红花对肝星状细胞基质分解素-1及其抑制因子基因表达的调节

目的 观察红花对HSC-T6细胞基质分解素-1(MMP3)及其抑制因子基因表达的影响.方法 以不同浓度的红花(1.0、0.5 g/L)作用于培养的肝星状细胞株HSC-T6细胞48 h,收集细胞,提取总RNA;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定MMP3及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的基因表达水平.结果 MMP3基因表达水平在红花1.0、0.5 g/L两组分别为2.80±0.36、2.52±0.32,而空白对照组为2.13 ±0.30.TIMP-1基因表达水平在红花1.0、0.5 g/L两组分别为1.66±0.23、2.04±0.30,而空白对照组为4.03±0.56.结论 红花可增强HSC-T6细胞MMP3的基因表达,并显著抑制HSC-T6细胞TIMP-1的基因表达,且与剂量有关.     

丹参对肝星状细胞基质分解素-1及其抑制因子基因表达的影响

目的 观察丹参对HSC-T6细胞基质分解素-1(MMP3)及其抑制因子基因表达的影响.方法 以不同浓度的丹参(0.8、0.4 g/L)作用于培养的肝星状细胞株HSC-T6细胞48 h,收集细胞,提取总RNA;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定MMP3及基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的基因表达水平.结果 MMP3基因表达水平在丹参0.8、0.4 g/L两组分别为2.03±0.32、2.19±0.26,而空白对照组为2.13±0.30.TIMP-1基因表达水平在丹参0.8 g/L、0.4g/L两组分别为2.11±0.32、3.12±0.46,而空白对照组为4.03±0.56.结论 丹参可明显抑制HSC-T6细胞TIMP-1的基因表达,且与剂量有关;但对MMP3的基因表达无明显影响.     

血小板衍生生长因子对肝星状细胞基质分解素-1及其抑制因子基因表达的调节

目的 了解血小板衍生生长因子（ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ，ＰＤＧＦ）对肝呈状细胞（ｈｅｐａｔｉｃ ｓｔｅｌｌａｔｅ ｃｅｌｌ，ＨＳＣ）基质分解素－１（ｓｔｒｏｍｅｌｙｓｉｎ－１，ＭＭＰ３）及金属蛋白酶组织抑制因子－１（ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ－１，ＴＩＭＰ）基因表达的影响。方法 在培养的肝星状细胞系中加入２００μｇ／     

肿瘤坏死因子α刺激培养的人肝星状细胞表达基质金属蛋白酶的研究

目的了解肿瘤坏死因子(TNF)α对培养的人肝星状细胞表达基质金属蛋白酶(MMP)的影响.方法分离、培养人肝星状细胞,用于TNFα刺激.用酶联免疫吸附试验检测不同时间培养上清液中的MMP-1、MMP-2和MMP-3浓度.结果受TNFα刺激的肝星状细胞表达MMP-1、MMP-2和MMP-3水平呈逐渐上升趋势,从刺激后20 h开始显著增加:MMP-1水平28 h＞24 h＞20 h＞4～16 h(P＜0.001);MMP-2水平28 h＞24 h＞20 h(P＜0.001)＞4～16 h(P＜0.05);MMP-3水平28 h＞24 h(P＜0.01),24 h＞20 h＞4～16 h(P＜0.05).TNF-α刺激后肝星状细胞产生的MMP-1和MMP-2平均浓度8 h时已高于对照组(P＜0.05),20 h后显著高于对照组(P＜0.01～0.001).而MMP-3平均浓度在4～16 h与对照组相比差异无显著性(P＞0.05),20 h后才显著高于对照组(P＜0.01).结论TNFα可刺激星状细胞表达MMP-1、MMP-2和MMP-3,其表达水平随刺激时间的延长呈逐渐增加趋势.     

