不同海拔高度交替低氧训练对大鼠骨骼肌线粒体呼吸功能的影响

目的:探讨不同海拔高度交替低氧训练对大鼠骨骼肌线粒体呼吸功能的影响。方法:50只雄性Wistar大鼠随机分为5组:常氧对照组(C组)、常氧训练组(NT组)、2500 m低氧训练组(2500 m HT组)、3500 m低氧训练组(3500 m HT组)、2500 m~3500 m交替低氧训练组(2500 m~3500 m HT组),每组10只。除C组大鼠不进行运动训练外,其余各组大鼠分别在常氧,模拟海拔2500m、3500 m及2500m~3500 m交替环境下进行递增负荷跑台训练和居住,每周训练6天,共4周。训练结束后处死大鼠,即刻取全血和骨骼肌样本,梯度离心法提取线粒体,测定血液红细胞数目(RBC)、血红蛋白(Hb)含量和骨骼肌线粒体呼吸链酶复合体(CⅠ~Ⅳ)活性。结果:(1)RBC和Hb:与C组比较,各训练组都有显著提高(P<0.01,P<0.05)。与NT组比较,低氧训练组都有显著提高(P<0.01)。与2500 m HT组和3500 m HT组比较,2500 m~3500 m HT组均显著提高(P<0.01)。(2)CⅠ~Ⅳ活性:与C组相比,NT组CⅢ活性显著提高(P<0.05),2500 m HT组CI活性显著提高(P<0.05),3500 m HT组CⅠ和CⅢ活性显著提高(P<0.01,P<0.05),2500 m~3500 m HT组CⅠ~Ⅳ活性均显著提高(P<0.01,P<0.05)。与NT组相比,3500 m HT组CⅠ活性显著提高(P<0.01),2500 m~3500 m HT组CⅠ、CⅡ活性显著提高(P<0.01,P<0.05)。与2500 m HT组相比,2500 m~3500 m HT组CⅡ活性显著提高(P<0.05)。结论:低氧训练在提高骨骼肌线粒体呼吸链功能方面较常氧训练更具优势,且交替低氧训练效果最佳。     

高强度间歇训练对老龄大鼠骨骼肌减少症及某些氧化应激、脂肪细胞因子和炎症因子的影响

目的:探讨高强度间歇训练(HIIT)和持续性运动(MICT)对老龄大鼠运动表现、骨骼肌氧化应激、血浆超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、白介素-6/10、脂联素和瘦素分泌的影响。方法:48只8月龄SD大鼠适应性喂养2周后进行体成分、耐力和抓力测试,随机选取12只大鼠作为成年对照组,禁食12 h后宰杀;剩下36只大鼠常规饲养10个月,18月龄时进行适应性跑台1周后随机分为三组:老龄安静组、老龄MICT组和老龄HIIT组,每组12只。之后进行8个月跑台训练,老龄MICT组以速度17 m/min进行跑台训练;老龄HIIT组以起始速度15 m/min,时间为4 min,之后跑台速度增至25 m/min,运动1 min,依次交替进行9个循环;两种运动的总时间均为45 min,1次/天,5天/周。末次训练48 h后检测体成分,并进行耐力和抓力测试;耐力测试后48 h禁食12 h宰杀,腹主动脉离心抽取血浆,连同成年对照组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆和骨骼肌炎症因子(IL-6、IL-10和hs-CRP)、氧化应激(SOD、MDA、8-OHdG和4-HNE)和脂肪细胞因子(瘦素和脂联素)含量。结果:(1)与成年对照组相比,老龄安静组大鼠的体重、体脂/瘦体重比值和体脂百分比显著增加(P<0.01),瘦体重%、骨骼肌指数、抓力和耐力显著降低(P<0.01),血浆氧化应激、hs-CRP和脂联素均显著增加(P<0.05)。(2)与老龄安静组相比,老龄HIIT组大鼠体脂重量显著减少(P<0.05),瘦体重百分比、耐力、抓力和骨骼肌指数显著增加(P<0.05或P<0.01);老龄MICT组大鼠耐力显著增加(P<0.05)。(3)与老龄安静组相比,老龄HIIT组血浆氧化应激水平(MDA:P<0.05,8-OHdG:P<0.01,4-HNE:P<0.05)、慢性炎症状态(hs-CRP,IL-6/IL-10比值,IL-10)和脂联素水平显著降低(P<0.05),但血浆瘦素显著升高(P<0.05),而老龄MICT组脂联素显著降低(P<0.01);与老龄安静组相比,老龄HIIT组和老龄MICT组骨骼肌SOD2显著升高(P<0.01),8-OHdG(P<0.01)和4-HNE(P<0.05)显著降低;与MICT组相比,HIIT组大鼠骨骼肌8-OHdG (P<0.05)和MDA(P<0.01)显著降低。Pearson相关分析显示,耐力与血浆8-OHdG呈负相关(r=-0.72),血浆hs-CRP与体脂百分比(r=0.55)、MDA(r=0.58)和4-HNE(r=0.66)呈正相关,血浆瘦素与体脂%(r=-0.58)呈负相关。结论:高强度间歇训练可通过调控血浆瘦素水平,改善老龄大鼠体成分,增加骨骼肌指数,提高老龄大鼠运动表现;高强度间歇训练可降低老龄大鼠炎症与氧化应激水平。     

