小剂量氢化可的松对脓毒症大鼠早、晚期炎症介质表达的影响

目的 研究小剂量氢化可的松（HC）对内毒素（LPS）诱导的脓毒症大鼠早、晚期炎症介质表达的影响。方法 将72只雄性Wistar大鼠随机分为3组：对照组（A组）8只、模型组（B组）32只、小剂量HC干预组（C组）32只。B组和C组设立2、8、16、24h四个时段点，每个时段点各8只（相应的8个亚组用B2、138、B16、B24及C2、C18、C16、C24表示）。腹腔注射LPS（1mg／kg）建立脓毒症大鼠模型，C组腹腔注射LPS后即刻尾静脉注射小剂量HC（6mg／kg），分别在注射后2、8、16、24h分时段采集各组大鼠血清，采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验检测各组血清TNF-α和IL-1β含量。采集各组大鼠海马组织5mg，制备细胞总蛋白质，进行蛋白质电泳及蛋白免疫印迹分析，检测高迁移率蛋白（HMG）B1水平。结果 各组血清TNF-α、IL-1β水平均以B2组为高，与A组比较，差异有显著性（P〈0．05），C2组与B2组比较下降明显，差异有非常显著性（P〈0．01）。其余各组TNF-α，IL-1β水平与A组及同时点两两比较，差异无显著性（P〉0．05）。A组海马组织可见微量HMGB1表达；B组在B8表达量始增加，以B16、]324为高（P〈0．05）。B组HMGBl表达有持续增加趋势。C组HMGB1表达较B组呈减少趋势，以C16、C24组减少明显，差异有显著性（P〈0．05）。结论 小剂量HC对早、晚期炎症介质TNF-α，IL-1β、HMGB1的表达有明显抑制作用。     

小剂量氢化可的松对脓毒症大鼠海马组织核因子κB表达的影响

目的研究小剂量氢化可的松(HC)对内毒素诱导的脓毒症大鼠海马组织核因子-κB(NF-κB)、抑制因子κB(IκB)表达的影响。方法雄性Wistar大鼠54只随机分为:对照组(A组)6只,模型组(B组)24只、小剂量HC干预组(C组)24只。腹腔注射脂多糖(LPS)1 mg/kg建立脓毒症大鼠模型,尾静脉注射小剂量HC(6 mg/kg)作为干预,分别在注射后2、8、16、24 h分时段麻醉并灌注固定取脑。B组和C组每个时段点各6只。采用免疫组织化学方法及医学图像分析系统检测大鼠海马NF-κBI、κB的表达。结果模型组NF-κB表达较正常对照组显著上调(P<0.05),IκB表达先降低后逐步上升,较对照组亦明显增加(P<0.05),以8 h为最高;干预组海马NF-κB表达较模型组显著下调(P<0.05);IκB表达较模型组明显增加(P<0.05)。结论小剂量HC可通过诱生IκB来抑制NF-κB的表达,进而调控LPS诱导的脓毒症脑功能障碍,NF-κB信号转导途径在其发病机制中起重要作用。     

氢化可的松对严重脓毒症伴心肌损伤大鼠循环及心肌炎症介质的影响

目的观察不同剂量氢化可的松（HC）对埃希大肠杆菌（E.cdi）致严重脓毒症伴心肌损伤大鼠循环中及心肌炎症介质的影响。方法灭活E．coli二次注射法建立Wistar大鼠严重脓毒症合并心肌损伤模型。40只雄性大鼠随机均分为5组：正常对照组、模型组、大剂量组（HC150mg／kg）、中剂量组（20mg／ks）和小剂量组（6mg／kg）,给药后2h采血及左右心室肌标本,检测血浆心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）、肿瘤坏死因子α（TNF—α）、IL-1β、NO、总NOS和心肌匀浆上清液NO、总NOS,并观察心肌iNOS表达情况。结果模型组上述指标均较正常对照组显著升高（P〈0．05）。小剂量组cTnⅠ与正常组无显著性差异,大、中剂量组cTnⅠ反较模型组明显升高。三种剂量HC对血浆TNF—α无明显影响,但均可降低IL-1β,以小剂量更显著,与正常对照组无显著差异;大、中剂量HC均未能降低血浆NO、总NOS,小剂量则能显著降低两者水平（P均〈0．05）;左、右心室肌匀浆含量差异无统计学意义。正常组心肌细胞无iNOS表达,模型组强表达。随HC剂量的递减,iNOS表达逐级减弱。结论不同剂量HC对严重脓毒症大鼠循环中及心肌炎症介质的影响不尽相同,小剂量可明显降低上述炎症介质水平、对心肌细胞iNOS表达的抑制也最显著。提示小剂量HC对严重脓毒症大鼠的心肌损伤有一定的保护作用。     

