瘦素对人甲状腺乳头状癌K1细胞增殖.迁移及侵袭的影响

目的 探讨不同浓度的瘦素对人甲状腺乳头状癌K1细胞增殖.迁移.侵袭能力的影响。方法 分别用0ng/ml(空白对照组).10ng/ml.50ng/ml.100ng/ml.125ng/ml,5组不同浓度的瘦素处理人甲状腺乳头状癌K1细胞,MTT实验检测不同浓度瘦素处理后细胞的增殖能力.划痕实验检测细胞迁移能力.Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果 MTT实验检测结果显示,瘦素对K1细胞的增殖没有影响(P>0.05);不同浓度的瘦素处理K1细胞后24h后划痕实验迁移率分别为:40.201%.47.383%.59.950%.68.732%.79.306%;48h后划痕实验迁移率分别为:49.398%.74.192%.86.733%.87.795%.90.005%。随瘦素浓度增加与处理时间延长,划痕内面面积缩小,迁移率增加(P<0.05)。Transwell实验结果显示,穿出聚碳酸酯膜的细胞数依次增多(P<0.05)。结论 随处理时间的延长和瘦素浓度的增加,人甲状腺乳头状癌K1细胞增殖能力不受影响,K1细胞迁移和侵袭能力均呈上升趋势。     

miR-144对甲状腺乳头状癌细胞增殖及细胞周期的影响

目的：研究甲状腺乳头状癌（PTC）细胞株中miR-144的表达水平,探讨miR-144不同表达水平对甲状腺癌细胞增殖能力及细胞周期的影响。方法：通过qPCR检测人PTC细胞K1、TPC-1和人甲状腺细胞Nthy-ori 3-1中miR-144的表达水平。K1细胞分别转染miR-144 mimics、miR-144 inhibitor及阴性对照（NC）。应用MTT增殖实验、克隆形成实验和流式细胞术分别检测miR-144不同表达水平对K1细胞生物学功能的影响。Western blot检测细胞周期蛋白Cyclin D1的表达情况。结果：PTC细胞中miR-144相对表达量与正常甲状腺细胞相比显著降低（P＜0.05）,其中K1细胞中miR-144的表达量最低。在K1细胞株中过表达miR-144后,细胞的增殖能力、单克隆形成能力显著下降,并且Cyclin D1表达水平降低,细胞被阻滞在G0/G1期（P＜0.05）。而miR-144表达下调则得到相反的结果。结论：miR-144在PTC细胞中低表达。通过抑制PTC细胞增殖、阻滞细胞周期,miR-144可能在PTC的发生发展中扮演抑癌基因的角色。     

微RNA-152靶向调控内质网脂质Raft关联蛋白1对甲状腺乳头状癌细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨微RNA-152(miR-152)对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制.方法 将对数生长期PTC TPC-1细胞随机分为空白对照组、miR-con组(转染miRNA-mimics阴性对照)和miR-152组(转染miR-152-mimics),另取对数生长期正常甲状腺细胞株Nthy...     

miR-637靶向AKT3对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞侵袭和转移能力的影响

目的:探讨甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中miR-637和AKT3基因的靶向关系,及miR-637对TPC-1细胞侵袭转移能力的影响.方法:利用生物信息学软件预测miR-637与AKT3之间的靶向关系,并采用双荧光素酶报告实验进行验证.TPC-1细胞分别转染miR-637 mimic(miR-637组)和miR-637阴...     

SQSTM1在甲状腺乳头状癌中的表达及其对甲状腺乳头状癌侵袭、迁移和增殖能力的影响

目的:探究SQSTM1在甲状腺乳头状癌中的表达及其对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1侵袭和迁移能力的影响。方法:采集2019年4至6月郑州大学第一附属医院收治的21例甲状腺乳头状癌患者切除手术的癌组织和癌旁组织,通过逆转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）方法检测组织中SQSTM1的表达情况;通过慢病毒转染在TPC-1细胞中...     

