CD36功能肽段对小鼠实验性矽肺组织内Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响

目的观察CD36功能肽段YRVRYLAKENITQDPEDH(93-110)对小鼠实验性矽肺纤维化是否有阻抑作用。方法将小鼠按体重随机分为4组:生理盐水组、SiO2模型组、CD36功能肽段组[YRVRYLAKENITQDPEDH(93-110)]、CD36对照肽段组[TVDGVYKVFNGKDNISKV(208-225)]。采用暴露式气管内注入法染尘,分别于7、14、21 d处死动物,测定小鼠肺脏器系数和采用免疫组织化学染色法测定肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果在染尘后14 d、21 d时,小鼠肺脏器系数和Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达明显低于SiO2模型组和CD36对照肽段组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CD36功能肽段(93-110)对小鼠实验性矽肺纤维化具有明显的抑制作用。 更多还原     

RNA干扰CD36表达对大鼠矽肺组织内Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白表达的影响

为观察RNA干扰CD36基因表达对大鼠实验性矽肺组织内Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白表达是否有抑制作用,选取健康Wistar大鼠96只,随机分为4组,即生理盐水组、SiO2模型组(10 mg SiO2/大鼠)、SiO2+Lv-shCD36(CD36 shRNA表达的重组慢病毒)组和SiO2+Lv-shCD36-NC(对照慢病毒)组。染尘后7、21、28 d处死动物,应用免疫组织化学方法测定大鼠肺组织内Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达,并采用图像分析系统进行定量分析。SiO2+Lv-shCD36组大鼠肺组织中Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白阳性着色弱于SiO2模型组和SiO2+Lv-shCD36-NC组,SiO2+Lv-shCD36组大鼠Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白的平均积分光密度值低于SiO2模型组和SiO2+Lv-shCD36-NC组,且差异有统计学意义(P<0.05)。提示RNA干扰CD36基因表达对大鼠实验性矽肺组织内Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达具有明显抑制作用。 更多还原     

血小板反应素-1的Ⅰ型重复序列功能肽段对小鼠肺纤维化的抑制作用

目的 观察血小板反应素-1的Ⅰ型重复序列(type Ⅰ)功能肽段对小鼠肺纤维化的抑制作用.方法 将小鼠随机分为6组,麻醉后采用暴露式气管内注入法给药,分别为对照组(生理盐水),模型组(1 mg/kg博莱霉素),type Ⅰ功能肽段低、高剂量组(1 mg/kg博莱霉素+100/200μgCSVTCG功能肽段),对照肽段低、高剂量组(1 mg/kg博莱霉素+100/200μgGDVTEN对照肽段).分别于不同处理后第7、14、21大处死动物,HE、VG染色进行肺组织病婵形态学观察,测定肺组织中羟脯氨酸含量.结果 不同处理后第14天type Ⅰ功能肽段低,高剂量组羟脯氨酸含量分别为(295.43±47.02)和(282.67±33.48)μg/g,与对照肽段低、高剂量组比较,羟脯氨酸含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).第21天type Ⅰ功能肽段低、高剂量组羟脯氨酸含量分别为(365.83±60.14)和(363.29±27.15)μg/g,与模型组、对照肽段低剂量组和高剂量组比较,羟脯氨酸含量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 type Ⅰ功能肽段对小鼠肺纤维化具有明显的抑制作用.     

