Ghrelin对大鼠小肠转运及消化间期移行性复合肌电活动的作用及机制

目的 探讨ghrelin对大鼠小肠转运和消化间期移行性复合肌电活动(MMC)的影响及作用机制.方法 大鼠禁食24 h,观察静脉给予不同剂量ghrelin对小肠转运的影响,及静脉给予ghrelin受体拮抗剂(D-Lys3)GHRP-6对ghrelin作用的影响.采用多道生理记录仪在大鼠清醒、禁食状态下监测消化间期MMC,观察静脉给予ghrelin对胃肠MMC的影响.分别给予阿托品、酚妥拉明、普萘洛尔、L-精氨酸及(D-Lys3)GHRP-6,探讨ghrelin对MMC的作用机制.结果 静脉给予ghrelin剂量依赖性地促进小肠转运,此作用可被(D-Lys3)GHRP-6阻断.静脉给予ghrelin促进胃肠MMC.阿托,品、L-精氨酸和(D-Lys3)GHRP-6不同程度地抑制ghrelin的促动力效应;酚妥拉明和普萘洛尔对ghrelin的促动力作用无显著影响.结论 Ghrelin可促进胃肠运动,这可能是通过胆碱能通路起作用,与NO通路关系密切,ghrelin受体GHS-R参与其促动力作用.     

侧脑室微量注射ghrelin对大鼠小肠转运和肌电活动的影响及作用机制

目的 探讨侧脑室微量注射ghrelin对大鼠小肠转运和小肠消化间期复合肌电活动(interdigestive myoelectric complex,IMC)的影响及作用机制. 方法 ①大鼠分别接受十二指肠导管置入及侧脑室套管置入,在禁食状态下经侧脑室给予ghrelin(0.4,1.6或6.4μg/kg),经十二指肠导管注入伊文氏蓝溶液,观察不同剂量ghrelin对禁食大鼠小肠转运的影响.另两组大鼠分别经侧脑室给予ghrelin受体拮抗剂(D-Lys3) GHRP-6(3.7μg/kg),(D-Lys3) GHRP-6(3.7 μg/kg)+ ghrelin(6.4μg/kg),探讨ghrelin的作用机制.②大鼠分别接受肠道电极置入及侧脑室套管置入,在禁食状态下采用多道生理记录仪监测消化间期MC,观察侧脑室微量注射ghrelin(6.4μg/kg)对大鼠小肠IMC的影响.经侧脑室给予(D-Lys3) GHRP-6(3.7 μg/kg)和NPY抗体(4μg/kg),再经侧脑室给予ghrelin(6.4μg/kg);经静脉给予阿托品(1 mg/kg)、酚妥拉明(1 mg/kg)或普萘洛尔(1 mg/kg),再经侧脑室给予ghrelin(6.4μg/kg),观察侧脑室注射ghrelin对IMC影响的作用机制. 结果 ①侧脑室微量注射ghrelin 0.4μg/kg对大鼠小肠转运无显著影响,ghrelin 1.6 μg/kg和6.4 μg/kg促进小肠转运,此促进作用可被(D-Lys3) GHRP-6阻断.②侧脑室微量注射ghrelin促进十二指肠和空肠IMC,使IMC周期缩短,Ⅲ相频率和振幅增加,Ⅲ相时程缩短,对Ⅲ相占IMC周期百分比无显著性改变.阿托品和(D-Lys3) GHRP-6不同程度地抑制ghrelin的促动力效应;酚妥拉明和普萘洛尔对ghrelin的促动力作用无显著影响. 结论 侧脑室微量注射ghrelin可促进小肠运动,这可能是通过外周胆碱能通路起作用,ghrelin受体GHS-R参与其促动力作用.     

