前列腺液中DD3mRNA定量检测无侵入性诊断前列腺癌的意义

目的探讨前列腺按摩后前列腺液沉渣中DD3mRNA含量在前列腺癌诊断中的应用价值。方法在前列腺穿刺活检前或术前麻醉后收集前列腺按摩后患者的前列腺液。其中前列腺癌（Pca）患者31例,前列腺增生患者（BPH）59例,离心取细胞沉淀物,用荧光实时定量逆转录-聚合酶链反应（Real time RT-PCR）方法检测DD3mRNA和PSAmRNA含量,以PSAmRNA作为管家基因校正前列腺液沉渣中的前列腺细胞,以DD3mRNA/PSAmRNA比值表示DD3mRNA含量。SPSS 13.0分析相关数据,以穿刺活检或术后病理检查结果为金标准,用受试者工作特征曲线（ROC）对DD3mRNA诊断性能进行分析,并与血清tPSA进行比较,同时探讨前列腺液DD3mRNA相对定量值阳性率与病理分级的关系。结果前列腺癌患者前列腺液DD3mRNA表达量明显高于BPH,差异具有统计学意义（P〈0.05）。ROC曲线分析结果显示,曲线下面积（ROC-AUC）=0.879（95%CI=0.795～0.964）。DD3mRNA相对定量值截断值取0.015313时,其诊断效能最大。其灵敏度为0.806,特异度为0.864,准确性0.67,阳性预测值75.8%,阴性预测值89.5%,阳性似然比、阴性似然比分别为5.97、0.224。若血清tPSA分别以4ng/ml和10ng/ml为截断值时,灵敏度分别为83.8%和54.84%,特异度分别为61.02%和83.05%,不同病理分级之间DD3mRNA的阳性率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论前列腺液中DD3mRNA测定的诊断性能明显高于血清PSA,作为前列腺癌的一种非损伤性诊断方法具有良好的应用前景。     

磁共振波谱成像联合fPSA/tPSA、PSAD对PSA灰区前列腺癌的诊断价值

目的 探讨磁共振波谱成像(MRS)联合前列腺特异性抗原(PSA)比值(fPSA/tPSA)及PSA密度(PSAD)在PSA灰区(4～10 ng/mL)对前列腺癌(PCa)的诊断价值.方法 选取PSA位于灰区,病理检查证实为前列腺增生(BPH)或PCa的男性患者60例,收集tPSA、fPSA数据,计算PSAD、fPSA/tPSA、(胆碱+肌酸)/枸橼酸盐的数值,用受试者工作特征(ROC)曲线分析MRS联合PSAD及fPSA/tPSA对PCa的诊断价值.结果 PCa组(n=24)和BPH组(n=36)的年龄和tPSA差异无统计学意义(P＞0.05);fPSA、fPSA/tPSA、前列腺体积、PSAD和MRS的差异均有统计学意义(P＜0.05);MRS、PSAD和fPSA/tPSA诊断PCa的效果相似(P＞0.05);MRS与PSAD或fPSA/tPSA联合后对PCa诊断效能无明显增加(P＞0.05);MRS、PSAD和fPSA/tPSA三者联合后,诊断效能显著增加(P＜0.05).结论 MRS联合PSAD及fPSA/tPSA可提高灰区PCa诊断的准确性,对灰区PCa诊断有较高应用价值.     

DD3mRNA在前列腺癌早期诊断中的应用现状

摘要：DD3mRNA仅表达在正常的前列腺组织及前列腺肿瘤组织,且在前列腺癌组织中表达量显著增高,对前列腺癌的早期诊断上其特异性及敏感性要明显优于血清PSA,使用DD3基因检测使前列腺疾病患者的活检率降低了49％。DD3mRNA具有高度的前列腺癌特异性,可以减少许多不必要的前列腺穿刺活检,有着较好的临床应用前景。     

f/tPSA、PSAD在PSA灰区对前列腺增生症和前列腺癌诊断效用的研究

目的探讨在PSA灰区(tPSA4-10ng/ml)前列腺特异性抗原(PSA)、游离前列腺特异性抗原/总前列腺特异性抗原(f/tPSA)、前列腺特异性抗原密度(PSAD)对前列腺增生症(BPH)、前列腺癌(PCa)的诊断效用。方法 162例患者经临床确诊后分为BPH组104例和PCa组58例,分别检测其血清PSA、f/tPSA、直肠超声检测前列腺体积并测算PSAD数值。结果 PCa组血清tPSA与BPH组之间差异无统计学意义(P>0.05)。PCa组血清f/tPSA较BPH组明显降低(P<0.01),PCa组PSAD值较BPH组明显升高(P<0.01)。随f/tPSA、PSAD升高,PCa诊断的敏感度也升高但特异度下降。PSAD对PCa诊断特异度明显高于f/tPSA比值。结论 f/tPSA比值和PSAD对诊断BPH、PCa具有重要意义。     

