虾青素对成骨细胞羟自由基氧化损伤的影响

目的：在H2O2胁迫下，研究虾青素增强成骨细胞抗自由基损伤的作用。方法：用H2O2作用MC3T3-E1成骨细胞，建立自由基损伤细胞模型。培养的成骨细胞分为对照组、模型组、虾青素低剂量组（1×10^-7mol／L）、虾青素中剂量组（1×10^-6mol／L）和虾青素高剂量组（1×10^-5mol／L）。测定不同处理组细胞活力、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性、活性自由氧（reactive oxygen species，ROS）含量、脂质过氧化物（lipid oxygen，IJP0）含量，同时利用荧光偏振法测定细胞膜流动性。结果：模型组细胞活力、SOD活性、细胞膜流动性均比各剂量虾青素组显著降低（P〈0．01），而ROS、LPO含量均比各剂量虾青素组显著升高（P〈0．01）。结论：H2O2摄入会导致大鼠成骨细胞的氧化损伤，而虾青素可以预防或降低此类损伤对细胞的影响。     

EGCG对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究表绿茶活性成分没食子儿茶素-3-没食子酸酯（epigallocatechin gallate，EGCG）对大鼠肾脏缺血再灌注损伤是否具有保护作用。方法将12只Lewis大鼠随机分为2组：（1）实验组大鼠7只，于肾缺血后的再灌注期将10mg／kg的EGCG置于2ml生理盐水中静脉注射；（2）对照组大鼠5只，于肾缺血后的再灌注期静脉注射2ml生理盐水。2h后处死动物，收集血液和肾脏标本，行血肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）、肾组织超氧化物歧化酶（SOD）和脂质过氧化产物丙二醛（MDA）含量测定，并进行组织病理和超微病理检查。结果实验组大鼠血Cr和BUN水平明显低于对照组（P〈0.05），肾组织中SOD活性较对照组明显升高（P〈0．01），肾组织脂质过氧化产物MDA的含量较对照组明显降低（P〈0．01）。病理学检测表明实验组大鼠肾小管周围毛细血管内未见淤血，肾小管上皮细胞变性及线粒体的损伤减轻。结论EGCG对大鼠肾脏缺血再灌注损伤具有保护作用。     

精子DNA损伤、核蛋白组型转换与顶体酶活性及精液参数的相关性分析

目的:探讨精子DNA损伤、精子核蛋白组型转换与顶体酶活性及精液参数的相关性。方法:收集535例精液标本,采用精子染色质扩散(sperm chromatin dispersion,SCD)检测精子DNA损伤,并与精子核蛋白组型转换、顶体酶活性和WHO手册(第4版)精液参数进行相关性分析。结果:精子DNA损伤与精子核蛋白组型转换、顶体酶活性、精子浓度及前向运动精子这些指标之间比较均具有显著性差异(P<0.01);精子DNA损伤与年龄、核蛋白组型转换、精子浓度和D级精子比例之间呈显著正相关(P<0.01或P<0.05),而与顶体酶活性呈显著负相关(P<0.001),多元逐步回归分析显示年龄、精子浓度、D级精子比例、核蛋白组型转换及顶体酶活性是5个独立的相关变量。精子核蛋白组型转换、顶体酶活性、精子密度和前向运动精子这4个指标的异常率在精子DNA异常组(DFI≥30%)中均显著的高于正常组(DFI<30%)。结论:精子DNA损伤与精子核蛋白组型转换、顶体酶活性及WHO(第4版)精液各参数之间存在密切的联系,可能是评价精子质量的另一项重要的指标。     