CD36功能肽段阻抑矽肺纤维化的实验研究

目的观察CD36功能肽段YRVRYLAKENITQDPEDH(93-110)对小鼠实验性矽肺纤维化的阻抑作用。方法将小鼠按体重随机分为4组:生理盐水组、SiO2模型组、CD36功能肽段组(93-110)、CD36对照肽段组(208-225)。采用暴露式气管内注入法染尘,分别于第7、第14、第21天处死动物,HE、VG染色进行肺组织病理学形态观察,采用碱裂解法测定肺组织中羟脯氨酸含量。结果染尘7 d,病理检查表明,CD36功能肽段组小鼠肺组织肺泡炎症较SiO2模型组和CD36对照肽段组轻。小鼠羟脯氨酸含量在各组间的差异也没有统计学意义(P0.05)。在染尘后14 d、21 d时,CD36功能肽段组小鼠肺组织纤维化程度明显轻于SiO2模型组和CD36对照肽段组小鼠,羟脯氨酸含量明显低于SiO2模型组和CD36对照肽段组,差异有统计学意义(P0.05)。结论CD36功能肽段对小鼠实验性矽肺纤维化具有明显的抑制作用。     

重组胰岛素样生长因子-1对高氧性肺损伤的影响及其机制研究

目的:探讨重组胰岛素样生长因子-1(rh-IGF-1)对高氧暴露下的新生大鼠肺的影响。方法:将生后2 d的W istar大鼠随机分为4组。Ⅰ组:空气+生理盐水组;Ⅱ组:高氧+生理盐水组;Ⅲ组:高氧+地塞米松组;Ⅳ组:高氧+rh-IGF-1组。Ⅱ、Ⅲ组和Ⅳ组大鼠持续暴露于85%氧气中,Ⅰ组大鼠呼吸空气。于生后14 d取肺组织作HE染色行辐射状肺泡计数及形态定量分析,采用免疫组化方法对肺组织中I型胶原蛋白行半定量检测。结果:与Ⅱ组相比,Ⅳ组辐射状肺泡计数显著增加(P<0.05),肺泡化程度高,肺组织中I型胶原蛋白表达明显增强(P<0.05),阳性表达明显改变的主要分布在支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞和肺内间质细胞。结论:rh-IGF-1通过增加肺内胶原含量及肺泡化水平,促进肺发育,从而减轻高氧性肺损伤。     

手掌参醇提取物处理染矽尘大鼠肺纤维化及肿瘤坏死因子-α表达的变化

目的研究手掌参醇提起物对染矽尘大鼠肺纤维化及组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法将120只Wistar大鼠随机分为对照组、染矽尘组和手掌参醇提取物与SiO2联合处理组(联合处理组)。采用气管暴露法给予染矽尘组和联合处理组大鼠气管内灌注矽尘,对照组大鼠气管内则给予灌注等量生理盐水。联合处理组自染尘后第1天起每日灌胃手掌参醇提取物2ml(10g/kg),对照组和染矽尘组则给予等量生理盐水每日灌胃直至大鼠处死。天狼猩红染色法结合偏振光显微镜观察肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原合成。制作大鼠肺组织芯片,用免疫组织化学PV法检测组织芯片TNF-α的表达。结果与染矽尘组比较,联合处理组的大鼠各时间点的肺系数明显降低(P<0.01)。与染矽尘组比较,联合处理组各时间点Ⅰ胶原低于染矽尘组(P<0.01);与染矽尘组比较,联合处理组各时间点Ⅲ胶原均低于染矽尘组,14天和21天差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。与染矽尘组比较,联合处理组各时间点肺组织TNF-α的积分光密度低于染矽尘组(P<0.01)。结论手掌参醇提取物可抑制矽尘诱导的大鼠肺纤维化和大鼠肺组织TNF-α蛋白的表达。     

