FHIT和PCNA在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中的表达与临床意义

目的研究脆性组氨酸三联体基因（FHIT）蛋白和增殖细胞核抗原（PCNA）在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌中的表达情况,探讨两者在宫颈癌早期诊断和发生发展中的临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测20例正常宫颈组织;20例宫颈CINI级、25例CINⅡ／Ⅲ级;60例宫颈癌组织中的FHIT蛋白和PCNA的表达。结果FHIT蛋白在正常宫颈组、宫颈CIN组、CINI组、CINⅡ／Ⅲ组和宫颈癌组中的阴性率分别为0％（0／20）、24．4％（11／45）、10．0％（2／20）、36．0％（9／25）和66．7％（40／60）,各组间阴性率比较差异有统计学意义（P〈0．05）;PCNA在正常宫颈组织、宫颈CIN组、宫颈癌组中的阳性率分别是65．0％（13／20）、93．3％（42／45）和98．3％（59／60）,各组间阳性率比较差异有统计学意义（P〈0．05）;在宫颈CIN和宫颈癌中,FHIT和PCNA的表达有一定的相关性（P〈0．05）。结论检测宫颈CIN中的FHIT蛋白表达情况,可用作高级别的CIN筛查或预测。FHIT和PCNA对于宫颈癌前期病变和宫颈癌的筛查和早期诊断具有一定的临床参考价值。     

宫颈癌及上皮内瘤变中p16表达与预后关系的研究

目的研究宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中p16基因表达的，临床意义。方法收集我院1996—2006年间妇科门诊活检及住院手术标本共164例，其中宫颈鳞状细胞癌86例，有淋巴结转移者22例，无淋巴结转移者28例，宫颈上皮内瘤变（CIN）78例，复习常规病理HE切片，并采用S-P免疫组化法对86例宫颈鳞癌和78例宫颈上皮内瘤变（CIN）蜡块标苓进行标记，观察P16基因的表达情况并进行对照分析。结果P16基因在宫颈鳞癌及CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ中的阳性表达率分别为3g．3％（33／86）、70．0％（14／20）、484％（16／33）、44．0％（11／25），明显低于正常宫颈组织93.3％（28／30）（P〈0．05）；有淋巴结转移者和无淋巴结转移者P16基因阳性表达率分别为27．2％（6／22）、535％（15／28）（P〈005）。结论P16基因表达与宫颈鳞癌、CIN病变程度及淋巴结转移有关。     

采用组织芯片技术研究宫颈癌中HPV与细胞周期调控因子p27表达的关系

目的研究宫颈癌组织中HPV感染与细胞周期调控因子p27表达的关系及意义。方法采用组织芯片技术制作60例宫颈癌组织芯片，同时用S—P免疫组织化学和原位分子杂交方法检测宫颈癌组织芯片中HPV、p27、p27mRNA的表达。结果60例宫颈癌组织中HPV、p27、p27mRNA的阳性率分别为48．3％、38．3％、51．7％。淋巴结转移阳性宫颈癌中p27和p27mRNA阳性率明显低于淋巴结转移阴性宫颈癌（P〈0．01）。淋巴结转移阳性宫颈癌中HPV阳性率明显高于淋巴结转移阴性宫颈癌（P〈0．05）。宫颈癌和CINⅢ级宫颈上皮内瘤变组织中HPV阳性率明显高于CINⅠ级和CINⅡ级（P〈0．05）。而p27和p27mRNA阳性率明显低于CINⅠ级和CINⅡ级宫颈上皮内瘤变组织（P〈0．05）。宫颈癌中HPV与p27及p27mR—NA表达呈明显负相关（r=-0．574，P〈0．05；r=-0．612，P〈0．01）。结论HPV感染和细胞周期调控因子p27低表达与宫颈癌密切相关。HPV感染与p27低表达有关。HPV和p27可作为评估宫颈癌预后的参考指标。应用组织芯片大规模高效检测临床组织样本是可行的，具有快速、方便、经济、准确的特点。     