精子冻存技术及上游法精子处理技术对精子DNA完整性的影响

目的通过对冷冻前后及精子处理前后精子DNA完整性的比较,探讨冷冻技术、冷冻时间及上游法精子处理技术对精子DNA完整性的影响。方法（1）精液常规检测正常的患者30例,手淫法取精,精液液化混匀后分4份,分别用于精子染色质扩散（SCD）实验检测精子DNA完整性、上游法处理精液、以及两组冻存实验（不加保护剂直接冻存的为冻存1组;添加蛋黄葡萄糖保护剂冻存的为冻存2组）;（2）上游法处理后的精液一部分用于检测精子动力和形态,一部分用于精子DNA完整性检测;（3）冻存1组分别于冻存第7天和第90天解冻,SCD实验检测精子DNA完整性;（4）冻存2组分别于第7天和第90天解冻,0．1ml用于精子DNA完整性检测,剩余精液应用上游法处理,检测上游处理前后精子DNA的完整性。结果（1）冻存1组中,冻存90d后解冻的精子DNA损伤率[（25．6土7．3）％]显著高于冻存7d者[（22．4±7．4）％]（P〈0．05）,且均显著高于新鲜精液的精子DNA损伤率[（20．6±7．3）％]（P〈O．05）;冻存2组中,冻存90d后精子DNA损伤率显著高于冻存7d者[（25．9±7．2）％VS．（23．6土7．8）％]（P〈O．05）,且均显著高于新鲜精液（P〈0．05）;而冻存7d和90d后,两个冻存组间比较,精子DNA损伤率均无显著差异（P〉0．05）。（2）新鲜精液经上游法处理后,精子DNA损伤率由处理前的（20．6±7．3）％降为（6．4±2．5）％（P〈O．05）;冻存2组中精液冻存7d和90d后复苏上游法处理后,精子DNA损伤率较未经上游法处理者均显著降低[分别为（9．38±2．8）％VS．（23．6±7．8）％和（9．7±2．6）％VS．（25．9±7．2）％]（P％0．05）。结论冻存对精子DNA有损伤,冻存时间对于精子DNA完整性有影响。不添加保护剂直接冻存和添加保护剂对精子DNA完整性的影响无显著差异。不论是新鲜精液还是冻存复苏精液,上游法处理并不会增加精子DNA的损伤,且有利于筛选出具有更好DNA完整性的精子。     

缬沙坦预处理对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的:探讨缬沙坦预处理对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制.方法:常规方法培养心肌细胞,培养72小时后,分为三组:正常对照组、心肌细胞缺氧/复氧损伤组、缬沙坦预处理后心肌细胞缺氧/复氧损伤组.分别观察心肌细胞结构,测定心肌细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)水平.结果:与对照组比心肌细胞缺氧/复氧损伤组细胞存活率明显下降、培养液中LDH、MDA含量明显增高,SOD含量明显下降;与心肌细胞缺氧/复氧损伤组比,缬沙坦预处理组心肌细胞存活率明显提高,培养液中LDH、MDA含量明显下降、S0D含量明显上升.结论缬沙坦通过抗氧化、抗脂质过氧化反应,清除氧自由基对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤有保护作用.     

精液白细胞与精子功能间关系的研究

为探讨精液中白细胞与精液质量的关系，对１１例生育男性、１８例生殖道感染性不育及１６例特发性男性不育患者，分别进行精液常规分析、精液白细胞计数、ＭＤＡ测定、精子活力测定及精子细胞膜完整性的测定。结果显示：（１）生育组白细胞密度为７３．２±２９万／ｍｌ，显著低于感染组（１４６．１±９２．２万／ｍｌ）及弱精子症组（１１１．３±５３．４万／ｍｌ），同时精子活动率、ＳＶＴ、精子头部膜完整率、尾部膜完整率均显著高于其它二组；生育组精液中ＭＤＡ值为４．５９１±２．５２１ｎｍ／ｍｌ，显著低于不育组。死亡率显著低于其它二组。（２）相关分析显示ＭＤＡ与白细胞密度成正相关，与精子活动率、ＳＶＴ、膜完整率成负相关。研究结果显示：（１）精液白细胞可通过膜脂质过氧化反应对精子功能造成损伤；（２）膜脂质过氧化反应可伴随白细胞的增加而增加，但同时又受精液中ＳＯＤ的抑制。结论：在病理情况下，白细胞增多可通过ＭＤＡ导致精子运动力、活动率下降，精子膜完整性受损，从而使精子受精能力下降。     