Ghrelin对肾功能不全大鼠胃肠移行性复合运动的影响

摘要：目的探讨ghrelin对肾功能不全（CRF）大鼠胃肠移行性复合运动（MMC）的影响。方法健康雄性SD大鼠30只,随
机取出6只做假手术组,其余24只根据是否预先应用ghrelin受体GHS-R的抑制剂D-Lys3-GHRP-6以及ghrelin剂量不同
而分为ghrelin 1~4组。采用5/6肾切除法建立CRF大鼠模型。采用多道生理记录仪在大鼠清醒、禁食状态下监测消化间
期MMC,观察腹腔注射不同剂量ghrelin对MMC周期的影响,以及给予D-Lys3-GHRP-6对ghrelin作用的影响。结果慢
性肾功能不全大鼠存在胃肠动力障碍,表现为胃肠道形态异常的MMC增加,MMC周期缩短,频率增加,Ⅲ相振幅减低;
ghrelin可以明显增加MMC出现的频率、增加Ⅲ相出现的时间、频率和振幅,且呈剂量依赖性(P<0.05);D-Lys3-GHRP-6可
以抑制ghrelin的作用。结论ghrelin可以明显改善CRF大鼠MMC周期紊乱,进而改善其胃肠动力障碍。
     

胆汁酸肝肠循环在大鼠消化间期胃肠肌电活动中的作用

目的: 研究胆汁酸肝肠循环在大鼠消化间期胃肠移行性复合肌电活动(MMC)中的作用. 方法: 32只大鼠被随机等分为4组. 在大鼠胃窦、十二指肠及空肠慢性埋置三对银丝电极,其中3组于高位结扎胆总管. 术后在大鼠清醒、禁食状态下记录消化间期胃肠肌电活动. 后两组分别给予UDCA及生理盐水灌胃观察其对胆道梗阻组大鼠胃肠肌电活动的影响. 结果: 正常禁食大鼠可观察到MMC波,胆道梗阻大鼠梗阻早期可见起源于胃、十二指肠的MMC波消失,代之以空肠起源的MMC波,梗阻后期十二指肠起源的MMC波逐渐恢复. UDCA灌胃可重新诱发胆道梗阻组大鼠十二指肠起源的MMC波,所诱发的MMC较正常组周期缩短,Ⅲ期时程延长. 生理盐水灌胃对胆道梗阻大鼠胃肠肌电活动无影响. 结论: 胆汁酸肝肠循环与大鼠MMC密切相关,主要与十二指肠起源的MMC关系密切.     

延髓最后区对犬消化间期移行性复合运动的调节作用

目的　探讨延髓最后区对胃肠消化间期移行性复合运动（MMC）及血浆胃动素水平的影响.方法　在8只犬的胃窦和十二指肠浆膜埋植应力传感器记录胃窦和十二指肠消化间期复合运动.在一侧股静脉内置慢性静脉插管供注射外源性胃动素.用RIA法测定血浆胃动素含量.观察：（1）消化间期正常MMC活动和血浆胃动素浓度变化；（2）电损毁延髓最后区对MMC活动和血浆胃动素水平的影响；（3）电损毁延髓最后区对外源性胃动素启动MMC Ⅲ相收缩作用的影响.结果　（1）正常犬消化间期出现典型的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ相MMC.MMC Ⅲ相与血浆胃动素释放高峰同步发生.（2）电损毁延髓最后区后, 胃窦和十二指肠MMC的收缩运动明显抑制,MMC Ⅰ相延长,Ⅱ、Ⅲ相明显缩短,失去了损毁前MMC周期性﹑时相性和移行性的特点,血浆胃动素浓度明显降低,外源性静脉注射胃动素不能启动MMC Ⅲ相收缩.结论　延髓最后区对消化间期 MMC的周期发生和移行有重要的调控作用,其作用途径与胃动素介导有关.     