姜黄素对肺纤维化大鼠I型胶原蛋白和转化生长因子β1mRNA表达的影响

目的 探讨姜黄素对肺纤维化大鼠I型胶原蛋白和转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠96只,随机分为正常对照组、模型组、泼尼松治疗组(泼尼松组)、姜黄素治疗组(姜黄素组),每组24只.除正常对照组外,其余各组大鼠气管内一次性注入博莱霉素诱导肺纤维化.造模后第15天起,姜黄素组和泼尼松组分别给予姜黄素(300 mg/kg)和泼尼松(5 mg/kg),每日灌胃1次,其余2组每日给予质量分数为1%的羧甲基纤维素钠(10 ml/kg)灌胃1次,直至处死动物.各组动物分别于造模后第21、28、42、56天随机处死6只.HE、Masson染色观察肺组织病理变化,免疫组化(EnVision二步法)测定肺组织中I型胶原蛋白表达,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定肺组织mRNA的表达.结果 第42、56天姜黄素组肺纤维化程度明显低于模型组和泼尼松组,差异有统计学意义(P＜0.05);第28、42、56天姜黄素组肺组织I型胶原蛋白表达水平明显低于模型组和泼尼松组,差异有统计学意义(P＜0.05);姜黄素组21、28 d肺组织TGF-β1mRNA表达水平分别为0.61±0.09、0.48±0.16,明显低于同期模型组,差异有统计学意义(均P＜0.05);21 d姜黄素组肺组织TGF-β1mRNA表达水平明显低于泼尼松组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化形成阶段应用姜黄素干预,抑制肺纤维化的发展,疗效优于传统治疗药物泼尼松.姜黄素可抑制I型胶原蛋白的合成与沉积,降低肺组织TGF-β1mRNA的表达.     

AcSDKP经由PDGF介导的细胞外信号调节激酶1/2的调节通路在大鼠矽肺纤维化形成中的作用

探讨抗纤维化短肽N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)经由血小板源性生长因子(PDGF)介导的细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的调节通路在矽肺纤维化形成中的作用。采用一次性支气管内灌注二氧化硅(SiO2)粉尘制作矽肺大鼠模型,将其分为对照组(4周组和8周组)、矽肺模型组(4周和8周组)、AcSDKP治疗组(抗纤维化治疗组和预防治疗组)。采用贴块法进行肺成纤维细胞的原代和传代培养。HE染色观察肺组织形态学变化,Western blot法检测肺组织、肺成纤维组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白和ERK1/2及磷酸化-ERK1/2蛋白的表达以及肺组织PDGF及其受体蛋白的表达。与对照比较,矽肺大鼠肺内PDGF及其受体蛋白、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白以及磷酸化-ERK1/2蛋白表达均增强,而AcSDKP治疗组则见上述蛋白表达减弱;在培养的肺成纤维细胞,PDGF能够刺激其Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达增加,同时上调磷酸化-ERK1/2蛋白的表达,而AcSDKP则显示出与PD98059(细胞外信号调节激酶通路特异性抑制剂)相同的作用,即能够抑制PDGF刺激成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达和上调磷酸化-ERK1/2蛋白表达...     

雷帕霉素对染尘大鼠肺组织胶原蛋白表达的影响

目的探讨雷帕霉素对染矽尘大鼠肺组织胶原蛋白表达的影响。方法对50只SPF级健康雄性大鼠建立肺纤维化模型,随机分为模型组和雷帕霉素组,两组均一次性气管灌注二氧化硅(250 mg/kg);同时,分别腹腔注射生理盐水和雷帕霉毒[2μg/(kg·d)],均隔天给药,持续28 d,分别于第7、14、28、60、90天,用酶联免疫法测定血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β(TGF-β)含量,用Massson染色观察大鼠肺组织病理组织学变化,用q RT-PCR法测定肺组织中Ⅰ型和Ⅲ型胶原m RNA含量。结果大鼠肺组织Massson染色结果显示,雷帕霉素组大鼠肺纤维化较模型组严重。随着时间的延长,模型组大鼠血清中TNF-α和TGF-β逐渐升高,差异有统计学意义(P0.05)。雷帕霉素组大鼠血清中TNF-α和TGF-β随着时间的延长而升高,在60 d时降低,90 d时再次升高;除60 d外,其他时间均高于模型组(P0.05)。随着时间的延长,模型组大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原m RNA逐渐升高,且差异有统计学意义(P0.05)。雷帕霉素组大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原m RNA表达随各时间点呈降低-升高波动趋势,其中Ⅰ型胶原m RNA表达在除60 d外的各时间点均高于模型组,Ⅲ型胶原m RNA表达在7、28、90 d高于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论雷帕霉素后期给药可能通过抑制m TOR信号通路而加重染尘大鼠的肺组织纤维化程度。     