宫颈癌泛素与细胞周期调控因子p27表达的关系

目的：研究宫颈癌组织中泛素（Ubiquitin）对细胞周期调控因子p27表达的影响及意义。方法：采用组织芯片技术制作60例宫颈癌和30例宫颈上皮内瘤变（Ⅰ～Ⅲ级）组织芯片，同时用S-P免疫组织化学和原位分子杂交方法检测组织芯片中Ubiquitin、p27、p27 mRNA的表达。结果：60例宫颈癌组织中Ubiquitin、p27、p27mRNA的阳性率分别为45．0％、38．3％、51．7％。淋巴结转移阳性宫颈癌中p27和p27mRNA阳性率明显低于淋巴结转移阴性宫颈癌（P〈0．01）。宫颈癌和CINⅢ级宫颈上皮内瘤变组织中p27和p27mRNA阳性率明显低于CINⅠ级和CINⅡ级（P〈0．05）。宫颈癌和CINⅢ级宫颈上皮内瘤变组织中Ubiquitin与p27表达密切相关，而与p27mRNA无关。结论：细胞周期调控因子p27低表达与宫颈癌密切相关，p27可作为评估宫颈癌预后的参考指标。Ubiquitin在p27蛋白质降解过程中发挥重要作用，与p27低表达有关。     

人乳头状瘤病毒在宫颈癌及癌前病变诊断中的意义

目的检测人乳头状瘤病毒HPv在宫颈癌（CO）和各级宫颈上皮内瘤变（CIN）中的表达情况,探讨其作为宫颈癌前病变的特异性标志物的可能性。方法对我院2008年10月到2010年10月经病理确诊的19例宫颈癌、55例CIN（包括CINI级20例、CINⅡ级16例和CINHI级19例）和30例宫颈炎患者的宫颈脱落细胞,采用基因芯片技术对PCR扩增产物进行HPv检测,观察不同病情宫颈组织中HPV的感染情况及型别分布状况。结果HPV在宫颈炎、CINI级、CINⅡ级、CINIII级和宫颈癌患者组织中的检出率分别为43．3％、50％、68．8％、84．2％和94．7％。CINII／III级及宫颈癌组患者HPV检出率明显高于宫颈炎组和CINI组。检出型别主要是HPV16型,在宫颈炎症组、CINI级、CINII级、CINⅢ级和宫颈癌组宫颈刷脱细胞中HPV16型检出的阳性率分别为6．67％、15％、31．3％、42．1％、和68．42％。同时随着病情的加重,其阳性率也逐渐升高,其中在宫颈癌组中最高,与宫颈炎症组、CINI组及CINⅡ组比较,差异有显著性（P〈0．05）,与CINⅢ组比较,差别无显著性（P〉0．05）。结论HPV感染是宫颈癌前病变的主要致病因素,其中强Pv16型感染与其密切相关,随着病变程度的加重,HPV16栓出率升高。提示HPV16为宫颈癌的高危因素。     

宫颈组织中脆性组氨酸三联体基因和凋亡抑制蛋白的表达及临床意义

目的研究脆性组氨酸三联体基因（FHIT）蛋白和凋亡抑制蛋白（survivin）在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中的表达情况,探讨两者在宫颈癌早期诊断和发生发展中的临床意义。方法采用免疫组织化学sP法检测20例正常宫颈组织;20例宫颈CINI级、25例CINⅡ／Ⅲ级;60例宫颈癌组织中的FHIT蛋白和凋亡抑制蛋白的表达。结果FHIT蛋白在正常宫颈组、宫颈CIN组、CINⅠ组、CINⅡ／Ⅲ组和宫颈癌组中的阴性率分别为0％（0／20）、24．4％（11／45）、10．0％（2／20）、36．0％（9／25）和66．7％（40／60）,各组间阴性率比较差异有统计学意义（P〈0．05）;凋亡抑制蛋白在正常宫颈组织、宫颈CIN组、宫颈癌组中的阳性率分别是20．0％（4／20）、31．1％（14／45）和95．0％（57／60）,各组间阳性率比较差异有统计学意义（P〈0．05）;在宫颈CIN和宫颈癌中,FHIT和凋亡抑制蛋白的表达有一定的相关性（P〈0．05）。结论检测宫颈CIN中的FHIT蛋白表达情况,可用作高级别的CIN筛查或预测。FHIT和凋亡抑制蛋白对于宫颈癌前期病变和宫颈癌的筛查和早期诊断具有一定的临床参考价值。     

