电压依赖性钾通道与哮喘发病机制的相关性研究

目的探讨钾通道开放剂（KCOs）对组胺作用后电压依赖性钾通道（Kv）及哮喘豚鼠支气管平滑肌细胞（BSMCs）Kv的作用。方法利用膜片钳技术细胞贴附式方法测定正常豚鼠支气管平滑肌细胞Kv的开放时间快慢成分（rfast、rslow），关闭时间及组胺作用后Kv的开放时间、关闭时间；哮喘豚鼠支气管平滑肌细胞Kv的开放时间、关闭时间及KCOs对二者的影响。结果组胺可明显缩短豚鼠BSMCs电压依赖性钾通道开放时间，延长关闭时间，与正常对照组比较差异有显著性（P〈0．001）；哮喘组与正常对照组比较开放时间,rfast、rslow明显缩短，关闭时间延长，二者相比有显著性差异（P〈0．001）。KCOs可延长组胺作用后及哮喘豚鼠BSMCs钾通道的开放时间，缩短关闭时间，二者相比有显著性差异（P〈0．001）。结论哮喘豚鼠BSMCs电压依赖性钾通道活性降低，组胺可缩短Kv的开放时间，延长Kv的关闭时间可能为哮喘的发病机制之一。KCOs可增加哮喘豚鼠支气管平滑肌Kv的活性，由此可能达到治疗哮喘的作用。     

钾通道与支气管哮喘

钾通道在气道平滑肌的收缩和松弛反应中起介导作用。本文总结了气道平滑肌上钾通道的分布和功能，各种收缩和松弛激动剂对钾通道的影响，钾通道在哮喘发病中的意义以及钾通道开放剂对支气管的作用及应用前景。     

一氧化氮对哮喘大鼠支气管平滑肌细胞钾通道的作用

目的　观察一氧化氮 (NO)供体硝普钠 (SNP)作用前、后哮喘大鼠支气管平滑肌细胞(BSMC)静息膜电位和钾电流的改变 ,为阐明NO松弛气道平滑肌的机制提供实验资料。方法　雄性SD大鼠 16只 ,按随机数字表法分为正常对照组和哮喘模型组 ,每组 8只。采用急性酶消化法分离单个BSMC ,用常规全细胞膜片钳技术记录正常对照组和哮喘模型组的静息膜电位 (Em)、钙激活剂钾通道 (BKCa)和电压依赖性钾通道 (Kv)电流 ,以及SNP作用后哮喘模型组Em和两种电流的变化。结果　 ( 1)哮喘模型组BSMC的Em为 ( -2 9± 6)mV(n =12 ) ,正常对照组为 ( -3 5± 6)mV(n =15) ,两组比较差异有显著性 (P <0 0 5) ;SNP作用后哮喘模型组BSMC的Em为 ( -3 8± 7)mV(n =12 ) ,与作用前比较差异有非常显著性 (P <0 0 1) ,与正常对照组比较差异无显著性 (P >0 0 5)。 ( 2 )方波刺激模式下哮喘模型组BKCa电流密度 (IKCa)为 ( 4 4± 17)pA/pF(n =8) ,正常对照组为 ( 73± 2 0 )pA/pF(n =10 ) ,两组比较差异有非常显著性 (P <0 0 1) ,SNP作用后哮喘模型组IkCa为 ( 79± 16)pA/pF(n =10 ) ,与作用前比较差异有非常显著性 (P <0 0 1) ,与正常对照组比较差异无显著性 (P >0 0 5) ;斜坡刺激模式下正常对照组和SNP作用前、后哮喘模型组的IkCa分别为     