人精液中酶类的检测与男性不育的关系

目的 探讨人精液中酶类与男性不育的关系。方法参照WHO标准方法，进行精液常规分析，按精子密度、活动率不同分为（正常、〈20、20-40、〉40）4个组。采用改良的Kennedy法检测精子顶体酶（ACE）活性。用Singer法测透明质酸本科酶（HYD）活性，采用磷酸笨二钠法检测酸性磷酸酶（ACP）。用以Glucana为底物的动力学方法测定精液γ-谷氨酰基移换酶（GGT）活性。结果98例不育各组的ACE、HYD、ACP和GGT活性明显低于正常生育组（P〈0.01），并且随精子密度和活动率减少而降低。随精子畸形率增高而下降。结论精液酶类的检测是评价精子成熟、活动率及穿卵受精能力的重要指标之一，是精液常规参数不可替代的，对男性不育的诊断治疗具有重要价值。     

葛根素对肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用及其保护机制的研究

目的观察葛根素（Pue）对肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注损伤是否具有保护作用，及其保护机制。方法首先建立大鼠肝硬化动物模型，在此模型基础上建立大鼠全肝缺血再灌注模型，比较用Pue预处理对缺血再灌注后，肝组织光镜下的形态学改变；血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氮酸氨基转移酶（AST）和氧化亚氮（NO）、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性，及肝组织中NO、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、MDA含量、SOD活性变化。结果Pue预处理可使大鼠血清NO含量、肝组织NO含量及SOD活性明显增高；而血清ALT、AST、MDA含量及肝组织TNF—α、MDA含量明显降低；肝组织形态损伤也有所减轻。结论葛根素对肝硬化大鼠肝缺血再灌注损伤有显著的保护作用，其主要机制是减少NO的降低、扩张血管、改善微循环；清除氧自由基、减轻脂质过氧化。     

番茄红素对人精子冷冻损伤的保护作用及机制研究

目的:通过在人精子冷冻保护液中添加不同浓度的番茄红素,研究番茄红素对精子冷冻损伤的可能保护作用及机制。方法:选择吉林省人类精子库捐精者的精液标本25份,每份精液一式4份,3∶1加入冷冻保护液后混匀,不含番茄红素者设为对照组(Ly0),而Ly2、Ly5、Ly10实验组混合液中分别含有2、5、10μmol/L的番茄红素,冷冻复苏精液进行常规分析,采用流式细胞术分析冻融后各组精子的凋亡率;采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法检测精子中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)浓度。利用JC-1标记法检测线粒体膜电位。结果:冻融后各组精子运动参数较新鲜精液参数均明显下降(P<0.01),Ly5组冻融后精子凋亡率[(25.68±4.36)%]较对照组[(33.26±4.78)%]显著下降(P<0.05);Ly5组线粒体膜电位水平[(66.18±14.23)%]显著高于对照组[(55.24±12.31)%],P<0.05;Ly2、Ly5、Ly10组的MDA水平与对照组比较,无统计学差异(P>0.05)。结论:在精液冷冻保护液中添加一定浓度的番茄红素可以减少线粒体氧化损伤,减轻活性氧对精子质膜的氧化应激损伤,从而提高精子的抗凋亡能力。     