驱虫斑鸠菊对大鼠实验性矽肺纤维化干预作用

目的观察雾化吸入新疆维吾尔药驱虫斑鸠菊(VAW)对矽肺纤维化大鼠肺表面活性蛋白D(SP-D)、Ⅰ型胶原蛋白和Smad3蛋白表达的影响。方法无特定病原体级健康雄性Wistar大鼠随机分成对照组、二氧化硅(Si O2)模型组和VAW干预组,每组20只。采用一次性非暴露式气管滴注法,Si O2模型组和VAW干预组大鼠均予质量浓度为50.0 g/L Si O2混悬液1.0 m L染尘,对照组大鼠予生理氯化钠溶液1.0 m L。染尘后1 d,VAW干预组予雾化吸入质量分数为20%的VAW注射液,Si O2模型组和对照组均予雾化吸入生理氯化钠溶液,1.0 m L/次,2次/d,直至处死。各组大鼠均分别在雾化吸入干预后1、3、7和14 d各处死5只,观察肺组织病理学改变情况,采用酶联免疫吸附法检测血清中SP-D表达水平,采用免疫组织化学法检测肺组织中Ⅰ型胶原蛋白和Smad3蛋白的阳性表达。结果肺组织病理学观察显示:对照组大鼠肺组织结构正常;Si O2模型组大鼠出现肺泡炎和肺纤维化;VAW干预组大鼠肺泡炎和肺纤维化程度明显轻于Si O2模型组。Si O2模型组大鼠SP-D表达水平高于对照组[(40.48±3.58)vs(38.20±2.21)μg/L,P<0.05];VAW干预组大鼠SP-D表达水平分别与对照组和Si O2模型组比较,差异均无统计学意义[(39.38±2.25)vs(38.20±2.21)μg/L,(39.38±2.25)vs(40.48±3.58)μg/L,P>0.05];SP-D表达水平在处理方案与处理时间的交互效应上无统计学意义(P>0.05)。Si O2模型组和VAW干预组Ⅰ型胶原蛋白和Smad3蛋白的阳性表达均高于对照组(P<0.01),VAW干预组Ⅰ型胶原蛋白和Smad3蛋白的阳性表达低于Si O2模型组(P<0.017)。结论 VAW能改善Si O2所致肺泡炎及肺纤维化程度,其机制可能与抑制SP-D、Ⅰ型胶原蛋白和Smad3蛋白的表达有关。     

