谷物粉尘致大鼠肺纤维化的实验研究

本文对生产现场谷物粉尘的致纤维化作用进行了实验研究。通过染尘不同时间大鼠肺脏病理学检查、胶原含量测定和染尘12个月大鼠肺扫描电镜观察,发现尽管该粉尘中游离SiO_2含量较高,致纤维化作用却不很强。染尘早期肺内为细胞性反应,6个月时肺内形成细胞性结节,12个月时细胞结节周围有少量网状纤维,肺间质呈轻度纤维化改变。各时期肺胶原含量增加。淋巴结改变出现较晚,程度较肺内为轻。     

皮毛粉尘对大鼠肺纤维化作用的实验研究

用皮毛作业现场粉尘（游离ＳｉＯ２）含量分别为０．６％，０．７％和１７．６％）经大白鼠气管内染尘，于染尘后１、３、６、１２个月作肺组织病理学检查及全肺胶原含量测定。实验动物早期主要为间质肺炎样改变和呼吸道炎症。实验晚期时，游离ＳｉＯ２含量低于１％的皮毛粉尘只表现为轻度肺间质纤维增生，而游离ＳｉＯ２含量为１７．６％的皮毛粉尘在肺内有典型的纤维结节形成，肺组织超微结构有相应改变。证明皮毛粉尘具有一定致纤维化作用，致纤维化作用的强弱与粉尘中游离ＳｉＯ２含量有关，提示应引起对皮毛工人尘肺的重视。     

粉尘致肺纤维化机制研究现状

鉴于尘肺病的高发病率、高危害性和不可逆转性,探讨其发病机制以达到早发现、早诊断、早治疗具有重要意义。本文对目前研究的较为深入的自由基学说和细胞因子网络学说进行综述。     

博来霉素致肺纤维化大鼠形态学变化的实验研究

目的　观察博来霉素 (Bleomycin ,BLM)致大鼠肺纤维化模型的形态学及胶原含量的变化 ,探讨其发生机制。方法　健康SD大鼠 ,BLM 5mg (kg·bw)复制大鼠肺纤维化模型 ,于 1、3、7、14、2 8d ,观察肺纤维化形成的病理变化和肺匀浆羟脯氨酸 (HYP)的含量变化。结果　光镜所见 :给予BLM后 1- 7d肺部病变以肺泡炎为主 ,14d以后则进入慢性纤维化阶段。电镜所见 :模型组 3- 7dⅠ型细胞受损 ;Ⅱ型细胞增生 ,其内板层小体明显增多 ,线粒体嵴消失甚至出现空泡样变 ;14 - 2 8dⅡ型细胞数目减少 ,纤维组织增生。模型组肺组织匀浆HYP含量于 7d开始明显增加 ,2 8d达高峰。结论　博来霉素诱发大鼠肺纤维化早期以肺泡炎为主 ,7d开始出现肺纤维化 ,2 8d肺纤维化为主要病变     

肺功能检查在博来霉素诱导的大鼠肺纤维化中的实验研究

目的由于条件限制,在许多大鼠疾病模型中无法检测肺功能的变化情况,检测肺纤维化大鼠的肺功能对实验动物的肺功能应用具有重要意义。方法 12只健康SD大鼠,随机分成正常对照组和博来霉素组,气管注射博来霉素(5 mg/kg)复制大鼠肺纤维化模型。于第28日腹主动脉放血法处死,比较两组体质量及肺质量,计算肺系数,检测两组大鼠肺功能和肺组织中羟脯氨酸的含量。结果与正常对照组比较,博来霉素组大鼠肺系数明显升高,博来霉素组羟脯氨酸的含量明显升高,同时HE和MASSON病理染色提示大鼠肺纤维化模型复制成功。大鼠肺功能检查结果:用力肺活量(forced vital capacity, FVC)、50%肺活量的呼气流速(forced expiratory flow,FEF)、最大呼气流量(peak expiratory flow,PEF)均较正常对照组明显降低,且具有统计学意义,另外,博来霉素组FEV0.1/FVC较正常对照组升高。结论大鼠肺纤维化模型中肺功能检测技术基本成熟,可以进一步扩大样本量进行研究。     