乙酰胆碱对豚鼠支气管平滑肌细胞膜钙、钾通道的影响

目的　从电生理角度探讨乙酰胆碱 (Ach)在哮喘发病中的作用 ,为哮喘发病机制及治疗寻找理论依据。方法　用膜片钳技术观察了钙钾离子通道特性变化。结果　 (1 )静息跨膜电位差值降低。 (2 )钾通道开放时间常数的快慢成分下降到正常对照组的 30 1 7% ,1 9 1 7% ,开放概率下降到正常的 1 6 44%。 (3)钙通道开放时间延长到正常的 1 73倍 ,开放概率增加了 41 67%。结论　支气管平滑肌细胞的钙钾离子通道特性在炎性介质的作用下发生改变 ,是气道高反应性支气管痉挛的重要环节。     

钾通道开放剂与肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡

肺动脉平滑肌细胞 (ＰＡＳＭＣｓ)增殖和凋亡的变化是低氧性肺动脉高压 (ＨＰＨ)血管重建的重要组成部分 ,钾通道活性改变在这两方面的作用还不清楚 ,我们的研究旨在明确钾通道开放剂对ＰＡＳＭＣｓ增殖和凋亡的作用。材料与方法　细胞培养 :酶消化法培养大鼠ＰＡＳＭＣｓ,细胞纯度为 98%。细胞增殖 :继代ＰＡＳＭＣｓ按 5× 1 0 3/孔接种于 96孔板 ,长满后静止 48ｈ ,加入 1 0 %胎牛血清 (ＦＣＳ ,美国ＧＩＢＣＯ ＢＲＬ公司 )和不同浓度的钾通道开放剂比那地尔(Ｐｉｎ ,美国Ｓｉｇｍａ公司 ) ,2 4ｈ后按ＣｅｌｌＴｉｌｔｅｒＴＭ(美国Ｐｒ…     

ATP钾通道开放剂对大鼠慢性低氧性肺动脉高压的作用

目的：研究ATP敏感性钾通道开放剂左旋克罗卡琳（levcromakalim)和克罗卡啉（cromakalim)对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞钾通道（KATP)和低氧性肺动脉高压的作用。方法：90只Wistar大鼠随机分为正常对照组（15只）和低氧组（75只）。应用膜片钳技术，在对称性高钾溶液中，将急性分离的大鼠肺动脉平滑肌细胞的内面向外式膜片上，分离出ATP敏感性KATP电流。应用右心插管技术，测定给药前、后大鼠平均肺动脉压（mPAP)。结果：慢性低氧3周大鼠肺动脉平滑肌细胞KATP通道活性与正常组大鼠比较无明显变化。但钾通道开放剂levcromakalim和cromakalim可明显激活慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞KATP电流。给低氧大鼠静脉注射levcromakalim和cromakalim，可对其mPAP产生剂量依赖性的降压作用，而对平均体动脉压也有一定的降低作用。结论：虽然KATP可能没有直接参与大鼠慢性低氧性肺动脉高压的产生，但levcromakalim和cromakalim可通过激活KATP通道而拮抗低氧对其它钾通道的抑制作用，levcromakalim和cromakalim可降低慢性缺氧大鼠低氧性肺动脉高压。     

延迟整流钾通道在哮喘大鼠模型气道平滑肌张力调控中的作用

目的　探讨电压依赖性延迟整流钾通道 (KV)在哮喘大鼠模型气道平滑肌张力调控中的作用及其对气道反应性的影响。方法　应用等长张力记录方法 ,观察钾通道对正常和哮喘大鼠离体支气管静息张力及收缩张力的影响。结果　 (1)KV 阻断剂 4 氨基吡啶 (4 AP)诱发大鼠离体支气管产生浓度依赖性的收缩反应。哮喘组支气管 (10只 ) 4 AP收缩反应量效曲线较对照组 (10只 )明显左移 ,两者达到最大效应的一半所需浓度的负对数值 (pD2 )分别为 2 5 8± 0 0 7,2 12± 0 0 4,两组比较差异有显著性 (P <0 0 1) ;最大反应强度 (Emax)哮喘组为 (3 2± 5 )mg/mg ,与对照组 [(3 1± 6)mg/mg]比较 ,差异有显著性 (P >0 0 5 ) ;(2 )在对照组中 ,4 AP使支气管对内皮素 1(ET 1)和组胺的收缩反应量效曲线明显左移 ,处理前pD2 分别为 6 2 7± 0 3 8、5 5 9± 0 2 7,处理后为 6 80± 0 47、6 42± 0 14,处理前、后比较 ,差异有显著性 (P均 <0 0 1) ;Emax处理前分别为 (3 6± 8)mg/mg、(3 6± 8)mg/mg,处理后为(40± 8)mg/mg、(3 9± 9)mg/mg,处理前、后比较 ,差异有显著性 (P均 >0 0 5 ) ;(3 )在哮喘组中 ,4 AP对ET 1和组胺诱发支气管收缩反应的量效曲线无显著影响 ,处理前pD2 分别为 6 5 1± 0 0 7、5 86± 0 14,处     