CircRNA EZH2通过调控miR-30c-5p促进前列腺癌细胞增殖和迁移

目的 探究circRNA EZH2通过调控miR-30c-5p对前列腺癌细胞的增殖和迁移的影响及其相关作用机制。方法 通过TCGA数据库分析circRNA EZH2在前列腺癌组织中的表达差异及生存曲线;转染siRNA敲降前列腺癌LNCaP细胞中的circRNA EZH2表达后,CCK-8实验和划痕实验观察LNCaP细胞增殖和迁移,RT-qPCR和Western blot法测定miR-30c-5p、JAK1和PI3K蛋白的表达。结果 在前列腺癌组织中circRNA EZH2的表达显著上调（P <0.000 1）,且高表达circRNA EZH2的患者生存率降低;沉默circRNA EZH2的LNCaP细胞较正常LNCaP细胞的增殖和迁移能力下降（P <0.000 1）,miR-30c-5p表达增高（P <0.000 1）,JAK1表达降低（P <0.000 1）,PI3K信号受抑制。结论 EZH2在前列腺癌中高表达,通过调控miR-30c-5p激活PI3K信号通路促进前列腺癌LNCaP细胞的增殖和迁移。     

碘酸钾和双酚A对甲状腺乳头状癌细胞增殖的影响

目的   观察碘酸钾和双酚A对人甲状腺乳头状癌细胞BHP10-3增殖的影响。方法   采用10-3~10-10mol/L碘酸钾和10-3~10-10mol/L双酚A(BPA),10-7mol/L碘酸钾+10-8mol/L双酚A培养BHP10-3细胞后,采用CCK-8细胞增殖活性法测定细胞增殖,采用流式细胞仪分析甲状腺乳头状癌细胞周期,采用western-blot印迹法和RT-PCR法分别检测细胞增殖周期调控基因（Cyclin D1）在蛋白和mRNA水平的表达。结果   与对照组细胞相比,10-7mol/L碘酸钾组、10-8mol/L双酚A组以及10-7mol/L碘酸钾联合10-8mol/L双酚A组,细胞吸光光度值增加（P<0.05）; G0-G1期细胞比例减少,  S期细胞比例增加(P<0.05);CyclinD1蛋白和mRNA的表达量均增加（P<0.05）。结论   碘酸钾和双酚A在一定浓度范围内可以促进甲状腺乳头状癌细胞的增殖。     

miR-3614-5p在卵巢癌细胞中的表达及对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响

目的 分析微小RNA(microRNA)-3614-5p在卵巢癌细胞中的表达,探讨其对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响及分子机制。方法 OncoLnc在线数据库分析miR-3614-5p表达水平与卵巢癌患者生存期的关系。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测miR-3614-5p在卵巢癌细胞系(SKOV-3、OVCAR-3、A2780、HO-8910、OC3)和正常卵巢上皮细胞系(IOSE80)中的表达。以miR-3614-5p表达最低的细胞系为转染对象,分别转染化学合成的miR-3614-5p模拟物(miR-3614-5p组)和miR-NC(对照组)。分别采用CCK-8法和Transwell迁移实验检测高表达miR-3614-5p对细胞增殖和迁移能力的影响。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因法预测并验证miR-3614-5p的靶基因。qRT-PCR和Western blot法检测miR-3614-5p对靶基因表达的影响。结果 miR-3074-5p表达水平较高的卵巢癌患者生存期长于miR-3074-5p表达水平较低的患者(P<0.05)。与IOSE80细胞比较,miR-3614-5p在卵巢癌细胞系中的表达显著减少(P<0.01),其在OVCAR-3细胞中表达最少(P<0.01)。与对照组比较,miR-3614-5p组OVCAR-3细胞增殖能力显著降低(P<0.05)、细胞迁移能力显著降低(P<0.01)。miR-3614-5p与G蛋白α抑制剂2(G protein alpha inhibiting activity polypeptide 2,GNAI2)mRNA的3′非翻译区存在结合位点(P<0.01)。高表达miR-3614-5p可显著干扰GNAI2基因的表达(P<0.01)。结论 miR-3614-5p在卵巢癌细胞系中的表达降低,其可通过干扰靶基因GNAI2的表达,抑制卵巢癌细胞的增殖和迁移过程,miR-3614-5p可能是治疗卵巢癌的新靶点。     

Hsa-miR-29c-5p在卵巢透明细胞癌中的表达及对细胞增殖迁移的影响

目的 探讨Hsa-miR-29c-5p在卵巢透明细胞癌中的表达及对细胞增殖迁移的影响.方法 采用qRT-PCR检测人卵巢透明细胞癌细胞株(ES-2)及人正常卵巢上皮细胞株(IOSE80)中Hsa-miR-29c-5p表达.将ES-2分为转染组和对照组,转染组通过siRNA转染法转染Hsa-miR-29c-5p mimi...     