无定形二氧化硅粉尘致纤维化作用的实验研究

大白鼠经无定形二氧化硅粉尘染尘后,肺内及肺门淋巴结出现一系列尘肺的组织反应,肺淋巴系统反应活跃,实验后期出现肺问质纤维化,肺胶原含量等指标也有相应改变。说明无定形二氧化硅粉尘确有一定的致纤维化作用。文中对无定形二氧化硅致纤维化作用及尘肺问题,作了初步探讨。     

诱导型一氧化氮合酶在博莱霉素致大鼠肺纤维化中的作用研究

目的研究诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在大鼠肺纤维化中的作用.方法在博莱霉素(BLM)致大鼠肺纤维化模型上,用免疫组化染色法测定肺组织iNOS的表达,硝酸还原酶法测定肺组织匀浆中NO含量,碱水法测定肺组织匀浆中HYP含量,HE染色法光镜观察肺组织形态学变化,评价iNOS在大鼠肺纤维化形成中的作用.结果肺组织NO含量:BLM组大鼠肺组织中NO含量高于对照组(P<0.05),L-NMMA组大鼠肺组织NO含量低于BLM组(P<0.05).肺组织HYP含量:BLM组大鼠肺组织中HYP含量高于对照组(P<0.05),L-NMMA组大鼠肺组织中HYP含量低于BLM组(P<0.05).肺组织iNOS表达:BLM组大鼠肺组织iNOS表达明显高于对照组(P<0.05);L-NMMA组大鼠肺组织iNOS表达低于BLM组(P<0.05).肺病理形态学:对照组大鼠肺组织结构正常;BLM组肺组织出现肺泡炎症、肺间质胶原纤维增生和肺纤维化;L-NMMA组大鼠肺部炎症和肺纤维化程度明显减轻.结论 iNOS抑制剂L-NMMA在一定程度能减轻肺炎症反应和肺纤维化程度,iNOS在肺纤维化中起着重要作用.     

复方鳖甲方对肺纤维化大鼠高分辨率CT影响的实验研究

目的　研究复方鳖甲方对盐酸博莱霉素致大鼠肺纤维化的治疗作用。方法　SD雄性大鼠 5 4只 ,其中 4 5只经气管滴注盐酸博莱霉素 ,9只经气管滴注等体积的生理盐水 ,于 80d后平行观察大鼠高分辨率CT(HRCT)征象 ,行HRCT—病理对照研究。结果　肺纤维化大鼠HRCT可见肺实变 ,肺小叶间隔、间质不同程度地增厚及小叶结构变形 ,结节影 ,血管支气管束异常 ,胸膜增厚 ,交界面不规则 ,磨玻璃样密度影等 ,部分可见蜂窝肺。病理切片对照显示 ,肺组织纤维性增生 ,肺间质出现明显纤维化。复方鳖甲方能改善肺纤维化大鼠的HRCT影像 ,降低肺组织纤维性病变。结论　复方鳖甲方可能是通过影响肺结构而对肺纤维化大鼠有一定程度的治疗作用     

雄附散对抗博莱霉素诱导的大鼠肺间质纤维化的作用机制

目的探讨雄附散对大鼠肺间质纤维化干预的机制。方法将70只SD大鼠随机分为正常组,假手术组,模型组,醋酸泼尼松组（5．6mg／kg）,雄附散高、中、低剂量组（1．4g／kg、0．7g／kg、0．35g／kg）。各组大鼠于造模后第2天开始连续4周灌胃（is）,给予生理盐水（0．014L／kg）或相应药物（0．014L／kg）,28d后取右中肺组织进行HE染色和Masson染色及MDA含量、SOD和GSH-PX活性测定。结果HE染色和Masson染色均提示雄附散高剂量组肺组织无明显形态学改变,肺组织中SOD和GSH-PX酶活性明显高于其他各组（P〈0．01）,MDA含量明显低于各药物干预组（P〈0．01）。结论雄附散可能通过提高受损组织中抗氧化酶活性水平来对抗肺组织纤维化过程。     