ATP敏感性钾通道开放剂与支气管哮喘

气道平滑肌上存在多种钾通道,它们决定膜的静息电位,超极化细胞膜,复极化动作电位.ATP敏感性钾通道是其中重要的一种钾通道.ATP敏感性钾通道开放剂(KATPCOs)通过降低气道高反应性、抑制神经反射和递质释放等机制舒张气道平滑肌.新一代高选择性的KATPCOs副作用少,是较为有希望的哮喘治疗药.     

正常肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾通道活性的观察

为了解人体正常肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的特性 ,取 2 4例人体正常肠系膜动脉小枝节段 ,用酶消化法获取标本细胞 ,以膜片钳制技术检测钙激活钾通道的活性 ,通过Pclamp专用软件实时采样记录其平均开放时间、平均关闭时间及平均开放概率等。结果发现 ,人体肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾通道开放具有明显电压依赖性 ,在对称性高钾液中 ,电流 -电压关系曲线在 10～ 6 0mV范围内可被直线拟合。在细胞吸附式膜片和内面向外膜片中 ,通道电导分别为 192 .3± 2 9.2Ps和 2 0 2 .5± 5 8.3Ps。开放概率和开放数目随Ca2 + 浓度的增加而增加 ,膜内面应用四乙胺可减少通道开放概率及电流幅值。提示人体肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾通道与人体其他血管相似 ,主要为大电导钙激活钾通道 ,具有电压和钙浓度双重依赖性。     

钾通道激活剂—尼可地尔的药理与临床

尼可地尔(nicorandil)为钾通道激活剂(p0tassium channel activator)或钾通道开放剂(K~ channel opener),具有抑制心脏,扩张血管的药理作用,临床上可用于治疗心绞痛、高血压等疾病。一、作用机制最近的研究表明,血管平滑肌,心肌和胰岛β细胞上存在着一种ATP敏感的K~ 通道,其活性为细胞浆表面的ATP所抑制但在特性上,血管平滑肌和胰腺β细胞上ATP敏感的K~ 通道不同。长压定,二氮嗪,以及尼可地尔,吡那地尔(pinacidil)     

钾通道在一氧化氮对支气管哮喘大鼠平滑肌张力调控中的作用

一氧化氮(NO)可松弛气道平滑肌(ASM)，降低气道高反应性，但其作用机制尚不清楚。我们测定NO供体硝普钠(SNP)、钾通道阻断剂4-氨基吡啶(4-AP)、四乙铵(TEA)对支气管哮喘大鼠支气管环张力的影响，探讨钾通道在NO对哮喘大鼠支气管平滑肌张力调控中的作用。     

钾通道与气道的功能调控

气道平滑肌(ASM)中有多种钾通道分布。ASM细胞的静息膜电位及张力和钾通道密切相关。钾通道通过cAMP、cGMP和PKC等多种信号途径参与部分ASM活性物质介导的舒缩反应,参与气道中神经组织的兴奋性传递及气道高反应性的形成等病理生理过程。钾通道开放剂对ASM收缩、气道中神经递质的释放及气道高反应性有一定的抑制作用。     

钾通道开放剂BRL 55834对离体豚鼠气道平滑肌细胞电生理活动的影响

钾通道开放剂ＢＲＬ５５８３４对离体豚鼠气道平滑肌细胞电生理活动的影响罗文侗石昭泉颜泽敏朱崎修清玉叶曜芩应用细胞内微电极记录技术，测定豚鼠气道平滑肌细胞膜电位，并观察钾通道开放剂ＢＲＬ５５８３４对其的影响。１．方法：６０只豚鼠随机分２组，将其中一组制成...     