硝呋齐特对甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的 探讨硝呋齐特对甲状腺乳头状癌细胞BCPAP和TPC-1的增殖、迁移及侵袭的影响。方法 用不同浓度（0、1.25、2.5、5、10、20 μmol/L）硝呋齐特处理BCPAP和TPC-1细胞,采用MTT法和克隆形成实验观察硝呋齐特对细胞增殖的影响;采用Hoechst 33258染色及流式分选技术观察对细胞凋亡的影响;通过Western blot法检测硝呋齐特处理后BCPAP细胞凋亡相关蛋白及迁移侵袭相关蛋白的表达情况;采用Transwell小室观察细胞迁移和侵袭能力。结果 硝呋齐特0、1.25、2.5 μmol/L处理BCPAP细胞,0、1.25 μmol/L处理TPC-1细胞,24、48、72 h后细胞增殖力均未受到明显抑制（ P>0.05）;硝呋齐特5、10、20 μmol/L处理BCPAP细胞,10、20 μmol/L处理TPC-1细胞,24、48、72 h后细胞增殖力均受到明显抑制（ P<0.05）,且随浓度增加和时间延长其抑制作用逐渐增强;此外,2.5、5 μmol/L硝呋齐特对TPC-1细胞的增殖抑制作用分别从72 h和48 h起效（ P<0.05）。暴露于10 μmol/L硝呋齐特10 d后,BCPAP和TPC-1细胞的克隆形成均受到抑制（ P<0.05）。10 μmol/L硝呋齐特处理48 h后,BCPAP和TPC-1细胞均出现细胞核改变,凋亡小体出现;流式分析显示BCPAP及TPC-1凋亡细胞增加（ P<0.05）。10 μmol/L硝呋齐特处理BCPAP细胞48 h,促凋亡蛋白CC-3、Bax的表达增加（ P<0.05）,而抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少（ P<0.05）;促迁移侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9的表达减少（ P<0.05）,MMPs家族抑制剂——金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP）-2表达增加（ P<0.05）。10 μmol/L硝呋齐特处理BCPAP和TPC-1细胞48 h,BCPAP细胞及TPC-1细胞迁移率与侵袭率均下降（ P<0.05）。结论 硝呋齐特于体外抑制人甲状腺癌细胞系BCPAP和TPC-1的增殖,通过上调CC-3和Bax蛋白的表达诱导细胞凋亡,通过降低MMP-2和MMP-9蛋白的表达阻断细胞的迁移与侵袭。     

miR-1301对口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响

目的 口腔鳞状细胞癌(OSCC)发病率高,在全世界恶性肿瘤中居第六位。越来越多的证据表明,microRNAs在调控OSCC中起着关键作用,本研究旨在探讨微小RNA (miRNA)-1301对口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响。 方法 人正常口腔上皮细胞系(HGF-1)和口腔鳞状细胞癌细胞株(YD-38、MK-1)购自美国典型培养库(ATCC);采用实时定量PCR(RT-PCR)技术检测口腔鳞状细胞癌组织和癌细胞中miR-1301的水平;采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测调控miR-1301的表达水平后OSCC细胞的增殖能力;划痕愈合实验检测调控miR-1301的水平后细胞的迁移能力。 结果 和正常口腔上皮细胞HGF-1(4.32±0.86)相比,OSCC细胞YD-38(2.25±0.24)和MK-1(3.32±0.85)中miR-1301的水平显著下调(均P<0.05);稳定转染miR-1301模拟物后继续培养细胞24、48、72 h,细胞的增殖水平分别为(0.26±0.02)、(0.32±0.03)、(0.42±0.04),miR-NC组的水平为(0.30±0.02)、(0.52±0.05)、(0.89±0.07),转染miR-1301模拟物后,细胞的增殖能力显著下调(均P<0.05),而在12 h时2组细胞增殖情况比较差异无统计学意义(P>0.05);与miR-NC组(1.00±0.10)相比,转染miR-1301模拟物(0.65±0.05)后,YD-38细胞的迁移能力显著下调(P<0.05),而转染miR-1301抑制剂则有相反的效果。 结论 miR-1301在口腔鳞状细胞癌组织和细胞中显著下调,转染miR-1301模拟物能够抑制OSCC细胞的增殖和迁移能力,miR-1301可能为口腔鳞状细胞癌的治疗提供新的分子靶点。      