博莱霉素诱导肺纤维化小鼠模型的建立及特征

目的探讨博莱霉素气管灌注诱导肺纤维化小鼠模型在不同时期分子生物学及组织病理学的改变。方法 6～8周龄C57BL/6小鼠60只,30只为正常对照组,30只以博莱霉素2.5 mg/kg单次气管灌注建立小鼠肺纤维化模型（模型组）,以肺组织病理学形态及基因表达水平为指标,判断模型小鼠肺纤维化发展阶段。结果正常对照组小鼠的肺组织无明显病理改变,模型组小鼠肺部有不同程度的肺泡结构破坏、炎性细胞浸润以及大量以胶原为主的细胞外基质沉积。基因表达检测结果显示:模型组灌注博莱霉素1～2周,小鼠肺组织白介素（IL）-4、IL-13较正常对照组升高,而3～5周模型组与正常对照组无差异（P>0.05）。模型组肺组织中胶原基因Colla2、Cola13、结缔组织生长因子（CTGF）、转化生长因子-β₁（TGF-β₁）均较正常对照组有不同程度的升高,与组织病理学改变一致。结论博莱霉素2.5 mg/kg单次气管灌注可成功建立肺纤维化小鼠模型;博莱霉素灌注早期以肺部炎性浸润为主,第3周时肺纤维化达到高峰,第5周开始纤维化有所缓解。     

肺气肿合并肺间质纤维化的临床探讨

目的 总结肺气肿合并肺间质纤维化的临床特点并探讨其临床意义。方法 分析5a来我院；确诊的17例肺气肿合并肺间质纤维化患者的症状、X线胸片、血气分析、肺功能、HRCT结果。结果 肺气肿合并肺间质纤维化患者多具有较长的吸烟史，临床表现介于上述两种病变之间，其肺功能测定结果不完全符合阻塞型或限制型通气功能障碍，X线及HRCT兼具二者的特点。结论 尽管肺气肿合并肺间质纤维化是两种不同的疾病，但是确实可以并存，且具有其独特的临床表现，胸部高分辨CT(HRCT)往往能为临床提供重要的诊断依据。     

麦门冬汤对大鼠肺纤维化形成阶段肺病理损害及下丘脑多巴胺、去甲肾上腺素、五羟色胺的干预作用

目的了解麦门冬汤对肺纤维化形成阶段干预作用。方法将普通级大鼠随机分为正常组、模型组、麦门冬汤组。除正常组外另两组用平阳霉素复制肺纤维化模型,其中麦门冬汤组造模后14 d用药,三组均于28 d处死后做肺脏病理组织学检查及测下丘脑多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NE）、五羟色胺（5-HT）。结果模型组肺纤维化程度明显高于正常组（P〈0.05）,麦门冬汤组明显低于模型组（P〈0.05）。模型组下丘脑NE、DA、5-HT水平高于正常组（P〈0.05）;麦门冬汤组下丘脑NE、DA、5-HT水平低于模型组（P〈0.05）。结论麦门冬汤有减少模型下丘脑NE、DA、5-HT含量,减轻其肺部病理改变的作用。     

白介素-4在博莱霉素致大鼠肺纤维模型中的表达

目的:检测IL-4在博莱霉素致大鼠肺纤维化模型中的表达,从而探讨IL-4在肺纤维化发病机制中的作用.方法:体重170～190g的雌性wistar大鼠,立即气管内灌注博莱霉素5mg/(kg·bw)建立肺纤维化模型,设立生理盐水对照组.第7、14天分别处死大鼠,收获肺组织及血清,右肺行苏木精-伊红(HE)染色,左肺经逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肺组织中IL-4mRNA的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中IL-4的水平.结果:灌注博莱霉素后第7天肺组织病变以肺泡炎为主,第14天肺内有纤维化病灶形成.模型组大鼠IL-4mRNA相对表达强度和IL-4蛋白质水平明显高于对照组,差异有显著性(P＜0.05).结论:在肺纤维化大鼠模型中IL-4的产生明显增高,IL-4在肺纤维化发病机制中具有重要作用.可将调节IL-4的产生及拮抗IL-4的作用作为肺纤维化治疗研究的新方向.     

