储存时间对腺苷和虫草素在柞蚕蛹虫草中分布和含量的影响

目的:研究储存时间对腺苷和虫草素在柞蚕蛹虫草中分布和含量的影响。方法:采用RP-HPLC法分别测定柞蚕蛹虫草子实体、菌核及整草中腺苷和虫草素含量,并与相同储存时间的米饭虫草进行比较。结果:储存1年的柞蚕蛹虫草腺苷和虫草素的含量顺序为子实体菌核;总量顺序为菌核子实体。储存2年的柞蚕蛹虫草腺苷和虫草素含量有所降低,其分布规律以及总量顺序没有明显变化。储存1年的柞蚕蛹虫草中腺苷总含量高于2年的,差异有统计学意义(P0.05),但其虫草素的含量差异无统计学意义(P0.05)。米饭虫草中腺苷含量是柞蚕蛹虫草的1.6倍,虫草素的含量是柞蚕蛹虫草5倍。结论:储存时间对腺苷和虫草素分布规律以及总量顺序无明显影响,但对其腺苷总含量有明显影响。     

蛹虫草化学成分研究

从蛹虫草菌丝中分离出六种化学成分。经结构鉴定为β-谷甾醇,麦角甾醇,D-甘露醇,腺嘌呤,腺苷及虫草素(3′-脱氧腺苷)。从蛹虫草菌丝中分离出虫草素、腺嘌呤及麦角甾醇尚属首次。     

HPLC法测定蛹虫草中腺苷和虫草素的含量

目的建立HPLC法测定蛹虫草中腺苷和虫草素的含量。方法采用SinochromODS Cl8柱,以磷酸盐缓冲液-甲醇(85:15)为流动相;流速为1.0 mL·min-1;检测波长为260 nm。结果腺苷在8.92~44.6μg·mL-1范围内线性关系良好,r=0.999 9;虫草素在6.23~31.15μg?mL-1范围内线性关系良好,r=0.999 9;腺苷平均加样回收率为97.80%,RSD为1.1%(n=5)。虫草素平均加样回收率为97.46%,RSD为1.5%(n=5)。结论本法专属性强,准确度高,重现性好,可作为蛹虫草质量控制的方法。     

虫草类产品中5种核苷类成分的测定及蛹虫草质量分析

目的建立HPLC法对4种常见虫草类样本[蛹虫草、发酵虫草菌粉(Cs-4)、中华被毛孢和冬虫夏草]中尿苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷5种核苷类成分进行含量测定,比较成分差异,确定蛹虫草的特征成分,为控制蛹虫草及其提取物的质量提供科学依据。方法采用岛津ODS-3 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水进行梯度洗脱,体积流量为0.8 mL/min,检测波长为260 nm,柱温为30℃。结果蛹虫草样品均含有尿苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷,而CS-4、中华被毛孢和冬虫夏草中未检测到虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷。供试品制备方法对核苷类成分的影响较大,蛹虫草粉采用6种方法制备供试品溶液,发现用水超声提取180 min获得的尿苷、鸟苷和腺苷的含量最高,且在24 h内稳定。虫草素性质稳定,而N6-(2-羟乙基)-腺苷对热和酸都不太稳定;其中4种制备方法测得的虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷含量一致。结论为蛹虫草及其提取物的质量分析提供了依据,以特征成分虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷为指标可更好地对蛹虫草及其提取物的质量进行控制。     

RP-HPLC法测定不同北虫草子实体和培养基中腺苷和虫草素含量的比较

目的:比较九种北虫草子实体以及3种培养基中腺苷和虫草素的含量。方法:超声水提法提取样品中腺苷和虫草素,用RP-HPLC法测定其含量。结果:九种北虫草子实体腺苷和虫草素含量都存在差异,腺苷含量为(1.054±0.259)-(2.931±0.356)mg·g-1;虫草素含量差异较大,为(0.435±0.016)-(4.981±0.212)mg·g-1。3种不同培养基中虫草素和腺苷也存在差异,其中3号培养基虫草素含量最高,达1.046 mg·g-1,1号培养基腺苷最高,为0.612 mg·g-1。结论:九种北虫草子实体腺苷和虫草素含量差异较大;三种培养基中腺苷和虫草素含量也存在差异。     