白细胞介素-1β及肿瘤坏死因子-α对大鼠肝星状细胞c-fos基因表达的调节作用

目的探讨白细胞介素1β(IL1β)、肿瘤坏死因子α(TNFα)对大鼠肝星状细胞cfos基因表达的影响。方法在培养的肝星状细胞系中加入IL1β(1μg/L)、TNFα(30μg/L),于8、24、48、72h4个时间点收集细胞,提取总RNA;用逆转录定量多聚酶链反应(PCR)方法测定cfos的基因表达水平。结果IL1β组肝星状细胞cfos基因表达水平在8、24、48h3个时间点均明显高于对照组;8h最高,为对照组的4倍。TNFα组肝星状细胞cfos的基因表达水平在8、24、48、72h均明显高于对照组;8h高,为对照组的3倍。结论IL1β、TNFα可增强肝星状细胞cfos基因的表达。     

肿瘤坏死因子—α对肝星状细胞基 发解素—1及其抑制因子基 …

目的 探讨肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）对肝星状细胞基质分解素－１及金属蛋白酶组织抑制因子－１（ＴＩＭＰ１）基因表达的影响。方法 在培养的肝星状细胞系中加入３０ｕｇ／Ｌ ＴＮＦ－α,于８、２４、４８、７２ｈ４个不同的时间点收集细胞,提取总ＲＮＡ;用逆转定量聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法测定基质分解素－１及ＴＩＭＰ１的基因表达水平。结果 ＴＮＦ－α组肝星状细胞基质分解素－１基因表达水平在８、２４、４８、     

肿瘤坏死因子-α对肝星状细胞形态及表达结缔组织生长因子的影响

目的 通过观察肿瘤坏死因子（TNF）-α对肝星状细胞（HSC）形态和结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响，探讨TNF—α在肝纤维化中的作用机制。方法 采用体外培养大鼠肝星状细胞，加入TNF-α和TGF-β1，透射电镜观察肝星状细胞的形态学改变并应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测不同处理组HSC中CTGF的表达。结果 TNF-α、TGF—β1均诱导HSC中CT-GF表达；10μg／L浓度的TNF-α作用6、24和48h后，检测到CTGFmRNA表达，而TGF-β1在1μg/L浓度作用4h后，即可诱导HSC中CTGFmRNA表达。结论 TNF-α诱导HSC中CTGF的表达可能参与早期肝纤维化的形成。     

肿瘤坏死因子α对脂多糖诱导的肝星状细胞表达结缔组织生长因子的影响

目的 观察脂多糖(LPS)体外作用于大鼠肝星状细胞(HSC)时肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和结缔组织生长因子(CTGF)表达变化,探讨TNF-α对LPS诱导的HSC中CTGF表达的影响.方法 用一步密度梯度离心法分离大鼠HSC,体外培养LPS处理HSC,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测不同LPS浓度处理的HSC CTGF mRNA表达水平,并用ELISA双抗体夹心法测定TNF-α浓度.结果 TNF-α水平随LPS浓度增加而增加,LPS可上调CTGF mRNA的表达,TNF-α浓度及CTGF mRNA表达水平呈一定的平行关系.结论 LPS可上调HSC中CTGF mRNA表达,该过程可能是通过TNF-α介导的.     

