多西环素对大鼠体外循环后肺内MMP-9和TIMP活性和基因表达的影响

目的:探讨多西环素对大鼠体外循环后肺内基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)活性和基因表达的影响?方法:健康雄性SD大鼠36只随机分为对照组?体外循环组(CPB组)和治疗组,分别于手术结束时(T1)和手术结束后6 h(T2)收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本?Western blot法测定BALF中MMP-9和TIMP-1的蛋白活性,RT-PCR法测定肺组织MMP-9和TIMP-1 mRNA的表达?结果:治疗组大鼠肺组织水肿减轻,BALF的中性粒细胞减少;CPB组BALF中MMP-9活性明显升高,CPB后6 h表达最强,治疗组MMP-9活性较CPB组有明显下降,TIMP-1的活性在CPB组和治疗组于CPB结束后呈较弱的增强趋势,两组间相同时间点的表达差异不明显;CPB组和治疗组MMP-9mRNA表达增强,但治疗组MMP-9 mRNA的表达在相应时间点较治疗组下降;TIMP-1 mRNA在治疗组表达增强,且T2时间点显著增强;MMP-9/TIMP-1 mRNA在CPB组和治疗组均有显著增大,但治疗组中T2时间点MMP-9/TIMP-1 mRNA比值较CPB组明显下降?结论:CPB可以引起大鼠术后肺内MMP-9的活性和基因表达增强,导致术后早期肺内MMP-9/TIMP-1 mRNA表达失衡,多西环素可以抑制CPB后大鼠肺组织内MMP-9蛋白水平和mRNA的表达,还可能上调TIMP-1的表达而间接抑制MMP-9 mRNA表达,改善MMP-9/TIMP-1的比例失衡?     

体外循环前后人肺静脉血中MMP-9和TIMP-1表达及浓度变化

目的探讨体外循环前后人肺静脉血中基质金属蛋白酶9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)表达及浓度变化。方法选择25例接受心脏手术的患者,其中20例在体外循环下手术,5例未在体外循环下手术。于体外循环(CPB)开始时(进胸时)、CPB结束时(关胸时)在肺静脉采取血标本,用酶联法(ELISA)检测各个标本血浆中MMP-9及TIMP-1的浓度;用逆转录聚合链反应(RT-PCR)测定MMP-9、TIMP-1的表达。结果CPB后人肺静脉血中MMP-9/TIMP-1明显升高,白细胞MMP-9表达及浓度增加,TIMP-1浓度及表达下降,而未经CPB的患者肺静脉血中MMP-9和TIMP-1表达及浓度无明显变化。结论鉴于MMP-9特异性降解作用,推测MMP-9、TIMP-1的变化与CPB后肺损伤的病理变化可能有一定关联。     

心肺转流对大鼠血浆和肺内基质金属蛋白酶-9的影响

目的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)与心肺转流(cardiopulmonary bypass,CPB)急性肺损伤有关。文中探讨MMP-9血浆浓度在大鼠CPB前后的变化及肺内表达的差异。方法健康雄性SD大鼠20只随机分为对照组和心肺转流组,心肺转流组分别于转流结束即刻、结束后2h和6h各时间点取血和肺组织,对照组分别在相应时间点取样。用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆MMP-9浓度,免疫组化染色观察肺组织MMP-9的表达。结果 CPB后血浆MMP-9浓度较术前及对照组明显升高,差异有统计学意义。免疫组化染色显示CPB后肺内MMP-9表达明显增强。结论 CPB可以引起大鼠肺内MMP-9表达增强,血液中MMP-9释放增加。     

大鼠体外循环后小肠黏膜基质金属蛋白酶9及其组织型抑制剂1表达与肠屏障功能的关系

目的探讨大鼠体外循环(CPB)后小肠黏膜基质金属蛋白酶9(MMP-9)及其组织型抑制剂(TIMP-1)表达与肠屏障功能的关系,为CPB后肠屏障功能保护提供新靶点。方法健康成年雄性清洁级SD大鼠40只随机分为CPB组(n=20)和假手术组(SH组,n=20)。另取10只作为正常对照组(N组)。分光光度法测定CPB后血浆二胺氧化酶(DAO)活性,转录酶-逆转录聚合酶链反应及蛋白质斑迹法检测肠黏膜MMP-9,TIMP-1的mRNA和蛋白表达变化,明胶酶谱法测定肠黏膜MMP-9活性变化,并进行统计学分析。结果 CPB组血浆中DAO活性比SH组和N组显著增高(P0.05);RT-PCR显示CPB组小肠黏膜MMP-9 mRNA表达水平较N组和SH组明显增加(P0.01);CPB组TIMP-1 mRNA表达水平与N组和SH组无显著差异(P0.05);Western blot显示CPB组MMP-9蛋白表达显著高于SH组和N组(P0.01);三组之间TIMP-1蛋白表达无明显差异(P0.05)。凝胶成像系统分析结果显示,CPB组小肠黏膜组织中MMP-9、MMP-2活性与SH和N组比较,均显著增强(P0.01);线性回归及相关分析结果显示:CPB后肠黏膜组织MMP-9活性和血浆DAO活性呈显著正相关(r=0.821,P0.01)。结论 CPB后小肠黏膜MMP-9表达上调及其酶活性增加导致MMP-9/TIMP-1失衡在肠屏障功能障碍发生发展中起重要作用。调控MMP-9活性有可能成为CPB过程中肠屏障功能保护新靶点。     