延髓最后区对犬消化间期移行性复合运动的调节作用

目的：探讨延髓最后区对胃肠消化间期移行性复合运动（MMC）及血浆胃动素水平的影响。方法：在8只犬的胃窦和十二指肠浆膜埋植应力传感器记录胃窦和十二指肠消化间期复合运动。在一侧股静脉内置慢性静脉插管供注射外源性胃动素。用RIA法测定血浆胃动素含量。观察：（1）消化间期正常MMC活动和血浆胃动素浓度变化；（2）电损毁延髓最后区对MMC活动和血浆胃动素水平的影响；（3）电损毁延髓最后区对外源性胃动素启动MMCⅢ相收缩作用的影响。结果；(1)正常犬消化间期出现典型的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ相MMC。MMCⅢ相与血浆胃动素释放高峰同步发生。（2）电损毁延髓最后区后，胃窦十二指肠MMC的收缩运动明显抑制，MMCⅠ相延长，Ⅱ、Ⅲ相明显缩短，失去了损毁前MMC周期性时相性和移行性的特点，血浆胃动素浓度明显降低，外源性静脉注射胃动素不能启动MMCⅢ相收缩。结论：延髓最后区对消化间期MMC的周期发生和移行有重要的调控作用，其作用途径与胃动素介导有关。     

大鼠杏仁核胃动素受体分布及其作用研究

目的 探讨大鼠杏仁核胃动素受体分布及杏仁核基底外侧核胃动素受体与外源性胃动素结合或者毁损后对十二指肠消化间期移行性复合肌电活动(MMC)的影响及其作用机制。方法 采用免疫组织化学、中枢立体定位杏仁核微量注射、杏仁核毁损、多道生理记录仪监测十二指肠MMC的方法,探讨大鼠杏仁核胃动素受体的作用。结果 杏仁核各亚核团都有胃动素受体分布,以杏仁内侧核分布最多;杏仁基底外侧核也有较多分布,后部多于前部;分布较少的核团是杏仁基底内侧核、杏仁中央核、杏仁基底外侧核;杏仁核基底外侧核胃动素受体与外源性胃动素结合后可以使十二指肠MMC时相变短,峰电振幅增加,峰电频率增快;膈下迷走神经切断术可完全阻断这种效应;阿托品、酚妥拉明、普萘洛尔不能阻断这种效应;抗胃动素血清只能部分阻断这种效应;杏仁基底外侧核核团毁损对十二指肠MMC影响不明显。结论 杏仁核各亚核团都有胃动素受体分布,杏仁内侧核是胃动素受体分布最多的部位。杏仁核微量注射胃动素可以使十二指肠MMC的时相、峰电振幅和峰电频率发生变化,这种作用可能是通过杏仁核-下丘脑-脑干-迷走神经通路实现的,提示杏仁核胃动素受体在对十二指肠MMC的中枢性调节中发挥着重要作用。     

阻断交感神经功能和切除迷走神经对狗十二指肠电活动的影响

在狗的十二指肠浆膜面埋植银—氯化银双极电极,进行慢性实验,记录清醒状态下禁食18小时后的十二指肠电活动,观察静脉注射心得安、酚妥拉明阻断交感神经功能或切除迷走神经后,对十二指肠消化间期综合肌电周期性活动的影响。结果发现静注酚妥拉明阻断交感神经α受体后,Ⅰ相缩短,Ⅱ相增长,Ⅱ相中快波和慢波的振幅增加,快波的出现率增多。切除迷走神经后效应相反,但对消化间期综合肌电周期性活动的影响则不明显。     

促胃肠动力药对大鼠胃及十二指肠电活动的影响

目的：研究克拉霉素、多潘立酮、莫沙必利和伊托必利等促胃肠动力药对胃及十二指肠肌电活动的影响,并进一步探讨其作用机制,为临床治疗提供参考意见。方法：用生物机能实验系统记录用药前后消化间期各组SD大鼠胃和十二指肠的肌电活动,比较几种促胃肠动力药对SD大鼠胃和十二指肠肌电图波幅及频率的影响;并加用阿托品、酚妥拉明及普萘洛尔作为拮抗剂,探讨以上几种促胃肠动力药的作用机制。结果：克拉霉素、多潘立酮、莫沙必利、伊托必利均能提高SD大鼠胃和十二指肠快波的振幅和频率 (P<0.05),其中以伊托必利作用最明显,克拉霉素组最弱;阿托品能够显著抑制各组SD大鼠快波的振幅及频率(P<0.05),而酚妥拉明和普萘洛尔则无影响。结论：克拉霉素、多潘立酮、莫沙必利和伊托必利均能提高SD大鼠胃和十二指肠肌电活动的振幅及频率,其作用机制之一可能与胆碱能受体有关,而与肾上腺素能受体无关。     

