碟脉灵注射液对坐骨神经损伤后NGF mRNA表达的影响

目的探讨碟脉灵注射液对大鼠坐骨神经损伤后神经再生的影响。方法将72只SD大鼠分为碟脉灵注射液组（A组）;神经生长因子组（NGF,B组）和对照组（生理盐水,C组）,每组24只。麻醉下暴露右侧坐骨神经,在坐骨结节远侧0.8cm处造成坐骨神经挤压伤,术后A组损伤处给予碟脉灵注射液,B组给予NGF,C组给予生理盐水。术后2d、7d、2w、4w、8w,取紧邻挤压伤部位远侧神经干,应用原位杂交的方法和图像分析处理系统定量测定神经组织中神经生长因子 mRNA（NGF mRNA）的表达。结果A组和B组大鼠坐骨神经挤压伤后第2周起,坐骨神经组织中NGF mRNA表达明显增加,至伤后第4周达到高峰,对照组NGF mRNA表达低,A、B两组与对照组之间的差异具有显著性（P〈0.05）。结论碟脉灵注射液可以促进挤压伤后大鼠坐骨神经NGF mRNA表达,其作用与NGF相仿。     

何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺NGF、NGF mRNA表达的影响

目的观察何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺神经生长因子（NGF）及NGF mRNA表达的影响。方法用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,免疫组化及原位杂交法检测何首乌饮预防量、治疗量灌胃后衰老大鼠下颌下腺NGF、NGF mRNA阳性表达的改变。结果预防实验部分NGF、NGF mRNA的表达,模型组与其他各组比较差异均有统计学意义（P（0.05或（0.01）,其中以正常组最高,模型组最低,各预防组中预防中剂量组最高。治疗性实验部分NGF、NGF mRNA的表达,自然恢复组与其他各组比较差异均有统计学意义（P（0.01）,其中以阴性对照组最高,自然恢复组最低,各治疗组中以治疗中剂量组最高。结论何首乌饮可提高衰老大鼠下颌下腺NGF、NGF mR-NA的表达而达到抗衰老的作用。     

磁刺激疗法对坐骨神经损伤大鼠神经传导速度及损伤运动神经元内GAP-43表达的影响

目的探讨磁刺激疗法治疗坐骨神经损伤的临床效果及机制。方法将60只SD大鼠随机分为观察组、对照组各24只和假手术组12只,前两组制备坐骨神经损伤模型。制模后观察组给予表面场强为0．09T磁刺激,30min／d,1次／d;其余两组不予干预。各组分别于第2、4、8、12周采用免疫组化法检测L4-L5脊髓运动神经元内生长相关蛋白（GAP-43）表达,于12周末行电生理检查测定神经传导速度（MCV）。结果与对照组比较,观察组各时点GAP-43表达明显升高（P均〈0．05）,术后第12周再生神经传导速度加快、波幅升高、潜伏时缩短（P〈0．05）。结论磁刺激疗法能促进大鼠周围神经损伤后MCV的恢复,其机制可能为增加损伤脊髓运动神经元中GAP-43的表达。     

前列地尔对SD大鼠损伤坐骨神经的修复作用

以SD大鼠坐骨神经建立周围神经损伤动物模型,以坐骨神经传导速度、坐骨神经干病理切片(光镜、电镜)为观察指标,观察前列地尔对周围神经损伤后恢复的影响.发现前列地尔组给药四周后能显著改善大鼠坐骨神经损伤状况.认为前列地尔对周围神经损伤有一定的修复作用.     