小剂量氢化可的松对脓毒症大鼠海马组织HMGB1表达的影响及机制研究

目的 研究小剂量氢化可的松(HC)对内毒索(LPS)诱导的脓毒症大鼠晚期炎症介质高迁移率蛋白B-1(HMGB1)表达的影响及核因子κB(NF-κB)信号转导途径在发病机制中的作用.方法 实验用雄性Wistar大鼠随机分为对照组(A组)、模型组(B组)、小剂量HC干预组(C组).B组和C组设立2、8、16、24四个时段点,分别为B2、B8、B16、B24、C2、C8、C16、C24组.腹腔注射LPS(1 mg/kg)建立脓毒症大鼠模型,尾静脉注射小剂量HC(6 mg/kg)作为干预.72只大鼠每组8只采集各组大鼠海马组织,进行蛋白免疫印迹分析检测HMGB1水平.54只大鼠每组6只,采用免疫组化SP法及医学图像分析系统检测大鼠海马NF-κB、IκB的表达.结果 HMGB1在A组可见微量表达,B8组表达量始增加,以B16、B24组为高(P<0.05),B组HMGB1表达有持续增加趋势.C组HMGB1表达较B组呈减少趋势,以C16、C24组减少明显,差异有统计学意义(P<0.05).B组NF-κB表达较A组显著上调,以B8组最高(P<0.05),IκB表达先降低后逐步上升,较A组也明显增加,以B24组为高(P<0.05),C组NF-κB表达较B组显著下调,以C2、C8组为著(P<0.05);IκB表达较B组明显增加,以C8、C16、C24组为著(P<0.05).结论 小剂最HC对晚期炎症介质HMGB1有明显抑制作用,NF-κB信号转导途径在其中起到重要作用.     

不同剂量氢化可的松对脓毒性休克早期大鼠凝血功能影响的实验研究

目的探讨不同剂量氢化可的松（hydrocortisone,HC）对脓毒性休克早期大鼠凝血功能的影响。方法经股静脉注射脂多糖（1ipopolysaccharide,LPS）25ms／kg建立凝血紊乱的脓毒性休克早期大鼠模型。40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组（等量生理盐水替代LPS和HC）、脓毒性休克早期组（休克组,等量生理盐水替代HC）、大剂量HC组（HD组,HC100mg／kg）、中剂量HC组（MD组,HC50mg／kg）、小剂量HC组（LD组,HC5mg／kg）,每组8只。HC干预后4h,采集标本观察大鼠血小板（PLT）计数、抗凝血酶（AT）Ⅲ活性、D-二聚体（D-Dimer）水平及血管性血友病因子（vWF）含量变化。结果休克组PLT计数、ATⅢ活性明显低于正常对照组,而D．Dimer及vWF水平则显著增高,P〈0．05。各HC干预组凝血指标较休克组均有改善,但HD组和MD组仅PLT计数与休克组的差异有统计学意义（P=0．000）,ATⅢ、D—Dimer、vWF3项指标与休克组差异不显著;而LD组各项指标均与休克组差异有统计学意义（P〈0．05）,且D—Dimer和vWF水平与正常对照组差异无统计学意义。MD组结果介于HD和LD组之间,MD组与HD组间差异无统计学意义。结论不同剂量HC对脓毒性休克早期大鼠凝血紊乱的影响不同,小剂量可能有利于改善脓毒性休克早期大鼠的凝血紊乱,大、中剂量对脓毒性休克早期大鼠凝血紊乱的改善并不显著。     

