脑缺血再灌注损伤后神经元损伤机制及治疗研究进展

近年来 ,对脑缺血再灌注损伤的研究越来越深入 ,大量的实验研究表明 ,脑缺血再灌注损伤对脑损害的机制是非常复杂的 ,本文就脑缺血再灌注损伤的相关病理生理机制及治疗方面的进展进行综述。1脑缺血再灌注损伤的病因机制1.1兴奋性氨基酸 (EAA)与缺血再灌注损伤EAA是一种神经递质 ,神经系统内EAA主要是谷氨酸(Glutamate) ,EAA受体有三种亚型 :N -甲基 -D -天门冬氨酸受体 (NMDA)、α -氨基羟甲基恶唑丙酸受体 (AMPA)、亲代谢受体。其中NMDA受体是受配基调节的离子通道 ,对Ca2 + 具有通透性 ,可被Mg2 + 电压依赖性阻断。EAA造成的…     

巴比妥对小鼠大脑皮层的[~3H]MK—801结合位点影响

兴奋性氨基酸(EAA)n—methyl—D—aspartate(NMDA)受体是一个受体—离子通道复合物,有多个不同活性区域调节点,其中拟精神药Phencyclidine(PCP)和thienycyclohexypiperidine(TCP)能与受体—离子通道内面特异位点结合,调节NMDA受体功能。Dizocilpine(MK—801)是非竞争性NMDA受体拮抗剂,亦能与PCP点结合而具抗惊厥作用和脑缺血保护作用。巴比妥     

突触内与突触外NMDA受体在β-淀粉样蛋白减少海马神经元突触后密度蛋白-95表达中的作用

目的 研究可溶性Aβ寡聚体在海马神经元中对突触蛋白表达的影响.方法 用免疫细胞化学方法检测在NMDA拮抗剂与激动剂作用下,Aβ25～35对突触后密度蛋白(PSD-95)表达的影响.结果 Aβ25～35引起的PSD-95减少具有时间、剂量依赖性.PSD-95的减少可被非特异性NMDA受体拮抗剂(MK801)缓解;突触外NMDA受体被阻断时,也可显著缓解;而在突触内NMDA受体被阻断时,无显著性改变.结论 Aβ引起的PSD-95减少依赖NMDA受体活性,突触外NMDA受体可能参与Aβ诱导突触蛋白降解.     

促离子型谷氨酸受体在正常大鼠下丘脑视前区的表达

目的:研究促离子型谷氨酸N-甲基-D-门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体亚基(NR2A、NR2B、NR1)和α-氨基-3-羟基-5-甲基异恶唑-4-丙酸(Alpha-amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4-propionic acid,AMPA)受体亚基(GluR1、GluR2、GluR3、GluR4)在正常大鼠下丘脑视前区(Preoptic area,POA)的表达。方法:分别采用逆转录实时荧光定量PCR和Western blot技术检测成年SD大鼠(n=12)视前区促离子谷氨酸受体亚基。结果:通过逆转录实时荧光定量PCR技术在所有大鼠视前区均可检测到Nr2a、Nr2b、Nr1、Glur1、Glur2和Glur3mRNA,但未检测Glur4 mRNA。在视前区,NMDA受体亚基NR2A mRNA和蛋白表达显著低于NR1(P0.01),而NR2B和NR1的mRNA、蛋白表达差异无统计学意义(P0.05);AMPA受体亚基Glur1和Glur3mRNA表达显著低于Glur2 mRNA(P0.01),而Glur1和Glur3 mRNA的表达丰度差异无统计学意义(P0.05)。Western blot实验显示,AMPA受体亚基GluR3的蛋白表达明显高于GluR2(P0.05),但GluR1和GluR2亚基蛋白表达无统计学差异(P0.05)。结论:在正常大鼠下丘脑视前区中有促离子型谷氨酸NMDA受体和AMPA受体表达,其主要亚基为NR2B、NR1、GluR1、GluR2和GluR3。     

由KA激活的谷氨酸受体亚基的cDNA克隆

脊椎动物中枢神经系统中快激动性神经传递主要是由L-谷氨酸(Glu)介导的。Glu的离子型受体,在药理、生理和激动剂结合这些性质基础上可分类为NMDA(N-甲基-D-天冬氨酸),AMPA(α-氨基-3-羟基-5-甲基-噁唑-4-丙酸)和KA(海人酸)亚型。在对编码Glu非NMDA受体亚基的cDNA克隆序列作比较后可发现:至少有两类亚基:G1uR1-GluR 4和GluR 5。作者现已克隆和表达了一个新的功能性Glu受体亚基——GluR6。它与G1uR1-GluR4有十分不同的药理特性。作者用Glu受体GluR5 cDNA克隆的编码区作探针,从大鼠小脑cDNA库中分离出一个有4 559个     

