内毒素受体基因多态性与脓毒症的研究进展

脓毒症是临床危重患者的主要死亡原因之一．已成为现代危重病医学亟待解决的重大难题。以往脓毒症的不良预后一直归结为诊断错误或不及时．以及抗炎治疗不充分．现在人们认识到脓毒症临床表型及治疗反应不同与其遗传基因背景的差异可能有内在联系。免疫相关基因多态性(polynorphism)在一定程度上决定了机体免疫应答状态的差异．基因多态性与脓毒症关系的研究日益     

乳果糖对严重烫伤大鼠血浆循环内毒素及组织中白细胞介素- 18 mRNA基因表达的影响

 目的探讨乳果糖对烫伤大鼠组织中白细胞介素-18 mRNA表达的影响.方法将大鼠致30%体表面积Ⅲ度烫伤,随机分成烫伤对照组(C组)及乳果糖预防组(L组).采用逆转录PCR技术检测肠、肺、肝、肾等组织中IL-18 mRNA水平.结果烫伤后两组体循环内毒素含量显著升高,用乳果糖予处理后可显著降低循环内毒素含量(P＜0.05或P＜0.01).烫伤后,肠、肺、肝、肾等组织中IL-18 mRNA表达较伤前显著升高(P＜0.01),伤后8 h达峰值,24h内居高不下.给予乳果糖予处理后可明显抑制IL-18 mRNA的过度表达(P＜0.05或P＜0.01).结论乳果糖可明显降低体循环内毒素的含量,并明显抑制肠、肺、肝、肾组织中IL-18 mRNA的过度表达.     

脓毒症大鼠内毒素增敏系统改变与高迁移率族蛋白-1表达的关系

目的　探讨脓毒症时组织脂多糖结合蛋白 (LBP)和脂多糖受体CD14的改变及其与高迁移率族蛋白 - 1(HMG - 1)诱生的关系。　方法　采用大鼠盲肠结扎穿孔 (CLP)致脓毒症模型 ,大鼠随机分成正常对照组、假手术组、CLP组及杀菌 通透性增加蛋白治疗组 (rBPI2 1治疗组 )。检测肝、肺、肾和小肠组织LBP、CD14及HMG - 1基因表达的变化。　结果　CLP组术后 2h ,肝、肺、肾和小肠组织LBP CD14mRNA表达均有不同程度增高 (P <0 .0 5～ 0 .0 1)。与CLP组比较 ,rB PI2 1治疗组CLP后 12h和 2 4h肝、肺组织LBPmRNA表达明显受抑制 (P <0 .0 1) ,12h各组织及2 4h小肠CD14mRNA表达亦明显降低 (P <0 .0 5 )。同时 ,CLP组术后 6h肝、肺、小肠HMG - 1mR NA表达显著增高 (P <0 .0 5 ) ,2 4h达峰值 (P <0 .0 1) ,并持续至 72h。rBPI2 1早期治疗可显著降低12h各组织和 2 4h肝、小肠HMG - 1mRNA的表达。相关分析表明 ,CLP后肝、肺、肾及小肠组织LBP CD14mRNA表达与相应组织的HMG - 1mRNA表达均呈显著正相关。　结论　脓毒症时LBP CD14增敏系统可能参与了晚期炎症介质HMG - 1的诱生过程。     