金丝桃苷对博来霉素诱导肺纤维化小鼠作用及机制

目的探讨金丝桃苷对博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠干预作用及机制。方法将36只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组(生理盐水)、模型组、金丝桃苷高、中、低剂量组(100、50、25 mg/kg)和强的松组(6 mg/kg),通过气管滴注博来霉素建立肺纤维化模型,连续给药28 d后处死小鼠;肺组织分别行苏木素-伊红(HE)染色、Masson's染色;免疫组化法检测肺组织中胶原蛋白Ⅰ(collagenⅠ)、collagenⅢ蛋白表达水平;用试剂盒检测肺组织中羟脯胺酸(HYP)含量;留取血清检测转化生长因子-β1(TGF-β1)含量;留取肺泡灌洗液检测白细胞介素-6(IL-6)水平。结果与对照组比较,模型组小鼠体重明显下降;与模型组比较,各剂量金丝桃苷组小鼠体重均明显增加(P0.05)。与对照组比较,模型组小鼠肺泡炎和肺纤维化积分[分别为(2.83±0.41)、(2.83±0.41)分]明显升高(P0.05);与模型组比较,金丝桃苷高、中剂量组、强的松组小鼠肺泡炎积分[分别为(1.00±1.10)、(1.67±1.03)、(1.50±1.05)分]和肺纤维化积分[分别为(1.00±0.63)、(1.33±1.03)、(1.83±0.75)分]均明显降低(P0.05)。与对照组比较,模型组小鼠肺组织collagenⅠ、collagenⅢ表达、HYP含量明显升高;与模型组比较,高剂量金丝桃苷组、强的松组小鼠肺组织中collagenⅠ、collagenⅢ表达、HYP含量明显下降。与对照组比较,模型组小鼠血清中TGF-β1含量[(182.83±11.15)μg/mL]、肺泡灌洗液中IL-6水平[(89.36±7.21)μg/mL]明显升高(P0.05);与模型组比较,高、中剂量金丝桃苷组及强的松组小鼠血清中TGF-β1含量[分别为(121.37±8.25)、(135.78±17.29)、(112.73±10.23)pg/mL]和肺泡灌洗液IL-6水平[分别为(48.25±8.39)、(71.90+7.74)、(44.45±7.15)μg/mL]均明显下降(P0.05)。结论金丝桃苷具有效改善博来霉素诱导的小鼠肺纤维化作用,其机制可能与抑制胶原分泌、抑制炎症反应有关。     

染矽尘大鼠肺组织不同时间点FasL表达与细胞凋亡

目的探讨染矽尘大鼠肺组织FasL表达及细胞凋亡在矽肺病理变化中的意义。方法将96只Wistar大鼠随机分为对照组和染矽尘组。对染矽尘组以暴露式气管内一次注入二氧化硅粉尘悬液(1 ml,0．2 g/kg)建立大鼠矽肺模型,对照组气管内注入1 ml灭菌生理盐水。分别于处理后1、3、7、14、21和28 d,每组分别取8只大鼠处死取肺组织,用组织芯片技术结合免疫组化SP法检测大鼠肺组织不同时间点FasL的表达;末端脱氨核苷酸转移酶末端标记技术(TUNEL)法检测大鼠肺组织细胞凋亡,并采用Image-Pro Plus Version 4．5 for windowsTM图像分析计算积分光密度。结果染矽尘组大鼠肺组织FasL在染矽尘后的7、14、21和28 d时,表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0．05),14 d时表达最高为157．50±23．12;染矽尘组大鼠肺组织凋亡阳性细胞在染矽尘后的1、3、7、14、21和28 d时,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0．05),7和14d,分别最高为32．95±20．40和31．07±7．15。结论矽尘能导致肺组织细胞凋亡;FasL在染矽尘大鼠肺组织多种细胞中表达并介导细胞的凋亡,凋亡细胞主要以炎性细胞为主。     

染尘大鼠Ⅰ和Ⅲ型胶原与相关细胞因子含量的变化关系

目的探讨IL-1β、TNF-α及TGF-β1在染尘矽肺大鼠肺组织内的变化和对Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的影响。方法将50只大鼠随机分为对照组、染尘组,各组于1、7、14、21、28d5个时间点分别取5只大鼠,采用气管暴露法建立大鼠矽肺模型;分别进行HE常规染色、天狼猩红染色并用Image-pro Plus Version 4.5 for WindowsTM图像分析系统进行Ⅰ、Ⅲ型胶原定量分析;肺组织内IL-1β、TNF-α、TGF-β1测定采用悬浮芯片蛋白测定法。结果Ⅰ、Ⅲ型胶原分别在第14天和第7天开始急剧增高;染尘组肺组织IL-1β的浓度在第1天达到高峰;TNF-α的表达量持续增加,在第14天出现峰值;TGF-β1第14天表达量增加并达峰值;回归分析结果显示IL-1β表达水平下降和TNF-α表达水平升高可能直接或间接导致Ⅰ型胶原的增加;IL-1β表达水平下降、TGF-β1表达水平升高可能直接或间接导致Ⅲ型胶原的增加。结论矽尘可以诱导肺组织过度表达Ⅰ、Ⅲ型胶原,并且IL-1β、TNF-α及TGF-β1可以直接或间接地增加胶原含量。     