f/tPSA和PSAD在良性前列腺增生和前列腺癌中的诊断价值

目的 探讨前列腺特异性抗原(PSA)、游离前列腺特异性抗原,总前列腺特异性抗原(fit PSA)和前列腺特异性抗原密度(PSAD)在不同PSA水平的诊断意义,及f/t PSA和PSAD诊断前列腺癌(Pca)的灵敏度和特异度.方法 回顾性分析229例良性前列腺增生患者(BPH组)和138例前列腺癌患者(Pca组)血清PSA检测结果.经直肠超声测量前列腺体积,计算f/t PSA、PSAD.结果 PSA＜4ng/ml时,tPSA、fit PSA、PSAD在BPH组和Pca组无显著性差异(P＞0.05);PSA为4-10ng/ml时,tPSA无显著性差异(P＞0.05),而fitPSA、PSAD具有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01);PSA＞10 ng/ml时,tPSA、fit PSA、PSAD在两组间均具有显著性差异(P＜0.01).当fit比值和PSAD分别取值0.12和0.22时,其诊断Pca的灵敏度和特异度分别为68.3%和75.6%、83.3%和63.8%.结论 f/t比值和PSAD在辅助诊断前列腺疾病中具有重要意义.     

不同f/tPSA、PSAD值及(F/T)/PSAD比值截点对前列腺癌的诊断价值

目的探讨不同的f/tPSA比值、PSAD值以及(F/T)/PSAD比值在筛检及诊断前列腺癌中的意义。方法回顾性分析138例经直肠超声引导行前列腺13点穿刺活检,其中48例(34.8%)为前列腺癌,90例(65.2%)为良性前列腺增生(BPH);另33例为TUR术后病理诊断前列腺癌。得前列腺癌组81例,BPH组90例。采用化学发光免疫分析法检测PSA,经直肠超声测定前列腺体积。应用2检验、ROC曲线分析不同的f/tPSA值、PSAD值以及(F/T)/PSAD值截点对临床诊断前列腺癌的灵敏度、特异度及诊断准确性。结果f/tPSA值取0.15(AUC0.585)、PSAD取值0.18(AUC0.635)、(F/T)/PSAD取值0.8(AUC0.669)时具有良好的诊断价值。与f/tPSA比值、PSAD值相比较,(F/T)/PSAD在保持相近的灵敏度同时,能更好的保证特异度(f2/tPSA-(F/T)/PSAD=15.674,P=0.000;2PSAD-(F/T)/PSAD=4.425,P=0.035)。在不同的PSA水平(<10,10~20,>20μg/L),应用(F/T)/PSAD参数都能获得优于单独使用f/tPSA或PSAD的灵敏度和特异度。结论f/tPSA截点取0.15,PSAD取0.18,(F/T)/PSAD取0.8能有效地筛检前列腺癌。应用(F/T)/PSAD优于单独应用f/tPSA或PSAD,能在保持较高的灵敏度(81.5%)同时保证良好的特异度(52.2%)。     

前列腺特异性抗原参数诊断前列腺癌的临床应用

目的探究不同前列腺特异性抗原(PSA)相关参数诊断前列腺癌(PCa)的临床应用价值。方法选取2017年1月-2020年10月宿州市第一人民医院收治的经病理检测确诊的80例前列腺癌患者(PCa组)和43例良性前列腺增生(BPH)患者(BPH组),收集所有患者PSA相关参数,如总前列腺抗原(tPSA)、游离前列腺抗原比例(fPSA/tPSA)、前列腺特异性抗原密度(PSAD),分析上述参数对前列腺癌的诊断价值。结果全部患者和PSA处于4～10 ng/mL患者中,PCa组PSAD高于BPH组,fPSA/tPSA均低于BPH组,差异有统计学意义(P0.05);两组患者比例在PSA、fPSA/tPSA比值、PSAD不同区间比较,差异有统计学意义(P0.05),其中PSA以10 ng/mL为临界值时诊断PCa价值最高,其敏感度、特异度、约登指数分别为85.00%、74.42%、0.594;当fPSA/tPSA以0.16为临界值时诊断效能最高,其敏感度、特异度、约登指数分别为72.50%、67.44%、0.399;当PSAD以0.35 ng/mL/cm3为临界值时诊断效能最高,其敏感度、特异度、约登指数分别为75.00%、97.67%、0.727。结论 PSA相关参数PSA、fPSA/tPSA、PSAD临界值分别为10 ng/mL、0.16、0.35 ng/mL/cm3时均可有效诊断PCa,临床工作中可综合多种参数共同判断,以提高PCa检出率。     

