间隙连接Cx32 mRNA、Cx43 mRNA及其蛋白产物在肝细胞肝癌中的表达

目的：探讨间隙连接基因Ｃｘ３２ｍＲＮＡ、Ｃｘ４３ｍＲＮＡ及其蛋白产物在肝细胞癌（ｈｅｐａｔｏｃｅｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＨＣＣ）发生的重要意义。方法：应用Ｓ－Ｐ免疫组织化学法、原位杂交和流式细胞仪分析技术，研究６１例ＨＣＣ、１４例正常肝组织以及肝癌细胞系ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ－７７２１、正常肝细胞系ＱＺＧ中，Ｃｘ３２ｍＲＮＡ、Ｃｘ４３ｍＲＮＡ及其蛋白产物的表达规律。结果：Ｃｘ３２蛋白在ＨＣＣⅠ、Ⅱ、Ⅲ级和正常肝组织中的阳性率分别为５５．６％、４２．１％、１８．２％和９２．９％；Ｃｘ３２蛋白在ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ－７７２１和ＱＺＧ中阳性细胞计数率分别为１．９％、１．７％和９９．０％。Ｃｘ４３蛋白在ＨＣＣⅠ、Ⅱ、Ⅲ级和正常肝组织中的阳性率分别为４４．４％、２６．３％、１２．１％和７８．６％。Ｃｘ４３蛋白在ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ－７７２１和ＱＺＧ中阳性细胞计数率分别为７．３％、２．３％和９９．１％。Ｃｘ３２、Ｃｘ４３在ＨＣＣ各级和正常肝组织中差异有显著性（Ｐ＜０．０１），在肝癌细胞系ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ－７７２１和正常肝细胞系ＱＺＧ中阳性细胞计数率差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。原位杂交显示，Ｃｘ３２ｍＲＮＡ在ＨＣＣⅠ、     

c－erbB－2蛋白和表皮生长因子受体在肝脏病变中的表达

对１８４例乙型肝炎、肝硬变和肝细胞癌（ＨＣＣ）及２９例正常肝组织的标本作了ＡＢＣ法染色，观察其ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白和表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的表达情况。３６％（４８／１３４）的慢性肝炎、肝硬变和ＨＣＣ组织中有ＥＧＦＲ表达，主要定位于血窦内皮。良、恶性病变肝组织之间在ＥＧＦＲ表达强度上无显著差别，提示ＥＧＦＲ可能与慢性肝脏病变中血窦内皮的增生有关。在正常肝，仅少数标本（５／２９）中见到ｃ－ｅｒｂＢ－２微弱表达；在ＨＢＶ相关的慢性肝脏病变，所有标本中均检测到ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白，主要定位于肝小多角细胞（ＳＰＬＣ）、小细胞性不典型增生（ＳＣＤ）及小管状化生（ＤＭ）的肝细胞；ＨＣＣ细胞中ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白阳性较弱。这提示ｃ－ｅｒｂＢ－２基因的活化与人ＨＣＣ发生有关。其作用机制可能是促进ＳＰＬＣ向ＳＣＤ的转化及促进ＳＣＤ的进展。ｃ－ｅｒｂＢ－２与ＨＢｘＡｇ表达的密切关联提示这种原癌基因的活化可能也与ＨＢＶＸ基因有关。     

抗核心脂域McAb对LPS体外诱导细胞释放IL-1及其mRNA表达的影响

采用细胞因子活性检测，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ及ＲＴ－ＰＣＲ等方法，在体外研究了抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ（ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４）对ＬＰＳ诱导人外周血单核细胞（ｈＰＢＭＣ）释放ＩＬ－１及其ｍＲ－ＮＡ表达水平的影响。结果表明，ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４在体外有抑制ＬＰＳ诱导细胞释放ＩＬ－１的作用；Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ及ＲＴ－ＰＣＲ结果证实，这３株ＭｃＡｂ能降低ＩＬ－１ｍＲＮＡ表达的水平；提示抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ可通过与ＬＰＳ的结合而中和ＬＰＳ作用于效应细胞，从而降低或阻碍了效应细胞中ＩＬ－１ｍＲＮＡ的表达，达到抑制细胞释放ＩＬ－１的作用。     