YKL-40在肺纤维化大鼠中的动态表达

目的　观察YKL-40在博莱霉素诱导的肺间质纤维化大鼠肺组织中的表达。方法　以博菜霉素（7.5mg/kg体重）气管内注入复制大鼠肺纤维化模型。分别于第7天、14天、21天分批处死动物。通过HE染色、Masson染色判断肺组织肺泡炎及肺纤维化程度;采用免疫组化、realtime RT-PCR及Western blot测定肺组织YKL-40表达情况。 结果 光镜下清晰可见博莱霉素组大鼠肺组织肺泡炎、肺纤维化程度增加,肺泡炎在第7天与对照相比差异极显著,第14天、21天肺泡炎症减轻,但仍与对照组间差异显著;纤维化程度在第14天即与对照组有显著性差异。与对照组相比,博莱霉素各组YKL-40上调表达有时间依赖性,且主要来源于平滑肌细胞、肺泡巨噬细胞、肺泡上皮细胞及成纤维细胞。YKL-40转录水平在第7天即显著增加,蛋白水平在14 d显著高于对照组(p<0.05),21 d时与对照组相比差异极显著(p<0.01)。结论 YKL-40表达量与肺纤维化程度正相关,YKL-40可能参与肺纤维化过程。     

新型气体信号分子硫化氢在大鼠肺纤维化发病中的作用

目的:在博来霉素(Bleomycin,BLM)诱导的肺纤维化大鼠模型上,观察内源性胱硫脒-γ-裂解酶/硫化氢(CSE/H2S)体系的变化以及应用外源性H2S供体硫氢化钠(NaHS)对肺纤维化的影响,以探讨内源性H2S在肺纤维化发病中的病理生理意义.方法:(1)雄性Wistar大鼠48只,随机分为对照组、肺纤维化组(经气管内滴入BLMA5 5 mg/kg)、肺纤维化+NaHS低剂量组(腹腔注射NaHS 1.4 μmol/kg,每日两次)和肺纤维化+NaHS高剂量组(腹腔注射NaHS 7 μmol/kg,每日两次).分别于第7天、第28天取肺组织行HE染色和Masson染色,用生化法测定丙二醛(MDA)、羟脯氨酸含量,采用敏感硫电极测定血浆H2S的生成量及亚甲基蓝法测定CSE活性,用半定量RT-PCR方法测定肺组织CSE的mRNA水平.(2)以羟自由基发生系统Fe2+(5 mmol/L)/H2O2(25 mmol/L)单独及与不同浓度NaHS(10^-5、5×10^-5、10^-4、10^-3mmol/L)共同孵育离体大鼠肺组织,测定MDA含量.结果:(1)第7天纤维化组大鼠血浆H2S含量较对照组下降46%,第28天时增加25%(均P＜0.01);肺组织CSE活性在第7天时比对照组降低26%(P＜0.01),第28天时CSE活性恢复,与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05);第7天和第28天纤维化组肺组织CSE mRNA含量较对照组分别升高34%和144%(P＜0.01);第7天及第28天纤维化组肺组织MDA、羟脯氨酸含量均较对照组明显升高(P＜0.01),NaHS高剂量组和低剂量组的MDA、羟脯氨酸含量均较纤维化组显著降低,高、低剂量组间差异无统计学意义(P＞0.05).(2)Fe2+/H2O2孵育组肺组织MDA含量较对照组明显升高,经给予不同浓度NaHS处理后,MDA含量均显著下降.结论:内源性CSE/H2S体系参与了大鼠肺纤维化的病理生理过程,外源性补充H2S可能通过减轻氧化应激抑制肺纤维化的发生.     