高住高练低训不同时程大鼠骨骼肌线粒体呼吸链功能的变化

目的:探讨高住高练低训(HiHiLo)习服过程中大鼠骨骼肌线粒体呼吸链功能的动态变化。方法:48只雄性Wistar大鼠随机分为6组:常氧对照组,HiHiLo 1、2、3、4、5周组,每组8只。HiHiLo的5组大鼠在低氧(模拟海拔2500m)环境和常氧环境中居住和训练相应周数,常氧对照组在常氧环境中不进行运动。各组大鼠在完成相应的训练后处死,即刻取血液和骨骼肌样本,分离血清,提取骨骼肌线粒体,测定血清肌酸激酶(CK)活性及骨骼肌线粒体呼吸链酶复合体NADH-Co Q还原酶(复合体Ⅰ,CⅠ)、琥珀酸-Co Q还原酶(复合体Ⅱ,CⅡ)、Co Q-细胞色素C还原酶(复合体Ⅲ,CⅢ)和细胞色素氧化酶(复合体Ⅳ,CⅣ)活性。结果:与常氧对照组相比,HiHiLo 1、2、3周组CK活性均显著增加(P<0.05,P<0.01)。HiHiLo 1周组CI~IV活性均显著下降(P<0.01),HiHiLo 2周组CI、CII、CIV活性均显著下降(P<0.05,P<0.01),HiHiLo3周组CI活性显著提高(P<0.05),HiHiLo 4周和5周组CI~IV活性均显著提高(P<0.05,P<0.01)。结论:在进行本研究训练方案HiHiLo过程中,骨骼肌需2周的适应期,第3周基本适应,第4~5周线粒体呼吸链功能可显著提高,第5周训练效果最佳。     

4周低氧运动对营养肥胖型大鼠骨骼肌自噬相关因子时序性变化的影响

目的:探讨在低氧条件下运动对营养肥胖型大鼠腓肠肌自噬相关因子P62、LC3、Beclin-1表达的影响以及低氧运动诱导骨骼肌细胞自噬发生的可能机制。方法:采用高脂饮食诱导SD大鼠建立营养肥胖大鼠模型,选取建模成功的肥胖大鼠随机分为5组,每组10只,分别为对照组(C)、低氧训练1周组(E1)、低氧训练2周组(E2)、低氧训练3周组(E3)和低氧训练4周组(E4)。低氧暴露模拟13.6%氧浓度(约为实际海拔3500米氧含量),动物跑台进行训练,速度为20 m/min,坡度为0,每天运动1 h,周末休息,分别训练0周、1周、2周、3周、4周。最后一次训练结束24 h后处死并采样,采用RT-PCR技术检测模型大鼠腓肠肌P62、LC3、Beclin-1 m RNA以及采用Westent Blot技术检测P62、LC3、Beclin-1蛋白在实验干预前后的变化情况。结果:(1)与C组相比,E1、E2、E3组Beclin-1 m RNA表达量显著升高(P<0.05);与C组相比,E2组Beclin-1蛋白表达量显著下降(P<0.05),E4组与E2组相比升高非常显著(P<0.01),E3组与E2组相比变化不显著,E3组显著低于E4组(P<0.05)。(2)E1组、E2组与C组相比P62 m RNA的相对表达量显著增加(P<0.05,P<0.01),E2组与E1组相比显著升高(P<0.05),E3组P62 m RNA的相对表达量非常显著低于E2组(P<0.01),E4组非常显著高于C组、E1组和E3组(P<0.01);E3组肥胖大鼠P62蛋白相对表达量与E2组相比显著升高(P<0.05)。(3)E2、E4组LC3 m RNA相对表达量非常显著高于C组(P<0.01),E3组与C组相比显著增加(P<0.05),五组肥胖大鼠LC3蛋白中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ变化均不明显。结论:(1)低氧运动能显著提升自噬基因的相对表达量,在一定程度上促进自噬的发生,但是自噬基因的转录与自噬蛋白质的合成具有不同步性。(2)在低氧训练的前两周骨骼肌的自噬程度出现增加趋势,但是随刺激时间的延长,骨骼肌的自噬程度逐渐降低,可能是机体对低氧刺激逐渐适应的结果。     