PDTC对百草枯致肺纤维化大鼠结缔组织生长因子及Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响

目的 观察急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺组织结缔组织生长因子(CTGF)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)的动态变化及四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)的干预效果,探讨PQ致肺纤维化机制及PDTC干预作用.方法 SD大鼠随机分为对照组(6只)、PQ染毒组(56只)、PDTC干预组(46只).染毒组和干预组给予PQ(80 mg/kg)一次性灌胃后2h,染毒组给予等量生理盐水腹腔注射,PDTC干预组给予PDTC(100mg/kg)一次性腹腔注射;对照组给予生理盐水1 ml/kg灌胃后2h,给予等量生理盐水腹腔注射.于不同处理后1、3、7、14、25、56 d蛋白免疫印迹法(Western blot)测定大鼠肺组织CTGF蛋白表达;实时荧光定量多聚酶链式反应(real-time PCR)测定CTGF、Col Ⅰ、ColⅢmRNA表达水平;同时测定肺组织羟脯氨酸(hyp)含量,观察中毒大鼠的肺组织病理变化.结果 染毒组大鼠肺组织CTGF蛋白表达随时间延长而逐渐升高,3～14d升高幅度缓慢,28～56d增幅较大,各时点均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).染毒组大鼠肺组织CTGF mRNA表达水平于染毒后1d即明显升高,3～14d表达迅速升高,28～56 d维持在较高水平,各时点均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).染毒组染毒后1、3 d Col Ⅰ mRNA表达无明显变化,7d表达略微增强,14～56 d水平大幅度升高,与对照组比较,7～56 d mRNA水平明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);染毒组ColⅢmRNA水平于染毒后1d即开始升高,7d达到高峰,之后呈下降趋势,各时点均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);Masson染色可见染毒后14～28 d成纤维细胞大量增殖,胶原纤维数量逐渐增多.与染毒组比较,PDTC干预组大鼠肺组织CTGF蛋白表达降低、CTGF、Col Ⅰ、ColⅢmRNA表达下调,相应时点的差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 CTGF表达持续增高;可能通过上调Col Ⅰ、ColⅢ转录水平,增加胶原分泌和基质合成,在PQ所致肺纤维化中起重要作用;PDTC抑制了上述因子的表达,可以减轻PQ中毒大鼠的肺损伤.     

血小板反应素-1功能片段对非活化形式的转化生长因子-β1活化的抑制作用

目的 研究血小板反应素-1(trombospondin-1,TSP-1)功能片段对肺巨噬细胞分泌的非活化形式的转化生长因子(TGF)-β1(latent-TGF-β1,L-TGF-β1)活化的抑制作用.方法 对大鼠肺纤维化模型进行肺泡灌洗,取肺巨噬细胞,用TSP-1功能片段进行孵育.实验分为对照组、单纯博莱霉素组、TPSR2-3/TSP-1GS3、融合蛋白组、GST蛋白组、CSVTCG功能肽段组、GDVTEN对照肽段组和CD36抗体组.采用双重免疫荧光标记法观察TGF,-β1与CD36共定位;用酶联免疫吸附法(ELISA)法测定肺巨噬细胞培养上清液中总TGF-β1和活化TGF-β1的量.结果 TSP-1功能片段各组及CD36抗体组的TGF-β1与CD36共定位的阳性荧光颗粒明显少于单纯博莱霉素组及各对照组.TSR2-3/TSP-1GST融合蛋白组活化TGF-β1含量为(14.82±4.68)pg/ml、CSVTCG功能肽段组为(10.28±.3.65)pg/ml,明显低于单纯博莱霉素组和相应对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).TSR2-3/TSP-1GST融合蛋白组和CSVTCG功能肽段组的活化TGF-β1占总TGF-β1的百分比均明显低于单纯博莱霉素组及各对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).各组总TGF-β1的量无明显差异.结论 TSP-1功能片段通过抑制L-TGF-β1/TSP-1蛋白复合物与CD36的结合进而阻抑L-TGF-β1的活化.     

