5个亚组。采用四血管阻断法制作血管性痴呆模型,Morris水迷宫法检测学习记忆能力,透射电镜观察自噬体的形成,蛋白质印迹法检测LC3Ⅱ/LC3Ⅰ 的比值作为自噬活性的指标。结果 与假手术组相比,VD组大鼠平均逃避潜伏期延长(P<0.05或0.01),穿越平台次数减少(P<0.05或0.01);与VD组比较,WM组大鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05或0.01),穿越平台次数增加(P<0.05或0.01)。VD组大鼠海马CA1区1周时神经细胞核膜凹陷,胞核浓缩,线粒体肿胀,可见自噬体、溶酶体;4周时自噬体、溶酶体数量显著增多;12周时仍可见自噬体。WM组神经元损伤较VD组减轻,自噬体数量减少。VD组大鼠海马CA1区LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值在1周时升高,4周时达到高峰,8周时开始下降,12周时仍较高。WM组各时间点LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值较VD组低,差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。结论 血管性痴呆大鼠海马CA1区自噬活性被激活,可能参与了血管性痴呆的发生发展。     

丙炔苯丙胺对帕金森病模型大鼠结肠自噬相关蛋白Beclin1及LC3表达的影响

目的观察丙炔苯丙胺对帕金森病(PD)模型大鼠肠功能障碍、自噬相关蛋白Beclin1及微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达的影响,探讨丙炔苯丙胺对PD肠功能障碍的治疗作用及可能机制。方法 2013年1月—2017年10月唐山市开平医院与华北理工大学附属医院合作实验。选取健康SD大鼠72只按随机数字表法分为假手术组(n=24)、帕金森病模型组(模型组,n=24)、丙炔苯丙胺干预组(干预组,n=24),后2组采用颈背部皮下注射鱼藤酮制备PD模型,而后模型组大鼠每日生理盐水灌胃,干预组予丙炔苯丙胺0.5 mg/kg灌胃。分别于4 d、8 d各取大鼠12只采用免疫组化法和蛋白印迹法检测结肠Beclin1和LC3的表达水平,并测定1 h粪便排出量及含水率。结果与假手术组比较,模型组4 d、8 d结肠Beclin1、LC3阳性细胞及蛋白表达均增加,1 h粪便排出量及含水率均减少(4 d:t/P=-28.614/0.000、-28.472/0.000、-21.561/0.000、-92.225/0.000、86.986/0.000、26.175/0.000。8 d:t/P=-24.523/0.000、-15.922/0.000、-26.262/0.000、-72.051/0.000、16.288/0.000、23.270/0.000);与模型组比较,干预组4 d、8 d结肠Beclin1、LC3阳性细胞及蛋白表达均减少,1 h粪便排出量及含水率均增加(4 d:t/P=8.254/0.000、7.572/0.000、11.846/0.000、43.157/0.000、-12.137/0.000、-7.727/0.000。8 d:t/P=18.981/0.000、8.480/0.000、21.154/0.000、63.285/0.000、-21.597/0.000、-17.980/0.000);与干预4 d组比较,干预8 d组大鼠结肠Beclin1、LC3阳性细胞及蛋白表达均明显减少,1 h粪便排出量及含水率显著增加(t/P=47.432/0.000、46.778/0.000、18.048/0.000、5.801/0.002、-7.045/0.001、-4.183/0.009)。结论丙炔苯丙胺可改善PD大鼠肠功能障碍,其作用机制可能与其抑制结肠过度自噬有关。     

自噬相关基因Beclin1和LC3与子宫内膜异位症的研究进展

子宫内膜异位症(EMs)是具有类似恶性肿瘤临床行为学特征的常见妇科良性病变,治疗较困难,复发率高。目前,EMs的发病机制尚不清楚,可能与机体自噬异常以及多种疾病的发生发展相关。自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白1轻链3(LC3)可对哺乳动物细胞自噬的调节发挥重要作用,EMs中存在自噬异常,异位子宫内膜可能存在自噬活性改变或特定自噬基因的减少、缺失、变异以及蛋白质表达异常,但目前关于EMs中Beclin1和LC3表达的研究较少,且研究结果尚不统一。     

自噬相关基因Beclin1在大鼠深Ⅱ度烧伤皮肤中的表达

目的 观察自噬相关基因Beclin1在大鼠深Ⅱ度烧伤皮肤中的表达,初步探讨自噬与烧伤皮肤之间的关系。方法 16只雄性Wistar大鼠随机分为正常组（对照组）和烧伤组（实验组）,每组各8只。实验组建立深Ⅱ度烧伤模型,烧伤后分别于1、3、7d取材。组织学检查观察各组动物皮肤全层情况,免疫组化检测Beclin1在各组动物皮肤的表达,并行图像处理和统计学分析。结果 Beclin1基因在实验组表达阳性,对照组表达阴性,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论 Beclin1基因在Wistar大鼠烧伤皮肤中的表达呈阳性,推测自噬参与深Ⅱ度烧伤皮肤的修复过程。     