抗细菌核心糖脂域McAb对LPS体外诱导细胞释放TNF－α和IL－6及其mRNA表达的影响

用细胞因子活性检测，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法，在体外研究了抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ（ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４）对ＬＰＳ诱导人外周血单核细胞（ｈＰＢＭＣ）释放ＴＮＦ－α和ＩＬ－６及其ｍＲＮＡ表达水平的影响。结果表明，ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４在体外有抑制ＬＰＳ诱导细胞释放ＴＮＦ－α和ＩＬ－６的作用；Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ结果证实，这３株ＭｃＡｂ能分别降低细胞ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达的水平；提示抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ可能通过与ＬＰＳ的结合而中和ＬＰＳ，从而降低或阻碍了效应细胞炎性细胞因子ｍＲＮＡ的表达，达到降低相应细胞因子的作用。     

4种癌基因mRNA在胃癌组织中的表达及意义

应用原位分子杂交（ＩＳＨ）技术，检测８８例胃癌组织中Ｋ－ｒａｓ、Ｈ－ｒａｓ、Ｃ－ｍｙｃ和肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３（Ｈ１）ｍＲＮＡ．其阳性结果分别为７８．４％、７０％、５８％和３８．６％，胃癌癌旁移行区正常粘膜和正常胃粘膜上皮的阳性率分别为１８．２％、１７％、１９．３％、２１．６％和０、０、０、３／５，与肿瘤区相比较，除ｎｍ２３外差异均非常显著（Ｐ＜０．０１）。Ｋ－ｒａｓ、Ｈ－ｒａｓｍＲＮＡ表达在在细胞膜内侧，Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ主要表达在细胞核内，ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达在胞浆内。４种癌基因表达与组织学类型无关，ｎｍ２３－Ｈ１的表达与胃癌病人有无淋巴结转移有关（Ｐ＜０．０１）。     

中国人中发现一例Charcot—Marie—Tooth病连接蛋白32基？…

目的 了解中国人进行性腓骨肌萎缩症（Ｃｈａｒｃｏｔ－Ｍａｒｉｅ－Ｔｏｏｔｈ ｄｉｓｅａｓｅ，ＣＭＴ）连接蛋白３２（ｃｏｎｎｅｘｉｎ３２，Ｃｘ３２）基因外显子２的突变情况。方法 对６例无亲缘关系的，无重复的ＣＭＴ１患者和１０例无亲缘关系的ＣＭＴ２患者进行ＳＳＣＰ分析，对有异常者进行测序，根据突变点序列设计合适的内切酶，对５０名正常对照进行酶切分析。结果 在１例ＣＭＴ１患者发生了Ｇｌｙ２１Ａｓｐ（６２     

人肝癌及肝硬变中IGF－2及HBxAg表达的对比研究

对６０例肝细胞癌、癌旁肝组织和４７例肝硬变石蜡切片进行ＩＧＦ－２和ＨＢｘＡｇ免疫组化染色。结果表明，在ＨＢｘＡｇ阳性的肝癌和肝硬变中ＩＧＦ－２阳性率分别为１００％（３２／３２例）和９４．６％（３５／３７例），而ＨＢｘＡｇ阴性组分别为８２．１％（２３／２８例）和６０％（６／１０例）。ＩＧＦ－２在肝癌中的阳性强度明显高于癌旁肝和肝硬变。ＩＧＦ－２的分布形态有：（１）胞浆包涵体样、（２）全胞浆、（３）核内分布三种。癌旁肝及肝硬变中可见小多角细胞（ＳＰＬＣ）呈ＩＧＦ－２和ＨＢｘＡｇ阳性。对ＩＧＦ－２在肝癌、癌旁肝和肝硬变中表达的意义及其与ＨＢｘＡｇ的关系以及ＳＰＬＣ的性质进行了讨论。     