脑血管平滑肌钾通道与脑血管痉挛

在脑血管平滑肌细胞膜上存在多种钾通道,一般分为4类:电压门控钾通道、钙离子激活钾通道、内向整流钾通道和ATP敏感钾通道.它们可调节脑血管张力,从而影响脑血流量以适应不同的生理病理学情况.蛛网膜下腔出血后,钾通道结构和功能发生变化,这些变化可能与脑血管痉挛的发生和发展有关.应用钾通道开放剂可松弛脑血管平滑肌,缓解脑血管痉挛.     

钾通道对人支气管平滑肌细胞增殖与凋亡及其相关基因表达的影响

目的　探讨电压依赖性延迟整流钾通道 (KV)、钙激活钾通道 (KCa)和ATP敏感性钾通道 (KATP)对人支气管平滑肌细胞 (HBSMCs)增殖与凋亡及其相关基因表达的影响。方法　支气管组织取材于 5例肺癌切除术患者癌旁正常的肺组织 ,将培养的HBSMCs分为 4组 :(1)对照组 (用不含药物的无血清培养基处理 ) ;(2 ) 4 氨基吡啶 (4 AP)组 (含 4mmol/L的 4 AP) ;(3)四乙铵 (TEA)组 (含 1mmol/L的TEA) ;(4)格列本脲 (Glib)组 (含 0 1mmol/L的Glib)。采用流式细胞术观察细胞的周期 ;应用荧光光度法检测细胞内钙 ;四甲基偶氮唑盐 (MTT)微量比色分析法检测细胞的增殖 ;原位末端标记法 (TUNEL)检测细胞的凋亡 ;免疫细胞化学技术检测增殖细胞核抗原 (PCNA)及凋亡相关基因Fas和FasL的表达 ,以观察 3种钾通道阻断剂对培养的HBSMCs增殖及凋亡的影响。结果 (1)对照组HBSMCs吸光度 (A)值为 0 30± 0 0 8,4 AP组为 0 6 7± 0 14 ,两组比较差异有统计学意义 (P <0 0 1) ;对照组PCNA的阳性率为 (2 3± 5 ) % ,4 AP组为 (89± 7) % ,两组比较差异有统计学意义 (P <0 0 1) ;对照组细胞内Ca2 浓度为 (98± 7)nmol/L ,4 AP组为 (2 5 5± 17)nmol/L ,两组比较差异有统计学意义 (P <0 0 1) ;对照组S G2 M期细胞数为 (12 6±     

012 钾通道与气道的功能调控

气道平滑肌(ASM)中有多种钾通道分布.ASM细胞的静息膜电位及张力和钾通道密切相关.钾通道通过cAMP、cGMP和PKC等多种信号途径参与部分ASM活性物质介导的舒缩反应,参与气道中神经组织的兴奋性传递及气道高反应性的形成等病理生理过程.钾通道开放剂对ASM收缩、气道中神经递质的释放及气道高反应性有一定的抑制作用.     