NF-kB抑制剂对烫伤脓毒症大鼠致炎／抗炎细胞因子表达的影响

目的　观察NF κB抑制剂对动物主要器官致炎 /抗炎细胞因子基因及蛋白表达的调节效应 ,并对其作用机制进行初步探讨。方法　34只动物随机分为正常对照组 (n=6 )、烫伤 (2 0 %TBSAⅢ度 )对照组 (n=6 )、烫伤后金葡菌感染组 (n=12 )和NF κB抑制剂二硫氨基甲酸酞吡咯烷 (PDTC)拮抗组 (n =10 ) ,检测动物肝、肾、肺组织中TNF α、IL 10基因及蛋白表达的改变。结果　烫伤脓毒症组 0 5～2h肝、肺、肾组织中TNF αmRNA表达迅速增强 ,同时各组织TNF α蛋白水平亦显著升高。PDTC早期干预对肺脏TNF αmRNA及蛋白水平影响不明显 ,但肝、肾组织其表达量在 2h均被显著抑制 (P <0 0 5或 0 0 1)。烫伤合并金葡菌感染后 2h大鼠肝、肺、肾组织IL 10mRNA与蛋白水平均显著升高 (P <0 0 5或 0 0 1) ,早期给予PDTC对肺、肾组织各时间点IL 10mRNA与蛋白表达均无明显影响 ,肝组织仅 2h呈现一定程度地下降。结论　NF κB抑制剂在有效拮抗G+ 菌脓毒症TNF α等致炎介质的同时 ,对机体并存的抗炎细胞因子反应机制具有保护作用。     

内毒素增敏系统与严重烧伤脓毒症的关系及其临床意义

目的 探讨严重烧伤患者内毒素增敏系统--脂多糖结合蛋白/脂多糖受体CD14(LBP/CD14)的变化与严重脓毒症的关系及其临床意义.方法 选择35例烧伤体表总面积大于30%患者,根据烧伤脓毒症的定义和诊断标准分为脓毒症组(19例)和非脓毒症组(16例),应用酶联免疫吸附试验检测患者烧伤后1、3、5、7、14、21、28...     

烧伤后脓毒症与多系统器官功能衰竭的关系

烧伤后脓毒症与多系统器官功能衰竭的关系１０００３７北京解放军第３０４医院郝岱峰郭振荣高维谊贺立新关键词烧伤；脓毒症；多器官功能衰竭中国图书资料分类号Ｒ６４４近年来，随着对烧伤后全身病理生理认识的提高和烧伤救治水平的发展，危重病人的治愈率明显提高。但大...     

脓毒症大鼠肝组织内IL-6/信号转导和转录激活因子3的表达变化及可能作用

目的研究IL-6／信号转导和转录激活因子3（STA33）信号通路在脓毒症大鼠肝组织中的活化规律及其与肝损害的关系。方法盲肠结扎穿孔（CLP）法制作脓毒症大鼠模型，66只大鼠随机分为正常对照组、CLP组和假手术组，分别于术后2，6，12，24，48h处死，采用实时荧光定量多聚酶链式反应（real-time PCR）和ELISA法分别检测肝组织中IL-6基因与蛋白表达，免疫组织化学法检测肝组织磷酸化STA33（P-STA33）的表达，同时测定血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平，光镜观察肝组织形态学变化。结果CLP组大鼠肝组织IL-6与P-STA33表达术后2h开始升高，12h达峰值，血清ALT和AST在术后24h达高峰，肝组织12h后出现炎症改变，P-STAT3表达与IL-6、肝功能变化均呈正相关（P〈0．05）。假手术组大鼠各项指标与正常对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论IL-6／STA33信号通路可能在诱导脓毒症动物肝脏急性损伤中具有重要作用。     