姜黄素对博莱霉素诱导大鼠肺纤维化的保护作用

目的观察姜黄素对博莱霉素诱导大鼠肺纤维化的保护作用及其作用机制。方法 72只大鼠随机分为三组:正常对照组(气管内一次性注射生理盐水2 mL/kg)、博莱霉素组(气管内一次性注射博莱霉素5 mg/kg)和姜黄素组(气管内一次性注射博莱霉素5 mg/kg后第15天起每日腹腔注射姜黄素50 mg/kg)。分别在实验第14、17、21、28天每组各处死大鼠6只,取肺组织行苏木精-伊红(HE)和Masson染色以评价病理变化;双抗体夹心ELISA测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-10含量。结果姜黄素组第28天肺泡炎和肺纤维化程度显著轻于博莱霉素组(均P<0.05);BALF中IL-10含量显著高于博莱霉素组(P<0.05)。结论姜黄素可以减轻博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化,其保护作用可能与促进IL-10表达有关。     

瓜蒌薤白汤对大鼠肺纤维化的干预作用研究

目的 研究瓜蒌薤白汤（GLXB-D）对大鼠肺纤维化的影响。方法 采用博莱霉素（BLM）诱导大鼠肺纤维化,采用放免试剂盒检测大鼠体内Ⅲ、Ⅳ型胶原（Col-Ⅲ、Col-Ⅳ）,层粘连蛋白（LN）,透明质酸（HA）水平;采用HE和MASSON染色检测大鼠肺组织病理形态学变化。结果 与正常组相比较,模型组大鼠体质量有明显减轻,肺指数增加,差异有统计学意义（P<0.05）;与模型组相比较,GLXB-D1、GLXB-D2、GLXB-D3组和强的松组大鼠体质量有所增加,肺指数明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）。与正常组大鼠相比较,模型组大鼠血清中Col-Ⅲ、Col-Ⅳ、LN和HA的含量明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）;与模型组相比,GLXB-D1、GLXB-D2、GLXB-D3组和强的松组血清中Col-Ⅲ、Col-Ⅳ、LN和HA的含量显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 GLXB-D对BLM诱导的大鼠肺纤维化有明显治疗作用,降低大鼠血清Col-Ⅲ、Col-Ⅳ、LN、HA含量,影响细胞外基质的合成是其可能的作用机制。     

卡托普利抗大鼠肺纤维化的作用及机制

目的探讨卡托普利对肺纤维化的治疗作用及可能的机制。方法将64只雄性SD大鼠随机分为对照组、博莱霉素模型组、卡托普利治疗组、地塞米松组治疗组,每组16只。采用HE染色、Masson染色行肺泡炎、肺纤维化程度分级,分别测定各组大鼠血浆AngⅡ、转化生长因子-β1（TGF-β1）mRNA含量以及羟脯氨酸、超氧化物歧化酶、丙二醛含量,并作各组间的对比分析。结果（1）第14天时：与对照组比较,其他3组大鼠肺泡炎评分、HYP含量、AngⅡ含量、MDA含量及TGF-β1 mRNA表达水平均明显升高（P〈0.05或0.01）,SOD含量均显著降低（均P〈0.01）,仅模型组肺纤维化评分显著高于对照组（P〈0.01）;与模型组比较,卡托普利组及地塞米松组肺泡炎、肺纤维化评分及HYP含量、AngⅡ含量、MDA含量及TGF-β1 mRNA表达水平均明显降低（P〈0.05或0.01）,SOD含量均显著升高（均P〈0.01）;地塞米松组显著高于卡托普利组（P〈0.01）,卡托普利组AngⅡ含量及TGF-β1 mRNA表达水平均明显低于地塞米松组（P〈0.05或0.01）。（2）第28天时：与对照组比较,其他3组大鼠肺泡炎及肺纤维化评分、HYP含量及TGF-β1 mRNA表达水平均显著升高（均P〈0.01）,模型组和地塞米松组AngⅡ含量显著升高（均P〈0.01）,仅模型组SOD含量显著降低、MDA含量显著升高（均P〈0.01）;与模型组比较,卡托普利组及地塞米松组肺泡炎及肺纤维化评分、HYP含量、MDA含量及TGF-β1 mRNA表达水平均明显低于模型组（均P〈0.05或0.01）,SOD含量均显著升高（均P〈0.01）,卡托普利组AngⅡ含量显著降低（P〈0.01）,地塞米松组AngⅡ含量显著升高（P〈0.01）;卡托普利组TGF-β1 mRNA表达水平明显低于地塞米松组（P〈0.05）。结论卡托普利可能是通过抑制AngⅡ的生成、减少TGF-β1 mRNA的表达以及纠正氧化／抗氧化失衡而博莱霉素诱导的大鼠