不同运动方式对大鼠血清与肝脏中hepcidin水平及相关调节因素的影响

目的:比较耐力运动及力竭运动对大鼠血液及肝脏中铁调素(hepcidin)表达的影响,并测定分析与之相关的铁代谢指标、低氧应答因子、炎性因子、抗菌肽活性相关指标的变化趋势。方法:雌性SD大鼠30只,随机分为对照组(n=10)、耐力运动组(n=10)、力竭运动组(n=10),对照组不运动,耐力运动组和力竭运动组分别采用为期4周的中等运动强度跑台训练和力竭运动强度跑台训练对大鼠进行干预,而后分别采集血样,进行血常规指标及血清中铁转运因子、低氧应答因子、炎性因子及抗菌肽活性相关指标测定;取肝脏标本,固定、包埋、切片后,利用免疫组织化学染色分别测定不同组别动物肝脏中hepcidin、低氧诱导因子(HIF-1α)、核转录因子kappa b(NF-κB)含量。结果:与对照组相比,4周耐力性运动后大鼠血清中hepcidin水平降低(P<0.05),促红细胞生成素(EPO)浓度升高(P<0.05),白细胞介素6(IL-6)浓度下降(P<0.01)。与对照组相比,4周力竭性运动后大鼠血清及肝脏中hepcidin水平升高(P<0.01),EPO浓度降低(P<0.01),同时伴有血清及肝脏中HIF-1α表达增加(P<0.01),血清转铁蛋白(TF)、可溶性转铁蛋白受体(s TFR)水平降低(P<0.01),血清中白细胞介素1(IL-1)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)水平显著升高(P<0.01,P<0.001,P<0.001,P<0.001);同时血清中与hepcidin抗菌肽活性相关的toll样受体4(TLR4)、NF-κB水平均显著升高(P<0.001)。结论:4周耐力性运动可下调大鼠血清中hepcidin水平;而4周力竭性运动可使大鼠血清及肝脏中hepcidin水平显著上调,提示不同运动方式对hepcidin的影响存在明显差异。     

耐力运动联合NAD合成酶基因CG9940过表达对中老龄果蝇心脏功能、运动能力和寿命的影响

目的:探讨耐力运动、NAD合成酶相关基因CG9940以及耐力运动联合CG9940基因过表达对中老龄果蝇心脏功能、运动能力和寿命的影响。方法:y[1]w[67c23]P{y[+m8]=Mae-UAS.6.11}CG9940[GG01267]雌性果蝇分别与W1118雄性果蝇、arm-Gal4雄性果蝇杂交取F1代分为对照组、运动组、过表达对照组和过表达运动组,4组均收集400只处女蝇,饲养至30天龄开始训练,连续训练5天,次日取材。实时荧光定量PCR测定CG9940基因m RNA表达量,M-mode心动图检测心管收缩时间、收缩直径、舒张直径、舒张功能不全指数、射血分数和心律失常指数,测量攀爬指数,统计生命周期。结果:(1)过表达对照组CG9940 m RNA过表达率为155.2%,过表达运动组的过表达率为152.0%。(2)与对照组相比,运动组心率降低(P<0.01),射血分数增大(P<0.01),舒张功能不全指数降低(P<0.05);过表达对照组心率降低(P<0.05),射血分数增大(P<0.01);过表达运动组心率降低(P<0.01),心脏平均收缩速度增大(P<0.05),射血分数增大(P<0.01),舒张功能不全指数减小(P<0.01),心律失常指数降低(P<0.05)。与运动组相比,过表达运动组心率降低(P<0.05),射血分数增大(P<0.01),舒张功能不全指数减小(P<0.05)。与过表达对照组相比,过表达运动组心率降低(P<0.05),射血分数增大(P<0.05),舒张功能不全指数减小(P<0.01)。(3)运动组攀爬指数高于对照组(P<0.05);过表达运动组攀爬指数高于对照组(P<0.01)和过表达对照组(P<0.05)。(4)运动组寿命高于对照组(P<0.05);过表达对照组寿命高于对照组(P<0.01);过表达运动组寿命高于对照组(P<0.01)、运动组(P<0.01)和过表达对照组(P<0.05)。结论:耐力运动能够提高中老年果蝇运动能力并且能延缓心脏功能性衰退和延长生命周期;NAD合成酶基因CG9940过表达能够延缓果蝇心脏衰老,显著延长果蝇寿命;耐力运动联合CG9940基因过表达能降低中老龄果蝇心律失常和舒张功能不全,同时能增强中老龄果蝇逆重力攀爬特征,提高活动能力,并且延寿效果更好,表明二者对中老龄果蝇抗衰老产生叠了加效应。     