维生素E对人精子冻融氧化应激损伤的保护作用

目的:探讨水溶性维生素E(Trolox)对冻融人精子氧化应激损伤的可能保护作用及机制。方法:选取16份健康生育男性的精液标本,分析精液常规参数及动力学参数后,将每份精液一式4份,1∶1加入冷冻保护液后混匀,不含水溶性维生素E者设为阴性对照组(G0),而G1、G2、G3实验组混合液中分别含有50、100、200μmol/L浓度的水溶性维生素E,冷冻复苏精液常规分析,检测复苏后精液中活性氧(ROS)水平,采用硫巴比妥酸法(TBA)检测精子中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)浓度。结果:冻融后各组精子运动参数较新鲜精液参数均明显下降(P0.01),G2组前向运动精子百分率[(53.33±5.63)%]较对照组[(47.85±5.09)%]明显改善(P0.05),精子VCL和VAP高于阴性对照组(P0.05)。G2组与G3组的ROS及MDA均低于阴性对照组(P0.05)。结论:在精液冷冻保护液中添加一定浓度的水溶性维生素E可以减少精子冻融过程中产生的过量ROS,减轻ROS对精子质膜的氧化应激性损伤,从而提高冻融后的精子活力。     

高胸段硬膜外阻滞对猪急性心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

目的：探讨高胸段硬膜外阻滞（HTEA）对心肌缺血／再灌注损伤的保护作用。方法：20只家猪随机分为两组，结扎左冠状动脉前降支（LAD）造成造血40min后再灌注6h，实验组（n=10)结扎前硬膜外腔注入0．5％布比卡因2ml;对照组（n=10)结扎前硬膜外腔注入生理盐水2ml。测定心率（HR）、平均动脉压（MAP）、中心静脉压（CVP）、血浆超氧化物歧化酶（SOD）活性、血清丙二醛（MDA）浓度、心肌乳酸（LA）释放量。结果：（1）实验组硬膜外阻滞的HR减慢22％，MAP、CVP分别降低25％和28％，而对照组血液动力学无明显变化。（2）实验组SOD活性变化不显著，再灌注5h、6h活性升高（P＜0．01）；MDA浓度在4h降至最低点（P＜0．05）；对照组SOD活性明显降低（P＜0．05），MDA含量明显增加（P＜0．05）。（3）两组心肌LA释放量在开放前达到高峰，之后随着供血、供氧的恢复逐渐下降，但实验组明显低于对照组（P＜0．01）。（4）开始再灌注时由于发生室颤实验组死亡1只，对照组死亡只（P＜0．05）。结论：HTEA可以减轻心肌缺血／再灌注损伤，其机制与保护SOD活性，降低心肌氧耗及脂质过氧化程度有关。     

异氟醚减少离体鼠肝缺氧-复氧损伤与枯否细胞有关

目的 明确异氟醚减少离体鼠肝缺氧-复氧损伤的作用主要发生在哪一阶段，以及与枯否细胞的关系。方法 将大鼠肝脏取下，置于离体鼠肝灌流仪中，以经95％O2／5％CO2饱和的改良克-林氏碳酸氢盐缓冲液恒压灌流（有氧状态用1．2kPa，缺氧状态用0．2kPa），维持生理pH值和温度，实时监测灌流液中LDH变化。2MAC异氟醚分别用于缺氧期、复氧期和缺氧-复氧期。用GdCl3选择性抑制枯否细胞活性。结果（1）2MAC异氟醚用于缺氧-复氧期和单纯用于复氧期均可抑制LDH升高，而单纯用于缺氧期则无明显作用。（2）2MAC异氟醚和（或）GdCl3组均可抑制肝脏缺氧-复氧后LDH升高。结论异氟醚保护缺氧-复氧肝脏免受损伤的作用主要发挥在复氧期，异氟醚在复氧期发挥保护作用可能与抑制复氧引起的氧自由基爆发有关，其作用与枯否细胞活性密切相关。     