大鼠杏仁核胃动素受体分布及其作用研究

目的探讨大鼠杏仁核胃动素受体分布及杏仁核基底外侧核胃动素受体与外源性胃动素结合或者毁损后对十二指肠消化间期移行性复合肌电活动（MMC）的影响及其作用机制。方法采用免疫组织化学、中枢立体定位杏仁核微量注射、杏仁核毁损、多道生理记录仪监测十二指肠MMC的方法，探讨大鼠杏仁核胃动素受体的作用。结果杏仁核各亚核团都有胃动素受体分布．以杏仁内侧核分布最多；杏仁基底外侧核也有较多分布，后部多于前部；分布较少的核团是杏仁基底内侧核、杏仁中央核、杏仁基底外侧核：杏仁核基底外侧核胃动素受体与外源性胃动素结合后可以使十二指肠MMC时相变短，峰电振幅增加，峰电频率增快；膈下迷走神经切断术可完全阻断这种效应：阿托品、酚妥拉明、普萘洛尔不能阻断这种效心；抗胃动素血清只能部分阻断这种效应：杏仁基底外侧核核团毁损对十二指肠MMC影响不明品。结论杏仁核各亚核团都有胃动素受体分布，杏仁内侧核是胃动素受体分布最多的部位。杏仁核微量注射胃动素可以使十二指肠MMC的时相、峰电振幅和峰电频率发生变化．这种作用可能是通过杏仁核-下丘脑-脑干．迷走神经通路实现的．提示杏仁核胃动素受体存对十二指肠MMC的中枢性调节中发挥着重要作用。     

大鼠海马区微量注射胃动素对十二指肠移动性复合肌电活动的影响

目的探讨海马微量注射胃动素对十二肠消化间期移行性复合肌电活动（migrating myoelectrical complex，MMC）的影响及作用机制。方法采用中枢立体定位海马微量注射，多道生理记录仪监测十二指肠MMC的方法，观察海马微量注入胃动素（0．37nmol）对十二指肠MMC的影响。结果海马微量注入胃动素叮以使卜二指肠MMC时相明显变短，峰电振幅增加．峰电频率增快．但对峰电时相无明显影响；膈下迷走冲经切断术可完全阻断海马胃动素对十二指肠MMC的影响：阿托品、酚妥托明、普萘洛尔不能阻断海马胃动素对十二指肠MMC的影响；抗胃动素血清只能部分阻断海马胃动素对十二指肠MMC的影响。结论海马外源性胃动素可以使十二指肠MMC的时相、峰电振幅和峰电频率发生变化．这种作用可能是通过海马．下丘脑．脑干-迷走神经通路，由非肾上腺素能非胆碱能神经元作用于十二指肠平滑肌或者促进胃动素的释放而实现的．海马在十二指肠MMC的调节巾发挥着重要作用。     