miR-21对人喉鳞癌细胞Hep2迁移侵袭能力的影响

目的：探讨微小RNA‐21（miR‐21）对人喉鳞癌细胞Hep2迁移、侵袭能力的影响。方法用脂质体Lipofectami‐neTM2000将miR‐21抑制剂和miR‐21NC转入人喉鳞癌细胞Hep2中,48h后,运用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室法检测细胞侵袭能力,蛋白质印迹法检测人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因（PTEN）／磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）／蛋白激酶B（Akt）的激活情况,以及基质金属蛋白酶（MMP）2、MMP9与伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白（RECK）的表达。结果与miR‐21NC比较,miR‐21抑制剂能明显降低Hep2细胞活力[（0．688±0．043）vs．（0．375±0．012）],抑制细胞迁移能力[（6．57±0．02）μmvs．（20．49±2．18）μm]及细胞侵袭能力[（100．7±10．2）vs．（46．8±4．3）],差异均有统计学意义（P＜0．01）;同时miR‐21抑制剂能明显下调PI3K、MMP2及MMP9的表达（P＜0．01）,降低Akt的磷酸化水平（P＜0．01）,并上调PTEN及RECK的表达（P＜0．01）。结论miR‐21抑制剂能明显抑制人喉鳞癌细胞Hep2的迁移、侵袭能力,可能与PTEN／PI3K／Akt信号通路有关。     

miR-155在甲状腺乳头状癌组织及血浆中的表达

目的:检测miR-155在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)组织及血浆中的表达差异,评价其对PTC的诊断价值?方法:应用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)检测52例PTC?32例结节性甲状腺肿患者组织中miR-155的表达水平及对应患者血浆?30例同期于本院行体检健康者血浆miR-155表达水平?应用受试者工作曲线(ROC)分析血浆miR-155的诊断价值,并分析其在 PTC 血浆与癌组织中表达的相关性?结果:miR-155在PTC与结节性甲状腺肿组织中的相对表达量分别为8.43 ± 6.14 和1.14 ± 0.41,PTC组高于结节性甲状腺肿组,差异有统计学意义(P < 0.01)?PTC组?结节性甲状腺肿组?对照组血浆miR-155表达量分别为3.35 ± 1.85?1.30 ± 0.30和1.41 ± 0.24,PTC组高于结节性甲状腺肿组及对照组,差异有统计学意义(P < 0.01)?PTC组与对照组区分的ROC曲线下面积(AUC)为0.932(95%CI:0.851~0.970,P < 0.001),PTC组与结节性甲状腺肿组区分的AUC为0.887(95%CI:0.811~0.961,P < 0.001)?miR-155在PTC组织表达与血浆中的表达呈正相关(r=0.589,P < 0.000 1)?其表达量与患者临床病理参数无相关性(P > 0.05)?结论:PTC患者血浆中miR-155表达量升高,有可能成为一种新的血液学标志物用于PTC的诊断?     

甲状腺乳头状癌组织中miR-129表达情况及其与临床病理特征的相关性分析

目的 分析甲状腺乳头状癌(Papillary thyroid carcinoma,PTC)组织中微小RNA-129(miR-129)的表达情况,并探讨miR-129与PTC患者临床病理特征的相关性。方法 选取本院2010年11月至2014年2月收治的125例PTC患者作为研究对象,采用回顾性分析法分析所有患者的临床资料,收集125例PTC患者其125份癌组织(研究者)及125份癌旁正常甲状腺组织标本(对照组)作为研究对象,所有组织标本均行miR-129 mRNA检测,分析PTC组织中miR-129的表达与患者临床病理特征的关系。结果 ①PTC患者PTC癌变组织中miR-129 mRNA表达水平低于癌旁正常组织(P<0.05);②miR-129的表达与PTC患者其年龄、性别、肿瘤大小情况均无明显关系(P>0.05),miR-129的表达与PTC患者临床分期、淋巴结转移及病理分级的表达有显著关系(P<0.05);③经单因素分析得出：临床分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移及病理分级2级及miR-129水平低表达时患者生存时间均显著缩短(P<0.05);④经多因素Cox分析得出：临床分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移及病理分级2级及miR-129水平低表达均为影响PTC患者预后的独立危险因素(HR=2.219,3.511,2.323,2.102)(P<0.05)。结论 miR-129在PTC患者组织中以低水平表达,临床分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移及病理分级2级时miR-129低表达率均上升,miR-129低表达PTC患者预后较差。     