动脉粥样硬化兔主动脉平滑肌细胞钙激活钾通道变化及意义

目的　探讨动脉粥样硬化 (atherosclerosis,AS)兔主动脉平滑肌细胞钙激活钾 (Calcium activatedpotassium ,KCa)通道变化及意义。方法　 2 0只健康新西兰白兔随机分为AS组和对照组 ,每组 10只。用酶消化法获取单个主动脉平滑肌细胞 ,通过膜片钳记录技术检测AS兔主动脉平滑肌细胞KCa通道的活性 ,并在浴液中分别加入不同浓度的Ca2 + ,实时采样记录通道的开放概率 (Po)、平均开放时间 (To)、平均关闭时间 (Tc)和电流幅值 (Am) ,以加钙前作为对照组观察上述参数的变化。结果　AS组KCa通道的活性明显高于对照组。结论　AS血管平滑肌细胞KCa通道的活性明显增加 ,可能是AS血管发生代偿性扩张的机制之一。     

ATP敏感性钾通道开放剂治疗脑缺血的前景

钾通道开放剂是近期开发的新型心血管类药物 ,也是医学、药学领域继钙拮抗剂后又一研究热点。ＡＴＰ敏感性钾通道 (ＡＴＰ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅＫ+ ｃｈａｎｎｅｌ,ＫＡＴＰ)开放剂是目前研究最多、应用最广的钾通道开放剂。从 80年代中期开始对其进行研究至今 ,已取得了显著进展。至今有 18个化合物进入临床实验阶段 ,10 0多个化合物在临床前研究阶段并评价出各自的药理学与实验治疗学特征。以血管平滑肌和胰腺 β细胞ＫＡＴＰ为靶标 ,开发出一系列激动剂和拮抗剂 ,已成功应用于抗高血压、抗心肌缺血和治疗非胰岛素依赖型糖尿病等[1] 。近年…     

脱氢表雄甾酮对慢性缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞钙激活性钾通道的作用

目的　研究钾通道开放剂脱氢表雄甾酮 (DHEA)对慢性缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞钙激活性钾通道 (KCa)的作用和缺氧性肺动脉高压的降压作用。方法　 50只Wistar大鼠随机分为对照组 (A组 ,10只 )和慢性缺氧组 (B组 ) ,B组又随机分为B1、B2 、B3 、B4 组 (每组各 10只 ) ,B组大鼠均以常压缺氧 3周建立大鼠慢性缺氧肺动脉高压模型。采用急性酶分离法分离得到大鼠肺动脉平滑肌细胞(SMCs)。应用膜片钳技术 ,在对称性高钾溶液中 ,于急性分离的大鼠肺动脉平滑肌细胞的内面向外式膜片 (inside outpatch)上 ,分离出KCa电流。比较A组和B1组KCa电流活性 ;观察DHEA对B1组KCa通道电流的激活作用。应用右心插管技术 ,测定给药前后B2 、B3 、B4 组大鼠平均肺动脉压 (mPAP)和平均体动脉压 (mSAP)等血流动力学指标。结果　B组大鼠肺动脉平滑肌细胞KCa活性比A组大鼠显著降低 (P <0 0 1)。DHEA可明显激活慢性缺氧所抑制的B1组大鼠肺动脉平滑肌细胞的KCa电流。给缺氧大鼠静脉注射DHEA可明显降低其mPAP(P <0 0 1) ,而对mSAP无明显作用 (P >0 0 5)。结论　缺氧对KCa通道的抑制作用在缺氧 3周大鼠缺氧性肺动脉高压发病中起着重要作用 ;DHEA可直接激活KCa活性而拮抗慢性缺氧对KCa的抑制作用 ;DHEA对大鼠慢性缺氧性肺动脉高压可产     

脑血管平滑肌钾通道与脑血管痉挛

在脑血管平滑肌细胞膜上存在多种钾通道,一般分为4类:电压门控钾通道、钙离子激活钾通道、内向整流钾通道和ATP敏感钾通道.它们可调节脑血管张力,从而影响脑血流量以适应不同的生理病理学情况.蛛网膜下腔出血后,钾通道结构和功能发生变化,这些变化可能与脑血管痉挛的发生和发展有关.应用钾通道开放剂可松弛脑血管平滑肌,缓解脑血管痉挛.