杏仁核微量注射胃动素对十二指肠MMC的影响

目的探讨杏仁核微量注射胃动素对十二指肠消化间期移行性复合肌电活动(m igratingm yoe lectrica l com p lex,MM C)的影响及作用机理。方法采用中枢立体定位杏仁核微量注射,多道生理记录仪监测十二指肠MM C的方法,观察尾静脉给予阿托品(50μg/kg)、酚妥拉明(200μg/kg)、普萘洛尔(100μg/kg)及抗胃动素血清(1∶50)和膈下迷走神经切断术后,杏仁核微量注入胃动素(0.37 nm o l)对十二指肠MM C的影响。结果杏仁核微量注入胃动素可以使十二指肠MM C时相明显变短〔(586.3±42.0)s vs(694.0±36.2)s〕,峰电振幅增加〔(294.7±43.2)μV vs(255.1±23.5)μV〕,峰电频率增快〔(23.1±0.6)次/m in vs(18.2±0.4)次/m in〕,但对峰电时相无明显影响,峰电频率的变化率要大于峰电振幅的变化率〔(54.3±5.6)%vs(22.4±4.3)%〕;膈下迷走神经切断术可完全阻断杏仁核胃动素对十二指肠MM C的影响;阿托品、酚妥拉明、普萘洛尔不能阻断杏仁核胃动素对十二指肠MM C的影响;抗胃动素血清只能部分阻断杏仁核胃动素对十二指肠MM C的影响。结论杏仁核外源性胃动素可以使十二指肠MM C的时相、峰电振幅和峰电频率发生变化,这种作用可能是通过杏仁核—下丘脑—脑干—迷走神经通路,由非肾上腺素能非胆碱能神经元作用于十二指肠平滑肌或者促进胃动素的释放而实现的。     

大鼠海马区微量注射胃动素对十二指肠移动性复合肌电活动的影响

目的 探讨海马微量注射胃动素对十二肠消化间期移行性复合肌电活动(migrating myoelectrical complex,MMC)的影响及作用机制。方法 采用中枢立体定位海马微量注射,多道生理记录仪监测十二指肠MMC的方法,观察海马微量注入胃动素(0.37nmol)对十二指肠MMC的影响。结果 海马微量注入胃动素可以使十二指肠MMC时相明显变短,峰电振幅增加,峰电频率增快,但对峰电时相无明显影响;膈下迷走神经切断术可完全阻断海马胃动素对十二指肠MMC的影响;阿托品、酚妥拉明、普萘洛尔不能阻断海马胃动素对十二指肠MMC的影响;抗胃动素血清只能部分阻断海马胃动素对十二指肠MMC的影响。结论 海马外源性胃动素可以使十二指肠MMC的时相、峰电振幅和峰电频率发生变化,这种作用可能是通过海马-下丘脑-脑干-迷走神经通路,由非肾上腺素能非胆碱能神经元作用于十二指肠平滑肌或者促进胃动素的释放而实现的,海马在十二指肠MMC的调节中发挥着重要作用。     

The distribution of motilin receptor in the amygdala of rats and its role in migrating myoelectric complex

Objective：To investigate the distribution of the motilin receptor in the amygdala of rats and its role in regulating the duodenal migrating myoelectric complex （MMC）. Methods：The distribution of motilin receptor in the amygdala in adult SD rats was detected by immunohistochemistry methods, and the duodenal interdigestive MMC was recorded via the electrodes implanted in the duodenum and analyzed us- ing a multichannel recorder. Results：Motilin receptor was observed in the amygdala of rats, The great amount of motilin receptor was found in the medial amygdaloid nucleus, which was also abundant in the basolateral nucleus but less abundant in the basomedial amygdaloid nucleus, the central amygdaloid nucle- us and the lateral amygdaloid nucleus. The shortening of the duodenal MMC cycle duration and the in- crease of the amplitude and the frequency of phase Ⅱ were recorded after motilin receptors being bound with exogenous motilin in the amygdala. The effects could be completely blocked by the subdiaphragmatic vagotomy but not by the intravenous injections of atropine, phentolamine or propranolol. Anti-motilin serum could partially block these effects, and the destruction of the basolateral nucleus of the amygdala had no significant effects on the duodenal MMC. Conclusion.. Motilin receptor is present in all the subnu- clei of the amygdala, with the greatest amount of motilin receptor present in the medial amygdaloid nucle- us. Microinjections of motilin in the amygdala can shorten the duodenal MMC cycle duration and increase the amplitude and the frequency of phase Ⅱ . These effects might be accomplished via the amygdala-hy- pothalamus-brainstem-vagus pathway, indicating the important role of the amygdala motilin receptor in the duodenal MMC regulation.     