Caspase-1抑制剂对重症急性胰腺炎大鼠肝IL-18表达的影响

目的 观察Caspase-1抑制剂对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肝组织及肝内IL-18表达的影响.方法 采用4%牛磺胆酸钠逆行注入胰胆管诱发SAP模型.SD大鼠42只,随机分为3组:对照组(HC组,n=6);SAP造模 生理盐水组(SAP-S组,n=18);SAP造模 Caspase-1抑制剂组(SAP-ICE-Ⅰ组,n=18).SAP-S组于造模后2h腹腔注射生理盐水1ml,12h后重复1次;SAP-ICE-Ⅰ组于造模后2h腹腔注射ICE抑制剂,12h后重复1次.HC组模拟胰胆管穿刺操作,但不注射药物.SAP-S组与SAP-ICE-Ⅰ组于造模后6、12、18h心脏穿刺抽血,测血清淀粉酶(AMY)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,并测定腹水量,留取标本在光镜下观察胰腺及肝组织病理学改变,采用免疫组化方法 检测IL-18在肝脏中的表达和定位,并用Western blotting方法 检测肝内成熟IL-18蛋白的表达.结果 与HC组比较,SAP-S组与SAP-ICE-Ⅰ组血清AMY、ALT、AST水平明显升高,腹水量明显增多(P<0.01);与SAP-S组相比,SAP-ICE-Ⅰ各组血清AMY、血清ALT、AST水平和腹水量有显著下降(P<0.01).光镜下,SAP-S组胰腺和肝组织病理损害程度随时间明显加重,与SAP-S组相比,SAIXlCE-Ⅰ组对应时间点胰腺病变程度有所减轻,而肝组织损伤未见明显变化.免疫组化结果 显示,Kupffer细胞胞质中IL-18的表达在SAP-S组和SAP-ICE-Ⅰ组较HC组明显增多,而SAP-ICE-Ⅰ组较SAP-S组明显减少.Western blotting结果 显示,成熟的IL-18表达在SAP-S组各时间点明显升高,与HC组相比均具有显著性差异(P<0.01),SAP-ICE-Ⅰ组各时间点较SAP-S组显著减少(P<0.01),除6h组外均较HC组无显著差异(P>0.05).结论 Caspase-1抑制剂可以抑制成熟的IL-18蛋白的表达,可以有效改善SAP时受损的肝脏功能.     

烫伤大鼠肠、肺组织白细胞介素-18的表达及其对脏器的影响

目的：探讨大鼠严重烫伤后肠，肺组织IL－18（白细胞介素－18，Interleukin-18)和相关介质的动态表达规律及其对脏器的影响。方法：采用大鼠30％体表面积Ⅲ度烫伤延迟复苏模型，肠，肺组织IL－18，IFN－γ，FasL(Fas配体，Fas Ligand)mRNA含量采用逆转录聚合酶链式反应检测。ELISA法测定IFN－γ含量；同时检测肠，肺功能指标。结果：肠、肺组织IL－18，IFN－γ，FasLmRNA表达较伤前显著升高，烫伤后8小时达高峰，且一直持续至伤后24小时，给予SDD（选择性消化道脱污染selective decontamination of the digestive tract)预后治疗后，不同程度抑制了IL－18，IFN－γ，FasLmRNA的表达。严重烫伤后，出现广泛的脏器功能损害，预防性SDD处理可不同程度地保护脏器。相关分析表明，循环内毒素与肠，肺IL－8，IFN－γ，FasL诱生有关，而后者与器官功能损害密切相关。结论：肠，肺组织IL－8，IFN－γ，FasLmRNA的表达在烫伤早期即显著增多，并呈逐渐升高的趋势，后者对脏器功能具有重要影响。     

血必净注射液对脓毒症大鼠肝组织凝溶胶蛋白及炎症因子的影响

目的 观察中药血必净注射液对脓毒症大鼠肝组织凝溶胶蛋白(GSN)及炎症因子的影响.方法 雄性Wistar大鼠78只,随机分为正常对照组(n=6)、假手术组(n=24)、盲肠结扎穿孔术(CLP)组(n=24)、血必净组(n=24).后两组采用CLP制备脓毒症大鼠模型.假手术组麻醉后开腹翻动盲肠后关腹.血必净组于术后2、1...     