清脑益元汤对大鼠脑缺血损伤Nestin、NGF表达的影响

目的研究清脑益元汤对大鼠脑缺血损伤后巢蛋白(Nestin)、神经生长因子(NGF)表达的影响,探究清脑益元汤对缺血性脑损伤神经元保护作用的部分机制。方法将192只健康SD大鼠随机分为两大组,每大组再分为4个亚组:空白组(n=6)、假手术组(n=30)、模型组(n=30)、清脑益元汤组(n=30)。采用改良的Longa线栓法制备大鼠急性脑缺血损伤模型,除空白组外,假手术组、模型组及清脑益元组按缺血损伤后1 d、3 d、7 d、14 d、28 d 5个取材时间点分为5个亚组。造模成功后取大鼠缺血侧脑组织,采用免疫组化法检测大鼠缺血侧皮质区Nestin、NGF表达,采用实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)法检测大鼠缺血侧皮质区Nestin、NGF mRNA表达。结果(1)免疫组化法:与假手术组相比,模型组、清脑益元组在缺血侧Nestin、NGF阳性细胞明显增多(P<0.01,P<0.01);与模型组相比,清脑益元组Nestin、NGF阳性细胞表达明显增多(P<0.01,P<0.05);(2)Real-Time PCR法:与假手术组相比,模型组、清脑益元汤组大鼠脑组织缺血侧皮质区Nestin、NGF mRNA表达量增加(P<0.01,P<0.01);与模型组相比,清脑益元汤组大鼠脑组织缺血侧皮质区Nestin、NGF mRNA表达量升高(P<0.01,P<0.05)。结论清脑益元汤可能通过上调脑缺血损伤后Nestin、NGF蛋白及mRNA表达,促进脑组织损伤修复、保护神经元,进而发挥脑保护的作用。     

Tadenan对早期糖尿病大鼠膀胱组织中NGF及P物质表达的影响

目的探讨Tadenan对早期糖尿病大鼠膀胱组织中神经生长因子（NGF）及P物质表达的影响。方法将36只雄性Wistar大鼠随机分为对照组（10只）、糖尿病组（10只）、治疗组（10只）、药物组（6只）。糖尿病组和治疗组大鼠先制作成糖尿病模型。饲养4周后,治疗组及药物组大鼠给予Tadenan100mg／（kg·d）,溶于2ml花生油中经胃管注入;对照组及糖尿病组大鼠给予同等剂量花生油赋形剂。以上动物共饲养8周。8周后处死,完整切取膀胱组织。采用RT-PCR及免疫组化法、ELISA法检测膀胱组织中NGF、P物质。结果糖尿病组NGF、P物质明显降低（P均〈0．05）;与糖尿病组相比,治疗组NGF及P物质显著升高（P〈0．05）。结论Tadenan可增加膀胱组织中NGF及P物质表达,推测这是Tadenan对糖尿病膀胱具有保护作用的机制。     

胡黄连对脑缺血大鼠神经生长因子表达的影响

目的 观察缺血再灌注(I/R)模型大鼠脑内神经生长因子(NGF)的变化,探讨胡黄连对神经元的保护作用.方法 参照线栓法制作大鼠脑I/R模型,胡黄连干预,免疫组化方法观察皮层、纹状体NGF表达.结果 模型组缺血侧皮层区、纹状体区于I/R 3 d时NGF表达至高峰,7 d后逐渐下降,但各时间点与假手术组比较,均有显著差异(P<0.01);胡黄连治疗组大鼠脑皮层与纹状体NGF明显高于正常组和模型组(P<0.01).结论 胡黄连对脑I/R损伤神经元有保护作用,其机制可能与上调脑内NGF表达有关.     

中药复方筋脉通对高糖培养SD大鼠背根神经元凋亡及NGF表达的影响

目的通过高糖培养大鼠背根神经节神经元(DRGn)细胞模型,探讨中药筋脉通含药血清对DRGn凋亡及NGF表达的影响。方法采用混合酶分步消化法培养DRGn。将体外培养的24 h的DRGn分为正常对照组(Con)、高糖组(HG,45 mmol/L葡萄糖)、筋脉通组(JMT)、牛磺酸组(Tau),加入含药血清(浓度均为10%)干预24 h后,DRGn细胞凋亡率采用TUNEL试剂盒进行检测,NGF的蛋白及mRNA的表达采用免疫印迹法及实时荧光定量聚合酶链式反应法进行检测。结果与HG组比较,JMT组和Tau组的细胞凋亡率均显著降低(P<0. 01);与HG组比较,JMT组NGF蛋白及mRNA的表达显著升高(P<0. 01);与Tau组比较,JMT组NGF蛋白表达显著升高(P<0. 01)。结论筋脉通含药血清可降低高糖培养DRGn细胞凋亡率,增加NGF蛋白及mRNA的表达,且升高NGF蛋白表达的作用优于牛磺酸。     