五味子乙素对染矽尘大鼠肺组织MMP-9和TIMP-1 mRNA表达的影响

目的观察五味子乙素（schisandrin B,Sch-B）对染矽尘大鼠肺组织基质金属蛋白酶（MMP-9）及其组织抑制剂（TIMP-1）mRNA表达的影响,探索其防治矽肺纤维化的作用机制。方法将48只大鼠随机分为对照组、染矽尘组和Sch-B干预组,每组16只,采用暴露式气管内注入法给染矽尘组和Sch-B干预组大鼠一次性染矽尘（50mg／只）,同法对照组大鼠给予生理盐水（1ml／只）。染尘后第1d开始灌胃给药,Sch-B干预组给予Sch-B（80mg·kg^-1d^-1）,其他组给予等体积的橄榄油。不同处理7d和28d后,各组分别取8只大鼠处死,取其肺组织用逆转录聚合酶链式反应（RT-RCR）方法测定大鼠肺组织MMP-9及TIMP-1基因的表达。结果大鼠染矽尘后,MMP-9mRNA表达升高,在两个时间点,与相应的对照组相比,差异均有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）;TIMP-1mRNA表达仅在第7d时有所升高（P〈O．05）。五味子组与染矽尘组相比,MMP-9mRNA表达仅在第7d时有所下降（P〈0．05）,TIMP-1mRNA表达则无明显变化。结论Sch-B对染矽尘大鼠肺纤维化的抑制作用可能与早期降低MMP-9mRNA的表达和各个时段在一定程度上对MMP9和TIMP-1 mRNA的表达量进行调整,从而使MMP-9／TIMP-1趋于平衡有关。     

盐酸多西环素对哮喘大鼠基质金属蛋白酶9/基质金属蛋白酶组织抑制剂1平衡的影响

目的 通过观察多西环素对哮喘大鼠基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotein 9,MMP-9)/基质金属蛋白酶组织抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinases 1,TIMP-1)平衡的影响,探讨哮喘临床治疗的新途径.方法 SD健康雄性大鼠33只随机分为3组,即正常对照组、哮喘模型组、多西环素干预组,每组11只.通过口腔灌服多西环素的方式对哮喘大鼠进行干预,观察大鼠肺组织中MMP-9、TIMP-1的表达.结果 哮喘模型组细胞总数、嗜酸性粒细胞数、气道管壁及平滑肌厚度、MMP-9及TIMP-1表达均明显高于正常对照组,多西环素干预组较正常对照组亦明显升高(P＜0.01).哮喘模型组MMP-9/TIMP-1低于正常对照组和多西环素干预组,多西环素干预组亦低于正常对照组(P＜0.01).结论 多西环素可通过对MMP-9/TIMP-1平衡调节减缓哮喘的气道炎症和气道重塑.     

黄芪多糖对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织内基质金属蛋白酶-9、金属基质蛋白酶抑制剂-1表达的影响

目的观察黄芪多糖（ASP）对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠肺组织内基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和金属基质蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）表达的影响。方法 Wistar雄性大鼠40只,随机分为4组：正常对照组,COPD组,黄芪多糖组,强的松组;采用改良烟熏加气管内滴加脂多糖（LPS）方法复制COPD模型,黄芪多糖组采用黄芪多糖灌胃干预30 d,强的松组采用强的松灌胃干预30 d,其他组用等剂量生理盐水灌胃。此后检测各组动物肺功能,取肺组织观察其病理学变化,分别检测各组肺组织中羟脯氨酸（MPO）含量,MMP-9、TIMP-1蛋白的水平,计算MMP-9/TIMP-1比值。结果 COPD组呈现慢性阻塞性肺组织病理变化,肺功能减低,MPO、MMP-9、TIMP-1表达增加,MMP-9/TIMP-1比值增高;黄芪多糖和强的松干预后,肺组织病理改变好转,肺功能改善,MPO、MMP-9、TIMP-1表达减低,MMP-9/TIMP-1比值降低,0.2 s用力呼吸量/用力肺活量（FEV0.2/FVC）与MMP-9/TIMP-1比值呈负相关。结论黄芪多糖可通过抑制COPD大鼠肺组织MMP-9、TIMP-1的表达,改善肺组织损伤及肺功能。     

