杭州市××幼儿园一次柯萨奇 B_3型病毒感染的小型暴发——Ⅱ.5例柯萨奇 B_3型病毒性脑膜炎的临床和流行病学资料

本市××幼儿园1964年9～10月发生一次由柯萨奇 B_s 型病毒引起的小型暴发,其中伴有头痛、呕吐的5例,曾初诊为“流行性乙型脑炎”,后经病毒分离和双份血清抗体测定,证实系柯萨奇 B_3 型病毒所致的无菌性脑膜炎,现将其流行病学及有关临     

柯萨奇病毒感染与Ⅰ型糖尿病关系的研究进展

Ⅰ型糖尿病的发病机制到目前为止尚未清楚,传统观点认为遗传因素、环境因素、免疫机制在IDDM的发病机制中占重要地位,目前大量文献报道表明,环境因素特别是柯萨奇B组病毒感染在IDDM发生中起重要作用。     

柯萨奇B病毒感染与Ⅰ型糖尿病的关系

应用间接免疫荧光法，对３５例病程不超过１６周的Ⅰ型糖尿病人测定了血清柯萨奇Ｂ病毒抗体ＩｇＭ（ＣＢＶ－ＩｇＭ）。结果发现，初发Ⅰ型糖尿病组ＣＢＶ－ＩｇＭ检出率与正常对照组无明显区别。ＣＢＶ－ＩｇＭ检出率不受地区影响，但与年龄有关，年龄小于１９岁的Ⅰ型糖尿病人ＣＢＶ－ＩｇＭ检出率高。ＣＢＶ－ＩｇＭ与胰岛细胞抗体、胰岛素自身抗体无关，是否与ＨＬＡ－ＤＲ４、Ａ９、ＤＱ３相关尚需进一步研究。提示我国初发糖尿病人发病与ＣＢＶ感染无关，遗传易感性不同、起病年龄不同、ＣＢＶ变异株不同可能解释ＣＢＶ与Ⅰ型糖尿病相关程度的差异。     

实验性柯萨奇B_3组病毒感染引起多脏器功能损害

目的 :探讨柯萨奇B3 病毒感染引起多脏器功能损害的病理基础。方法 :4～ 6周龄健康雄性BALB/c小鼠 2 0只 ,腹腔注射 10 9TCID50 的柯萨奇B3 组病毒 (CVB3 )液 0 .12ml,10d后处死小鼠 ,分别摘取心脏、肝脏和肺标本 ,制成病理切片 ,光镜及电镜下观察其病理变化。结果 :心脏出现病理改变小鼠 17例 ,其中 2例出现多脏器损害 ,占小鼠总数的 10 %。结论 :柯萨奇B3 病毒感染可引起多脏器损害 ,在临床工作中对重症病毒性心肌炎患儿应注意其多脏器损害 ,以提高治愈率及生存率     

逆转录聚合酶链反应方法检测新生儿病房柯萨奇B_3病毒感染

目的:探讨逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法在检测柯萨奇病毒B3(CoxB3)感染中的作用。方法:采用RT-PCR方法对北京某医院31对(62例)疑似有母婴传播性CoxB3感染的新生儿和母亲血样进行CoxB3病毒的RNA检测。结果:62例样本经血清学检测,只有1例新生儿CoxB3病毒抗体阳性,阳性率为1.61%。经RT-PCR方法检测,62例血样中有12例检测结果为阳性,阳性率为19.35%;其中4对母、婴均阳性,2对新生儿阳性、母亲阴性,还有2对母亲阳性、新生儿阴性。其余23对母婴均为阴性。结论:RT-PCR法对于早期CoxB3感染检测的阳性率优于血清学检测方法,对确定病毒的传播途径有参考价值,同时可以早期预防病毒感染在新生儿中的爆发。RT-PCR法具有快速、敏感、特异性强等特点,是快速、有效检测CoxB3病毒感染的诊断方法之一。     