蝉花与有关虫草活性成分检测比较

目的:测定蝉花的虫草活性成分,并与冬虫夏草和蛹虫草作比较。方法:分别采用高效液相色谱法、3,5-二硝基水杨酸比色法和高碘酸钠比色法测定3种虫草样品的腺苷和虫草素、虫草多糖以及虫草酸含量。结果:经测定,蝉花中含虫草素0.02mg·g-1,腺苷1.90mg·g-1,虫草多糖94.88mg·g-1,虫草酸78.57mg·g-1,其中虫草酸和腺苷含量高于冬虫夏草,多糖和虫草酸含量高于蛹虫草。结论:蝉花中的虫草活性成分不亚于冬虫夏草和蛹虫草,属于优质虫草,值得进一步研究和推广。     

新疆虫草与冬虫夏草中腺苷和虫草素的HPLC法测定比较

目的：建立测定虫草类药材腺苷和虫草素含量的HPLC方法,比较新疆虫草和不同地区冬虫夏草中腺苷和虫草素的含量差异。方法：采用反相高效液相色谱法,色谱柱：DikmaTM C18（4.6mm×250mm,5μm）;流动相：甲醇-水（15：85）;柱温为30℃,流速：1.0ml/min;检测波长：260nm。结果：新疆虫草和冬虫夏草中均含有腺苷和虫草素,其中新疆虫草中腺苷含量为237.7μg/g,介于3个冬虫夏草样品（145.2～307.4μg/g）之间;虫草素含量为38.9μg/g,明显高于冬虫夏草（4.2～11.3μg/g）的3～10倍左右。结论：本方法具有简便、快捷、准确等特点,适用于虫草类药材中腺苷和虫草素含量的测定,本研究提示新疆虫草可作为冬虫夏草新资源。     

蚕虫草不同部位营养与活性成分分析

目的:明确蚕虫草不同部位的营养与活性成分,以便开发利用。方法:对蚕虫草、子座、菌核和蚕粉进行分析研究。虫草素和腺苷测定采用高效液相色谱法,虫草多糖测定采用3,5二硝基水杨酸比色法,虫草酸测定采用高碘酸钠比色法,蛋白质测定采用考马氏亮蓝比色法,粗脂肪测定采用索氏提取法。结果:蚕虫草的多糖含量达86.49mg·g^-1;子座的腺苷含量达6.82mg·g^-1;菌核的虫草素和虫草酸含量分别达到13.28mg·g^-1和44.07mg·g^-1。结论:不同活性成分在蚕虫草及其不同部位的含量不同,其中蚕虫草活性成分总量最高,菌核虫草素和虫草酸含量最高;研究还表明蛹虫草菌对蚕体脂肪和蛋白质的分解利用能力很强。     

用蛹虫草固体发酵法高效生产虫草素的研究

目的：研究并建立用蛹虫草固体发酵方式高效生产虫草素的最佳方法。方法：通过对不同菌株在固体发酵过程中各生长期的虫草素含量变化进行跟踪测定以及正交旋转组合设计、正交试验设计等方法，对影响虫草素产量和含量的各影响因子(包括菌种、生长期、培养基配方和环境条件等)进行系统优化。结果：JF-1是虫草素生产的最佳菌株，现蕾期是收获提取虫草素的最佳时期；最佳的培养基配方为水料比1.1∶1(mL·g^-1)，营养水中酵母膏、蛋白胨、葡萄糖的用量分别为22.6，6.0，25.4 g·L^-1，营养水pH 6.6；最佳的环境条件为：光照强度4 400 lx，每日光照时间18 h，温度18～22 ℃。结论：用以上方法固体发酵生产虫草素，经过约13 d的培养，培养基中虫草素达到0.60%，比传统液体发酵方法的最高产量高近2倍，并且培养时间缩短2 d。     