宫颈上皮内瘤变组织人乳头瘤病毒感染与凋亡抑制基因表达的相关性研究

目的 探讨宫颈癌发生、发展过程中人乳头瘤病毒（HPV）感染与凋亡抑制基因Bcl-2表达的关系。方法 采用免疫组化法检测正常宫颈、慢性宫颈炎及宫颈上皮内瘤样病变Ⅰ级（CINⅠ）、CINⅡ、CINⅢ共116例组织中凋亡抑制基因Bcl-2的表达；聚合酶链反应法检测HPV16、18型的存在。结果 ①Bcl-2在正常宫颈、慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ组织中的表达呈上升趋势，CINⅡ、CINⅢ组织中Bcl-2的阳性率显著高于正常宫颈、慢性宫颈炎、CINⅠ组织（均为P〈0.05）。②HPV阳性组中，CINⅡ、CINⅢ组织的Bcl-2的阳性率显著高于阴性率（P〈0．05）；CINⅡ、CINⅢ组织的Bcl-2的阳性表达率与HPV感染呈正相关。结论 HPV感染可能通过诱导Bcl-2的过度表达，抑制细胞凋亡，促进组织增殖从而在宫颈癌发生的早期起重要作用。     

荧光原位杂交检测细胞中hTERC基因扩增在宫颈癌早期诊断中的意义

目的检测hTERC基因在子宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌中的拷贝数扩增情况,探讨其作为宫颈癌早期诊断标志物的可能性。方法采集在本院就诊的95例宫颈脱落细胞,经病理诊断确诊,其中正常10例,炎症／CINⅠ32例、CINⅡ20例、CINⅢ18例,宫颈癌15例。以生理盐水制片和TCT低渗法制片,应用荧光标记探针GLPTERC／CSP3米,用荧光原位杂交（FISH）方法进行hTERC基因拷贝数的检测。3号染色体着丝粒为对照,1株宫颈癌细胞和正常骨髓淋巴细胞为阳性对照,正常宫颈细胞为阴性对照。结果95例临床标本中,正常宫颈细胞中表达率为1．012％（阈值）;宫颈癌组的阳性率为93．3％（14／15）、CIN总阳性率为65．79％（25／38）,与正常和炎症／CINⅠ组3．13％（1／32）差异有统计学意义（P〈0．05）;CINⅡ组的阳性表达率为60％（12／20）,CINⅢ组的阳性率为72．2％（13／18）,与正常和炎症／CINI组差异有统计学意义（P〈0．05）;CINHI组与宫颈癌组差异无统计学意义（P〉0．05）;hTERC基因在宫颈癌细胞株hela和正常骨髓淋巴细胞中基因扩增呈阳性;hTERC的阳性表达率与宫颈细胞癌前病变的严重程度相关。结论hTERC基因参与宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的发生发展,作为宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的标志物,hTERC基因的检测可作为提高宫颈癌早期诊断率的重要手段和癌前病变治疗的重要依据。     