谷氨酰胺对脓毒症幼年大鼠心肌基质金属蛋白酶及其组织抑制因子的影响

目的 探讨谷氨酰胺对脓毒症大鼠心肌胶原的保护机制。方法 选健康18日龄Wistar大鼠121只,每个时间点随机取11只按腹腔注射药物不同分为：（1）生理盐水对照组（0h）;（2）内毒素（LPS）;（3）谷氨酰胺治疗（Gln）组。后两组又分为2、4、6、24及72h时点。在各时点分离心脏,8只用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定基质金属蛋白酶组织抑制因子3（TIMP-3）mRNA表达,另3只用于石蜡切片,用免疫组化方法测定金属心肌基质蛋白酶3（MMP-3）及其TIMP-3,以及用原位杂交方法测定MMP-3mRNA表达。结果 （1）LPS组各时点MMP-3及其mRNA表达较0h组增强,在6h达高峰,到72h虽然有所下降仍高于对照组,P〈0．01;Gln组各时点MMP-3mRNA及其蛋白质表达也较0h组增强,但较LPS组各时点为弱,最高点在24h,P〈0．01;（2）LPS组各时点TIMP-3以及mRNA表达较0h组明显减弱,在6h最低,P〈0．01;Gln组各时点TIMP-3以及mRNA表达也较0h组减弱,但较LPS组为强,最低点在24h,P〈0．01。（3）脓毒症组比Gln组心脏,超微结构改变明显。结论 （1）在脓毒症时MMP-3及其mRNA表达增强,而TIMP-3及其mRNA表达受抑制。（2）谷氨酰胺可以减轻这种影响,而且使这种损伤作用时间向后推迟。     

缺氧缺血性脑损伤新生大鼠核因子κB表达与脑细胞凋亡的关系

目的观察核因子κB（NF—κB）在缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠脑细胞凋亡中的表达，探讨其HIBD后NF—κB与细胞凋亡的关系。方法新生7日龄SD大鼠48只，随机分为2组：假手术组和缺氧缺血（HI）模型组，各24只。HI组大鼠采用Rice方法建立新生大鼠HIBD模型，分别于手术后6、24、48、72h取脑组织切片，用免疫组织化学方法检测NF—κB在海马区的表达、TUNEL方法检测神经细胞凋亡。假手术组不作缺氧缺血处理，采用同样方法检测NF—κB。结果假手术组海马区有少量NF—κB表达，且有少量凋亡细胞，各时间点无明显变化（Pa〉0．05）；HI组NF—κB的表达在6h后开始增加，48h达高峰，并持续至72h（P〈0．05），与假手术组相比较差异有统计学意义（Pa〈0．05）；细胞凋亡在6h即开始增加，在24、48、72h逐渐增加，随时间变化差异有统计学意义（Pa〈0．05），与假手术组相比差异有统计学意义（Pa〈0．05）；直线相关回归分析HI组NF—κB表达与细胞凋亡呈显著正相关（各时点的r=0.478，0.552，0.641，0.627 Pa〈005．缩诊HTBn后NF—κB在海马区的持续活化对促进神经细胞凋亡起重要作用。     

缬沙坦对脓毒症大鼠的早期干预作用

目的 探讨缬沙坦对脓毒症大鼠的早期干预作用。方法 大鼠72只，随机分为4组：正常组、模型组、缬沙坦干预组、生理盐水对照组。每组分别于腹腔注射后2h、4h、8h三个时间点（T2、T4、TR）进行相关检测。正常组仅予生理盐水3mg／kg腹腔注射，模型组予腹腔注射脂多糖（LPS，3mg／kg），缬沙坦干预组在腹腔注射LPS后10min予缬沙坦（5mg／kg）灌胃，生理盐水对照组在腹腔注射LPS后10min子等量生理盐水灌胃。分别于腹腔注射LPS或生理盐水后相应时间点处死动物，取心脏血，采用ELISA法检测各组血清中肿瘤坏死因子（TNF）-α、血管内皮生长因子（VEGF）、可溶性L，选择素（sL-selectin）的浓度。结果 大鼠腹腔注射LPS后，血清TNF-α、VEGF、sL-selectin的浓度均有明显升高。缬沙坦干预组与模型组各时间点相比，上述增高的细胞因子浓度显著降低（P〈0．05）。结论 缬沙坦能显著降低脓毒症大鼠增高的血清TNF-α、VEGF、sL-selectin的浓度水平，通过减少炎症相关介质的释放、抑制自细胞活化、降低毛细血管通透性等机制减轻机体的炎症反应。     