稀土氧化钕粉尘染毒大鼠不同时间点Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维含量及IL-12表达的研究

目的 探讨稀土氧化钕粉尘暴露对大鼠不同时间点肺组织中Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维含量和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白介素-12(IL-12)表达的变化。方法 选用125只SPF级成年SD雄性大鼠,体重(200±16)g,随机分为染尘组和对照组,采用气管非暴露插管灌注法建立模型,分别用稀土氧化钕粉尘悬液0.8 m L(50 mg/m L)和0.9%生理盐水0.8 m L进行一次性染尘。分别于染尘后第3、7、14、21和28 d各处死15只染尘组和10只对照组大鼠,收集BALF;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别测定染尘组和对照组大鼠BALF上清液中IL-12含量,肺组织分别进行HE染色、天狼猩红染色,运用Image-Pro Plus Version 4.5for Windows TM图象分析系统对肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维含量进行定量分析。结果 稀土氧化钕粉尘致实验大鼠肺组织纤维化过程中可见Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的大量增生,染尘后早期主要以Ⅰ型胶原纤维增生为主。其中Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的表达量明显增加,与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。肺组织病理学观察证实,染尘大鼠早期肺组织以炎症反应为主,且随染尘时间的延长炎症反应程度呈现加重的趋势。染尘后不同时间点大鼠BALF上清液中IL-12出现先减少后增加,在第7 d达到最低值后又呈现增加趋势,但均高于对照组(P<0.05)。结论 稀土氧化钕粉尘诱导大鼠肺纤维化过程中Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维含量增多,且分布范围扩大。同时BALF上清液中IL-12出现高表达,表明IL-12的含量变化与稀土氧化钕粉尘致大鼠肺纤维化发生发展密切相关。     

稀土氧化钕粉尘染毒大鼠不同时间点Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维含量及IL-12表达的研究

目的 探讨稀土氧化钕粉尘暴露对大鼠不同时间点肺组织中Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维含量和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白介素-12(IL-12)表达的变化。方法 选用125只SPF级成年SD雄性大鼠,体重(200±16)g,随机分为染尘组和对照组,采用气管非暴露插管灌注法建立模型,分别用稀土氧化钕粉尘悬液0.8 m L(50 mg/m L)和0.9%生理盐水0.8 m L进行一次性染尘。分别于染尘后第3、7、14、21和28 d各处死15只染尘组和10只对照组大鼠,收集BALF;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别测定染尘组和对照组大鼠BALF上清液中IL-12含量,肺组织分别进行HE染色、天狼猩红染色,运用Image-Pro Plus Version 4.5for Windows TM图象分析系统对肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维含量进行定量分析。结果 稀土氧化钕粉尘致实验大鼠肺组织纤维化过程中可见Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的大量增生,染尘后早期主要以Ⅰ型胶原纤维增生为主。其中Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的表达量明显增加,与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。肺组织病理学观察证实,染尘大鼠早期肺组织以炎症反应为主,且随染尘时间的延长炎症反应程度呈现加重的趋势。染尘后不同时间点大鼠BALF上清液中IL-12出现先减少后增加,在第7 d达到最低值后又呈现增加趋势,但均高于对照组(P<0.05)。结论 稀土氧化钕粉尘诱导大鼠肺纤维化过程中Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维含量增多,且分布范围扩大。同时BALF上清液中IL-12出现高表达,表明IL-12的含量变化与稀土氧化钕粉尘致大鼠肺纤维化发生发展密切相关。     