Ki67在子宫颈上皮内瘤变中的表达及意义

目的研究Ki67在不同级别的子宫颈上皮内瘤变中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测Ki67在正常宫颈组织、CINⅠ级、CINⅡ级以及CINⅢ级的石蜡标本组织中的表达。结果47例组织标本（正常宫颈组织10例、CINⅠ级11例、CINⅡ级13例以及CINⅢ级13例）中，Ki67阳性表达率分别为10％，36．4％，84．6％，92、3％，各组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Ki67可反映出宫颈上皮细胞在癌变的过程中细胞增殖活性的改变，可作为早期诊断宫颈癌的标记物，以提高宫颈癌的早期诊断率。     

宫颈鳞癌组织中MCM5的表达及临床意义

【目的】探讨微小染色体维持蛋白5（MCM5）在宫颈鳞癌和宫颈上皮内瘤（cIN）变中的表达及其临床意义。【方法】采用免疫组化法检测MCM5在66例宫颈鳞癌及90例CIN中的表达,通过标记指数（LI）计算MCM5在宫颈病变中表达情况,并分析其与临床病理学特征之间的关系。【结果IMCM5的表达从CIN到宫颈鳞癌逐渐增高：在CINⅠ,CINⅡ,CINⅢ,宫颈鳞癌中LI中位数分别为36．45%,60．43%,79．52％,90．34％。4组间比较差异有统计学意义（P〈0．01）;在宫颈鳞癌高、中、低分化组中MCM5表达逐渐升高,差异有统计学意义（P〈0．01）,而在FIGO分期、年龄、淋巴结是否转移各组中差异均无统计学意义（P〉0．05）。【结论]MCM5是一种新型的细胞增殖标志物,可以作为宫颈病变预后的参考指标,其表达水平与宫颈鳞癌分化程度有关。     

荧光原位杂交检测端粒酶基因在宫颈癌前病变中的表达及意义

目的探讨端粒酶(hTERC)基因在子宫颈上皮内瘤变(CIN)及鳞状细胞癌(SCC)中的表达及临床意义。方法收集2008年5月至2009年1月珠海市人民医院妇科门诊就诊的120例患者的子宫颈脱落细胞标本,经液基细胞学制片诊断,其中20例为正常子宫颈脱落细胞,其余100例均为不能明确意义的非典型细胞(ASC-US),后者根据病理活检结果分为四组:CINⅠ级53例,CINⅡ级33例,CINⅢ级12例以及SCC 2例,采用荧光原位杂交(FISH)技术检测上述各组脱落细胞中的hTERC基因。结果正常组20例用于确定阈值,本实验室阈值为7%,其他各组阳性判断均通过与阈值比较得来。在CINⅠ级、CINⅡ级、CINⅢ级和SCC患者宫颈脱落细胞中,hTERC基因的表达阳性率分别是18.9%、87.8%、91.7%和100%。CINⅡ级、CINⅢ级及SCC组与CINⅠ级比较,hTERC基因表达阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01),CINⅡ级、CINⅢ级及SCC两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。hTERC基因表达增加与子宫颈上皮内瘤变的程度及病变发展的方向关系十分密切。结论 hTERC基因在CIN和SCC中表达异常,且随病变程度的增加其表达阳性率增加,在CINⅡ级、CINⅢ级及SCC中的扩增明显高于CINⅠ级,提示我们可以通过利用脱落细胞检测hTERC基因的手段有效识别高级别鳞状上皮内瘤变及监测宫颈癌前病变的进展。     