骨髓间质干细胞静脉注射移植对大鼠脊髓损伤后NGF及TNF-α表达的影响

目的探讨大鼠骨髓间质干细胞(rMSCs)移植对脊髓损伤(SCI)后神经生长因子(NGF)、肿瘤坏死因子(TNF)-α表达的影响及rMSCs移植治疗SCI的作用机制。方法选择清洁级健康雄性SD大鼠90只,采用改良Allen法制备SCI大鼠模型84只,随机分为对照组和rMSCs移植组各42只,另外准备6只大鼠进行假手术操作作为假手术组。对照组于损伤后经尾静脉注射PBS 1 ml,假手术组和rMSCs移植组于损伤后经尾静脉均注射rMSCs单细胞悬液1 ml。损伤后1、6、12、24、72、168、336 h,应用RTPCR方法检测各组处理前后NGF、TNF-αmRNA表达情况。结果对照组和rMSCs移植组损伤脊髓后NGF、TNF-αmRNA表达较假手术组明显增加(P<0.05);rMSCs移植组与对照组比较,NGF mRNA水平增加更明显,而TNF-αmRNA水平显著下降(P<0.05)。结论大鼠发生SCI后损伤脊髓局部的NGF、TNF-α表达增加,而rMSCs移植能改变SCI区的微环境,使损伤脊髓局部的NGF更进一步的表达,而TNF-α表达降低,这可能是促进大鼠神经结构及功能恢复、减少脊髓继发性损伤进而促进损伤大鼠运动功能恢复的机制之一。     

糖尿病大鼠膀胱组织中NGF、P75的表达及意义

成年雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠35只,随机分成2组,正常对照组15只,糖尿病模型组20只。应用链脲佐菌素诱导。注射STZ72小时后测尾静脉血葡萄浓度。BG≥16.7mmol/L为模型成功。造模成功8周后进行实验,实验前1天测定代谢笼24小时尿量。实验切取完整膀胱和称量膀胱湿重。苏木素-伊红后,光镜下观察糖尿病大鼠膀胱逼尿肌的形态学变化。采用免疫组织化学方法检测膀胱逼尿肌细胞中NGF及P75的表达情况。结果体重较正常对照组增长缓慢,为（248.05±15.52g）vs（322.80±15.92g）;24小时尿量模型组大于正常对照组,为（88.31±7.22ml）vs（20.93±2.90ml）;膀胱湿重测定重于正常对照组,为（171.15±6.08mg）vs（135.53±5.33mg）。HE染色后光镜下观察逼尿肌结构表现,正常对照组：移形上皮细胞排列整齐,固有膜完整,逼尿肌细胞大小形态均一,肌纤维排列有序,神经元细胞排列整齐。糖尿病模型组：移形上皮细胞排列紊乱,固有膜充血水肿,粘膜下层有明显的嗜酸细胞浸润,逼尿肌肌细胞肥大,形态多样,肌束排列紊乱松散,神经元细胞排列紊乱松散,细胞水肿。免疫组化结果显示：正常对照组大鼠膀胱壁NGF主要分布在逼尿肌细胞浆内,阳性表达率为86.67%,而糖尿病模型组大鼠膀胱壁NGF也主要分布在逼尿肌细胞浆内,阳性表达率为35%,两组间有显著差异。同样,p75在膀胱壁黏膜下、固有膜和逼尿肌细胞内均有分布,和正常组相比,糖尿病组表达明显减少,差异具有统计学意义。结论NGF及其受体p75在STZ诱导的Ⅰ型糖尿病大鼠的膀胱逼尿肌细胞内表达均明显减少,NGF、P75在DC的发生发展中发挥了重要作用。     