Decorin基因过表达对HEK293T细胞微管相关蛋白LC3和自噬基因beclin1表达的影响

目的:构建人核心蛋白聚糖(DCN)重组质粒,研究其对微管相关蛋白LC3和自噬基因beclin1表达的影响.方法:从人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)提取总RNA,经RT-PCR获得decorin的全长cDNA,克隆至T-载体pUM-T并测序,亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,再次测序正确后以磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK293T细胞,利用RT-PCR、Western Blot方法检测空载体组和重组质粒转染组微管相关蛋白LC3和自噬基因beclin1转录水平及翻译水平的表达.结果:经DNA测序证实人DCN cDNA片段正确插入真核表达载体中.Western Blot结果显示经磷酸钙共沉淀法转染的HEK 293T细胞中目的基因高表达.RT-PCR和Western Blot结果显示,与空载体组相比,重组质粒转染组LC3转录水平显著降低,beclin1和LC3-Ⅱ的翻译水平均显著降低.结论:成功构建人DCN重组质粒,其在HEK 293T中过表达可以显著降低微管相关蛋白LC3和自噬基因beclin1表达,为进一步研究DCN与自噬的相互作用奠定了基础.     

Decorin基因过表达对HEK 293T细胞微管相关蛋白LC3和自噬基因beclinl表达的影响

目的:构建人核心蛋白聚糖(DCN)重组质粒,研究其对微管相关蛋白LC3和自噬基因beclinl表达的影响。方法:从人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)提取总RNA,经RT-PCR获得decorin的全长cDNA,克隆至T-载体pUM-T并测序,亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,再次测序正确后以磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK293T细胞,利用RT-PCR、Western Blot方法检测空载体组和重组质粒转染组微管相关蛋白LC3和自噬基因beclinl转录水平及翻译水平的表达。结果:经DNA测序证实人DCN cDNA片段正确插入真核表达载体中。Western Blot结果显示经磷酸钙共沉淀法转染的HEK 293T细胞中目的基因高表达。RT-PCR和Western Blot结果显示,与空载体组相比,重组质粒转染组LC3转录水平显著降低,beclin1和LC3-II的翻译水平均显著降低。结论:成功构建人DCN重组质粒,其在HEK 293T中过表达可以显著降低微管相关蛋白LC3和自噬基因beclinl表达,为进一步研究DCN与自噬的相互作用奠定了基础。     

微管相关蛋白与自噬的研究进展

微管相关蛋白和微管蛋白共同控制微管的组装和稳定性,进而调控一些重要的生理过程,例如:调节细胞物质运输,维持细胞形态,细胞分裂分化,肿瘤的发生及自噬的发生.本综述将重点关注于微管相关蛋白与自噬之间的联系.     

自噬基因Beclin1在卵巢癌中的研究进展

妇科恶性肿瘤中卵巢癌的发病率排名第三,但是死亡率排名第一。自噬是指细胞在缺乏营养和能量等刺激时受损的生物大分子和细胞器被溶酶体包裹降解的过程,自噬参与了细胞的生理和病理过程,近来研究表明自噬对肿瘤的生物学有着复杂且重要的作用。Beclin1是自噬的正向调控基因,Beclinl与肿瘤之间的关系正如自噬与肿瘤之间的关系。自噬基因Beclin1对卵巢癌的发生、发展、治疗和预后有何影响,本文就此作一综述。     

Beclin 1调控心肌自噬与心血管疾病关系的研究进展

Beclin 1基因是调控自噬的关键蛋白之一,与相关蛋白结合形成复合体诱导自噬,并调控自噬水平。在应激刺激下,Beclin 1可以调节心肌细胞自噬活性,对心肌细胞起到保护或者损害的作用,与多种心血管疾病有着密切关系。通过探讨Beclin 1调控心肌自噬对心血管疾病的影响,以期为研究心血管疾病发生机制和临床治疗提供新的思路和理论依据。     

自噬基因Beclin1与肿瘤的研究进展

Beclin1基因也称BECN1基因,是酵母ATG6的同系物,Beclin1基因是细胞执行自体吞噬的必需基因,且和肿瘤的发生、发展密切相关。Beclin1通过对细胞自噬的调节,在肿瘤的病理生理过程中起重要作用。本文对Beclin1与肿瘤的关系,特别是Beclin1与妇科肿瘤的相关研究进行总结、综述。     