宫颈癌变过程中XIAP和caspase-3表达水平的变化及其与高危型人乳头瘤病毒感染的相关性

目的：探讨X-连锁凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP）和caspase 3在宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）及宫颈鳞癌（squamous carcinoma of the cervix,SCC）中的表达水平及其与高危型人乳头瘤病毒（human papilloma virus,HPV）感染的关系.方法：采用免疫组织化学Envision二步法检测XIAP和caspase-3在SCC（n=25）、CIN（n=80）及正常宫颈（normal cervix,NC,n=10）石蜡包埋组织中的表达,并进行HPV分型检测.结果：高危型HPV 总感染率为62.6％（72/115）.SCC、CINⅢ、CINⅡ、CIN Ⅰ、NC组的高危型HPV感染率分别为88.0％（22/25）、84.0％（21/25）、68.0％（17/25）、33.3％（10/30）、20.0％（2/10）,高危型HPV感染率随着宫颈病变的加重呈上升趋势,差异有统计学意义（x2 =30.820,P =0.000）.NC、CIN Ⅰ、CINⅡ与SCC组的XIAP阳性表达率两两比较差异均有统计学意义（P均＜0.01）,XIAP阳性率及表达水平与宫颈病变的严重程度呈正相关（r=0.410,P=0.000）.NC、CIN Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ与SCC组的caspase-3阳性表达率两两比较差异均有统计学意义（P均＜0.05）,其阳性率及表达水平与宫颈病变的严重程度呈负相关（r=-0.320,P=0.000）.在CIN及SCC中,XIAP与caspase-3、XIAP与高危型HPV感染分别呈负相关（r=-0.402,P=0.000）和正相关（r=0.458,P=0.000）.结论：高危型HPV感染、XIAP高表达和caspase-3表达下调在宫颈癌前病变向SCC演变的过程中可能起促进作用.     

宫颈上皮内瘤样病变组织中白介素10及转化生长因子β1mRNA的表达及其意义

目的：检测宫颈上皮内瘤样病变组织（CIN）中白介素10（IL-10）和转化生长因子β1RNA（TGF-β1RNA）表达水平，探讨CIN局部微环境变化，为郎格汉斯细胞（LCs）诱导的外周免疫耐受寻求依据。方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测25例CIN组织及10例正常宫颈组织中IL-10和TGF-β1RNA的表达水平。结果：CIN组织IL-10和TGF-β1RNA表达水平高于正常对照组，CINⅡ-Ⅲ级组IL-10和TGF-β1RNA表达水平高于CINI级组，二者间差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：CIN局部微环境中IL-10及TGF-β1高表达可能是外周免疫耐受的重要标志之一。     

宫颈癌及癌前病变组织FoxM1和VEGF表达及相关性

目的研究叉头转录因子（FoxM1）与血管生内皮长因子（VEGF）蛋白在宫颈癌及癌前病变组织中的表达,并分析两者表达的相关性及意义。方法采用免疫组化方法检测150例宫颈组织标本中FoxM1和VEGF的表达,分析其相关性。结果正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变（CIN）组织和宫颈癌组织中FoxM1蛋白表达率分别为13.64%、46.34%、60.87%,VEGF蛋白表达率分别为18.18%、42.68%、63.04%,CIN组织、宫颈癌组织与正常宫颈组织FoxM1和VEGF表达比较,差异有显著性（χ^2=8.723-14.634,P〈0.01）,宫颈癌与CIN组织比较,差异无显著性（P〉0.05）。CIN各组间（CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ）、宫颈癌Ⅰ-Ⅱ期与Ⅲ-Ⅳ期FoxM1和VEGF表达比较,差异均无显著性（χ^2=0.131-2.997,P〉0.05）。宫颈组织中FoxM1与VEGF表达呈正相关（r=0.673,P〈0.01）。结论 FoxM1和VEGF可能参与了CIN和宫颈癌的形成过程。     

紧密连接蛋白-2、4、5、10、18mRNA在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中的表达研究

目的探讨紧密连接蛋白(Claudin)-2、4、5、10、18在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌组织中的表达及意义。方法选取10例CINⅠ、10例CINⅡ、18例CINⅢ和20例宫颈癌共计58例病变组织作为研究对象,以9例正常宫颈组织作为对照组,采用TRIzol法提取宫颈标本组织总mRNA,SYBR荧光实时定量反转录聚合酶链反应分析Claudin-2、4、5、10、18在各组织中的mRNA表达情况。结果 Claudin-2、4的mRNA表达在正常宫颈组织、CIN、宫颈癌的疾病进展中呈递增趋势,CINⅢ及宫颈癌中的Claudin-2、4的mRNA表达明显高于CINⅠ、CINⅡ及正常宫颈组织,差异有统计学意义(P0.05),而在CINⅢ与宫颈癌比较中,差异无统计学意义(P0.05)。Claudin-5、10、18在正常宫颈组织及异常宫颈组织中均无表达。结论 Claudin-2、4可能与宫颈癌的发生、发展相关,检测Claudin-2、4mRNA的表达可为CINⅢ及宫颈癌的早期诊断及化疗治疗提供辅助参考依据。     