地塞米松对缺氧缺血新生大鼠脑组织兴奋性氨基酸和C-fos蛋白表达的影响

目的观察地塞米松（DXM）对缺氧缺血新生大鼠脑组织兴奋性氨基酸（EAA）和C-fos蛋白表达的影响，探讨其在缺氧缺血性脑损伤（HIBD）中的应用价值。方法建立HIBD动物模型，应用高效毛细管电泳和免疫组化方法，分别检测假手术组、HIBD组、小剂量DXM干预组（0．5mg／kg）及大剂量DXM干预组（10mg／kg）的脑组织EAA含量及C-fos蛋白表达水平。结果HIBD组的EAA含量及C-fos蛋白表达均较假手术组明显升高（P〈0．01）；小剂量DXM组的EAA含量及C-fos蛋白表达较HIBD组无明显变化（P〉0．05）；大剂量DXM组EAA含量较HIBD组明显减少（P〈0．01），较小剂量DXM组减少（P〈0．05）；大剂量DXM组C-fos蛋白表达较HIBD组及小剂量DXM组均明显降低（P〈0．01）。结论缺氧缺血促进脑组织EAA的释放，诱导C-fos蛋白表达；大剂量DXM干预可能通过抑制EAA释放，降低C-fos蛋白表达而对缺氧缺血脑损伤起保护作用。     

神经生长因子对新生鼠缺氧缺血性脑损伤神经修复作用的研究

目的研究神经生长因子（NGF）对新生鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）后，神经干细胞巢蛋白（nestin）及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响，探讨其神经修复作用机制。方法7日龄新生SD大鼠84只，建立HIBD模型后，随机分为假手术组、缺氧缺血组及NGF干预组各28只。神经生长因子干预组腹腔内注射NGF（6000U／kgJd），缺氧缺血组同步注射等量生理盐水。采用免疫组化法检测NGF对新生大鼠HIBD后不同时间内Nestin及VEGF表达的影响。结果缺氧缺血性脑损伤后12、24h，3、7、14d，NGF干预组在大脑皮质、海马和室旁区的Nestin表达高于缺氧缺血组（P〈0．05），且高峰提前到3d。HIBD后即刻、3、12、24h及3d，NGF干预组在大脑皮质、海马区VEGF的表达高于缺氧缺血组（P〈0．05），且高峰提前到3h。结论NGF对HIBD具有神经修复作用可能是通过上调nestin及VEGF的表达而实现的。     

微小RNA在B淋巴细胞发育及B淋巴细胞肿瘤中的作用

微小RNA(miRNA)是一种内源性的单链RNA,含19～25个核苷酸,其在转录后水平与靶mRNA的3’非编码区相作用,通过抑制靶mRNA的翻译或降解靶mRNA来抑制基因的表达。近年来研究发现,miRNA在细胞的分化、增殖和凋亡等生理过程中发挥重要作用,其异常表达促使了多种疾病的发生和发展。B淋巴细胞是细胞免疫重要组成部分,大量的研究表明,miRNA参与B淋巴细胞的发育和B淋巴细胞肿瘤的发生。现就几年来关于miRNA-17-92簇、miRNA-150、miRNA-155和miRNA-181在正常B淋巴细胞发育过程中的表达情况及在B淋巴细胞肿瘤中异常变化的研究作一综述。     

The protective efficacy of recombinant hepatitis B vaccine in newborn infants of hepatitis B e antigen-positive-hepatitis B surface antigen carrier mothers

Recombinant hepatitis B vaccine has been shown to be as safe and effective as plasma-derived vaccines. However, its efficacy in the prevention of perinatal infection has not been fully evaluated in an endemic area. We recruited 110 high risk infants born to hepatitis B e antigen-positive-hepatitis B surface antigen (HBsAg) carrier mothers in a study of recombinant vaccine efficacy. They were randomized into 2 groups, A (54 infants) and B (56 infants), to receive 4 doses of vaccine, containing 20 or 10 micrograms of surface antigen, respectively, at 0, 1, 2 and 12 months of age. An additional 60 high risk infants were recruited later (Group C) and received three 20-micrograms doses of vaccine at 0, 1 and 6 months of age. All infants also received a dose (145 IU) of hepatitis B immunoglobulin soon after birth. Sera were collected at 0, 1, 2, 3, 6, 12 and 14 months of age to assay HBsAg and anti-HBs. At 12 months of age the HBsAg carrier rates were 7.4 and 1.8%, in Groups A and B, respectively. In Group C the HBsAg-positive rate was 3.3%. HBsAg was invariably first observed between 0 and 2 months of age. Virtually all noncarrier infants developed substantial titers of anti-HBs at 12 months of age. No serious adverse effect was observed after vaccination.     