高住低训对大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物活性的影响

目的:探讨高住低训(HiLo)习服过程中大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物活性的动态变化。方法:40只SD大鼠分为5组:常氧对照组以及HiLo1、2、3、4周组,每组8只。HiLo组大鼠每天在模拟海拔2500m(氧含量约为15.4%)的环境生活,在模拟海拔1300m(氧含量约为19.4%)环境游泳1h,每周6天。通过光谱分析法,观察在1~4周时间内,在HiLo作用下大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ(NADH-CoQ还原酶)、复合物Ⅱ(琥珀酸-CoQ还原酶)、复合物Ⅲ(CoQ-细胞色素C还原酶)和复合物Ⅳ(细胞色素氧化酶)活性的变化。常氧对照组不进行运动,测试指标与运动组相同。结果:HiLo1周组大鼠心肌线粒体酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性与对照组相比均显著下降(P<0.05,P<0.01)。HiLo2周组除酶复合物Ⅲ外,其他三种酶复合物活性均显著低于对照组(P<0.05,P<0.01)。HiLo3周组心肌线粒体酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性与对照组相比差异无统计学意义;但线粒体蛋白含量显著升高(P<0.05)。HiLo4周组心肌线粒体酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ活性显著升高(P<0.05,P<0.01);线粒体蛋白含量显著升高(P<0.05)。结论:大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性在HiLo的习服过程中需要3周时间。     

Dynamic changes and clinical significance of coagulation, fibrinolytic function and platelet parameter before and after chemotherapy in lung cancer patients

目的 探讨肺癌患者化疗前后凝血、纤溶功能相关指标与血小板参数的变化及其临床意义.方法 检测60例肺癌患者化疗前后血浆凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)、血浆蛋白C(PC)、游离蛋白S(FPS)、纤溶酶原激活剂抑制物-Ⅰ(PAI-Ⅰ)、血小板计数(PLT)、血小板压积(PCT)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW),并以20例健康体检者作为正常对照.结果肺癌患者化疗前与正常对照相比,血浆FIB、D-D、PAI-Ⅰ含量明显升高 (P<0.05或P<0.01),血浆PC、FPS含量明显降低(P<0.05),PLT、PCT、MPV明显升高(P<0.05);肺癌患者化疗后与化疗前相比,血浆PT、TT、APTT明显缩短(P<0.01),血浆FIB、D-D含量降低(P<0.05或P<0.01)、PAI-Ⅰ含量升高(P<0.01),PC、FPS含量降低(P<0.05),PLT、PCT、MPV下降(P<0.01);肺癌患者化疗前后的凝血、纤溶功能相关指标和血小板参数与患者性别、病理类型、TNM分期、有无转移等临床病理特征之间无显著关联(P>0.05).结论 肺癌患者化疗前凝血、纤溶功能和血小板各项指标明显不同于正常人,总体处于高凝、抗凝功能降低、继发纤溶亢进的状态下,化疗可进一步加剧肺癌患者的凝血功能紊乱.     

低氧耐力运动对营养性肥胖大鼠骨骼肌自噬蛋白表达的影响

目的:通过对高脂膳食诱导的营养性肥胖大鼠模型进行低氧耐力训练,探讨不同低氧浓度的耐力运动对营养性肥胖大鼠骨骼肌自噬相关蛋白LC3、Beclin1、AMPKα2、Sestrin2表达的影响。方法:80只建模成功的营养性肥胖大鼠随机分为8组(常氧安静组、常氧运动组、11.3%组、13.3%组分别在11.3%、13.3%、16.3%静组不进行任何干预,运动组按照20 m/min、40 min/d、5次/周的安排训练8周,末次训练24 h后处死大鼠取腓肠肌,采用Western Blot方法测定腓肠肌自噬相关蛋白LC3(微管相关蛋白1轻链3)、Beclin1(酵母ATG6同源物)、AMPKα2、Sestrin2的表达水平。结果:(1)实施低氧暴露干预后,11.3%低氧组、13.3%低氧组大鼠腓肠肌自噬相关蛋白Beclin1、AMPKα2、Sestrin2表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著高于常氧组(P<0.05)。(2)实施耐力运动干预后,与对应安静组相比,运动组Beclin1、AMPKα2表达水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著性升高(P<0.05);常氧运动组、16.3%低氧运动组、11.3%表达水平显著性升高(P<0.05)。(3)低氧结合耐力运动干预后,与常氧安静组相比,常氧运动组、16.3%低低氧运动组Sestrin2、Beclin1、AMPKα2蛋白表达显著性升高(P<0.低氧运动组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著性升高(P<0.05),低氧运动组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著性升高(P<0.05);且随氧浓度降低,Beclin1、AMPKα2、Sestrin2表达水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值呈现上升趋势。结论:运动和低氧都能显著激活骨骼肌细胞自噬,上调骨骼肌自噬相关蛋白的表达水平;与单纯运动和单纯低氧相比,低氧耐力训练对自噬的调控作用更加明显。     