脓毒症大鼠肝脏组织Toll样受体4和髓样分化蛋白-2基因表达的变化规律

目的探讨脓毒疗人鼠肝脏组织内毒素复合受体—Toll样受体4（TLR4）／髓样分化蛋白-2（MD-2）mRNA的表达变化，研究其与肝脏组织肿瘤坏死因子-α（TNF—α）mRNA表达的父系。方法腹腔注射内毒素（LPS）5mg／kg制作大鼠脓毒症模型。动物分为正常对照组（20只）及内毒素注射后1h、2h、6h组（各20只）．检测肝脏组织TLR4／MD-2以及TNF-α mRNA的表达。结果LPS注射后1h，TLR4／MD-2及TNF-α mRNA表达开始升高并达高峰．伤后2～6h逐渐下降，各时间点的表达量均显著高于对照组（P〈0．01）．TLR4与MD-2 mRNA的表达呈明显正相关（P〈0．05）．且分别与TNF—α mRNA的表达呈显著正相关（P〈0．05）。结论LPS可迅速上调肝脏组织TLR4／MD-2的基闪表达并诱导早期炎症细胞因子TNF-α的基因表达。脓毒症时TLR4识别LPS是可能以TLR4／MD-2复合体的形式完成的．且在识别过程中MD-2是TLR4必需的作用分子。     

人白细胞介素6在HT-29结肠癌细胞系中的转基因表达

将含IL-6cDNA的PMAM重组载体用脂质体法转染大肠癌细胞株HT-29,克隆出抗性细胞,经Southern印迹杂交证明有IL6基因片段的插入.RNA点杂交结果表明:IL-6基因转染细胞有较强的IL-6mRNA转录,而未转染细胞的转录水平很弱;7TD1-MTT法检测转染前后细胞的上清显示:抗性细胞分泌的IL-6活性明显增强.     

急性肺损伤大鼠TNF-α、IL-1β、IL-1ra mRNA的表达及药物干预

目的观察急性肺损伤(ALI)大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-1受体拮抗剂（IL-1ra）mRNA的动态表达及白介素-10(IL-10)、地塞米松(Dex)对TNF-α、IL-1β、IL-1ra的干预作用。方法气道内滴注内毒素(LPS)10mg／k建立大鼠ALI模型。72只雄性SD大鼠随机分为对照组、损伤组、LPS加IL-10组、LPS加Dex组，每组18只(2、6、24h各6只)。采用RTPCR方法检测肺组织TNF-α、IL-1β及IL-1ra mRNA的表达水平，光镜下观察肺组织病理改变。结果损伤组肺组织TN-α mRNA表达2h达高峰，随后迅速下降；IL-βmRNA表达2h显著升高，6h达高峰，随后迅速下降；IL-1ra mRNA表达6h开始升高，且为峰值，24h仍高于对照组。IL-10及Dex可明显抑制肺组织TNF-α及IL-1βmRNA的表达，但对IL-1ra mRNA表达无明显影响。肺组织病理检查见IL-10组、Dex组的肺损伤较损伤组明显减轻。结论急性肺损伤时，TNF-α及IL-1βmRNA表达明显早于IL-1ra mRNA，提示ALI早期存在炎症介质／抗炎介质失衡。IL-10、Dex可明显抑制TNF-α及IL-1βmRNA的表达，但不影响IL-1ra mRNA的表达，这有利于炎症介质／抗炎介质平衡的重建，减轻大鼠ALI。     

大鼠腹腔巨噬细胞高迁移率族蛋白B1诱生机制的初步探讨

目的　探讨腹腔巨噬细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)诱生的分子机制。方法　取正常Wistar大鼠腹腔巨噬细胞置 2 4孔培养板中 (1× 10 6/孔 ) ,培养 3天后用内毒素 (LPS)刺激 ,观察LPS刺激与巨噬细胞HMGB1mRNA表达的时效关系及量效关系 ,同时观察氟达拉滨 (fludarabine,STAT1抑制剂 )及雷帕霉素 (rapamycin,STAT3抑制剂 )对HMGB1mRNA表达的影响。结果　LPS刺激可使大鼠腹腔巨噬细胞HMGB1mRNA表达明显上调 ,于攻击后 2 4～36h达峰值 ,至 4 8h减弱。LPS的刺激剂量为 75～10 0ng/ml时 ,HMGB1基因表达明显增强。经氟达拉滨和雷帕霉素处理均可明显下调HMGB1基因表达。结论　LPS可诱导大鼠腹腔巨噬细胞HMGB1mRNA表达 ,其诱生机制与Janus激酶 /信号转导子和转录激活因子 (JAK/STAT )途径密切相关。     