抗核心脂碱McAb对LPS体外诱导细胞释放IL—1及其mRNA表达的影响

采用细胞因子活性检测，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ及ＲＴ－ＰＣＲ等方法，在体外研究了抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ（ＥＬ１，ＥＬ３和３Ｈ４）对ＬＰＳ诱导人外周血单核细胞释放ＩＬ－１及其ｍＲＮＡ表达水平的影响。结果表明，ＥＬ１，ＥＬ３和３Ｈ４在体外有抑制ＬＰＳ诱导细胞释放ＩＬ－１的作用；Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ及ＲＴ－ＰＣＲ结果证实，这３株ＭｃＡｂ能降低ＩＬ－１ ｍＲＮＡ表达的水平；提示抗细菌核心糖脂域Ｍ     

老年慢性乙型肝炎患者肝组织内Pre－S2蛋白的表达及意义

用免疫组织化学方法和单克隆抗体检测５７例老年慢性乙肝患者肝组织内Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ，并与６３例非老年患者进行比较。老年组Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白总阳性率为７５．４％（４３／５７），非老年组为５４．０％（３４／６３），两组差异显著。老年组Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白阳性细胞数非常显著地高于非老年组，膜型Ｐｒｅ－Ｓ２阳性率９３．０％（４０／４３），Ｐｒｅ－Ｓ２与ＨＢｓＡｇ符合占９１．２％（５２／５７）。４３例Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白阳性标本中血清ＨＢｅＡｇ阳性５３．５％（２３／４３），ＨＢｅＡｂ阳性４１．９％（１８／４３）。认为老年慢性乙肝肝内Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白表达高于非老年的，Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白免疫反应与ＨＢｓＡｇ相似并可能在ＨＢｓＡｇ免疫特性中起作用。     

高胆固醇血症大鼠LDL受体与apoA－1mRNA的水平变化及苯甲酸雌二醇对其影响

本文研究了实验性高胆固醇血症大鼠肝及小肠中低密度脂蛋白（ＬＤＬ）受体ｍＲＮＡ和载脂蛋白（ａｐｏ）Ａ－１ｍＲＮＡ的水平变化以及苯甲酸雌二醇（ＥＢ）对二者的影响。发现高脂（ＨＣ）组肝及小肠ＬＤＬ受体ｍＲＮＡ水平分别低于正常组５０％和６０％（Ｐ＜０．０５），小肠ａｐｏＡ－１ｍＲＮＡ水平低于正常组５８％（Ｐ＜０．０５），此时血清总胆固醇（ＴＣ）及ＬＤＬ胆固醇（ＬＤＬ－ｃ）均明显高于正常组（Ｐ＜０．０１），血清ａｐｏＡ－１低于正常组（Ｐ＜０．０５）。ＨＣ＋ＥＢ组血清ＴＣ及ＬＤＬ－ｃ明显低于ＨＣ组，而肝ＬＤＬ受体ｍＲＮＡ水平则显著高于ＨＣ组，为ＨＣ组的３．５倍（Ｐ＜０．００２）。结果提示：（１）高胆固醇负荷时细胞可通过转录水平下行调节ＬＤＬ受体；（２）小肠可能在ａｐｏＡ－１的代谢中起重要作用；（３）ＥＢ可能通过诱导肝ＬＤＬ受体基因表达而降血脂。     

广西地区肝癌中c—myc和N—ras癌基因的原位表达？…

目的：分析了广西地区地癌中ｃ－ｍｙｃ、Ｎ－ｒａｓ癌基因的表达与乙型肝病毒（ＨＢＶ）感染的关系及其在肝癌发生中的作用。方法：应用原位ｃＤＮＡ－ＲＮＡ杂交方法和免疫组化方法检测３１例广西地区肝癌和相应癌旁组织中ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ、Ｎ－ｒａｓｍＲＮＡ和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｘＡｇ。结果：肝癌及癌旁均有较高的ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ癌基因的表达。检出率都在８５％以上，其在不同发化程度肝癌中的表达差异无显著性意义     

