氨氯地平对人乳腺癌细胞MCF-7细胞的抑制作用及机制研究

目的观察氨氯地平对人乳腺癌细胞MCF-7周期、周期蛋白相关基因及产物表达的影响,探讨氨氯地平对人乳腺癌MCF-7细胞周期的影响及其机制。方法MTT检测细胞增殖;流式细胞仪分析细胞周期;RT-PCR技术检测细胞周期相关基因cyclinD1、p21mRNA的表达;Western blot检测细胞周期蛋白cyclinD1、p21的蛋白表达。结果氨氯地平剂量和时间依赖性的抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖,IC50为14.439μmol.L-1。经7.22μmol.L-1(1/2IC50)、14.439μmol.L-1(IC50)、28.88μmol.L-1(2IC50)的氨氯地平作用人乳腺癌MCF-7细胞48h,G0/G1期细胞较对照组明显增高(P<0.05);并使人乳腺癌MCF-7细胞中cyclinD1mRNA及蛋白表达降低;p21mRNA及蛋白表达升高。结论氨氯地平对人乳腺癌MCF-7细胞具有抗增殖作用,并使细胞阻滞于G1期。其G1阻滞机制可能与调控细胞周期相关基因cyclinD1、p21mRNA及蛋白的表达相关。     

二氢青蒿素对人乳腺癌MCF-7细胞的体外抑制作用

目的研究二氢青蒿素(青蒿素生物合成中的可能前体)对肿瘤细胞增殖的影响和机制.方法采用体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞株,利用SRB法测定青蒿素和青蒿琥酯对MCF-7细胞增殖的影响,用流式细胞检定法(FCM)测定细胞周期的变化,用亚G1期含量测定法和DAPI荧光染色法观察细胞凋亡.结果二氢青蒿素能显著抑制MCF-7细胞的增殖,IC50为0.26μmol*L-1;二氢青蒿素作用后细胞周期发生明显变化,细胞被阻滞在G0+G1期,S期细胞显著减少.二氢青蒿素作用细胞24h后可轻微诱导MCF-7细胞凋亡.结论二氢青蒿素能强烈抑制MCF-7细胞增殖,将细胞阻滞于G0+G1期.     

丁酸钠对乳腺癌细胞MCF-7生长的抑制作用

目的 初步研究丁酸钠对乳腺癌细胞MCF-7生长的抑制作用.方法 常规培养乳腺癌细胞MCF-7至对数生长期,观察用丁酸钠处理后细胞生长速度、倍增时间、克隆形成率、细胞周期分布和细胞凋亡的变化.结果 与MCF-7亲本细胞相比,用丁酸钠处理的MCF-7细胞:①生长速度减慢.倍增时间延长(MCF-7亲本细胞、2.5mmol/L、5mmol/L和10mmol/L丁酸钠处理的MCF-7细胞倍增时间分别为29.9h、62.3h、164.2h和301.0h,P<0.05);②克隆形成率显著降低(MCF-7亲本细胞和丁酸钠(5mmol/L)处理24h的MCF-7细胞平均克隆形成率分别为72%和16.7%,P<0.05);③出现明显的G1期阻滞,S期和G2/M期细胞比例显著减少(P<0.05);④凋亡细胞数量明显增加(P<0.05);⑤出现明显的DNA"梯子"样断裂变化.结论 初步揭示了丁酸钠可以逆转乳腺癌细胞MCF-7的恶性生物学行为,其该作用可能与诱导MCF-7细胞凋亡有关,为丁酸钠在乳腺癌治疗中应用的可能性提供了初步的理论和实验依据.     

钙离子与钙调素或三氟拉嗪对离体管蛋白和在体微管的作用

作者曾改变轴浆中Ca~(2+)浓度使在体微管解聚。为了解其作用机理自兔脑提取了微管的亚单位管蛋白,浊度测定发现,无论Ca~(2+)本身抑制离体管蛋白聚合或者钙调素(CaM)增强它的抑制作用都取决于Ca~(2+)浓度。将抗CaM药三氟拉嗪注入大鼠坐骨神经使轴突中的微管解聚,Ca~(2+)与三氟拉嗪伍用则抵消各自解聚微管的作用。实验进一步证明Ca~(2+)调节微管聚合的主要作用途径是通过CaM,提示CaM结合一定数目的Ca~(2+)时能维持微管的聚合,若其浓度降低、结合Ca~(2+)增多或不足均使微管解聚。     