二羟异黄酮和三羟异黄酮对CHO细胞抗氧化活性的比较研究

目的:研究二羟异黄酮(Daidzein)和三羟异黄酮(Genistein)对H2O2诱导的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)氧化损伤的保护作用及探讨其抗氧化活性的作用机制。方法:H2O2体外培养CHO细胞建立细胞氧化损伤模型,预先加入三羟异黄酮和二羟异黄酮(0.25～20μmol/L)作用24h作为保护后再加入100μmol/LH2O2作用3h,显微镜下观察CHO细胞形态改变,MTT法检测活细胞数,LDH法检测细胞的损伤情况,MDA生成量和SOD活性的测定检测细胞膜脂质过氧化反应程度。结果:H2O2处理细胞3h后,细胞形态发生明显改变,胞体变小、突起缩回;MTT吸光值减小,活细胞数减少;MDA生成量和LDH释放量明显增多,SOD活性下降,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01)。Daidzein处理组和Genistein处理组细胞形态明显改善,MTT吸光值显著增加,MDA生成量和LDH释放量明显减少,与H2O2处理组相比有显著性差异(P<0.01)。结论:与三羟异黄酮相比,二羟异黄酮一样能显著抑制H2O2对CHO细胞的氧化损伤,且具有较强的保护作用。     

反复自然流产与精子DNA完整性的相关性研究

目的 探讨反复自然流产与精子DNA完整性的相关性。方法 按纳入标准将研究对象分成反复自然流产患者丈夫组（n=58）和正常生育男性对照组（n=50），采用吖啶橙实验（AOT）对研究对象精子DNA完整性进行检测，并对研究对象精液进行常规分析。砖果两组研究对象年龄、吸烟史、饮酒史无统计学差异（P〉0．05）；反复自然流产患者丈夫组精液的精子密度、精子活力显著低于正常生育对照组（P〈O．05）；反复自然流产患者丈夫组精子DNA的完整性低于正常生育对照组，差异有统计学意义（P〈O．05）。砖论精子DNA完整性损伤是反复自然流产的可能原因，精子DNA完整性损伤导致反复自然流产的致病机理尚需进一步研究。     

静脉输注维生素E对急性胰腺炎时肺脏脂质过氧化损害的保护作用

目的观察维生素E（VE）对急性胰腺炎（AP）时肺组织脂质过氧化的保护作用。方法采用3％牛磺胆酸钠按O1mg／kg体重注入胰管内制成AP动物模型后,经肠系膜静脉按100mg／kg体重注入VE乳剂或相同体积的生理盐水,术后6小时和24小时活杀动物检测血清淀粉酶、脂肪酸及磷脂酶A_2（PLA_2）活性;肺脏组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性及三磷酸腺着（ATP）含量。结果VE组动物肺脏组织炎性病理改变较AP组明显减轻;血清淀粉酶、脂肪酶及PLA_2活性均较AP组显著降低（P＜0．05）。肺脏组织MDA含量较AP组巳著降低（P＜0．05）,SOD活性及ATP含量较AP组显著升高（P＜0.05）。结论氧自由基所引发的脂质过氧化作用是急性胰腺炎时肺脏损害发病过程中的重要因素之一,应用较大剂量VE可减轻肺脏组织损害。     

川芎嗪在大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用

目的：探讨川芎嗪对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法：观察川芎嗪注射液对大鼠肾脏缺血再灌注损伤后血浆超氧化物歧化酶（SOD）、脂质过氧化物丙二醇（MDA）、内皮素－1（ET－1）的作用及肾小管损伤形态学的影响。结果：川芎嗪治疗组大鼠血浆SOD水平较缺血再灌注组显著升高（P＜0.05)，MDA和ET－1水平显著性下降（P＜0.05)，肾小管损伤的病理分级显著减轻（P＜0.05)。结论：川芎嗪对肾脏缺血再灌注性损伤具有保护作用。     

精液中前列腺小体—一种新发现的免疫抑制成分

精液中前列腺小体—一种新发现的免疫抑制成分山西医学院生殖免疫研究室（太原０３０００１）王春芳郑振群综述大量的研究证实人精浆具有免疫抑制作用，此作用的存在可能是为了延长精子的寿命。最早的观点认为，这种活性主要是由较高浓度的前列腺素（ｐｒｏｓｔａｇｌａｎ...     