N-甲基-D-天冬氨酸受体-3亚基研究进展

<正>NMDA受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)是一种离子通道型谷氨酸受体,这类受体还包括KA受体(kainic acid receptor,KAR)和AMPA受体(α-amino-3-hydrox-y-5-methyl-4-isoxa-zolep-propionate receptor,AMPAR)。绝大部分NMDA受体分布于中枢神经系统,参与兴奋性突触传     

NMDA受体在培养海马神经元树突树上的表面表达及定位

目的　研究NMDA受体在不同发育阶段的培养大鼠海马神经元的表面表达以及在树突结构上的定位。　方法　构建绿荧光蛋白 (GFP)标记的NMDA受体NR1a亚单位的表达载体 (GFP NR1a) ,转染原代培养 5d的大鼠海马神经元 ,用抗GFP抗体和Cy3交联的二抗染色活细胞表面的受体簇。结合青荧光蛋白 (CFP)的共表达突出神经元的结构细节 ,观察表面NMDA受体簇的分布。　结果　GFP NR1a转染的神经元能表达点状、且分布于全细胞的绿荧光NMDA受体簇 ,在成熟神经元的树突上多为表面受体簇。培养 7d和培养 17d的转染神经元树突表面的NMDA受体簇密度并无显著差异。另外 ,培养 7d的海马神经元 ,表面NMDA受体簇几乎都位于树突干上 ,而树突丝上则罕见 ;培养 2周后 ,约一半的NMDA受体簇分布于树突棘。　结论　表面NMDA受体簇的分布具有树突结构相关的特异性 ,尤其是发现在发育早期NMDA受体簇罕见于树突丝 ,却已广泛分布于树突干上 ,且密度相当于成熟神经元。提示在突触形成过程中NMDA受体可能是以预先表达于树突干表面的受体簇形式被新形成的突触所征募     

腺苷与癫痫

内源性腺苷(adenosine,AD)可能是脑内自然抗痫物质之一,通过细胞膜上的A_1、A_2、A_3受体发挥作用。兴奋性氨基酸(excitatory amino acid,EAA)释放增多、NMDA受体过度刺激、Ca~(2+)大量内流与癫痫的产生密切相关;而内源性腺苷的大量释放能终止癫痫发作,对神经细胞起保护作用。今后选择性腺苷受体激动剂的发展可为癫痫治疗提供新的更有效的药物。     

新生大鼠大脑皮层完整神经元上的NMDA受体单离子通道特性

兴奋性氨基酸受体(EAAR)是脊椎动物中枢神经系统中最主要的兴奋性神经递质受体。分为NMDA;KA;AMPA;AP_(43)ACPD五个亚型。NMDA受体与中枢神经系统的许多重要生理、病理过程密切相关。以往对NMDA受体单离子通道特性的研究均是在从神经元上撕下的膜片上(外面向外式)进行的。而有许多研究表明     

AMPA和KA受体的药理学和生理功能

谷氨酸受体是脊椎动物中枢神经系统中一类主要的兴奋性神经递质受体，可分为离子型和代谢型两大类。离子型谷氨酸受体（iGluR）是非特异性阳离子通道，包括NMDA、AMPA和海人藻酸（kainate，KA）受体通道（图1），它们在快速兴奋性突触传送中发挥着重要作用。由于NMDA和代谢型谷     

右美沙芬抗抑郁作用及其机制研究

目的:探讨右美沙芬(DXM)的抗抑郁作用及其机制。方法:利用束缚加噪声刺激法构建抑郁症小鼠模型,并采用强迫游泳实验、悬尾实验及旷场实验探索DXM的抗抑郁作用,采用分子生物学方法检测DXM对小鼠脑内N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体活性以及总一氧化氮合酶(NOS)和各类型NOS含量的影响,并研究其作用机制。另外,预先向小鼠腹腔注射NMDA受体拮抗剂MK-801(MK)、NMDA、NO前体L-精氨酸(L-ARG)、内皮型NOS(eNOS)抑制剂Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)、诱导型NOS(iNOS)抑制剂氨基胍(AG)、神经元型NOS(nNOS)抑制剂7-硝基吲唑(7-NI)或磷酸二酯酶5抑制剂西地那非,再给予DXM,验证DXM抗抑郁作用的机制。结果:DXM具有抗抑郁作用,且呈剂量依赖性;DXM能够抑制大脑NMDA受体活性,且呈剂量依赖性,DXM能够抑制eNOS及nNOS的表达;MK、L-NAME以及7-NI能够促进DXM的抗抑郁作用,NMDA、L-ARG以及西地那非能够抑制DXM的抗抑郁作用,AG不影响DXM的抗抑郁作用。结论:DXM具有抗抑郁作用。NMDA受体及L-ARGNO-cGMP信号通路可能参与这一过程。     