香烟暴露对大鼠肺组织及人血管内皮细胞MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的 探讨香烟暴露对大鼠肺组织及人血管内皮细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)表达的影响.方法 采用烟熏法建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型,记录模型组(M组)及对照组(N组)大鼠的一般观察指标、肺功能指标、肺组织病理学指标、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数和分类及肺组织中MMP-9和TIMP-1的表达.用Western blot检测不同浓度香烟提取物干预后人血管内皮细胞中MMP-9和TIMP-1表达的变化趋势.结果 M组大鼠出现毛发脱落、反应迟钝、呼吸频率加快等变化.M组与N组比较,大鼠BALF中炎性细胞计数、肺组织形态学指标、肺功能指标、肺组织MMP-9和TIMP-1的表达及MMP-9/TIMP-1的差异均有统计学意义(P < 0.05).随着香烟提取物浓度增高,人血管内皮细胞中MMP-9和TIMP-1的表达逐渐增强.结论 吸烟是COPD的一个重要致病因素.肺内MMP-9/TIMP-1的失衡及血管内皮细胞中MMP-9和TIMP-1的表达可能在COPD的发生发展中起一定作用.     

MMP-9和TIMP-1在实验性肺气肿大鼠肺组织中的表达及其意义

目的研究基质金属蛋白酶(MMP-9)及其组织抑制因子(TIMP-1)在弹性蛋白酶所致肺气肿大鼠肺组织中的表达.方法雄性Wistar大鼠20只,随机分为两组:正常对照组和肺气肿模型组,每组10只.模型组大鼠气管内滴入弹性蛋白酶复制肺气肿模型.25d后,观察各组大鼠肺组织的病理改变,免疫组化方法观察肺组织MMP-9和TIMP-1中的蛋白表达情况.结果肺气肿模型组MMP-9和TIMP-1的表达与正常对照组相比明显增强(P＜0.01),且MMP-9/TIMP-1比值失衡.结论MMP-9/TIMP-1失衡在肺气肿形成中起重要作用.     

全反式维甲酸对大鼠肺气肿模型的干预作用及对MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的 研究全反式维甲酸（ATRA）对大鼠肺气肿模型的干预作用及其作用机制。方法 建立吸烟肺气肿大鼠模型，将40只雄性Wistar大鼠随机分为健康对照组（A组，10只）和吸烟组（30只），吸烟组再随机分为模型组（B组，10只）、生理盐水对照组（C组，10只）、维甲酸干预组（D组，10只），后两组于吸烟6个月后分别每日子ATRA 20mg／kg（D组）和相同剂量生理盐水（C组）灌胃进行干预，通过苏木精-伊红染色评价ATRA的干预作用，用原位杂交和免疫组化等方法观察肺组织基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）的mRNA及蛋白的表达。用免疫组化法观察Ⅳ型胶原在肺组织的表达。结果 与A组相比，B组肺组织MMP-9、TIMP-1 mRNA和蛋白的表达均明显上升（均P〈0．01）；与B组、C组相比，D组肺组织MMP-9mRNA和蛋白的表达显著减少（均P〈0．01），而TIMP-1表达明显上升（均P〈0．05）；平均肺泡数增加，PaO2、氧饱和度明显改善。结论 ATRA能一定程度上减轻吸烟诱导的大鼠肺气肿，且这种效应可能与ATRA抑制MMP-9和增强TIMP-1表达有关。     

MMP-9和TIMP-1在新生大鼠持续高氧暴露后肺组织中的动态表达

目的:探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)在高氧致慢性肺疾病(CLD)新生大鼠肺组织中的动态变化和意义。方法:足月新生大鼠生后12h分别持续吸入0.90～0.95的高氧和空气,于1,3,7,14,21d应用免疫组化和RT-PCR方法分别检测肺组织MMP-9和TIMP-1蛋白及mRNA表达。结果:MMP-9在高氧3d时蛋白和mRNA表达均较空气组增强(P<0.05,P<0.01);TIMP-1蛋白在高氧组表达高于空气组,3d和7d比较P<0.05,14d和21d比较P<0.01;TIMP-1 mRNA水平高氧组高于空气组,3d和7d比较P<0.05,和14d比较P<0.01,和21d比较无差异。结论:高氧暴露后MMP-9和TIMP-1的表达在不同阶段的变化不一致,MMP-9/TIMP-1平衡状态遭到破坏,可能是高氧后胶原异常沉积以及正常肺泡化过程受阻的重要因素。     