神经生长因子对糖尿病大鼠坐骨神经形态学的影响

目的 研究神经生长因子(NGF)对糖尿病大鼠周围神经病变的影响。方法 糖尿病大鼠造模后2周开始连续后肢肌注 NGF(800 U·kg~(-1)·d~(-1)),应用甲苯胺蓝染色及透射电镜观察大鼠坐骨神经的形态学变化。结果 糖尿病造模后2周电镜下坐骨神经即出现葱管样改变,且该病理改变随时间加重,6个月出现脱髓鞘。3个月及6个月NGF治疗组(NGF组)大鼠坐骨神经的神经纤维髓鞘及轴突面积较相应的糖尿病组(DM组)均增加,3个月NGF组及DM组坐骨神经纤维髓鞘面积分别为(47.48±11.84)μm~2和(44.86±12.28)μm~2(P<0.05);6个月分别为(57.76±10.33)μm~2和(46.34±11.57)μm~2(P<0.05)。3个月NGF组及DM组坐骨神经纤维的轴突面积分别为(22.86±9.59)μm~2和(19.86±7.78)μm~2(P<0.05);6个月分别为(23.90±7.18)μm~2和(20.29±6.67)μm(P<0.05)。6个月NGF组较3个月组髓鞘面积增加,并可减少坐骨神经纤维脱髓鞘。结论 早期、长期应用NGF可以有效改善糖尿病大鼠周围神经病变的形态。     

HCMV感染对神经胶质细胞NGF表达的影响

目的 探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染时神经胶质细胞内源性神经生长因子(NGF)的表达变化.方法 采用免疫荧光法检测HCMV即刻早期蛋白(IE),RT-PCR技术检测正常培养和感染HCMV的神经胶质瘤(U251)细胞的NGF.结果 HCMV能够感染U251细胞,U251能够表达NGF,感染HCMV后初期NGF表达没有变化,后期明显下调(P＜0.05).结论 HCMV能够诱导U251细胞中的NGF表达异常.     

何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺NGF mRNA、EGF mRNA表达的影响

目的探讨何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺神经生长因子(NGF)、表皮生长因子(EGF)基因表达的影响。方法选用8周龄SD雌性大鼠90只,用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,何首乌饮的干预作用分治疗和预防两部分,用原位杂交法检测各组大鼠下颌下腺NGF mRNA、EGFmRNA表达的情况。结果预防性实验部分的组间NGF mRNA、EGF mRNA表达比较差异有统计学意义(P<0.01),其中以正常组最高,模型组最低,各预防组处于中间水平,其中预防中剂量组最高。治疗性实验部分的组间NGF mRNA、EGF mRNA表达比较差异有统计学意义(P<0.01),其中以阴性对照组最高,自然恢复组最低,各治疗组处于中间水平,其中中剂量组最高。结论何首乌饮可在基因转录水平提高NGF、EGF的表达。     

六味地黄丸对2型糖尿病大鼠坐骨神经组织胰岛素样生长因子-1 mRNA和神经生长因子mRNA表达的影响

目的观察六味地黄丸对2型糖尿病(T2DM)大鼠坐骨神经神经生长因子(NGF)和胰岛素样生长因子(IGF)-1 mRNA表达的影响,探讨六味地黄丸对糖尿病周围神经病变(DPN)保护作用的机制。方法雄性SD大鼠高脂高糖饲料喂养8 w后小剂量(20 mg/kg)腹腔注射链脲佐菌(STZ),成功诱导其成为T2DM大鼠模型,分成模型组、糖末宁组、六味地黄丸高、中、低剂量组。给药8 w后用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组大鼠坐骨神经组织IGF-1 mRNA和NGF mRNA的相对表达。结果与空白对照组相比,模型组大鼠NGF-1 mRNA及IGF-1 mRNA相对表达明显减少(P<0.01);与模型组相比,六味地黄丸中剂量组和高剂量组NGF-1 mRNA及IGF-1 mRNA的相对表达均明显升高(P<0.01)。结论六味地黄丸对T2DM大鼠DPN保护作用的机制与促进NGF、IGF-1等神经生长因子的分泌有关。     