Interleukin-6 and its mRNA responses in exercise and recovery: relationship to muscle glycogen

Increases in circulating interleukin-6 (IL-6) during exhaustive exercise have been suggested to be related to declining muscle glycogen. We addressed two hypotheses: (a) exhaustive exercise on two occasions will result in similar decreases in glycogen and increases in circulating IL-6 and its muscle mRNA; (b) increasing the rate of glycogen restoration via high-carbohydrate feeding in recovery will be associated with more rapid declines in muscle mRNA and circulating IL-6. Ten male subjects (22.6+/-0.8 year) cycled to exhaustion (65% VO(2 max)) on two occasions (117.8+/-2.9 min). Carbohydrate (1 g/kg bw) or water was ingested at exhaustion, 60, 120, 180, and 240 min post-exercise. Muscle biopsies were taken at rest, exhaustion, 30, 60, 120 and 300 min of recovery. Exercise resulted in a 14.5-fold increase (P<0.05) in IL-6 mRNA, 14.4-fold increase (P<0.05) in circulating IL-6, and a 80% decrease (P<0.05) in muscle glycogen from rest. The decline in glycogen was not correlated with the increase in IL-6 or IL-6 mRNA. During recovery, circulating IL-6 and its muscle mRNA decreased similarly in both trials; however, glycogen increased 150% (P<0.05) and 40% in the carbohydrate and water trials, respectively. Therefore, the declining IL-6 mRNA and IL-6 plasma concentrations during recovery were not related to carbohydrate availability or changes in glycogen.     

肺门、纵隔淋巴结^18F-FDG PET显像结果回顾

目的：~(18)F-FDG PET显像已经广泛用于肿瘤的检测,但肺门与纵隔淋巴结可能出现的非特异性摄取干扰PET显像结果的判断。本文通过临床实际病例回顾,分析这种非特异淋巴摄取的显像特点。材料和方法：回顾429例行肺或全身PET检查,图像质量合格,排除淋巴瘤,有病理、临床材料证实或经长期随访符合终点分析标准的病例。重点分析肺门、纵隔淋巴结显影率、影像特点,并与病例的人口学、临床结果对比分析。结果：114例(26．6%)肺门、纵隔淋巴结显影。其中48例见于良性疾病,恶性疾病66例。非特异性摄取与性别关系不大,但60岁以上人群发生率(46．4%)明显高于中青年(17．9%)。肺门两侧横行分布者多为良性,涉及纵隔的纵行淋巴结多见于恶性疾病。结论：肺门淋巴结非特异性摄取有年龄与分布形式特点,有助于同恶性疾病的淋巴转移鉴别。     

外科手术患者血清趋化因子IP-10含量的变化及意义

目的观察外科手术患者血清趋化因子IP-10含量的变化及其与脓毒症的关系。方法14例普通外科疾病住院手术患者,根据术后是否出现脓毒症分为脓毒疗组（n=6）和非脓毒症组（n=8）,另有6例健康志愿者作为正常对照组（n=6）。采用ELISA法动态检测血清中IP-10含量。结果外科手术后非脓毒症患者血清IP-10含量升高,第1～3天达峰值,一周降至术前范围;手术后并发脓毒症者血清IP-10含量进一步升高且持续时间延长,术后1、3、7天显著高于无脓毒症者（P〈0．05或0．01）,且脓毒症组IP-10含量与白细胞计数呈显著正相火（r=0．955,P〈0．05）。结论外科手术打击可刺激IP-10的产生,血清IP-10水平持续升高与脓毒症的发生密切相关。