前列腺健康指数在PI-RADS 评分3分前列腺癌患者中的应用价值

目的：探讨前列腺健康指数(PHI)和前列腺健康指数密度(PHID)在PI-RADS评分3分前列腺癌诊断中的应用价值。方法：收集我院在2018年11月—2022年9月行前列腺穿刺术的112例PI-RADS v2评分为3分的患者病例资料。并将患者分为前列腺癌组(47例)和前列腺良性病变组(65例)。术前检测血清tPSA和PSA同源异构体2(p2PSA),并计算前列腺特异抗原密度(PSAD)、PHI和PHID。采用ROC曲线评估各参数在PI-RADS评分3分前列腺癌诊断中效能。结果：前列腺癌组p2PSA、PHI、PSAD、PHID相较于良性病变组均明显增高(P均<0.05)。ROC曲线分析结果显示,PHID、PHI、PSAD和p2PSA诊断前列腺癌的AUC分别为0.808、0.781、0.731、0.725,相较于tPSA(AUC=0.605)均有统计学差异(P均<0.05)。PHID、PHI、PSAD和p2PSA诊断临床有意义前列腺癌(csPCa)的AUC分别是：0.812、0.792、0.756、0.715,但只有PHID、PHI相较于tPSA有统计学上差异(P<0.0...     

实时RT-PCR定量检测前列腺癌患者外周血DD3 mRNA及其临床意义

目的探讨前列腺癌（PCA）患者外周血DD3mRNA的检测方法及其临床意义。方法建立SYBRGreenⅠ实时RT-PCR定量检测DD3mRNA,分别检测39例不同分期PCA患者（PCA组）、32例前列腺良性增生（BPH组）患者和26名健康男性（健康组）外周血中DD3mRNA含量,并进行对比分析。结果建立的SYBR Green实时RT-PCR方法最少可检测到10拷贝的核酸,在原始模板101-107拷贝范围内,CT值与起始模板浓度具有良好的线性关系;扩增后仅有的溶解曲线峰显示很好的特异性;批间变异系数范围为6.0%～14.8%。健康组DD3mRNA均为阴性,27例BPH组患者中4例结果检测在101数量级,而39例PCA组中26例阳性。PCA组未治疗患者和去势治疗患者DD3mRNA阳性率及定量值比较差异均有统计学意义（P〈0.01）,PCA组无骨转移患者和骨转移患者阳性率和定量值比较差异也均有统计学意义（P〈0.05）。结论基于双链嵌合染料SYBRGreen建立的RT-PCR定量检测DD3mRNA方法具有敏感性高、线性检测范围广、特异性强及重复性较好的特点。外周血DD3mRNA的丰度与前列腺癌的发生、发展及转归都有密切关系。     

PSA密度对灰区内前列腺癌的诊断价值

目的:研究前列腺特异性抗原密度(PSA density,PSAD,即血清总PSA与前列腺体积的比值)在F/TPSA位于0.16两侧时对灰区内前列腺癌的预测能力并制定合理的参考界值。方法:收集tPSA位于4～10ng/ml并行前列腺穿刺活检的患者135例,病理证实BPH112例,PCa23例,检测其tPSA、fPSA、F/TPSA及PSAD,分为两组,A组F/TPSA≤0.16,B组F/TPSA>0.16;绘制tPSA、PSAD的ROC曲线,计算并比较曲线下面积,分析PSAD在不同取值时的敏感度和特异度。结果:A组tPSA与PSAD的曲线下面积分别为0.554、0.803(P<0.05);PSAD>0.18时敏感度(75%)和特异度(78.38%)均达到最大。B组tPSA、PSAD的曲线下面积分别为0.549、0.862(P<0.05);PSAD>0.22时,敏感度(72.73%)和特异度(86.67%)均最大。结论:在灰区内tPSA对鉴别前列腺癌无明显价值。联合F/TPSA有助于提高诊断的特异性,当F/TPSA≤0.16时推荐PSAD参考界值为0.18,当F/TPSA>0.16时推荐为0.22。     