维生素C对柯萨奇B_3病毒感染的心肌细胞的保护作用研究

观察维生素Ｃ对柯萨奇Ｂ３（ＣＶＢ３）病毒的复制和对病毒感染心肌细胞的影响，结果表明：维生素Ｃ（ＶｉｔＣ）对ＣＶＢ３感染的心肌细胞具有保护作用，加ＶｉｔＣ培养２４ｈ后，随时间延长，保护作用越来越明显（Ｐ＜０．０５）；实验结果还表明：ＶｉｔＣ在细胞外并无直接灭活病毒作用，而是作用于细胞，影响病毒的复制，从而使心肌细胞得到保护。     

一起幼儿园柯萨奇肠道病毒感染暴发的调查

目的 通过调查一起幼儿园柯萨奇肠道病毒感染暴发疫情,为肠道病毒感染的防治工作提供科学依据。方法采用现场流行病学方法对发病班级的儿童进行流行病学调查,收集病例肛拭子及咽拭子样本进行实验室检测。结果本次疫情共调查37名儿童,其中发病23名。病例以发热、呕吐、头痛、嗜睡等为主要症状。采集12名发病儿童和4名未发病儿童肛拭子及咽拭子标本进行实验室检测,柯萨奇肠道病毒阳性率93.75%。结论 综合流行病现场调查和实验室检测结果,确定为一起柯萨奇肠道病毒引起的暴发疫情。     

柯萨奇病毒B_3致病模型的建立

目的 :建立柯萨奇病毒 (CV)B3 的实验动物模型 ,以期为抗病毒药物筛选提供工具。方法 :雄性BALB/C鼠腹腔注射CVB3 后 ,观察小鼠发病症状 ,并在不同时间处死小鼠 ,取小鼠心、脾、肝、肾等组织进行病毒分离、病毒核酸检测、心肌组织病理检查。结果 :感染后第 3d小鼠即出现症状 ,第 5d在小鼠的心脏、脾脏、肾脏均可分离出感染性病毒 ,其滴度分别为 :10 4 .7,10 3.3 ,10 3.2 TCID50 / 0 .1ml,同时小鼠心、脾、肾、等组织及血清中CVB RNA检测为阳性 ,心肌组织出现典型炎性改变。结论 :雄性BALB/C鼠感染CVB3 后可引起病毒性心肌炎发生     

原位RT-PCR法检测柯萨奇B_3病毒感染HeLa细胞中的病毒RNA

利用生物素标记的核苷酸直接掺入法，建立了检测柯萨奇Ｂ３病毒感染的原位逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，并对经柯萨奇Ｂ３病毒感染的ＨｅＬａ细胞和未感染的ＨｅＬａ细胞进行了检测。结果表明，病毒感染的ＨｅＬａ细胞可见阳性信号，细胞呈蓝紫色，而未感染的ＨｅＬａ细胞无阳性信号，细胞不着色。说明该技术可应用于柯萨奇Ｂ３病毒感染的细胞和组织中的病毒ＲＮＡ检测，特别是用于病毒感染组织（如心肌炎、心肌病心肌组织）中病毒ＲＮＡ的定位检测。     

乙型病毒性肝炎合并EB和柯萨奇B_2病毒感染一例报道

陈×,女,6岁半,住院号79-736。因上腹部隐痛10天,高热8无,黄疸及咳嗽一周,于1979年3月3日入院。 患儿于入院前10天开始感上腹部隐痛,二天后发热达39(?)～40℃,次日发现黄疸,伴纳呆及刺激性咳嗽。在外就诊,血清谷丙转氨酶(SGPT)190单位/升,一分钟胆红质(Sb′)3.3毫克％,总胆红质(Sb)11毫克％。总蛋白6.3克％,白/球蛋白2.6/3.7,诊断为病毒性肝炎。因症状加重而转本院。病程中无咽痛,淋巴结肿大,嗜睡及烦躁。无肝炎接触。     