miR-30a-3p通过靶向调控BAFF在肾癌细胞迁移和血管生成能力中的作用研究

目的:研究微小RNA(miR)-30a-3p对肾细胞癌(RCC)细胞的转移和血管生成表型的影响。方法:结合癌症基因组图谱(TCGA)数据库提供的RCC中miR-30a-3p表达数据分析miR-30a-3p在RCC细胞系中的表达特征。结合生物信息学网站预测miR-30a-3p与B细胞激活因子(BAFF)3’非翻译区(3’-UTR)的结合。将RCC细胞系ACHN和786O分为LV-miR-30a-3p组[感染过表达miR-30a-3p的慢病毒载体]、LV-NC组[感染慢病毒载体阴性对照]、LV-miR-30a-3p+pcDNA-BAFF组[联合感染LV-miR-30a-3p和过表达BAFF的载体(pcDNA-BAFF)]以及LV-miR-30a-3p+pcDNA-EV组[联合感染LV-miR-30a-3p和空载体(pcDNA-EV)]。Transwell迁移小室法检测细胞的迁移能力,小管形成实验检测细胞血管生成能力。qPCR检测miR-30a-3p的表达。Western blot检测BAFF、促血管生成蛋白血管内皮生长因子A(VEGFA)的蛋白表达。双荧光素酶基因报告实验检测ACHN细胞中...     

YAP在人甲状腺乳头状癌中的表达及对细胞生长的影响

目的：探讨Yes相关蛋白（YAP）在人甲状腺乳头状癌中的表达及对甲状腺乳头状癌细胞生长的影响。方法收集57例该院普通外科行手术切除的甲状腺乳头状癌及对应癌旁组织标本,所有患者均经病理诊断确认,免疫组织化学染色检测甲状腺乳头状癌及癌旁组织中的YAP表达,统计分析YAP蛋白与肿瘤临床病理资料间的相关性。siRNA沉默甲状腺乳头状癌B‐CPAP细胞中YAP基因表达,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）及流式细胞技术检测沉默YAP后B‐CPAP细胞增殖及凋亡水平变化。结果 YAP蛋白在甲状腺乳头状癌组织中表达水平显著高于对应癌旁组织（P＜0．05）;且YAP蛋白表达与TNM分期和肿瘤体积呈显著正相关（P＜0．05）,沉默YAP基因可显著降低B‐CPAP细胞的增殖能力,并促使细胞发生凋亡（P＜0．05）。结论YAP在甲状腺乳头状癌组织中高表达并与肿瘤不良临床病理特征有关,下调YAP基因可显著抑制甲状腺乳头状癌细胞生长。     

miR-150在甲状腺乳头状癌中的表达水平及意义

目的检测miR-150在甲状腺乳头状癌的表达,探究miR-150在甲状腺乳头状癌的早期筛查和诊断方面的作用。方法选取内蒙古医科大学附属医院甲状腺病变患者110例。采用Real-time PCR方法检测miR-150在甲状腺癌组织和非癌组织间的表达,记录患者相关的临床病理资料,比较甲状腺癌组织和非癌组织间miR-150的表达差异。结果当设置甲状腺乳头状癌组织中mi R-150表达为0.00±0.00时,结节性甲状腺肿、结节性甲状腺肿伴腺瘤样增生、结节性甲状腺肿伴慢性淋巴细胞性甲状腺炎的表达为1.88±0.48、1.50±0.35、1.37±0.34。miR-150在甲状腺乳头状癌组织中的表达明显著低于状腺非癌组织(P0.01),但在伴有淋巴结癌转移的标本中稍高于非淋巴结癌转移的标本,但未发现有统计学意义。miR-150表达的AUC为0.867,其诊断甲状腺乳头状癌的灵敏性为76.2%,特异性为76.7%。结论 miR-150结合其他的临床指标可能成为诊断甲状腺乳头状癌的一种新的肿瘤标志物,对区分甲状腺乳头状癌和结节性甲状腺肿时具有较好的诊断价值,其表达与病灶转移与否之间没有明显的相关性。     