蛹虫草菌丝与冬虫夏草中核苷类成分的含量测定

蛹虫草菌丝与冬虫夏草中核苷类成分的含量测定刘静明,刘岱,杨立新,钟裕容,崔淑莲(中国中医研究院中药研究所北京100700)蛹虫草CardycepsmiliLaris(L.)Link,为冬虫夏草同属真菌,近年来发现蛹草有重要的药用价值,越来越受到国内外的重视,国外报道从蛹虫草人工培养液中分离出虫草素,3′-氨基-3-去氧腺甙及肌氨酸氨基腺音。我们从蛹虫草菌丝中分离得6种成分:β-谷甾醇、麦角甾醇、D-甘露醇、腺嘌呤、腺苷和虫草素￣[1]。并对5批样品....     

腺苷受体及蛹虫草虫草素在新冠肺炎防治中相关的药理机制＊

目前，新冠肺炎流行，轻症有一般肺炎症状，重症可导致呼吸困难、炎症因子风暴和呼吸窘迫综合征。本研究从基础和临床两个方面，综述了腺苷作为先天免疫的介质在炎症和损伤的肺组织中高度分泌，通过腺苷受体A1、A2A、A2B、A3的激活，在急性肺损伤的病理过程中起到抗炎、抑制免疫风暴产生、保护脏器损伤、修复重塑组织的作用。蛹虫草虫草素也是腺苷受体A1、A2A、A2B、A3的激活剂，在临床或动物模型中表现了增强人体免疫力、抑制RNA病毒繁殖、抗炎、抑制细胞因子风暴产生、保护肝脏、保护心脏、保护肾脏、抗肺纤维化的功效。本研究探讨了蛹虫草虫草素作为可培育的、安全的新资源食品或腺苷受体的激活剂，在新冠肺炎防治中可起到的积极作用。     

蛹虫草中虫草素分离纯化工艺研究进展

本文介绍了蛹虫草和虫草素的性状功效以及检测和提取工艺,主要综述了虫草素的分离纯化工艺的研究进展。离子交换树脂法是目前分离纯化虫草素的常用方法,超临界CO2萃取在分离蛹虫草中核苷类成分方面也取得了进展,并提出大孔吸附树脂技术可能会成为虫草素分离纯化新的手段。     

HPLC-ESI-MS测定冬虫夏草和蚕蛹虫草中腺苷和虫草素含量

目的 :建立测定冬虫夏草及蚕蛹虫草中腺苷和虫草素的方法。方法 :HPLC-ESI-MS法 ,用甲醇为提取溶剂 ,采用选择性离子检测 (SIM)和电喷雾离子化 (ESI) ;色谱条件 :ShimadzuVP-ODS色谱柱 ;流动相水 甲醇 甲酸(94∶5∶1) ,以 2 氯腺苷为内标。结果 :腺苷回归方程Y=0 .1346X +0.0129,r=0.9984 ,线性范围 0.5～124.5mg·L^-1;虫草素回归方程Y=0.2164X +0.0215 ,r=0.9991,线性范围 0.5～ 136 .5mg·L^-1;腺苷和虫草素加样回收率分别为 95 .8%及 98.1%。结论 :方法灵敏、快速和选择性好 ,可用于冬虫夏草及其代用品中腺苷和虫草素的分析及质量控制。     

HPLC法测定蛹虫草子实体及其培养基的虫草素含量

目的:建立蛹虫草子实体及其培养基中虫草素(Cordycepin)含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法,选用YMC-PackC18色谱柱(250×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(20:80),流速为1mL/min,检测波长为260nm,柱温为30℃,分析时间为20min。结果:蛹虫草子实体中虫草素含量为0.503mg/g,平均加样回收率(n=9)为100.8%(RSD=1.33%);蛹虫草培养基中虫草素含量为0.118mg/g,平均加样回收率(n=9)为101.7%(RSD=1.82%)。结论:本方法分离度好、精密度高、专属性强、灵敏度高,可用于蛹虫草子实体及其培养基的质量评价。     

酶法提取蛹虫草中虫草素的研究

目的 研究UPLC浏定虫草素的方法及酶法提取蛹虫草中虫草素的工艺条件.方法 对酶种类、酶用量、酶解温度、酶解时间、酶解pH值进行考察,确定最佳提取工艺.结果 中性蛋白酶提取蛹虫草中虫草的最佳工艺为:酶用量1.5%,酶解温度50℃,酶解pH值5.5,酶解时间60 min.结论 该工艺条件下,虫草素提取得率为0.732%,与未加酶的热水浸提相比,虫草素提取得率增加6.2倍.     