不同强度急性疲劳运动对大鼠心肌线粒体电子传递链酶复合体活性的影响

目的:研究不同强度急性疲劳运动对大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合体活性的影响,进一步探讨运动性疲劳发生的可能机制。方法:以21只健康雄性Wister大鼠为实验对象,随机等分为安静对照组、大强度运动组和中等强度运动组。大强度运动组大鼠进行间歇性跑台运动,速度为27m/min,总运动时间90min,每10min间歇1min;中等强度运动组大鼠进行持续性跑台运动,速度为18m/min,运动时间100min;对照组大鼠未进行任何运动。差速离心提取大鼠心肌线粒体。分光光度法测定线粒体呼吸链酶复合体(CⅠ～CⅣ)活性。结果:大强度运动组CⅠ的活性与安静对照组相比无显著性差异,CⅡ、CⅢ和CⅣ活性显著低于安静对照组(P<0.01),分别低20.24%、25.37%和41.03%;中等强度运动组CⅠ、CⅢ和CⅣ活性显著低于安静对照组(P<0.05),分别低50.07%、35.90%和20.90%,CⅡ活性无显著性差异。中等强度运动组CⅠ活性显著低于大强度运动组(P<0.01),CⅡ活性显著高于大强度运动组(P<0.01),CⅢ和CⅣ活性与大强度运动组无显著性差异。结论:大强度运动和中等强度运动均会引起大鼠心肌线粒体电子传递链酶复合体活性不同程度的变化,且大强度运动主要影响FADH2电子传递链酶复合体的活性,而中等强度运动主要影响NADH电子传递链酶复合体的活性。     

不同强度耐力运动对大鼠心房Ⅰ型、Ⅲ胶原蛋白的影响及结缔组织生长因子的调节作用

目的:探讨不同强度耐力运动对大鼠心房Ⅰ型胶原蛋白(Col-I)和Ⅲ型胶原蛋白(Col-III)的影响,并研究结缔组织生长因子(CTGF)的表达变化,为探究运动性心房纤颤的发生机制提供依据。方法:24只健康雄性SD大鼠随机分为安静组、中强度组和大强度组,每组8只。进行16周的运动训练,每周训练5天,每天1小时。16周末处死大鼠摘取心脏后分离出右心房,应用RT-PCR、免疫荧光化学和Western Blot技术测定Col-I、Col-III和CTGF基因与蛋白的表达。结果:与安静组相比,大强度组Col-I m RNA和蛋白的表达显著升高(P<0.05和P<0.01);Col-III m RNA增加但无显著性,蛋白表达显著性升高(P<0.01);Col-I/Col-III蛋白表达的比值显著升高(P<0.01);CTGF m RNA和蛋白的表达均显著升高(P<0.05)。与安静组相比,中强度组Col-I m RNA和蛋白的表达增加,但无统计学差异;Col-III m RNA表达显著性降低(P<0.01),蛋白表达无显著性变化;Col-I/Col-III蛋白表达比值增高,但无显著性;CTGF m RNA表达增高而蛋白表达降低,但均无显著性。结论:长期大强度运动可导致大鼠心房Col-I和Col-III显著增加、Col-I/Col-III比例发生失衡,可能与长期大强度运动诱导大鼠心房CTGF的表达增加有关,构成了运动性心房纤颤发生的重要病理机制之一。     