肿瘤坏死因子α对人腹膜间皮细胞基质金属蛋白酶及其组织抑制物表达的影响

目的 观察肿瘤坏死因子α（TNF-α）对人腹膜间皮细胞(HPMC) 基质金属蛋白酶（MMP）2、MMP-9及其组织抑制物（TIMP）2、TIMP-1 mRNA和Ⅰ型胶原表达的影响，同时观察TNF-α、TGF-β、IL-1单独或协同作用对HPMC的MMP-9活性的影响。 方法 采用半定量RT-PCR法测定细胞MMP-2、MMP-9、TIMP-2及TIMP-1 mRNA 的表达。采用Biotrak MMP-9 活性检测系统来精确定量测定MMP-9活性及MMP-9原的含量。ELISA法检测Ⅰ型胶原蛋白的表达。 结果 TNF-α(1~10 μg/L)分别刺激HPMC 4、16、24及48 h后， HPMC的MMP-9 mRNA表达显著上调，为基础的2.3～4.9倍（P ＜ 0.05），呈时间依赖性。TNF-α（1 μg/L）作用48 h后显著下调TIMP-1、TIMP-2 mRNA 表达，为基础的77.2％、61.3％（P ＜ 0.05），而MMP-2 mRNA表达没有显著变化。TNF-α+TGF-β１ （1~10 μg/L）、 TNF-α+TGF-β1+IL-1(1~10 μg/L)和TNF-α(5~10 μg/L)刺激HPMC 24 h后，促其分泌MMP-9 的作用最为明显。同时，TNF-α明显上调Ⅰ型胶原蛋白表达（P ＜ 0.05）。 结论 TNF-α 明显上调HPMC的MMP-9 mRNA的表达和MMP-9 的活性；联合其他细胞因子后促MMP-9分泌的作用更明显。TNF-α单独或协同其他因子在腹膜纤维化的过程中可能发挥了重要作用。     

重组人肝再生增强因子对肝纤维化大鼠金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达的影响

目的　了解重组人肝再生增强因子 (hALR)对肝纤维化大鼠金属蛋白酶组织抑制因子 1(TIMP1)基因表达的影响。方法　建立CCl4中毒性及人血白蛋白免疫损伤性两种大鼠肝纤维化模型。模型完成后予不同剂量hALR(每天 5 0、10 μg/kg体重 )治疗。在不同的时间点留取大鼠肝组织标本 ,提取总RNA ,用逆转录定量聚合酶链反应 (RT PCR)测定TIMP1的基因表达水平。结果　在两种模型中低剂量hALR治疗组大鼠肝组织TIMP1的基因表达水平在治疗过程中的不同阶段与模型组差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;高剂量hALR组大鼠肝组织TIMP1的基因表达水平(四氯化碳模型 2 .13± 0 .2 0 ,1.3 6± 0 .13 ;白蛋白模型 3 .0 2± 0 .5 2 ,1.85± 0 .42 )均明显低于模型组(四氯化碳模型 3 .3 1± 0 .2 6,2 .40± 0 .2 3 ;白蛋白模型 4.60± 0 .73 ,3 .61± 0 .62 )。结论　重组人肝再生增强因子可抑制肝纤维化大鼠金属蛋白酶组织抑制因子 1的基因表达。     

白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α对人正常髓核细胞基质金属蛋白酶-28转录影响的研究

目的 探讨白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）对髓核细胞的基质金属蛋白酶-28（matrix metalloproteinase-28,MMP-28）是否具有调控作用。方法 培养人体正常髓核细胞,将3个不同浓度的IL-1β（0 ng/mL、10 ng/mL、50 ng/mL）和3个不同浓度的TNF-α（0 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL）分别与体外扩增的第3代髓核细胞联合培养72 h,采用实时聚合酶链反应（real time-polymerase chain reaction,RT-PCR）法测定MMP-28 mRNA的转录水平,采用单因素方差分析法比较转录水平的差异。结果 不同浓度（0 ng/mL、10 ng/mL、50 ng/mL）的IL-1β与髓核细胞共培养72 h后,各组间MMP-28mRNA转录水平（0.325±0.019、0.343±0.018、0.343±0.018）差异无统计学意义（P>0.05）。不同浓度（0 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL）TNF-α与髓核细胞共培养72 h后,各组间MMP-28 mRNA转录水平（0.325±0.019、0.515±0.02、0.610±0.012）差异有统计学意义（P<0.01）,且高浓度组MMP-28 mRNA转录水平较低浓度组明显升高（P<0.01）。结论 IL-1β对正常人体髓核细胞MMP-28转录无调控作用,而TNF-α可以上调MMP-28mRNA转录水平,且呈浓度依赖性。     