骨肉瘤组织中抑癌基因TAp73和自噬基因Beclin1的表达及其与肿瘤恶性程度的相关性

目的:研究骨肉瘤组织中抑癌基因TAp73和自噬基因Beclin1表达量与肿瘤恶性程度的相关性。方法:收集在我院手术切除的56例骨肉瘤组织和肉瘤旁组织、37例骨巨细胞瘤组织,采用免疫组化试剂盒测定TAp73、Beclin1的阳性表达率;采用酶联免疫吸附试剂盒测定TAp73、Beclin1以及增殖、侵袭基因的蛋白表达量。结果:骨肉瘤组织中TAp73、Beclin1的蛋白表达量及阳性表达率均显著低于肉瘤旁组织、骨巨细胞瘤组织,IRX2、JAK3、STAT5、CTGF、Wnt、β-catenin的蛋白表达量均显著高于肉瘤旁组织、骨巨细胞瘤组织;TAp73、Beclin1(+)、(++)、(+++)骨肉瘤组织中IRX2、JAK3、STAT5、CTGF、Wnt、β-catenin的蛋白表达量均显著低于TAp73、Beclin1(-)骨肉瘤组织,TAp73、Beclin1(++)、(+++)骨肉瘤组织中IRX2、JAK3、STAT5、CTGF、Wnt、β-catenin的蛋白表达量均显著低于TAp73、Beclin1(+)骨肉瘤组织,TAp73、Beclin1(+++)骨肉瘤组织中IRX2、JAK3、STAT5、CTGF、Wnt、β-catenin的蛋白表达量均显著低于TAp73、Beclin1(++)骨肉瘤组织。结论:骨肉瘤组织中抑癌基因TAp73和自噬基因Beclin1的低表达能够通过激活IRX2/JAK3/STAT5和CTGF/Wnt/β-catenin信号通路来促进细胞增殖和侵袭。     

Beclin 1、LC3在恶性纤维组织细胞瘤中的表达

目的 研究自噬蛋白Beclin 1、LC3在恶性纤维组织细胞瘤的表达.方法 选取云南省肿瘤医院2011年11月至2014年10月经手术切除的MFH组织标本, 应用免疫组织化学SP方法检测恶性纤维组织细胞瘤组织中Beclin 1、LC3蛋白表达情况.结果 在本组21例标本中Beclin 1、LC3基因表达均显著升高, P<0.05.结论 Beclin 1、LC3在恶性纤维组织细胞瘤组织中呈高表达, 并且两者间显著相关, 可能与恶性纤维组织细胞瘤的发生及发展密切相关.     

Beclin 1与LC3蛋白在腮腺多形性腺瘤及腮腺癌在多形性腺瘤中的表达和意义

目的探讨自体吞噬相关基因Beclin 1和微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain3,LC3)表达和腮腺肿瘤之间的关系。方法所用组织取自本院2001-2009年手术标本,用免疫组化法和免疫印迹法检测20例正常腮腺组织,37例腮腺多形性腺瘤,41例癌在多形性腺瘤中Beclin 1和LC3的表达,并结合临床病理因素进行分析。结果 Beclin 1、LC3在正常腮腺组织表达为(1.045±0.002)、(0.779±0.047),在腮腺多形性腺瘤中表达下降[(0.419±0.051)、(0.243±0.023),P<0.05],在癌在多形性腺瘤中二者阳性表达显著下降[(0.173±0.008)、(0.051±0.010),P<0.05]。淋巴结转移及TNM分期与Beclin 1的表达间有明显差异(P<0.05),不同侵袭性,不同淋巴结转移组与LC3的表达间有明显差异(P<0.05)。结论 Beclin 1和LC3在腮腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤中表达下调,自体吞噬功能改变可能在腮腺肿瘤形成过程中具有一定作用。     

Expression and significance of Beclin 1 and LC3 in parotid pleomorphic adenoma and carcinoma in pleomorphic adenoma

目的 探讨自体吞噬相关基因Beclin 1和微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain3,LC3)表达和腮腺肿瘤之间的关系.方法 所用组织取自本院2001-2009年手术标本,用免疫组化法和免疫印迹法检测20例正常腮腺组织,37例腮腺多形性腺瘤,41例癌在多形性腺瘤中Beclin 1和LC3的表达,并结合临床病理因素进行分析.结果 Beclin 1、LC3在正常腮腺组织表达为(1.045±0.002)、(0.779±0.047),在腮腺多形性腺瘤中表达下降[(0.419±0.051)、(0.243±0.023),P＜0.05],在癌在多形性腺瘤中二者阳性表达显著下降[(0.173±0.008)、(0.051±0.010),P＜0.05].淋巴结转移及TNM分期与Beclin 1的表达间有明显差异(P＜0.05),不同侵袭性,不同淋巴结转移组与LC3的表达间有明显差异(P＜0.05).结论 Beclin 1和LC3在腮腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤中表达下调,自体吞噬功能改变可能在腮腺肿瘤形成过程中具有一定作用.     