三氟拉嗪对过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡的保护作用

许多研究表明,氧化应激诱导的细胞损伤与生理老化过程和许多神经退行性疾病如阿尔茨海默病和帕金森病等有关。既往研究认为,氧化代谢和抗氧化剂不足引起的过氧化     

三氟拉嗪对吗啡镇痛耐受性的翻转作用

目的··:研究三氟拉嗪对吗啡镇痛耐受性的影响。方法··:热板测痛法,测定三氟拉嗪对小鼠热板(55℃)痛阈值(s)的影响;慢性吗啡处理使小鼠对吗啡的镇痛作用产生耐受性 ,观察低剂量三氟拉嗪对吗啡耐受小鼠最大镇痛效率的影响。结果··:(1)三氟拉嗪(2-20mg·kg-1)呈剂量依赖性延长小鼠的热板(55℃)痛阈值(s) ;(2)慢性吗啡处理使6mg·kg-1 吗啡最大镇痛效率降低42.2%(P<0.05),9mg·kg-1 吗啡最大镇痛效率降低9.8%(P>0.05) ;(3)合用低剂量三氟拉嗪(2mg·kg-1)和吗啡(6mg.kg-1)可以使吗啡耐受小鼠的最大镇痛效率提高47.9 %(P<0.01),其最大镇痛效率与单独急性吗啡(6mg·kg-1)处理相同。结论··:三氟拉嗪对小鼠的吗啡镇痛耐受性存在翻转作用     

三氟拉嗪诱发细胞凋亡及对DNA依赖蛋白激酶催化亚单位表达和P38磷酸化的抑制作用

目的　探讨三氟拉嗪(TFP)对肿瘤细胞生长的抑制作用和分子机制,寻找抑制肿瘤生长的作用靶分子。方法　用不同剂量TFP作用于人宫颈癌上皮细胞(HeLa) ,体外细胞计数绘制生长曲线;荧光染料染色及DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;γ射线及TFP处理细胞观察TFP对细胞辐射敏感性的影响;Western印迹分析蛋白表达或磷酸化。结果TFP作用后HeLa细胞的生长受到抑制,对γ射线的敏感性增加,且随着剂量的增加细胞凋亡的比率也增加。TFP还可有效诱导DNA修复蛋白DNA依赖蛋白激酶催化亚单位(DNA-PKcs)被切割,且可抑制辐射诱发的P3 8的磷酸化。结论　TFP可抑制肿瘤细胞的生长,对DNA-PKcs的表达和P3 8的磷酸化都有抑制作用     

三氟拉嗪对小鼠神经病理痛的镇痛作用

目的探讨三氟拉嗪（TFP）治疗小鼠神经病理痛的可行性。方法雄性ICR小鼠40只,随机分为5组（n= 8）,Shame组为假手术组;SNL组制作L5/L6脊神经结扎神经病理痛（SNL）模型;SNL/TFP 0.10组,SNL + TFP 0.10 mg&#8226;kg-1（i.t.）;SNL/TFP 0.25组,SNL + TFP 0.25 mg&#8226;kg-1（i.t.）;SNL/TFP 0.50组,SNL + TFP 0.50 mg&#8226;kg 1（i.t.）;分别于SNL手术或假手术前、术后5 d、TFP注射后30 min测定小鼠的机械痛阈和热痛阈。结果SNL术后5 d除Sham组外的各组小鼠机械痛阈和热痛阈降低（P＜ 0.05）,TFP 0.25 mg&#8226;kg-1（i.t.）可升高SNL小鼠的痛阈（P＜ 0.05）,TFP 0.50 mg&#8226;kg-1（i.t.）可完全抑制SNL小鼠的疼痛行为（P＜ 0.05）。结论TFP可有效治疗小鼠神经病理痛,有可能用于临床疼痛治疗。     

紫苏醇亚微乳剂对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制作用研究

目的:研究紫苏醇亚微乳剂对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制作用。方法:以紫苏醇溶液为对照,采用MTT比色法检测不同浓度(0、50、100、200、400、800μmol·L-1)紫苏醇亚微乳剂处理不同时间(24、48、72h)后对人乳腺癌细胞MCF-7的抑制率及半数抑制量(IC50)值,并设立空白组进行比较。结果:与空白组比较,试验组与对照组在作用24h、浓度高于400μmol·L-1,48h、浓度高于100μmol·L-1,72h、浓度高于50μmol·L-1时均表现出明显抑制作用(P<0.05);后2组抑制作用比较无显著性差异;试验组与对照组对MCF-7细胞株的IC50值分别为353.9、377.9μmol·L-1。结论:紫苏醇制成亚微乳剂后与其溶液比较,对人乳腺癌细胞MCF-7具有相同的抑制作用。     