不同低氧训练模式对大鼠脑组织线粒体呼吸链酶复合体活性的影响

目的:探讨不同低氧训练模式对大鼠脑线粒体呼吸链功能的影响。方法:40只健康2月龄雄性Wistar大鼠随机均分为5组:常氧训练组(LoLo)、高住高练组(HiHi)、高住低训组(HiLo)、低住高练组(LoHi)和高住高练低训组(HiHiLo),每组8只。依实验方案,各组大鼠分别在常氧(模拟海拔1500m,大气压为632mmHg)或/和低氧(模拟海拔3500m,大气压为493mmHg)环境中居住及递增负荷训练5周,每周训练6天。最后一次训练后在常氧环境恢复72h,力竭运动后即刻取样。差速离心提取线粒体。分光光度法测定呼吸链酶复合体(CⅠ～CⅢ)活性。结果:4个低氧训练组大鼠脑组织线粒体呼吸链CⅠ活性与LoLo组相比均无显著性差异。LoHi组CⅡ活性显著下降(P<0.01),降低76.199%,其余各组无显著性差异。HiHi组、HiLo组和LoHi组CⅢ活性均显著下降(P<0.01),分别降低71.496%、65.240%和87.838%,HiHiLo组显著性上升(P<0.01),提高170.145%。结论:在模拟海拔3500m的4种低氧训练中,髙住高练低训提高大鼠脑组织线粒体呼吸链功能的作用优于髙住高练、高住低训和低住高练。     

急性运动对大鼠肝脏线粒体呼吸链酶复合物的影响

目的:研究急性运动对大鼠肝线粒体呼吸链酶复合物活性的影响。方法:21只健康雄性Wister大鼠随机分为安静对照组、大强度运动组和中等强度运动组,每组7只。大强度运动组进行大强度间歇性跑台运动,速度为27m/min,坡度为0,总运动时间90min,每运动10min间歇1min;中等强度运动组进行中等强度持续性跑台运动,速度为18m/min,坡度为0,运动时间100min;对照组未进行任何运动。采用分光光度法测定线粒体呼吸链酶复合物(Ⅰ~Ⅳ)活性。结果:与安静对照组相比,大强度运动组复合物Ⅰ和复合物Ⅱ活性无显著性变化,复合物Ⅲ和复合物Ⅳ活性分别下降16%和45%,有统计学意义(P<0.05,P<0.01);而中等强度运动组复合物Ⅰ、复合物Ⅲ和复合物Ⅳ活性分别下降26.1%、24%和65%,有统计学意义(P<0.01),复合物Ⅱ活性显著升高(P<0.01),升高54.7%。与大强度运动组相比,中等强度运动组复合物Ⅰ和复合物Ⅳ活性显著降低(P<0.01),复合物Ⅱ活性显著升高(P<0.01),复合物Ⅲ活性下降9.5%,但无统计学意义。结论:大强度间歇疲劳运动对大鼠肝线粒体NADH呼吸链起始端酶(复合物Ⅰ)和FADH2呼吸链起始端酶(复合物Ⅱ)活性无显著影响,可使复合物Ⅲ和复合物Ⅳ活性显著下降;中等强度持续疲劳运动使大鼠肝线粒体NADH呼吸链酶(复合物Ⅰ、复合物Ⅲ和复合物Ⅳ)活性显著下降,复合物Ⅱ活性显著增强;中等强度运动对肝线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ的影响较大强度运动严重。     

我国耐力运动员线粒体DNA高变区Ⅰ序列异质性多态特征

为了探讨人类运动能力相关的基因标记与分子遗传学机制,选取汉族耐力运动员95人,相应汉人对照92人,对其线粒体基因高变区I(mtDNA HVRⅠ)特异性片段进行扩增、测序,分析其序列多态性特征.结果显示:中国汉人及其耐力运动员mtDNA HVRⅠ总共测得140个多态位点,其中,异质性多态位点27个.中国汉族耐力运动员mtDNA HVRⅠ异质性多态位点20个,位点A16132C,A16135C, C16085G, T16144A, C16111T, C16107T,C16108T,T16189C为其独有.异质性多态类型主要表现为碱基转换和碱基颠换两种,未见碱基缺失及插入改变.运动员T-A颠换频率显著高于常人对照(P< 0.01),而A-G转换和T-G颠换频率则显著低于常人对照(P< 0.01,P < 0.05).研究结果提示,mtDNA HVRⅠ异质性多态特征明显区别于同质性多态改变,mtDNA HVRⅠ作为良好的遗传标记,对于人类运动能力的分子遗传学探讨有重要意义.     