铅暴露时间对大脑皮质ATG5、Beclin1、 LC3B 表达的影响

目的 通过复制成年动物铅暴露模型,研究铅暴露时间长短对大脑皮质自噬蛋白ATG5、 Beclin1、LC3B 表达的变化。方法 选取18 只豚鼠随机分为4 组：对照组（3 只）,以及铅暴露15、60 和 90 d 组（每组5 只）。用0.2% 醋酸铅饮用水复制动物铅暴露模型,对照组给予等量的生理盐水喂养;免疫组 织化学法检测ATG5、Beclin1 和LC3B 的表达。结果 与对照组相比,不同时间铅暴露组自噬蛋白ATG5、 Beclin1 和LC3B 的阳性表达升高（P <0.05）。铅暴露90 d 组的ATG5 表达水平与各暴露组比较,差异有统 计学意义（P <0.05）。铅暴露15 d 组与60 d 组的ATG5 表达水平比较,差异无统计学意义（P >0.05）。各暴 露组Beclin1 和LC3B 蛋白水平比较,差异无统计学意义（P >0.05）。结论 环境铅饮用水可通过自噬蛋白 ATG5、Beclin1 及LC3B 引起大脑皮质区的自噬反应,推测铅暴露激活的早期自噬反应可能对大脑皮质发挥 神经毒性作用,对成年豚鼠大脑造成不可逆转的损害。     

自噬相关蛋白 Beclin1、LC3在甲状腺癌合并颈部淋巴结转移中的表达及临床意义

目的:探究分析与细胞自噬相关的蛋白Beclin1及LC3在甲状腺癌合并颈部淋巴结转移中的表达及其在临床治疗中的意义。方法:采用免疫组织化学方法检测,选取48例我院2012年2月至2014年2月收集的甲状腺癌组织、30例癌旁正常组织用以检测Beclin1及LC3蛋白表达,另取38例甲状腺癌转移淋巴结以及30例的正常淋巴结临床标本,用以检测Beclin1及LC3蛋白表达。结果:在取材的所有样本中均有表达Beclin1,但在甲状腺癌组织中含量低于癌旁正常的甲状腺组织(P<0.01),转移淋巴结中Beclin1水平明显低于正常淋巴结组(P<0.01);免疫组化结果显示在所有样本中也检测到LC3蛋白表达,在甲状腺癌组织中的含量最低,并且显著低于癌旁甲状腺组织(P<0.01),在发生转移的淋巴结组织中,LC3含量低于正常淋巴结组织(P<0.01)。结论:自噬功能相关蛋白Beclin1与LC3的表达与甲状腺癌是否发生转移密切相关,是肿瘤向囊外扩展的直接标记。该蛋白具有作为甲状腺癌淋巴结转移的术前评估指标的潜在可能,具有一定的指导意义。     

Beclin1基因在SW620细胞自噬和凋亡中作用

目的 探讨Beclinl基因在SW620细胞自噬和凋亡中作用.方法 采用RNA干扰技术抑制Beclinl表达,Beclinl被抑制后细胞的存活能力通过MTT实验评估;结直肠癌细胞SW620在血清剥夺状态下自噬活性通过LC3蛋白水平评估;分别经血清剥夺、星孢菌素及依托泊苷处理的SW620凋亡率通过流式细胞仪检测;Beclinl表达情况经Western blot评估.结果 pSUPER-Becl组细胞血清剥夺后存活能力显著降低(P＜0.05),在血清剥夺24 h后,空白对照组和pSUPER-non组抗凋亡能力比pSUPER-Becl组更强(P＜0.05),星孢菌素处理后,pSUPER-Becl组细胞凋亡最为显著(P＜0.05),用依托泊苷处理后得到相似的结果(P＜0.05);pSUPER-non组与空白对照组细胞中Beclinl的表达随血清剥夺时间的延长呈现上调趋势(P＜0.05),这与LC3的表达变化相一致;而pSUPER-Becl组LC3的表达显著减少(P＜0.05).结论 Beclin1是结直肠癌细胞中自噬和凋亡的关键调节因素,并且维持凋亡和自噬的平衡;Beclinl通过调节细胞自噬活性,在结直肠癌发展与演进中作为一种保护机制,使肿瘤细胞免受到低营养和化疗所致的损伤而持续生存.