盐酸三氟拉嗪片溶出度的测定方法

目的：建立盐酸三氟拉嗪片的溶出度测定方法。方法：按2000年版《中国药典(二部)》附录溶出度测定项下第三法，以盐酸溶液(1：20)为介质，转速75r／min，用紫外分光光度法检测，测定波长为256nm。结果：在1．90～11．38μg／mL范围内，浓度与吸收度里良好的线性关系(r＝0.9998)，平均回收率为99．2％，RSD＝0．99％(n＝6)。规定45min的溶出量不得少于标示量的80％。结论：方法简单、准确，能有效控制盐酸三氟拉嗪片的质量，并可作为质量控制标准之一。     

钙离子与三氟拉嗪对标记蛋白轴浆转运的作用

<正> 作者曾证明,在体坐骨神经中注射Ca~(2+)或其络合剂ECTA以改变轴浆中Ca~(2+)浓度均使微管减少或消失。而Ca~(2+)可通过钙调素(CaM)抑制离体管蛋白聚合成微管,神经内注射CaM     

阿帕替尼铜配合物水凝胶对人乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用

目的 制备阿帕替尼(Apa)铜配合物水凝胶(Cu-Apa@APsGels),并探究其对血管生成的抑制作用。方法 通过溶剂挥发法将Apa与Cu²⁺形成稳定配合物Cu-Apa,并通过FT-IR与紫外分光光度计对Cu-Apa进行表征;将Cu-Apa包埋于黄芪多糖基原位凝胶(APsGels)内形成载药凝胶Cu-Apa@APsGels, SEM观察Cu-Apa@APsGels的微观形态及测定孔径,通过FT-IR进行图谱鉴定;采用MTT法对不同药物进行细胞毒性实验;采用Transwell实验测定不同药物对MCF-7细胞的侵袭效果。结果 Cu²⁺可与Apa中的吡啶结构配位形成Cu-Apa,其中,Apa的含量约30%。APsGels凝胶的相变时间77.33 s、相变温度37℃、溶胀率142%,在体外可缓慢降解。MTT试验结果表明：APsGels凝胶的不良反应较小,生物相容性好。APsGels对细胞毒性和侵袭能力的影响较弱,Cu-Apa次之,Cu-Apa@APsGels的抑制能力最强。结论 Cu-Apa@APsGels可提高Apa的利用度并降低其不良反应,对M...     

三氟拉嗪的抗伤害作用及其作用机理

应用小鼠热板法和醋酸扭体法伤害实验 ,评价三氟拉嗪的抗伤害作用 ,并对其作用机理进行探讨 .结果表明 :在热板法伤害实验中 ,三氟拉嗪 (2～ 2 0mg·kg- 1)剂量依赖性地延长热板伤害反应的潜伏期 ,三氟拉嗪 (2mg·kg- 1)和吗啡 (1,3和 6mg·kg- 1)合并使用 ,增加吗啡抗伤害的作用和效率(2 9.4 %～ 5 4 .4 % ) ;在醋酸扭体法伤害实验中 ,三氟拉嗪 (0 .1～ 3mg·kg- 1)非常显著地抑制醋酸伤害刺激所致小鼠扭体反应的次数 ,增加扭体反应的潜伏期 ,呈剂量依赖性 .进一步研究结果表明 :μ受体拮抗剂纳洛酮 (1～ 9mg·kg- 1)和多巴胺 1(DA1) /多巴胺 2 (DA2 )受体激动剂阿扑吗啡 (1～ 9mg·kg- 1)对三氟拉嗪的抗伤害作用无翻转作用 .这些结果提示 :三氟拉嗪具有一定的抗伤害刺激的药理作用 ,但是中枢神经系统中的 μ受体和DA2 受体不参与三氟拉嗪的抗伤害作用     

莪达夏提取物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用

目的研究藏药莪达夏水提物对体外培养的人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用MTT法检测不同浓度的莪达夏水提物处理MCF-7肿瘤细胞12、24、48 h后细胞的存活率,光镜下观察MCF-7细胞形态学的变化,用Annexin V-FITC/PI双染色凋亡检测试剂盒和流式细胞术分析水提物对MCF-7细胞凋亡的影响。结果莪达夏水提物对MCF-7肿瘤细胞的增殖产生抑制作用,且最高抑制率达62%,不同浓度的水提物作用细胞后可引起肿瘤细胞出现胞浆空泡和凋亡小体,低浓度的水提物处理细胞后,肿瘤细胞出现早期凋亡,随着药物浓度的增高,凋亡晚期的坏死细胞增多。结论莪达夏水提物可抑制体外培养的MCF-7乳腺癌细胞的增殖,其抑制作用与诱导肿瘤细胞凋亡的机制有关。     