Transient hepatitis B surface antigenemia after neonatal hepatitis B immunization

Following immunization with hepatitis B vaccine, 39 infants were followed prospectively for hepatitis B surface antigen (HBsAg). A total of 69.2% of the infants tested positive for antigenemia at least once. Antigenemia was identified most often at 2–3 days (43.5 %) and 5–6 days (43.5 %) after immunization. The longest documented duration of antigenemia was 21 days. In all cases the antigenemia was transient and cleared by the 28th day post-vaccination.     

Use of hepatitis B vaccine alone or in combination with hepatitis B immunoglobulin for immunoprophylaxis of perinatal hepatitis B infection.

The efficacy of hepatitis B vaccine alone or in combination with immunoglobulin in neonates born to HBsAG positive mothers was investigated. Twenty-four infants were given three doses (at 0, 1, 2 months) of the vaccine alone, while 27 infants were given hepatitis B immunoglobulin (HBIG) and three doses of the vaccine. Fifty-eight infants born to HBsAg positive mothers who did not agree for vaccination or could not come for follow-up constituted the control group. The overall seroprotection rates (anti-HBS levels > or = 10 IU/l) were almost similar in both the groups at 6 months (81 and 76 per cent, respectively). However, the seroprotection rates in babies born to HBeAg positive mothers were better with combination of HBIG and vaccine (71 v. 57 per cent, respectively). It was also observed that seroprotection rates in babies born to anti-HBe positive mothers were even better (100 and 90 per cent in vaccine alone and combination group, respectively). No chronic carrier was detected in babies born to anti-HBe positive mothers.     

Parvovirus B19

Zusammenfassung Infektionen mit Parvovirus B19 verursachen eine der klassischen Kinderkrankheiten, die Ringelröteln (Erythema infectiosum). In den letzten Jahren fand man, dass Parvovirus-B19-Infektionen neben dieser meist problemlos verlaufenden Symptomatik auch mit schweren Erkrankungen unterschiedlicher Organbereiche wie Arthritiden und Arthralgien, Anämien, Thrombo- und Granulozytopenien, Hepatitiden, Enzephalitiden, Meningitiden und Myokarditiden einhergehen können. Hierbei persistiert das Virus oft über längere Zeiträume im Blut oder in bestimmten Geweben. Besonders gefährdet sind Immunsupprimierte. Infektionen bei schwangeren Frauen können zu Spontanaborten, Totgeburten oder Hydrops fetalis führen. Aufgrund der neuen epidemiologischen Daten sollten Infektion und Übertragungswege des Parvovirus B19 mehr Beachtung als bisher erfahren.     

乙型肝炎高危儿免疫预防效果及乙肝病毒母婴传播影响因素分析

目的 分析乙型肝炎病毒(HBV)母婴传播影响因素及乙肝高危儿免疫预防的效果,为儿童乙肝防治提供科学依据。方法 回顾性调查539例HBsAg阳性产妇及其6个月至5岁的乙肝高危儿551例,并检测乙肝高危儿的乙肝标志物,分析乙肝病毒母婴传播的影响因素。结果 乙肝疫苗接种率为100%,96.6%联合注射了乙肝疫苗和乙肝免疫球蛋白(HBIG)。各年龄段乙肝高危儿的HBsAg阳性率差异无统计学意义;HBsAb阳性率随年龄增长逐步下降 (P<0.01)。高危儿母亲为HBsAg、HBeAg双阳性者较单纯HBsAg阳性的乙肝感染率高 (15.1% vs 0.2%,P<0.01)。单纯接种乙肝疫苗的高危儿乙肝感染率 (28.6%)高于联合免疫注射者 (2.8%),P<0.01。结论 乙肝高危儿HBsAb阳性率随年龄增高逐渐下降。母亲HBsAg、HBeAg双阳性和出生未联合免疫注射是乙肝病毒母婴传播的危险因素。