多指标优选蛹虫草提取工艺

目的:优选蛹虫草的提取工艺。方法:用多指标综合评分法,采用L9(34)正交试验设计,以虫草素、腺苷、尿苷、多糖及出膏率为检测指标,考察了4种因素(溶剂用量、乙醇体积分数、提取时间、提取次数)对其提取工艺的影响。结果:蛹虫草最佳提取工艺条件为加8倍量水,煎煮3次,每次1 h。结论:本研究优化了蛹虫草的提取工艺,并为蛹虫草的进一步利用和产品开发提供了实验依据。     

冬虫夏草及其代用品中腺苷和虫草素的LC-MS-MS定量分析研究

目的：建立定量测定冬虫夏草及其代用品中腺苷和虫草素的LC-MS-MS方法。方法：HPLC-ESI-MS-MS法,用90%甲醇为提取溶剂,采用多反应监测(MRM)模式测定。结果：腺苷的回归方程Y＝89.04X+506.85,r=0.999 7,虫草素的回归方程Y＝99.66X+1 251.34,r=0.998 8,线性范围均为5.0～1 000.0 μg·L-1；腺苷和虫草素的检出限(LOD)分别为0.44,0.31 μg·L^-1,加样回收率分别为98.12%,97.94%。结论：该法灵敏、选择性好、快速,可用于冬虫夏草及其代用品中腺苷和虫草素的定量测定和质量控制。     

高速逆流色谱法分离制备蛹虫草发酵液中虫草素

目的 以蛹虫草发酵液虫草素粗提物为原料,对高速逆流色谱(HSCCC)分离制备虫草素条件进行研究.方法 利用HPLC测定分配系数法结合分析型HSCCC对分离虫草素的溶剂体系进行筛选,确定虫草素分离的最佳溶剂体系为醋酸乙酯-正丁醇-0.5％氨水(2∶3∶5),并运用此溶剂体系,上相作为固定相,下相作为流动相,利用制备型HSCCC分离制备蛹虫草发酵液中虫草素.结果 400 mg虫草素粗产品通过制备型HSCCC一次分离制备获得质量分数为98.7％的虫草素产品43.8 mg.结论 该法效率高,操作简单,为虫草素的大量制备提供了重要参考.     

RP-HPLC法测定北虫草中腺苷、虫草素含量

目的:采用RP-HPLC法测定不同基地、不同批次的北虫草子实体中腺苷、虫草素含量。方法:Agela-C18色谱柱,流动相为Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液(pH=6.5)-甲醇(17∶3),流速1.0 ml/min,检测波长260 nm,柱温20℃。结果:小麦基质培养的北虫草中腺苷平均含量最高,虫草素含量二者相差甚微。结论:以小麦为基质培养的北虫草质量较好。     

氧化铝脱色纯化虫草素工艺研究

目的 探索氧化铝柱层析脱色纯化蛹虫草培养基中虫草素的工艺.方法 以蛹虫草小麦培养基原料,水加热提取,采用酸性氧化铝干柱层析、醇沉去杂、重结晶来纯化得到高纯度虫草素.结果 氧化铝柱层析参数:层析剂为酸性氧化铝,30％乙醇为洗脱溶剂,洗脱用量为2倍柱体积,酸性氧化铝用量为蛹虫草小麦培养基重量:酸性氧化铝重量为1g∶3g.氧化铝脱色液浓缩,浸膏乙醇超声溶解,沉淀过滤,滤液冷置结晶,晶体重结晶即得白色针状虫草素晶体.结论 该工艺可简捷有效地将蛹虫草小麦培养基中0.2％虫草素纯化至97％虫草素,同时也适合于虫草发酵液、虫草菌丝体虫草素的分离纯化.