肺癌患者金属蛋白酶组织抑制因子—1基因表达的研究

目的了解金属蛋白酶组织抑制因子-1在肺癌发展过程中的作用。方法术中取19例肺癌患者癌组织及正常肺组织，提取组织总核糖核酸(RNA)，用逆转录共扩增定量多聚酶链反应(PCR)方法测定金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平。结果肺癌组织金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平明显高于正常肺组织(P＜0.01)，肺癌患者金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平与肿瘤大小呈负相关(r=-0.467，P＜0.05)；与肿瘤组织学类型无关。结论金属蛋白酶组织抑制因子-1在阻止肺癌的浸润、转移中可能起重要作用。     

大鼠脊髓损伤后白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α基因表达的变化

目的 探讨大鼠脊髓损伤后白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达的变化规律。方法SD大鼠42只,随机分为7组,采用改良Allen's脊髓损伤打击模型,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定伤段脊髓组织IL-1β、TNF-αmRNA的表达情况。结果 正常脊髓组织内存在IL-1β、TNF-αmRNA的表达,脊髓损伤后IL-1β、TNF-αmRNA表达迅速增强,在伤后1h达到高峰。结论 IL-1β、TNF-α存在于正常的脊髓组织内,脊髓损伤后IL-1β、TNF-α表达迅速增强,提示协同参与了继发性脊髓损伤过程,并可能是损伤性因素。     

罗格列酮对肝星状细胞基质金属蛋白酶-2和-9基因表达的影响

目的 观察过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)特异配体罗格列酮对肝星状细胞(HSC)表达基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的影响.方法 在培养的HSC株中加入不同浓度的罗格列酮(终质量浓度为5、10、15、20 μmol/L),于24 h后收取细胞,利用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定MMP-2、MMP-9 mRNA表达.结果 MMP-2表达水平在罗格列酮5、10、15、20 μmol/L组分别为0.5708±0.0609、0.8900±0.0823、1.1348±0.1205、1.4490±0.0832,而空白对照组为0.3237±0.0796.MMP-9表达水平在罗格列酮5、10、15、20 μmol/L组分别为0.5487±0.0770、0.7554±0.0510、0.9497±0.0451、1.1088±0.0777,空白对照组为0.3220±0.0592.结论 罗格列酮可增强HSC对MMP-2、MMP-9的表达,并在一定范围内,呈剂量依赖性.     

大鼠脊髓损伤后白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α基因表达的变化

目的 探讨大鼠脊髓损伤后白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达的变化规律。方法 SD大鼠42只，随机分为7组，采用改良Allen's脊髓损伤打击模型，以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定伤段脊髓组织IL-1β、TNF-α mRNA的表达情况。结果 正常脊髓组织内存在IL-1β、TN-αmRNA的表达，脊髓损伤后IL-1β、TNF-αmRNA表达迅速增强，在伤后1h达到高峰。结论 IL-1β、TNF-α存在于正常的脊髓组织内，脊髓损伤后IL-1β、TNF-α表达迅速增强，提示协同参与了继发性脊髓损伤过程，并可能是损伤性因素。     

不同发生时期的增生性瘢痕中基质金属蛋白酶及其抑制因子基因表达的变化

目的:研究基质金属蛋白酶-2(MMP-2),基质金属蛋白酶-9(MMF-9)及其抑制因子(TIMP-2)在不同形成时期的增生性瘢痕中的基因表达变化。方法:提取16例不同发生时期的增生性瘢痕和8例正常皮肤的总RNA后,分离mRNA,用RT-PCR方法检测MMP-2,MMP-9和TIMP-2基因在不同组织中的表达。结果: MMP-2,MMP-9和TIMP-2基因在正常皮肤和增生性瘢痕中都有表达。在增殖期的瘢痕中,这3种基因转录产物的灰度比值分别为(13．5±4．5),(18．4±4．7),(13．6±2．4),与正常皮肤相比明显升高(P<0．05)。在成熟期的瘢痕中这三种基因表达量恢复到正常皮肤水平。结论:MMP-2,MMP-9和TIMP-2基因表达增强可能是增生性瘢痕形成的机制之一,而MMP-2和MMP-9基因表达降低可能与增生性瘢痕达到相对稳定的成熟状态有关。     