2周耐力训练削弱骨骼肌5′-一磷酸腺苷激活的蛋白激酶信号对急性运动的反应

目的:探讨2周耐力训练对大鼠一次急性运动骨骼肌5′-一磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)信号的影响,分析骨骼肌AMPK信号对耐力训练的适应特点。方法:52只雄性SD大鼠分为训练和未训练两大组,训练组进行2周速度为18m/min、10%坡度、每天60min的耐力训练,结束后进行一次性大强度跑台运动(速度26m/min,10%坡度,60min);未训练组只进行一次性大强度跑台运动。两组分别于一次性运动前(安静时)、运动后即刻(0h)、1h和6h取材。使用高效液相色谱法(HPLC)测定AMP、ATP含量,放射性同位素方法测定AMPK活性。结果:与安静时相比,训练和未训练组大鼠一次性运动后即刻,腓肠肌AMP、AMP/ATP、AMPK分别增加42%、80%、80%和62%、89%、180%,均有统计学意义(P<0.01),AMP和AMP/ATP在运动后1h恢复,AMPK在运动后6h恢复;和未训练组相比,训练组一次性运动后即刻AMP和AMPK的增幅分别下降20%(P<0.05)和100%(P<0.01),但两组ATP和AMP/ATP在各时间点均无显著差异。结论:2周耐力训练削弱骨骼肌AMPK对急性运动的反应,其原因可能与AMP含量的增幅被削弱有关。     

AR阻断剂对运动骨骼肌mTOR信号通路的影响

目的:通过阻断雄激素受体(AR)并结合运动,探讨雄激素对运动骨骼肌哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路的影响特点。方法:30只7周龄雄性SD大鼠,适应性训练后随机分为5组:安静对照组(C)、AR阻断剂组(F)、运动组(E)、AR阻断剂运动组(EF)、假手术组(S)。F、EF组于实验前3 d颈部皮下包埋氟他胺释缓剂,E、EF组进行为期10 d的中等强度运动,于末次运动后6 h取趾长伸肌,测定肌球蛋白重链(MHC)蛋白表达及AR、m TOR、核糖体S6蛋白激酶(p70S6K)、真核起始因子4E结合蛋白(4EBP1)基因及蛋白和磷酸化表达。结果:F组体重与C组相比显著下降(P<0.01),E组无显著差异。F组MHC含量与C组相比显著下降(P<0.05),E组则显著升高(P<0.05);EF组与E组相比显著下降(P<0.01)。F组AR m RNA、p-AR与C组相比显著下降(P<0.01),E组显著升高(P<0.05),EF组与E组相比显著下降(P<0.01)。F组m TOR、p70S6K、4EBP1 m RNA与C组相比均显著下调(P<0.05,P<0.01,P<0.05),E组则显著上调(P<0.05),EF组与E组相比显著下降(P<0.01)。F组p-m TOR、p-4EBP1、4EBP1与C组相比均显著下降(P<0.01,P<0.01,P<0.05),E组p-m TOR、m TOR、p-p70S6K显著增加(P<0.01,P<0.01,P<0.05),EF组与E组相比显著下降(P<0.01)。结论:阻断AR可显著抑制m TOR通路活性,运动则促进m TOR通路活性增强,阻断AR后运动并不能诱导m TOR通路活性增强,表明雄激素对运动骨骼肌m TOR通路的作用主要经AR介导的非基因途径进行。     

耐力运动对GK大鼠肝脏内质网应激和胰岛素信号通路的影响

目的:研究耐力运动对GK大鼠肝脏内质网应激和胰岛素信号通路的影响。方法:GK大鼠16只,随机分为糖尿病组(D组)和糖尿病运动组(DE组),每组8只;对照Wistar雄性大鼠16只,随机分为正常组(C组)及正常运动组(E组),每组8只。DE及E组进行为期6周的跑台耐力运动,速度按周递增分别为15、16、17、18、19、20 m/min,持续时间为1 h,每周运动6天,周日休息,6周耐力训练后进行腹腔注射葡萄糖耐量试验(IPGTT)。Real-time PCR检测肝脏免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)、肌醇需求激酶1(IRE1)、c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)、JNK2、胰岛素受体底物1(IRS1)、蛋白激酶B2(AKT2) mRNA的相对表达;Western Blotting检测Bip、JNK1、JNK2、P-JNK、AKT的蛋白表达。结果:IPGTT测试开始60min～120 min后,DE组血糖水平低于D组(P<0.01)。D组的JNK1蛋白表达高于C组(P<0.05),DE组的JNK2蛋白表达低于E组(P<0.01)。D组的AKT蛋白表达低于C组(P<0.01),DE组的AKT蛋白表达低于E组(P<0.01),各组其余分子表达均无显著性差异。结论:胰岛素抵抗的发生与JNK1表达水平的升高密切相关。6周跑台耐力运动并未影响大鼠肝脏内质网应激水平和GK大鼠肝脏胰岛素信号通路,但其能改善GK大鼠血糖水平,有利于维持血糖水平稳态。     