Ghrelin对血管紧张素Ⅱ诱导的脐静脉内皮细胞 氧化应激和内皮功能损伤的影响

目的：探讨促生长激素释放肽（ghrelin）对血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ, Ang Ⅱ）诱导的离体培养的脐静脉内皮细胞（human umbilicus vein endothelial cell-12,HUVEC-12）损伤的保护作用。方法：(1)在培养的人脐静脉内皮细胞中加入10-9~10-6mol/L AngⅡ共培养24 h,或用10-9~10-6mol/L ghrelin预处理2 h后与10-6mol/L AngⅡ共培养24 h。用MTT法测量内皮细胞活力和用AnnexinV-FITC凋亡试剂盒在流式细胞仪下测量内皮细胞凋亡率。(2)HUVEC用10-9,10-8,10-7,10-6mol/L AngⅡ分别培养3,6,12或24 h,10-9,10-8,10-7或10-6 mol/L ghrelin预处理2 h后与10-6mol/L AngⅡ共培养24 h。生长激素促分泌剂受体1a(growth hormone secretagogue receptor 1a,GHSR1a)受体阻断剂 ［D-Lys3］GHRP-6加入 10-6 mol/L ghrelin预处理2 h后与10-6mol/L AngⅡ共培养24 h组,DCF荧光探针法测细胞内活性氧（reactive oxygen species, ROS）。(3)HUVEC分别与 10-9,10-8,10-7或10-6mol/L AngⅡ和 ghrelin共培养24 h,与10-6mol/L AngⅡ孵育3,6,12或24 h,或10-9,10-8,10-7或10-6mol/L ghrelin预处理30 min,1 h或2 h后与10-6mol/LAngⅡ培养24 h,加入丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶信号通路（mitogen-activated protein kinase /extracullar signal regulated kinase 1/2,MAPK/ERK1/2）信号通路抑制剂PD98058、磷脂酰肌醇3-激酶/丝-苏氨酸激酶（phosphoinositide-3-kinase/serine threonine kinase,PI3K/Akt ）阻断剂 wortmannin和［D-Lys3］GHRP-6 共培养24 h,与用AngⅡ和ghrelin孵育的HUVEC 比较上清液中NO产量,HUVEC用ghrelin,PD98059, wortmannin, ［D-Lys3］GHRP-6预处理2 h后与10-6mol/L AngⅡ共培养24 h,或用ghrelin加上PD98059,wortmannin及［D-Lys3］GHRP-6预处理2 h后与10-6mol/L AngⅡ共培养24 h。内皮细胞上清中的一氧化氮（nitric oxide, NO）用Griess法测量。(4)HUVEC用空白对照或AngⅡ在有或没有用ghrelin或ghrelin和wortmannin 一起预处理的情况下孵育,用免疫印迹法（Western blot ）测量内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase, eNOS）的蛋白表达及丝苏氨酸激酶（serine threonine kinase,Akt）磷酸化蛋白表达。结果：AngⅡ引起内皮细胞损伤,增加HUVEC细胞凋亡率,减少培养的HUVEC细胞上清中NO含量,而ghrelin保护HUVEC免受AngⅡ损伤;Ghrelin减少与AngⅡ共同孵育的HUVEC ROS的产生。这种作用被［D-Lys3］GHRP-6消除。PD98059能阻止AngⅡ导致的HUVEC分泌NO减少,Wortmannin和［D-Lys3］GHRP-6消除Ghrelin保护HUVEC释放NO的作用;AngⅡ减少eNOS 的表达,但ghrelin能增加eNOS表达,Wortmannin消除Ghrelin的这种作用;Ghrelin 能刺激p-Akt的表达并在10~20 min达到高峰。结论：Ghrelin在AngⅡ导致的HUVEC损伤中起保护作用,其机制与通过GHSR1a受体减少氧化应激、增加eNOS蛋白表达和激活PI3K/Akt信号通路有关。     