糖尿病大鼠椎间盘中白介素-1α和肿瘤坏死因子-α的含量变化

目的 :测定糖尿病大鼠椎间盘组织中白介素 1α (IL 1α)和肿瘤坏死因子 α (TNF α)的含量变化 ,并对其意义进行探讨。方法 :3 6只SD大鼠随机分为 2组 ,每组 18只 ,处理组用腹腔单次注射链脲佐菌素溶液 (strep tozotocin ,STZ)造成糖尿病。分别在第 1、 3、 4个月时 ,采用免疫酶联法 (ELISA法 )测定椎间盘组织中IL 1α和TNF α。结果 :在 3个不同时期 ,糖尿病组中IL 1α和TNF α的含量均明显高于正常对照组 (P <0 0 1)。糖尿病组中IL 1α和TNF α的含量在 3个不同时期差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :糖尿病时 ,椎间盘组织中IL 1α和TNF α的含量明显增加 ,并维持在较高水平 ,这可能与造成糖尿病患者椎间盘突出术后效果相对差有关     

急性重症胆管炎大鼠肝组织高迁移率族蛋白-1对肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的探讨急性重症胆管炎（ACST）大鼠肝组织高迁移率族蛋白1（HMG-1）改变及其对肿瘤坏死因子（TNF-α）表达的调节作用。方法通过制作ACST大鼠模型，正丁酸钠干预，不同时相点检测肝组织HMG-1及TNF-α表达，同时观察肝功能及结构改变。结果ACST组12-24h肝组织HMG-1和TNF-amRNA表达均显著增强（P〈0．05或0．01）。正丁酸钠处理可显著抑制ACST后12-24h肝组织HMG-1mRNA表达（P〈0．01），并明显下调肝组织TNF-αmRNA表达及TNF-α水平（P〈O．05或0．01），同时血清谷丙转氨酶（ALT）水平显著降低（P〈0．05或0．01），肝脏的病理形态得到明显改善。结论ACST大鼠肝组织HMG-1表达可促进局部TNF-α的合成与释放，从而诱导ACST大鼠急性肝功能损害。     

大鼠胆管阻塞性肝纤维化模型肝组织明胶酶-2、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1 mRNA表达的研究

局部基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)与基质金属蛋白酶(MMPs)的比例失调，是造成肝纤维化细胞外基质(ECM)沉积的主要原因。本实验以逆转录一聚合酶联反应(RT-PCR)观察了大鼠胆管阻塞性肝纤维化模型肝组织明胶酶-2(MMP-2)和TIMP-1 mRNA表达的变化，现报道如下。     

重组人肝再生增强因子抑制大鼠肝星状细胞c-jun基因表达的研究

目的探讨重组人肝再生增强因子(hALR)对大鼠肝星状细胞c-jun基因表达的影响。方法在培养的肝星状细胞系中加入200、20、2 μg／L三种浓度的hALR,于8、24、48、72 h四个时间点收集细胞,提取总RNA;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定c-jun的基因表达水平。结果对照组肝星状细胞有c-jun的明显表达;不同浓度的hALR 3组肝星状细胞c-jun基因表达水平在8、24、48、72 h四个时间点均明显低于对照组;2μg／L组为对照组的60％-64％,20μg／L组为对照组的41％-43％,200 μg／L组为对照组的29％-35％。与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结论hALR对大鼠肝星状细胞c-jun基因表达有明显的抑制作用。