前列腺癌中DD3的表达及意义

目的 检测DD3 mRNA在前列腺癌中的表达,探讨其在前列腺癌诊断中的作用,并分析其与前列腺癌临床分期和病理分级之间的关系.方法 采用SYBR-Green I实时荧光定量RT-PCR.法检测DD3 mRNA在34例前列腺癌、20例前列腺增生组织及3种前列腺癌细胞株中的表达,同时收集临床病例数据,分析其表达含量与临床分期和病理分级之间的关系,应用SPSS13.0对数据进行统计分析.结果 ①DD3 mRNA在前列腺癌组织和前列腺癌细胞株中的表达量明显升高,与其在前列腺增生组织中的表达量相比,差异具有显著性(P<0.001).②在不同的临床分期与病理分级中,DD3 mRNA的表达量随临床分期和病理分级增加而增加,其差异亦具有显著性(P<0.001).结论 DD3 mRNA在前列腺癌中呈高表达,可作为前列腺癌的一项特异性早期诊断标记物,其与前列腺癌的临床分期和病理分级具有相关性,提示其有可能在前列腺癌的发生发展中起重要作用.     

应用mRNA差异显示技术筛选卵巢癌耐药相关基因

目的 筛选卵巢癌泰素耐药相关基因。方法 采用间歇诱导法建立了卵巢癌泰素耐药细胞株Ｓｋｏｖ３／Ｔａｘｌ－２５;采用ｍＲＮＡ ＤＤ比较Ｓｋｏｖ３／Ｔａｘｏｌ－２５对泰素耐药增加４４倍,同时对顺铂也产生了耐药。比较Ｓｋｏｖ３和Ｓｋｏｖ３／Ｔａｘｏｌ－２５的ｍＲＮＡ,获得２２个差异条带。对其中５个差异条带进行了ＤＮＡ序列测定,有３个与已知的基因高度同源,分别为ｔＰＡ、Ｋｉａａ０３７２和ＬＤＬＣ。２个为未知     

双重实时荧光逆转录聚合酶链反应检测尿液DD3/PSA mRNA比值及其应用

目的建立双重实时荧光逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测尿液DD3／PSAmRNA比值,评价其初步应用。方法分别在前列腺特异性抗原（PSA）基因外显子1和2、差异显示编码3（DD3）基因外显子1和3之间设计一对引物和一条探针,PSA和DD3基因的TaqMan—MGB探针5’分别标记HEX和FAM荧光素,建立双重实时荧光RT—PCR检测尿液DD3／PSAmRNA比值的方法,并对方法学进行评价。对34例前列腺癌（PCa）、44例良性前列腺增生（BPH）患者前列腺按摩后尿液中的DD3／PSAmRNA比值进行检测,评价其临床应用价值。结果扩增产物经测序证明为PSA和DD3特异性片段。以LNCaP细胞cDNA作模板,PSAmRNA和DD3mRNA最低检测限分别为0,6细胞／反应和60细胞／反应。DD3／PSAmRNA比值批内、批间变异系数分别为3．8％-4,7％和4．1％-4,9％。PCa组尿液DD3／PSAmRNA比值明显高于BPH组（P〈0．01）。尿液DD3／PSAmRNA比值诊断PCa的ROC曲线下面积（AUC）为0．746（95％CI：0．630—0．862）,当截断值为0．254时其敏感度和特异度分别为64．7％和77.3％,其阳性率与临床和病理分级均无关。结论成功建立了双重实时荧光RT—PCR检测尿液DD3／PSAmRNA比值的分子生物学诊断方法。该方法对PCa诊断具有较高特异度和敏感度,且节省操作时间、降低实验成本,有望成为PCa早期诊断的有效方法。     

胃癌腹膜转移中galectin-3 mRNA的表达与意义

目的探讨GALECTIN-3基因在胃癌腹膜转移中的作用。方法通过实时定量RT-PCR方法,对35例同期伴腹膜转移病人的胃癌原发灶、淋巴结转移灶、腹膜转移灶、正常胃粘膜组织中GALECTIN-3MRNA的表达水平进行实时定量RT-PCR检测。结果胃癌原发灶(385.639±98.534)、腹膜转移灶(368.589±93.431)、淋巴结转移灶(375.920±94.346)中GALECTIN-3MRNA表达量同正常胃粘膜(2.158±0.896)中的表达量相比,差异具有统计学意义(P<0.05),胃癌原发灶、腹膜转移灶及淋巴结转移灶三者中的表达量两两相比,差异无统计学意义(P>0.05)。GALECTIN-3MRNA在胃癌原发灶与腹膜转移灶中的表达呈正相关(R=0.997,P=0.000)。结论GALECTIN-3MRNA在胃癌中的高表达与胃癌腹膜转移密切相关。胃癌病灶的GALECTIN-3MRNA检测可作为术前判断胃癌已伴腹膜转移或具有腹膜转移潜能的生物学标记。     