HMGB1和细胞凋亡在宫颈病变中的表达及意义

[目的]探讨宫颈病变的高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达和细胞凋亡情况.[方法]分别应用免疫组化和末端核酸转移酶脱氧尿嘧啶标记法(TUNEL).检测并比较正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变(CIN)各期、宫颈鳞癌ⅠA期中HMGB1的表达和细胞凋亡情况.[结果]HMGB1在正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、宫颈鳞癌ⅠA...     

液基细胞学结合病理学活检在宫颈病变诊断的应用分析

目的 研究液基细胞学检查（TCT）和病理学活检在宫颈病变诊断中的价值.方法 分析3,710例行TCT检查的患者以及其中719例行阴道镜下活组织检查并有病理结果的临床资料.结果 （1）3,710例TCT中检出上皮内低度病变（LSIL）115例（3.10%）,上皮内高度病变（HSIL）26例（0.70%）,宫颈癌3例（0.08%）.719例行阴道镜下活检,CIN Ⅰ 20例（2.78%）,CIN Ⅱ 37例（5.15%）,CIN Ⅲ 12例（1.67%）;宫颈浸润癌14例（1.95%）;子宫内膜癌3例（0.42%）.（2）TCT与病理学符合率在上皮内低度病变、上皮内高度病变、宫颈癌中分别为7.04%,43.75%,100%,在上皮内高度病变、宫颈癌中具有较高的符合率.（3）各年龄段所占比率在宫颈病理活检阴性组,CIN组和宫颈癌组差别有统计学意义（P〈0.01）.CIN主要集中在20～49岁,宫颈癌发病的中位年龄45.71岁,其发生有年轻化趋势.TCT榆查中阳性率在各年龄组中差别具有统计学意义（P〈0.05）,主要集中在20～49岁组,以30～39岁组最高,50岁以上组明显下降.结论 TCT检查结合病理学活检对CIN和宫颈癌的早期诊断具有熏要价值.     

CyclinD1和k-ras在宫颈癌中的表达及意义

目的通过检测CyclinD1和k-ras在宫颈癌组织(实验组),正常宫颈组织(对照组),CINⅠ,CINⅡ,CINⅢ中表达水平的差异,探讨它们在宫颈癌疾病发生发展中所起的作用和可能的分子机制,为宫颈癌的病因学研究提供理论依据。方法采用免疫组织化学方法检测宫颈癌患者15例,正常宫颈组织20例,CINⅠ18例,CINⅡ12例,CINⅢ20例中CyclinD1和k-ras的表达情况,分析CyclinD1和k-ras在宫颈癌疾病发生、发展过程中的相互关系。结果 CyclinD1和k-ras与正常组织比较,在宫颈癌组织中表达明显增高,随着临床分期的增加,蛋白表达增强差异有统计学意义(P0.05);k-ras蛋白、CyclinD1蛋白与年龄、宫颈癌组织分型中其表达差异无统计学意义(P0.05);而在分化程度和淋巴转移方面差异有统计学意义(P0.05);且在低分化组为66.7%和59.3%,在高、中分化组为23.7%和28.9%;有淋巴结转移组为54.8%和63.0%,且CyclinD1和k-ras表达明显呈正相关。结论 1k-ras、CyclinD1蛋白的高表达与宫颈癌的发生密切相关,各种蛋白共同发挥了协同作用。2在宫颈癌疾病中CyclinD1和k-ras的表达强度增强,且二者表达明显相关。