灯盏细辛对大鼠肺纤维化的保护作用及其与强的松的效果对比

[目的]观察灯盏细辛对肺纤维化大鼠肺组织炎症程度、胶原纤维形成的影响,探讨灯盏细辛对肺纤维化的干预作用及其机制. [方法]将40只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、灯盏细辛组、强的松组.模型组以博来霉素气管内注入建立模型,对照组以生理盐水气管内注入,灯盏细辛组以博来霉索气管内注入并以灯盏细辛进行干预治疗,强的松组给予强的松干预作为对照,于d 29将大鼠处死并检测.以HE染色和细胞核颗粒计数观察肺组织炎症程度,以胶原染色检测总胶原蛋白,以免疫组化法检测Ⅰ型胶原纤维,以实时荧光定量PCR法检测TGF-β1 mRNA. [结果]灯盏细辛组相比模型组在炎症程度、总胶原纤维、Ⅰ型胶原纤维、TGF-β1 mRNA的表达均有下降. [结论]灯盏细辛可抑制肺内炎症反应、总胶原纤维和Ⅰ型胶原纤维的合成,在博来霉素致大鼠肺纤维化的过程中具有一定的保护作用,但其保护作用弱于强的松.     

双氢青蒿素对矽肺大鼠肺组织 TGF-b1､Smad2/3､Col-Ⅰ蛋白表达的影响

目的 观察双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对矽肺大鼠肺组织中转化生长因子-b1(TGF-b1)?Smad2/3?Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)表达的影响?方法 60只雄性SD大鼠随机分成对照组?模型组?DHA组,每组20只?模型组和DHA组给予1ml二氧化硅(SiO2)混悬液造模,对照组给予1ml生理盐水造模,造模后第2天开始灌胃给药,DHA组每只大鼠给予DHA75mg/kg灌胃,模型组和对照组给予1ml/100g生理盐水灌胃,每周给药6d,连续给药4周,并于第7?14?28天处死大鼠取肺组织,检测肺脏器系数,观察肺组织病理学变化,免疫印迹(Western blot)法检测TGF-b1?Smad2/3?Col-Ⅰ的蛋白表达?结果 与对照组相比,DHA组肺系数升高,差异具有统计学意义(P<0. 01);与模型组相比,DHA组肺系数降低,差异有统计学意义(P<0. 05);苏木素-伊红(HE)染色法显示DHA 组肺泡内的巨噬细胞和中性粒细胞低于模型组? Western blot实验结果显示,与模型组相比,DHA组TGF-b1?Smad2/3?Col-Ⅰ蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P<0. 05)?结论 DHA可以降低矽尘大鼠肺系数,减轻大鼠肺组织炎症,减少肺泡内巨噬细胞和中性粒细胞浸润,抑制TGF-b1?Smad2/3?Col-Ⅰ蛋白的表达,起到抑制肺纤维化作用,其机制可能与调控TGF-b1/Smad信号通路有关?     

两种矽肺造模方法比较

目的 比较两种矽肺造模方法的优劣,并探讨一次性气管滴注法造模的最佳时间。方法 口鼻暴露染尘小鼠20只,气管滴注染尘小鼠20只,分别于染尘后第7、14、21、28天处死;对照组小鼠5只,正常饲养28d处死。检测各时间节点小鼠肺湿重、脏器系数、肺组织羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量,并观察肺组织病理改变。结果 口鼻暴露法染尘21、28d小鼠肺湿重及脏器系数,7、14、21、28d小鼠肺纤维化评分,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),染尘28d小鼠肺组织形成矽结节;气管滴注染尘后第14、21、28天小鼠肺湿重、脏器系数,第28天小鼠HYP含量,第7、14、21、28天小鼠肺纤维化评分,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),染尘后第21天形成多个矽结节,第28天矽结节融合成大片状。结论 暴露法染尘28d小鼠开始形成矽结节,滴注法染尘后第21天小鼠即可完成矽肺造模。