Ghrelin对血管紧张素Ⅱ诱导的脐静脉内皮细胞氧化应激和内皮功能损伤的影响（英文）

目的：探讨促生长激素释放肽（ghrelin）对血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）诱导的离体培养的脐静脉内皮细胞（human umbilicus vein endothelial cell-12,HUVEC-12）损伤的保护作用。方法：（1）在培养的人脐静脉内皮细胞中加入10-9～10-6mol/L AngⅡ共培养24h,或用10-9～10-6mol/Lghrelin预处理2h后与10-6mol/L AngⅡ共培养24h。用MTT法测量内皮细胞活力和用AnnexinV-FITC凋亡试剂盒在流式细胞仪下测量内皮细胞凋亡率。（2）HUVEC用10-9,10-8,10-7,10-6mol/L AngⅡ分别培养3,6,12或24h,10-9,10-8,10-7或10-6mol/L ghrelin预处理2h后与10-6mol/L AngⅡ共培养24h。生长激素促分泌剂受体1a（growth hormone secretagogue receptor1a,GHSR1a）受体阻断剂[D-Lys3]GHRP-6加入10-6mol/L ghrelin预处理2h后与10-6mol/L AngⅡ共培养24h组,DCF荧光探针法测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）。（3）HUVEC分别与10-9,10-8,10-7或10-6mol/L AngⅡ和ghrelin共培养24h,与10-6mol/L AngⅡ孵育3,6,12或24h,或10-9,10-8,10-7或10-6mol/L ghrelin预处理30min,1h或2h后与10-6mol/LAngⅡ培养24h,加入丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶信号通路（mitogen-activated protein kinase/extracullar signal regulated kinase1/2,MAPK/ERK1/2）信号通路抑制剂PD98058、磷脂酰肌醇3-激酶/丝-苏氨酸激酶（phosphoinositide-3-kinase/serine threonine kinase,PI3K/Akt）阻断剂wortmannin和[D-Lys3]GHRP-6共培养24h,与用AngⅡ和ghrelin孵育的HUVEC比较上清液中NO产量,HUVEC用ghrelin,PD98059,wortmannin,[D-Lys3]GHRP-6预处理2h后与10-6mol/L AngⅡ共培养24h,或用ghrelin加上PD98059,wortmannin及[D-Lys3]GHRP-6预处理2h后与10-6mol/L AngⅡ共培养24h。内皮细胞上清中的一氧化氮（nitric oxide,NO）用Griess法测量。（4）HUVEC用空白对照或AngⅡ在有或没有用ghrelin或ghrelin和wortmannin一起预处理的情况下孵育,用免疫印迹法（Western blot）测量内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）的蛋白表达及丝苏氨酸激酶（serine threonine kinase,Akt）磷酸化蛋白表达。结果：AngⅡ引起内皮细胞损伤,增加HUVEC细胞凋亡率,减少培养的HUVEC细胞上清中NO含量,而ghrelin保护HUVEC免受AngⅡ损伤;Ghrelin减少与AngⅡ共同孵育的HUVEC ROS的产生。这种作用被[D-Lys3]GHRP-6消除。PD98059能阻止AngⅡ导致的HUVEC分泌NO减少,Wortmannin和[D-Lys3]GHRP-6消除Ghrelin保护HUVEC释放NO的作用;AngⅡ减少eNOS的表达,但ghrelin能增加eNOS表达,Wortmannin消除Ghrelin的这种作用;Ghrelin能刺激p-Akt的表达并在10～20min达到高峰。结论：Ghrelin在AngⅡ导致的HUVEC损伤中起保护作用,其机制与通过GHSR1a受体减少氧化应激、增加eNOS蛋白表达和激活PI3K/Akt信号通路有关。