2周耐力训练削弱骨骼肌5''-一磷酸腺苷激活的蛋白激酶信号对急性运动的反应

目的:探讨2周耐力训练对大鼠一次急性运动骨骼肌5'-一磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)信号的影响,分析骨骼肌AMPK信号对耐力训练的适应特点.方法:52只雄性SD大鼠分为训练和未训练两大组,训练组进行2周速度为18m/min、10%坡度、每天60min的耐力训练,结束后进行一次性大强度跑台运动(速度26m/min,10%坡度,60min);未训练组只进行一次性大强度跑台运动.两组分别于一次性运动前(安静时)、运动后即刻(0h)、1h和6h取材.使用高效液相色谱法(HPLC)测定AMP、ATP含量,放射性同位素方法测定AMPK活性.结果:与安静时相比,训练和未训练组大鼠一次性运动后即刻,腓肠肌AMP、AMP/ATP、AMPK分别增加42%、80%、80%和62%、89%、180%,均有统计学意义(P<0.01),AMP和AMP/ATP在运动后1h恢复,AMPK在运动后6h恢复;和未训练组相比,训练组一次性运动后即刻AMP和AMPK的增幅分别下降20%(P<0.05)和100%(P<0.01),但两组ATP和AMP/ATP在各时间点均无显著差异.结论:2周酎力训练削弱骨骼肌AMPK对急性运动的反应,其原因可能与AMP含量的增幅被削弱有关.     

补充辅酶Q_(10)与递增负荷训练对一次力竭运动大鼠骨骼肌线粒体呼吸链酶复合体活性的影响

目的:探讨补充外源性辅酶Q10(CoQ10)及递增负荷运动训练对一次力竭运动大鼠骨骼肌线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ活性的影响。方法:36只2月龄健康雄性Wister大鼠随机分为4组(n=9):对照组(NC)、补充CoQ10组(QC)、训练组(NE)和补充CoQ10+训练组(QE)。喂养及训练时间共7周。QC组和QE组每天按2mg/100g体重剂量灌胃补充CoQ10一次。NC组和QC组不进行运动训练,NE组和QE组进行递增负荷水平跑台运动训练。7周后各组均进行一次力竭运动,运动后即刻断头处死,迅速取出股四头肌。差速离心提取骨骼肌线粒体,分光光度法测定线粒体呼吸链酶复合体(CⅠ~CⅢ)活性。结果:(1)CⅠ活性:与NC组比较,QC组和QE组均显著下降(P<0.05,P<0.01);与NE组比较,QE组显著下降(P<0.05)。(2)CⅡ活性:与NC组比较,QC组显著升高(P<0.01);与QC组比较,QE组显著下降(P<0.01);与NE组比较,QE组显著上升(P<0.05)。(3)CⅢ活性:与NC组比较,QC组和NE组均显著上升(P<0.01)。结果提示:(1)单纯补充CoQ10和递增负荷训练均可提高力竭性运动后即刻骨骼肌线粒体呼吸链功能,且单纯补充CoQ10效果更佳。(2)递增负荷运动训练与补充CoQ10在提高力竭性运动后即刻骨骼肌线粒体功能方面无协同作用。     

急性缺血性心脑血管疾病组织因子途径的改变

目的观察急性缺血性心、脑血管疾病发作期间组织因子途径的变化及其临床意义。方法观察对象包括69例急性心肌梗死(AMI),71例急性脑梗死患者以及50例健康成人。血浆中组织因子(TF)和组织因子途径抑制物(TFPI)活性测定采用发色底物法,抗原测定用ELISA法;凝血因子Ⅶ(FⅦ)促凝活性测定采用一期凝固法,FⅦa水平测定采用重组可溶性组织因子法,凝血酶原(FⅡ)及纤维蛋白原(Fbg)相对活性分别采用发色底物法及凝血酶时间法测定。结果与对照组相比,AMI患者血浆中TF活性、TF抗原、TFPI活性与TFPI抗原和FⅦa均显著增加(P<0.01),而血浆中FⅦ:C无显著变化(P>0.05),FⅡ及纤维蛋白原(Fbg)亦显著增加(P<0.01);急性缺血性脑卒中(AICS)患者血浆中TF活性、TF抗原均升高(P均<0.01),TFPI活性、TFPI抗原均降低(P<0.05),而血浆中FⅦ:C、FⅦa、FⅡ及纤维蛋白原显著增加(P均<0.01)。两病例组比较,AMI组TF活性、抗原及纤维蛋白原升高更为显著(P<0.01);AMI组TFPI活性、抗原增加,而AICS组均降低,差异具有显著性意义(P<0.01),FⅦ:C在AICS组显著升高(P<0.01),而血浆FⅦa及FⅡ两组差异并无显著性(P>0.05)。结论AMI和AICS的发生存在组织因子途径的启动,但其组织因子途径改变并不相同,患者内皮功能受损,血液存在一定的高凝倾向。