小鼠柯萨奇B_3病毒感染与胸腺等免疫器官继发性萎缩的关系

本文用CVB_3感染BALB/G小鼠,结果表明:在感染过程中,免疫器官的受累以胸腺最为明显,脾脏次之。肠系膜淋巴结未见著变。胸腺、脾脏重量和镜下的改变,ANAE强阳性率的变化与心肌炎发展的不同阶段至为密切,与极期变化最重,胸腺和脾脏的重量分别缩小为对照组的1/5和1/2。此外,拒食和体重下降等营养因索,也起一定作用。     

柯萨奇B_3病毒单克隆抗体的制备及鉴定

用柯萨奇 B3病毒免疫 Balb/c小鼠。取脾细胞与 Sp2 /0细胞进行融合及细胞培养。用间接免疫荧光法筛选阳性细胞。并用 ELISA法等行 Ig类及亚类的鉴定。结果 :经融合、筛选、克隆化后共获得 2 6株稳定分泌特异性 Mc Ab的杂交瘤细胞 ,其中 3株分泌Mc Ab为 Ig G1类 ,2株为 Ig G2 b类 ,4株为 Ig G2 a类 ,1 7株为 Ig G3类。 2 6种 Mc Ab中除少数杂交瘤株的 Mc Ab能与同组不同型发生交叉反应及 Mc Ab2 B2 与 Polio 型、Mc Ab1 H10 与CVA4 有交叉反应外 ,其余的 Mc Ab仅与本型的病毒起反应。提示 CVB3- Mc Ab具有高度的特异性及均一性 ,可广泛应用于基础医学及临床医学研究     

病毒性心肌炎感染模型——大鼠搏动心肌细胞培养的柯萨奇B_2病毒感染研究

新生培养的 Sprague-Dawley 大鼠搏动心肌细胞感染柯萨奇 B_2病毒后,逐步出现细胞病变、细胞停止搏动,培养液中乳酸脱氢酶(LDH)及谷草转氨酶(SGOT)增高,核素标记检测有细胞毒性增加等改变.此模型可用于研究某些药物对病毒性心肌炎的防治观察。     

苦瓜蛋白对柯萨奇3型病毒感染大鼠心肌细胞的保护作用

目的 在病毒性心肌炎心肌细胞模型上观察苦瓜蛋白对柯萨奇3型病毒(CVB3)感染SD大鼠心肌细胞的保护作用及其机制. 方法 体外原代培养SD大鼠心肌细胞,以CVB3感染培养大鼠心肌细胞,复制病毒性心肌炎心肌细胞模型,分别测定心肌细胞搏动百分比(PBC)、半数有效率(ED)、细胞病变(CPE)、心肌酶谱、半感染致死量(TCID50),分析其对心肌细胞的保护作用. 结果 苦瓜蛋白的ED值为0.045 mg/mL,80、40、20、10 μg/mL苦瓜蛋白可显著提高心肌细胞PBC、降低病毒的复制,80、40 μg/mL苦瓜蛋白可减少CPE,降低心肌酶水平. 结论 苦瓜蛋白对感染CVB3的心肌细胞有较强的保护作用.     

双黄连抗柯萨奇B3型病毒感染大鼠原代心肌细胞的效应

目的观察双黄连抗柯萨奇B3病毒感染原代大鼠心肌细胞的作用,并初步探讨其机制.方法选用出生1～3天的Sprague-Dawley大鼠,取其心室肌组织,制备原代大鼠心肌细胞,培养72 h后,用不同浓度的双黄连对抗100TCID50柯萨奇B3型病毒感染细胞,观察细胞病变,测定感染36 h后细胞上清液中的病毒滴度及肌酸磷酸激酶.结果 0.5、 0.25、0.125 g/L双黄连均可明显减轻心肌细胞病变,降低细胞上清液的病毒滴度, 减少感染心肌细胞肌酸磷酸激酶的释放(分别和病毒对照组相比,P<0.01).结论双黄连对柯萨奇病毒感染的新生大鼠原代心肌细胞有保护作用.     