Lactuside B对脑缺血再灌注损伤后大鼠海马和纹状体神经生长因子mRNA表达的影响

目的探讨高翅果菊提取物Lactuside B(LB)对大鼠脑缺血/再灌注损伤海马和纹状体神经生长因子mRNA表达的影响。方法 SD雄性大鼠,随机分为6组(8只/组)即模型组、假手术组、阳性对照组、LB高剂量、中剂量和低剂量组。采用大脑中动脉阻塞2 h再灌注24 h和72 h动物模型、各组在相应时间点处死一半动物,以RT-PCR技术分别检测大鼠海马和纹状体不同时间段NGF mRNA的表达情况。结果模型组NGFmRNA在海马和纹状体表达明显增多,再灌注72 h海马和纹状样NGF mRNA表达显著下降;在海马,用药后LB各剂量组NGF mRNA表达增多,与模型组比较有显著差异(P<0.01);与阳性对照组比较中、低剂量组有显著差异(P<0.01),且中、低剂量组用药72 h时NGF mRNA表达较多,与用药24 h比较有显著差异(P<0.05)。在纹状体,LB各剂量组NGF mRNA表达同样增加,与模型组比较有显著差异(P<0.01),与阳性对照组比较其低、中、高剂量组均有显著差异(P<0.01或P<0.05),LB用药72 h时中、低剂量组NGF mRNA表达更多,与用药24 h比较有显著差异(P<0.05)。结论 LB对大鼠海马和纹状体的NGF基因产生了较大的影响,其抗脑缺血再灌注损伤的作用机制可能与LB能够上调二部位的NGF mRNA有关。     

外源性神经生长因子对雪旺细胞中NF-κB mRNA 表达的影响

目的：观察外源性神经生长因子（NGF）对雪旺细胞（SCs）中核转录因子κB（NF-κB）mRNA表达的影响。方法体外培养SCs，用S-100免疫组化染色鉴定细胞纯度。取第4代优质细胞，随机分为实验组（ NGF）、阻断组（NGF＋anti-NGFR）、对照组（PBS），提取各组总mRNA，分别用紫外分光光度计、1．5％琼脂糖凝胶电泳观察结果，通过实时荧光定量PCR检测NF-κB mRNA的表达。结果体外培养的SCs与倒置显微镜下观察到的活体细胞形态一致，S-100免疫组化染色显示，SCs纯度达到91％。紫外分光光度计观察A260/A280为1．8～2．2，1．5％琼脂糖凝胶电泳可见28、18 s两条清晰条带，证实提取的mRNA质量良好。实时荧光定量PCR检测发现，与对照组、阻断组相比，实验组NF-κB mRNA的表达显著增高（P均＜0．01）。结论外源性NGF可以上调SCs中NF-κB mRNA的表达。     

降脂益肝冲剂对NASH大鼠肝脏抵抗素mRNA表达的影响

目的:观察降脂益肝冲剂对非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠肝脏抵抗素mRNA表达的影响,并探讨抵抗素在大鼠NASH发病机制中的作用.方法:24只♂Wistar大鼠随机分为3组:正常组普通饲料喂养,模型组和治疗组高脂饮食喂养.治疗组在高脂饮食12 wk后给予降脂益肝冲剂,同时模型组和正常组给予等量的生活饮用水灌胃,17 wk末处死各组大鼠.观察动物一般情况,肝组织脂肪变性及炎症活动程度,测定血清TNF-α、ALT、AST,空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),并计算胰岛素敏感指数(ISI);RT-PCR法检测肝组织抵抗素mRNA相对含量.结果:在正常肝脏组织探测到抵抗素mRNA的微量表达(0.42±0.08),模型组其表达量显著升高(2.14±0.11,P<0.01),与模型组相比治疗组则显著下降(0.90±0.06,P<0.01).模型组抵抗素水平与血清TNF-α、ALT、AST水平、肝脏炎症活动度计分成显著正相关(r=0.873,0.772,0.716,0.892,P<0.05),与ISI无相关.治疗组上述各项指标均得到显著改善.结论:抵抗素与反映肝脏炎症程度及肝功能的指标密切相关,可能在NASH的发病中起重要作用.降脂益肝冲剂对NASH有很好的疗效,抵抗素是其可能的作用靶点.     