MMP-9及TIMP-1在支气管扩张症患者气道中的表达

目的研究基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其天然抑制因子金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)在支气管扩张症患者气道中的表达情况,并分析TIMP-1/MMP-9比值失衡情况与支气管扩张症发病及病情进展的关系。方法本实验采用病例对照研究,分设支气管扩张症组、肺炎组及正常对照组,而支气管扩张症组又分为轻、中、重3个亚组。收集支气管肺泡灌洗液,ELISA法检测其中MMP-9及TIMP-1的浓度,并计算TIMP-1/MMP-9比值,同时取气管内膜组织,免疫组化法检测其中MMP-9及TIMP-1的表达。结果 MMP-9在支气管扩张症组的支气管肺泡灌洗液中明显升高(P=0.000),但TIMP-1却无明显升高,TIMP-1/MMP-9比值明显低于肺炎组及正常对照组(均为P=0.000);MMP-9在支气管扩张症患者中随严重程度的增加其浓度亦升高,但TIMP-1却无同步上升,TIMP-1/MMP-9比值重度组较轻度组有明显下降(P=0.005)。结论BE患者中存在TIMP-1/MMP-9比值失衡,且随着病情进展,该比值的失衡情况逐渐加重,提示TIMP-1/MMP-9比值失衡在BE的疾病发生及病情进展中有着重要作用。     

Activity of Matrix Metalloproteinase in Airway Epithelial Cells of COPD Patients

Chronic obstructive pulmonary disease(COPD) is characterized by the air flow limitationthat is progressive and not fully reversible. Thecondition is believed to be associated with the ab normal inflammatory responses of lung to theharmful gases and particles. The exact mechanismof COPD is not completely understood and itspathological features included chronic inflammationof bronchi, small airway disease and serious cen tro lobular emphysema[1]. The pulmon…     

基质金属蛋白酶/组织金属蛋白酶抑制物表达失衡在衰老大鼠肾小管间质损害中的意义

目的研究基质金属蛋白酶(MMP)及组织金属蛋白酶抑制物(TIMP)在不同鼠龄的单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾小管间质中的表达变化,探讨其可能的作用.方法选用3月、26月龄大鼠制备UUO模型,采用组织病理及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹等方法观察UUO术后3、7、14 d不同鼠龄大鼠的肾脏组织学改变和MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2等在梗阻肾小管间质中的表达情况;用明胶酶谱法检测UUO术后不同时间点MMP-2、MMP-9的蛋白水解活性.结果在对照组,TIMP-1、TIMP-2仅微弱表达于3月龄肾脏中,而在26月龄大鼠肾脏中其表达显著增加(P<0.01);老年鼠肾组织中MMP-2、MMP-9的蛋白水解活性显著低于3月龄大鼠(P<0.01).与对照组相比,3月龄、26月龄大鼠梗阻侧肾脏的肾小管间质纤维化面积随UUO术后时间的延长而增加,TIMP-1、TIMP-2及MMP-2、MMP-9的mRNA及蛋白质的表达在术后各时间点均显著增高(P<0.01), MMP-2和MMP-9的蛋白水解活性随UUO术后时间的延长而逐渐下降.其活性的下降与TIMP-2及TIMP-1蛋白质表达的增加呈明显的负相关.与3月龄鼠比较,26月龄鼠肾小管间质纤维化面积在UUO术后各时间点也明显增加(P<0.01),TIMP-1、TIMP-2在肾组织中各时间点的mRNA及蛋白质表达均显著增高(P<0.01),MMP-2、MMP-9的蛋白水解活性在各时间点均显著下降(P<0.01).结论衰老引起的TIMP的高表达及MMP蛋白水解活性下降可能是使衰老大鼠肾小管间质损害加重的重要因素之一.     

基质金属蛋白酶-9及其抑制剂在哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液中的表达

目的 :观察实验性哮喘豚鼠与对照组豚鼠支气管肺泡灌洗液 (bronchoalveolarlavagefluid ,BALF)中MMP 9、TIMP 1的表达。方法 :用卵蛋白制备哮喘模型 ,免疫组织化学SABC法染色 ,苏木素复染。显微镜下观察哮喘组及对照组BALF中细胞总分数 ;MMP 9、TIMP 1阳性细胞百分比。结果 :BALF中哮喘组嗜酸性粒细胞明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;巨噬细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞MMP 9、TIMP 1均呈阳性。且哮喘组MMP 9及TIMP 1阳性细胞百分比比对照组MMP 9及TIMP 1明显增高 (P <0 .0 0 1 )。结论 :MMP 9、TIMP 1可能与哮喘炎症有关。