中枢神经系统中锌抑制NMDA受体反应的机制

锌在中枢神经系统谷氨酸能神经末梢中含量丰富 ,而且在神经传导中能释放入突触间隙 ,浓度可达30 0 μmol L。作为最重要的谷氨酸离子型受体 ,N 甲基 D 门冬氨酸 (NMDA)受体的反应与突触可塑性、心理应激反应以及多种神经病理改变密切相关。Zn2 能抑制由NMDA受体介导的电流 ,其抑制NMDAR的作用包括电压依赖和电压非依赖两种机制 ;同时 ,Zn2 对由不同亚基组成的NMDA受体反应的敏感性也不相同。此外 ,NMDAR上包括质子、多胺在内的多个结合位点也与Zn2 的抑制作用有关     

抗NMDA 受体抗体在神经精神狼疮发病机制中的研究进展

系统性红斑狼疮是一种累及全身多个器官和系统的自身免疫病,出现神经精神症状时,称为神经精神狼疮(NPSLE)。N-甲基-D-天(门)冬氨酸(NMDA)受体是一种跨膜离子通道型谷氨酸受体,抗NMDA 受体抗体主要分为抗NR1 型和抗NR2 型,近年抗NMDA 受体抗体在NPSLE 的发病机制中的作用成为一研究热点,尤其是抗NR2 抗体与NPSLE 密切相关,本文就到目前为止NMDA 抗体在NPSLE 中的作用机制的研究进展作一综述。     

逆转EphB2的缺乏可以改善AD小鼠的认知功能

阿尔茨海默病(AD)中,Aβ寡聚物通过消弱神经元NMDA型谷氨酸受体的作用导致认知功能障碍,而NMDA型谷氨酸受体的功能受到受体赖氨酸激酶EphB2的调节。EphB2胞外有三个结构域:配体结合结构域(LB)、富含半胱氨酸结构域(CR)、Ⅲ型纤维连接蛋白重复结构域(FN)。实验证实Aβ寡聚物与EphB2的结合区域为FN,Aβ寡聚物结合到NMDA的FN区域后可促使蛋白酶体内EphB2的降解从而降低EphB2的水平。已知转基因hAPP小鼠模型和AD患者的大脑记忆相关区域均可检测到EphB2的耗竭。为确定EphB2的缺乏是否会干扰NMDA受体依赖功能,美国科学家通过导入慢病毒载体来改变小鼠大脑记忆中心位置神经元表达EphB2。通过短发夹RNA介导基因沉默技术的使齿状回EphB2表达降低可使非转基因小鼠     

氟中毒大鼠脑组织中NMDA受体及内质网应激相关通路蛋白的表达

背景：前期研究发现N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDA)受体与氟相关，但其在氟诱导的内质网应激中的作用尚不明确。目的：观察实验性氟中毒大鼠脑组织中兴奋性神经递质NMDA受体及内质网应激IRE1α-ASK1-JNK通路蛋白表达变化，并应用NMDA受体抑制剂干预SH-SY5Y细胞，探讨氟中毒神经系统损伤的发病机制。方法：(1)动物模型：18只1月龄SD大鼠随机分为对照组(饮水含氟量<0.5 mg/L)、低氟组(饮水含氟量为10.0 mg/L)、高氟组(饮水含氟量为100.0 mg/L)，每组6只，雌雄各半。饮水摄氟饲养6个月后，观察大鼠氟斑牙发生情况，测定24 h尿氟含量；大鼠麻醉处死后取脑组织观察组织病理变化，蛋白印迹法检测脑组织中NMDA受体及IRE1α、ASK1、JNK蛋白表达。(2)细胞模型：体外培养SH-SY5Y细胞，选择终浓度为0.3 mmol/L和3 mmol/L的氟化钠染氟处理，并用10μmol/L的NMDA受体拮抗剂Ifenprodil、MK-801对染氟细胞进行干预，观察相关蛋白改变。结果与结论：(1...     