甲状腺乳头状癌BRAF基因突变及表达的临床意义分析

目的：研究探讨甲状腺乳头状癌BRAF基因突变及表达的临床意义.方法：随机抽取2008年6月-2013年9月本院接诊的106例甲状腺肿瘤以及结节性甲状腺肿患者作为研究对象,将其中58例甲状腺乳头状癌患者设为观察组,其余设为对照组,采用DNA直接测序法和聚合酶链反应对所有患者的甲状腺组织进行BRAF基因检测,采用免疫组织化学法检测患者B-rM蛋白表达情况,观察两组患者BRAF基因突变情况、B-rM蛋白表达情况,分析其与甲状腺乳头状癌的相关性.结果：观察组患者基因突变率48.3％显著高于对照组0％,组间比较差异显著（P＜0.05）;观察组患者B-rM蛋白阳性率63.8％,显著高于对照组6.3％,二者比较差异显著（P＜0.05）,具有统计学意义.结论：甲状腺乳头状癌患者的BRAF基因突变率 与B-rd蛋白表达水平均显著升高,BRAF基因突变在临床检测乳头状癌具有重要意义,对甲状腺肿瘤的性质判断具有一定的作用.     

MiR-491-5p过表达对人鼻咽癌HONE-1细胞增殖和迁移的影响

目的：探讨微小RNA-491-5p (miR-491-5p)过表达对人鼻咽癌HONE-1细胞增殖和迁移的影响,为研究鼻咽癌的发病机制和靶向治疗提供依据。方法：将人鼻咽癌HONE-1细胞分为对照组（转染对照质粒）和miR-491-5p组（转染miR-491-5p质粒）。采用荧光显微镜观察2组鼻咽癌HONE-1细胞转染效率,CCK-8法检测2组鼻咽癌HONE-1细胞增殖活性,Transwell小室实验检测2组鼻咽癌HONE-1细胞的迁移细胞数,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测2组鼻咽癌HONE-1细胞中波形蛋白和上皮钙黏素mRNA表达水平,Western blotting法检测2组鼻咽癌HONE-1细胞中波形蛋白和上皮钙黏素蛋白表达水平。结果：与对照组比较,作用24、48和72 h时miR-491-5p组鼻咽癌HONE-1细胞增殖活性（t=2.832,P=0.047 3;t=4.522,P=0.001 4;t=9.308,P<0.01）和迁移细胞数（t=9.639, P<0.01）明显降低;与对照组比较,miR-491-5p组鼻咽癌HONE-1细胞中波形蛋白mRNA...     

eEF2K对胶质瘤细胞增殖及迁移能力的影响

目的 探讨eEF2K对胶质瘤细胞增殖及迁移能力的影响。方法 采用Westernblot法和实时荧光定量PCR检测eEF2K在胶质瘤细胞U87和正常星形胶质细胞HA1800中蛋白及m RNA的表达。在胶质瘤U87细胞上进行慢病毒转染,以下调eEF2K的表达,用Westernblot法验证转染效率。实验分为两组:转染阴性对照空病毒载体的为阴性对照组,转染eEF2K-sh RNA低表达载体的为实验组。稳转细胞株构建成功后,采用CCK-8细胞增殖实验、细胞划痕实验检测胶质瘤U87细胞的增殖能力和迁移能力。结果 与正常星形胶质细胞相比,胶质瘤细胞中eEF2K的蛋白表达量明显升高(P<0.001),m RNA的表达水平有所升高(P<0.01)。与阴性对照组相比,下调eEF2K的表达后可以抑制胶质瘤细胞的增殖能力(P<0.001)和迁移能力(P<0.01)。结论 eEF2K在胶质瘤细胞中呈高表达,下调eEF2K的表达能够抑制胶质瘤U87细胞的增殖能力和迁移能力。