孕激素受体拮抗剂ZXH951对乳腺癌细胞生长抑制作用及对端粒酶活性的影响

目的　研究ZXH951在体外对乳腺癌细胞的生长抑制作用及对端粒酶活性的影响。方法　分别用细胞生长曲线、集落形成及竞争性配体与受体结合法,测定ZXH951的体外抗肿瘤作用及其与孕激素受体（PR）、雌激素受体(ER)结合活性;用流式细胞术及多聚酶链反应-端粒重复序列扩增法探讨ZXH951对人乳腺癌T47D细胞周期及端粒酶活性的影响。结果　ZXH951对ER和PR双阳性的乳腺癌细胞T47D体外增殖有较强的抑制作用,而对ER和PR双阴性的人乳腺癌细胞MDA-MB-231无明显抑制作用;ZXH951与PR有较强结合活性,而与ER无明显结合活性;可将T47D细胞阻滞在G1期,并对端粒酶活性有一定抑制作用。 结论　ZXH951是一个有发展前景的新型抗孕激素类化合物,在体外对乳腺癌细胞有较强的抑制作用,其作用机制可能与其通过PR介导的细胞增殖及对端粒酶活性抑制有关。     

抗人stathmin单克隆抗体及其联合紫杉醇对人乳腺癌细胞的生长抑制作用

目的：探讨抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇分别单用或联用对乳腺癌细胞系MCF-7的生长抑制及促凋亡作用。方法：以不同浓度的抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇分别组成单药组和联合用药组,另设不加药的空白对照组,分别作用于MCF-7细胞24、48、72、96h,观察细胞数量和形态的变化。MTT法检测单克隆抗体、紫杉醇单用组、联用组以及对照组对MCF-7细胞的增殖抑制作用,用流式细胞仪通过AnnexinV/PI双染法检测各组细胞凋亡率的改变。结果：不同浓度的各实验组作用后细胞数量明显减少、形态不规则,部分细胞核固缩和胞质减少,而对照组细胞生长状态良好。抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇单用与联用均能抑制MCF-7细胞增殖,呈剂量-时间依赖效应,联用组细胞抑制率较单药组明显增高,差异具有统计学意义（P〈0.05）,两药联用有交互效应（P〈0.05）。抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇单用与联用均能诱导MCF-7细胞凋亡,联合组更为明显（P〈0.05）。结论：抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇单用与联用均能抑制MCF-7细胞增殖,诱导其凋亡;两药联合作用于人乳腺癌MCF-7细胞具有协同作用。     

三氟拉嗪对金丝桃甙镇痛作用的影响及机制的分析

以前工作表明金丝桃甙的镇痛作用与减少神经末梢钙内流有密切关系.本文在小鼠热板模型及痛介质诱发的神经放电模型上.发现预处理5mg·kg~(-1)的三氟拉嗪可显著减弱金丝桃甙的镇痛作用;并不被多巴胺受体激动剂及侧脑室注射多巴胺所逆转;在小鼠扭体上.利血平及酸妥拉明Sc后.金丝桃甙镇痛作用未见有显著变化。实验结果提示金丝桃甙镇痛作用与去甲肾上腺素能系统无关,而与钙调蛋白活性有关。     

丙戊酸钠对人乳腺癌细胞系MCF-7增殖的抑制作用及其量效关系研究

目的:探讨丙戊酸钠(VPA)对乳腺癌细胞系MCF-7的增殖抑制作用及其量效关系。方法:MCF-7细胞用0.75～4.0mmol·L-1VPA处理48h,同时设不加药对照组。MTT法分析细胞生长抑制、AnnexinⅤ/碘化丙啶双染法检测细胞凋亡、碘化丙啶法观察细胞增殖周期的变化。结果:与对照组比较,VPA组细胞生长抑制率由17%～54%递增,细胞凋亡率中位数分别为8.32%、9.6%、11.8%、13.7%、16.6%,与对照组比较均有不同程度的增加;细胞增殖周期分析可见对照组顺序出现G1、S、M期,而VPA组随药物浓度的升高而出现逐渐递增的G1期阻滞。结论:VPA可明显抑制MCF-7的生长,诱导凋亡和细胞周期G1期阻滞作用,且呈剂量依赖趋势,在乳腺癌治疗方面有重要价值。