突触后突触结合蛋白在长时程增强过程中介导AMPA受体的胞吐作用

<正>N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体依赖性长时程增强(long-term potentiation,LTP)引起的突触联系增强具有重塑神经环路及调节学习和记忆的作用。在NMDA受体依赖性LTP诱导过程中,Ca2+内流会刺激突触α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑丙酸(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole propionic acid,AMPA)受体的募集,从而强化突触联系。然而,Ca2+诱导AMPK受体募集的机制尚未明确。Wu等的研究发现,在小鼠海马CA1区的锥体神经元中同时阻断突触结合蛋     

小鼠大脑皮质N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体的检定及其在衰老时的变化

以放射性配基结合分析法对正常成年小鼠(3月龄)大脑皮质NMDA受体作了检定,观察了衰老过程中小鼠NMDA受体、长时程电位增强(long-term potentiation,LTP)等的变化以及补肾中药复方对这些变化的影响。结果归纳如下:正常成年小鼠大脑皮质NMDA受体的最大结合容量(B_(max))和平衡解离常数(Kd)分     

侧脑室注射NMDA受体激动剂后精神分裂症小鼠海马齿状回内NR1和BrdU的改变

目的:探讨精神分裂症(schizophrenia,SP)小鼠侧脑室注射N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体激动剂后,海马齿状回(dentate gyrus,DG)颗粒细胞层NR1和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)阳性细胞数量的改变。方法:选择健康6周龄雄性C57小鼠,地卓西平马来酸盐(MK-801)慢性给药制备精神分裂症动物模型,实验分为NMDA组、生理盐水组、SP组和空白对照组共四组,NMDA组侧脑室注射NMDA受体激动剂。BrdU标记后行免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜下观察和计数DG颗粒细胞层NR1和BrdU阳性细胞的表达和数量变化。结果:(1)NR1阳性细胞数在NMDA组、空白对照组、SP组和生理盐水组分别为16.1±2.08,14.5±2.17,19.4±4.65,19.5±4.33,经比较,NMDA组和空白对照组NR1阳性细胞的数量明显少于SP组(P<0.05),但NMDA组与空白对照组相比无明显差异(P>0.05),SP组与生理盐水组相比也无明显差异(P>0.05)。(2)BrdU阳性细胞数在NMDA组、空白对照组、SP组和生理盐水组分别为5.2±2.53、5.3±0.82、3.4±1.58、3.5±1.35,经比较,NMDA组和空白对照组分别多于SP组(P<0.05),和生理盐水组(P<0.05);但NMDA组较空白对照组无明显差异(P>0.05),SP组较生理盐水组亦无明显差异(P>0.05)。结论:SP小鼠侧脑室注射NMDA受体激动剂后,可引起DG颗粒层NR1阳性细胞数减少和BrdU阳性神经细胞数的增多。     

代谢型谷氨酸受体第5亚型的研究进展

代谢型谷氨酸受体第 5亚型 (m G1u R5 )高表达区域是纹状体、海马及大脑皮质。它是与 G蛋白耦联的受体 ,通过 1、4、5 -三磷酸肌醇 (IP3)和 Ga2 +作为第二信使系统发挥生物学效应。它与中枢神经系统发育的可塑性有关 ;可加强大脑皮质 -氨基丁酸 (GABA)能神经元的抑制性突触传递。在纹状体内 ,它可加强NMDA受体的神经毒性作用 ,并与底丘脑核及多巴胺 (DA)系统发生联系 ,可能参与调节基底节的运动 ,并可能与帕金森病 (PD)动物模型中锥体外系症状的产生有关。在海马内 ,m G1u R5可形成长时程增强效应 (L TP) ,与学习和记忆有关     

24 NMDA受体在大鼠大脑皮层内的表达-mRNA原位杂交法

<正>谷氨酸是脊椎动物中枢神经系的主要兴奋性神经递质,对中枢神经系的可塑性及学习起很大作用.N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体是谷氨酸的受体之一.当NMDA受体活动增强时,可使钙离子间细胞内流量增加,是脑外伤后引起脑水肿及脑细胞坏死的原因之一.为观察NMDA受体在成年大鼠大脑皮层及嗅脑内的分布,我们用SD大鼠作实验.灌注取脑后,将脑作冰冻切片,用NMDA受体的信息核糖核酸为探针(NMDAmRNA),用碱性磷酸酶法染色,用olympus AH_3型显微镜进行观察.有NMDA受体分布的区域染成鲜蓝色.在镜下观察到NMDA受体为细粉末点状,分布在细胞的不同部位.观察结果表明NMDA受体在大鼠皮层及嗅脑内有广泛分布.嗅球的僧帽状细胞的胞浆内含大量NMDA受体,大脑前额叶及其基底前脑的各层细胞均含NMDA受体,而顶枕叶的皮层则主要在2～3层及第5层锥体细胞含NMDA受体.大脑及嗅球内NMDA受体在不同区域内分布的不均匀现象,可能表明大鼠的嗅脑、前额叶及基底前脑在其学习活动中起着较重要作用.