聚精丸对弱精子症患者精浆一氧化氮、超氧化物歧化酶的作用机制研究

目的:研究聚精丸治疗弱精子症的可能机制,为寻找其作用机制提供新的线索。方法:选择弱精子症患者34例,给予聚精丸治疗3个月,治疗前后分别作精液常规及精浆一氧化氮(NO)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性测定,观察治疗前后精液常规参数以及NO含量、SOD活性的变化。结果:与治疗前相比,治疗后精液常规参数均有显著性改变(P<0.05或P<0.01);精浆NO值无明显变化(P>0.05);而SOD活性由(95.97±20.75)μg/L下降为(76.14±19.99)μg/L(P<0.05)。弱精子症治疗前精浆NO含量和SOD活性之间呈负相关(r=-0.246,P<0.05)。结论:聚精丸可以显著改善弱精子症患者精子活动率,但聚精丸的良好疗效可能并不体现在精浆NO含量和SOD活性值的改变。     

离体肾小管低氧,氧复苏损伤中的脂类介质和磷脂酶A2

从体外制备肾小管上皮细胞低氧、氧复苏模型入手，着重分析了低氧、氧复苏损伤过程中磷酯酶（ＰＬ）Ａ＿２的活性变化，ＰＬＡ＿２活性变化与细胞内钙稳态、脂质过氧化产物（ＬＰＯ）及ＰＧｓ、ＴｘＡ等脂类介质之间的关系，以探究低氧、氧复苏致肾小管上皮细胞损伤的本质。结果发现，在低氧及低氧、氧复苏时，ＰＬＡ＿２活性逐渐升高，尤其在氧复苏过程中，ＰＬＡ２活性升高明显；与此同时，［Ｃａ］ｉ自始至终处于高水平状态，两者呈明显相关关系（ｒ＝０．６８，Ｐ＜０．０１）。人为调节细胞外钙离子浓度也发现，Ｃａ浓度可明显影响ＰＬＡ＿２活性。ＰＬＡ＿２的激活呈明显Ｃａ依赖性。推测在低氧、氧复苏性损伤中，ＰＬＡ＿２的激活极有可能是由于低氧、氧复苏造成的细胞内钙离子浓度增高所致。ＰＬＡ＿２的损伤作用可能与由其引起的脂质过氧化及脂类介质的产生与释放有关。ＣｙＡ可明显阻断ＰＬＡ＿２的激活以及过氧化脂质、脂类介质的大量产生和堆积，缓解低氧、氧复苏所造成的细胞损伤。     

RHO/ROCK信号通路在精子抗冷冻损伤中的作用

目的:探讨RHO/ROCK信号通路在人精子抗冷冻损伤中的作用,为高效精液冷冻保护剂的研制提供理论依据。方法:选取健康精液25份,每份精液分为新鲜组、对照组与RHO通路抑制剂组(抑制剂组)。检测冷冻前后各组精液精子活力、精子存活率、精子膜完整率、正常形态精子百分率、精子DNA碎片指数(DFI)、精子顶体酶活性及精子线粒体膜电位变化;免疫荧光染色检测RHOa/ROCK蛋白在精子中的表达。结果:抑制剂组精液冷冻复苏后精子活力[(57.50±6.83)%vs(51.20±7.70)%,P=0.002]、精子存活率[(60.24±5.53)%vs(52.87±5.07)%,P=0.001]、精子膜完整率[(67.10±4.43)%vs(59.78±5.56)%,P=0.001]、正常形态精子百分率[(7.46±1.28)%vs(4.83±1.11)%,P=0.001]、精子DFI[(18.87±4.07)%vs(27.64±6.64)%,P=0.001]、精子线粒体膜电位(63.11±2.97 vs 56.30±4.28,P=0.001)指标均明显优于对照组;抑制剂组冷冻后精子顶体酶活性与对照组差异无统计学意义(98.30±11.33 vs 97.65±9.31,P0.05)。免疫荧光染色显示RHOa/ROCK蛋白在精子头、颈部广泛表达。结论:RHO/ROCK信号通路在精子冷冻损伤中具有一定作用,抑制其通路活性可明显提高精子抗冷冻损伤的能力。