哮喘患者外周血转录因子Foxp3 mRNA表达水平及临床意义

目的:探讨哮喘患者外周血叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)mRNA表达水平及临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR技术检测63例哮喘患者和40例正常对照组外周血中转录因子Foxp3mRNA表达水平。结果:哮喘组患者外周血Foxp3mRNA表达水平(0.32±0.13)较对照组(1.15±0.31)明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);急性发作期患者外周血Foxp3mR-NA表达水平(0.22±0.06)较非急性发作期患者(0.47±0.15)明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);急性发作期重度患者外周血Foxp3mRNA表达水平(0.18±0.04)较对照组(0.29±0.07)明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:哮喘患者外周血中转录因子Foxp3mRNA表达水平明显降低且与疾病分期及病情严重程度密切相关,Foxp3可能参与了哮喘发病过程。     

肝癌组织GPC3 mRNA与AFP mRNA的表达

目的: 探讨肝细胞肝癌(HCC)中GPC3 mRNA与AFP mRNA的表达以及二者单独和联合检测的诊断价值.方法: 半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测HCC 41例,其他肝肿瘤15例,健康人11例肝组织标本中两个基因的表达.结果: GPC3 mRNA在HCC、癌旁、其他肿瘤、远离HCC与正常肝组织的相对表达量分别为78.9±35.5,30.6±21.6,36.6±25.2,23.8±15.5;而AFP mRNA的相对表达量依次为61.2±32.6,31.5±23.6,29.0±24.7,21.2±15.9;各基因在HCC与其他组织间表达差异显著(P<0.01).以各自远离癌灶与正常组织相对表达量的上限(x 1.96s)为界值,HCC中GPC3 mRNA,AFP mRNA的高表达比率分别为80.5 %与63.4 %,而两者联合检测的比率达92.7 %.AFP mRNA与血清AFP水平和HCC分级有关,GPC3 mRNA的表达与HCC的分级及侵袭性有关.HCC中两个指标相对表达量无显著相关性(r=-0.145,P=0.365).结论: GPC3 mRNA可能是一个潜在的特异性HCC标记,与AFP mRNA联检可提高HCC筛查与诊断的比率.     

趋化性细胞因子受体CXCR3 mRNA在异位性皮炎患者的表达及其临床意义

目的 为了研究异位性皮炎患者皮损趋化性细胞因子受体CXCR3在异位性皮炎的发病过程中的作用.方法 采用荧光定量聚合酶链反应检测21例异位性皮炎患者皮损内和18例健康对照者正常皮肤中CXCR3的表达水平;采用直线相关回归分析方法分析CXCR3 mRNA的表达与异位性皮炎病情严重程度的关系.结果 异位性皮炎患者皮损内CXCR3mRNA表达水平明显高于对照组(P＜0.01);异位性皮炎患者皮损内CXCR3 mRNA表达水平与异位性皮炎病情严重程度呈正相关性(r=0.67092,P=0.0009).结论 趋化性细胞因子受体CXCR3可能参与了异位性皮炎的发病过程.     

前列腺癌特异DD3基因实时荧光定量PCR检测方法建立及初步应用

目的：建立实时荧光定量PCR检测特异DD3基因方法,探讨其在前列腺癌早期诊断中的应用价值．方法：根据Genebank中的DD3 mRNA全序列,设计DD3基因的特异引物和探针,构建用于制备DD3基因检测的定量标准品的克隆载体;建立DD3基因的实时荧光定量方法,分别用于前列腺癌患者全血、尿液、前列腺液标本的检测．结果：经稳定性、特异性、重复性和敏感性实验评价,DD3基因实时荧光定量PCR方法的最低检测限为1．64×10^3拷贝／L,线性范围为1．64×10^3～1．64×10^15拷贝／L．对临床收集的19份前列腺癌患者,20份非前列腺癌患者、30份健康者的全血、尿液及前列腺液标本进行检测．19份前列腺癌患者标本中阳性率分别为100％（全血）、80％（尿液）、100％（前列腺液）;20份非前列腺癌患者标本中只有1份前列腺液出现低拷贝值（1×10^5拷贝／L）;30份健康者标本均为阴性．在全血、尿液、前列腺液标本中,前列腺癌患者DD3 mRNA含量明显高于非前列腺癌患者和健康者（P〈0．05）．结论：DD3基因是一种用于前列腺癌早期诊断的特异性指标,可用于生物体液中少量癌细胞的检测,在前列腺癌早期诊断、微转移诊断、预后判断、指导治疗等方面均具有潜在的应用价值．