NGF联合抗VEGF对糖尿病模型大鼠视网膜组织中氧化应激和VEGF表达的影响

目的 研究联合应用神经生长因子(NGF)与抗血管内皮生长因子(VEGF)对实验性糖尿病大鼠视网膜组织氧化应激反应和VEGF含量变化的影响。方法 选用清洁级健康雄性Wistar大鼠,分为正常对照组、模型组、NGF组和NGF+抗VEGF组。利用高脂高糖饮食+腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型,在大鼠饲养至16 W出现视网膜病变后,给予NGF组和NGF+抗VEGF组大鼠肌肉注射NGF,NGF+抗VEGF组同时给予眼球内注射抗VEGF药物。比较各组房水中VEGF含量和空腹血糖水平;生理记录仪检测各组视网膜暗反应(ERG)变化;比色法检测各组视网膜组织中丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)水平;免疫组化检测各组视网膜组织中VEGF蛋白水平。结果 各组注射3 w后,与模型组相比,NGF组和NGF+抗VEGF组血糖值无明显变化(P>0.05);与模型组比较,NGF组和NGF+抗VEGF组视网膜组织中MDA水平显著减少(P<0.05),CAT和SOD水平明显升高(P<0.05);免疫组化结果表明,与模型组相比,VEGF在NGF组和NGF+抗VEGF...     

参苓散对脾阴虚痴呆模型大鼠海马区BDNF、NGF表达的影响

目的观察参苓散对脾阴虚痴呆(AD)大鼠海马区脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)表达的影响。方法将48只体重(300±20)g的健康雄性大鼠,随机分成空白组(空白对照)、阴虚组(脾阴虚)、AD组(脾阴虚+AD)和治疗组(脾阴虚+AD+治疗),每组12只。通过病证结合的方法建立脾阴虚AD大鼠模型,治疗组给予中药参苓散灌胃,每日1 ml/100 g,持续10 d,其他各组每日予等体积生理盐水灌胃。采用Morris水迷宫测试各组大鼠学习记忆能力,用免疫组化(SP)方法观察大鼠海马区BDNF和NGF的表达。结果①造模后,阴虚组、AD组、治疗组与空白组对比逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数减少(P<0.05或P<0.01);给予参苓散治疗后,治疗组与阴虚组、AD组相比,大鼠逃避潜伏期明显缩短,穿越平台次数增多(P<0.01);②与空白组比较,阴虚组、AD组大鼠海马BDNF、NGF表达明显下调(P<0.01);而治疗组大鼠海马BDNF、NGF表达与阴虚组、AD组比较明显上调(P<0.01)。结论参苓散能改善脾阴虚AD模型大鼠的学习记忆能力,增加其海马区BDNF、NGF表达。     

苏木乙醇提取物对坐骨神经损伤小鼠免疫功能的影响

目的 研究苏木乙醇提取物(SME)对坐骨神经损伤小鼠免疫功能的影响.方法 选取成年雄性Balb/c小鼠60只,随机分为SME高中低剂量组和空白对照组,行右侧坐骨神经离断吻合术,分别于术后3、5、7、14、28 d以MTT法测定淋巴细胞增殖转化能力,ELISA法测定血清循环免疫复合物(CIC)浓度.结果 各时间点小鼠淋巴细胞增殖转化能力及血清CIC浓度与SME剂量呈明确的量效关系.结论 SME能够影响坐骨神经损伤小鼠的细胞及体液免疫功能,且与用药剂量存在明确量效关系.