反义寡核苷酸抑制柯萨奇病毒B_3致病作用的实验研究

目的 :观察在细胞培养系统和小鼠体内反义寡核苷酸 (AODN)抑制柯萨奇病毒B3(CVB3)致病作用。方法 :观察细胞病变效应 (CPE) ,常规微量法滴定病毒的50 %组织细胞感染量 (TCID50)以及观察感染小鼠心肌组织的病理改变。结果 :1 AODN可推迟和减轻CVB3 感染细胞CPE ,且随AODN浓度增高 ,对CPE的抑制作用增强 ;培养上清中病毒滴度随AODN浓度升高而降低。2 随AODN剂量增加 ,感染小鼠心肌组织病毒滴度逐渐降低 ;心肌细胞病变程度逐渐减轻 ;心肌炎发病率也逐渐降低。结论 :AODN可能通过抑制CVB3 复制来保护Vero细胞和小鼠心肌组织抵抗感染。     

干扰素对呼吸道柯萨奇病毒感染的治疗研究

目的：探讨呼吸道柯萨奇病毒感染的临床特点及干扰素的治疗效果。方法：采用酶联免疫法检测柯萨奇病毒混合型IgM。干扰素组在常规治疗的基础上加用干扰素注射液。结果：上呼吸道感染组CV—IgM阳性率25．56％，肺炎组阳性率24．05％。CV—IgM阳性上感患儿：干扰素组热退时间低于对照组．有显著性差异（P〈0．05）。CV—IgM阳性肺炎患儿：干扰素组热退时间及治愈时间均低于对照组。有显著性差异（P〈0．05）。结论：①柯萨奇病毒可引起小儿呼吸道感染，在上感中占25．56％，肺炎中占24．05％。②干扰素对呼吸道柯萨奇病毒感染治疗效果较好。     

柯萨奇B3病毒感染小鼠不同时间的心电图观察

目的 用柯萨奇B3病毒感染BALB／c小鼠。用普通心电图仪对实验组和对照组小鼠,在不同时间进行心电描记总结出变化规律,为病毒性心肌炎动物模型提供检测指标,为临床心肌炎诊断提供实验依据。方法 用频响为0-90Hz,纸速为50mm／s普通心电图仪,对260只小鼠选择其标准导联Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和单极加压肢体导联aVR、aVL、aVF的心电图进行描记。其中实验组148只,对照组112只。结果 通过两组小鼠心电图比较,对照组小鼠心电图未发现异常。而实验组小鼠心电图异常率达50％以上。随着感染时间的延长,心电图可见到结早、不完全性房室脱节、房室传导阻滞、QRS波终末传导延缓粗钝等。小鼠心电图异常比例更为显著。结论 感染柯萨奇B病毒后,小鼠心电图改变与病毒性心肌炎心电图异常改变相符。小鼠心电图的描记可以做为病毒性心肌炎动物实验比较客观的检测指标之一。     

小鼠急性柯萨奇B_3病毒性心肌炎电生理的表现

用常规细胞内微电极技术及实时微机数据处理系统,对柯萨奇B_3病毒(CB_3V)感染的BALB/c小鼠(早期7d、14d)作心肌电生理参数及动作电位波形研究。发现在病毒感染早期,心肌细胞的静息电位(RP)、动作电位振幅(APA)、超射(Os)、O相最大上升速率(Vmax)均数值除感染7d组Os值无差异,其余均显著低于同期正常对照组:而动作电位时程APD50和APD90均数值除感染14d组APD90无差异外,均显著延长。动作电位异常波形多达十种,占感染组的65％以上。提示CB_3V感染对心肌造成的损害,可产生多种心电活动异常,并成为形成各种形式心律失常的基础。     

自然流产与柯萨奇B组病毒感染关系的研究

为了研究柯萨奇B组病毒1～6型(CVB_(1～6)与自然流产的关系,采用间接ELISA法检测了40例自然流产妇女和40例人工流产妇女血清柯萨奇B组病毒抗体IgM(CVB-IgM)。结果为自然流产组中CVB-IgM阳性率为85％(34/40),人工流产组中CVB-IgM阳性率为35％(14/40),两者比较有显著性差异(P<0.01),提示,CVB感染与自然流产有一定相关性。