人肝癌细胞GHC－3表面抗原性质的研究

以人肝庙细胞株ＧＨＣ－３细胞为抗原，免疫制备获得抗人肝癌细胞膜单克隆抗体ＨＬＭ＿３（ＨＬＭ＿３－ＭｃＡｂ）．应用ＨＬＭ＿３－ＭｃＡｂ研究分析肝瘤细胞表面抗原性质及其对ＧＨＣ－３细胞的生物效应，结果表明：ＨＬＭ＿３－ＭｃＡｂ可抑制已铺展的ＧＨＣ－３细胞生长；辣根过氧化物酶结合法探测受ＭｃＡｂ作用的细胞ＣｏｎＡ受体和ｒａｓ瘤基因产物ｐ２１．反应均明显减弱；交叉－阻断测试抗原及ＣｏｎＡ受体发现，无论是细胞先与ＭｃＡｂ结合后再与ＣｏｎＡ反应，抑或先与ＣｏｎＡ反应后再与ＭｃＡｂ结合，都显示ＧＨＣ－３细胞的膜抗原与腹表面的ＣｏｎＡ受体有密切关系。进一步作糖化学分析，从高效薄层色谱（ＨＰＴＬＣ）区带和扫描初步显示为不完全分化的中性糖脂。     

食管癌及癌旁组织中EGR-1、c-fos、cyclin D1的表达

目的：研究ＥＧＲ－１、ｃ－ｆｏｓ、ｃｙｃｌｉｎＤ１３种基因ｍＲＮＡ及其相应蛋白在人食管癌癌变过程中的表达水平及其相关性,并探讨其与食管癌的发生、发展及生物学行为的关系。方法：原位杂交法检测４７例食管鳞状细胞癌及其癌旁、上切缘中３种基因的ｍＲＮＡ、免疫组化ＳＡＢＣ法检测蛋白表达水平。结果：３种基因原位杂交、免疫 化阳性表达产物均分别定位于胞浆及胞核中,ＥＧＲ－１ｍＲＮＡ、ｃｆｏｓｍＲＮＡ、ｃｙｃｌｉ     

连接蛋白基因Cx26的一个可能的新启动区

目的 探讨人类连接蛋白基因２６（ｃｏｎｎｅｘｉｎ ２６,Ｃｘ２６）的调控机理。方法 对Ｃｘ２６基因转译起始点上游的一个ＤＮａｓｅ－１超敏区片段１．６ｋｂ进行序列分析和ＣＡＴ报告基因分析。结果 Ｃｘ２６－１．６ｋｂ片段具有启动子功能。结论 Ｃｘ２６－１．６ｋｂ中含有２个ＧＴ盒（分别位于－６１５８ｂｐ和－６２１３ｂｐ）,１个ＴＴＡＡＡ盒位于－６２３７ｂｐ,这是在人类Ｃｘ２６基因中新发现的第２个启动区。     

空肠弯曲菌HSP60家庭成员的鉴定

用针对ＨＳＰ６０保守区的二株单抗ＩＬＨ９和ＭＬ－３０进行了Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ和ＥＬＩＳＡ试验，发现空肠弯曲菌ＣＪ－Ｓ１３１株４３ｋＤ通道蛋白属ＨＳＰ６０家庭成员，命名其为空弯菌ＨＳＰ４３。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和薄层扫描显示ＨＳＰ４３是主要菌体蛋白。虽然ＨＳＰ极端保守，但用ＣＪ－Ｓ１３１ｌｙｓａｔｅ免疫小鼠事，发现最早诱导的抗体是针对ＨＳＰ４３的，并且这种抗体活性在随后８０ｄ的观察期间一直     

淋巴瘤凋亡调节基因bcl—x mRNA及蛋白的表达

目的 探讨凋亡调节基因ｂｃｌ－ｘ在淋巴瘤细胞凋亡调控和肿瘤发生中的作用及在淋巴瘤诊断中的价值。方法 收集３０例新鲜标本和１０９例存蜡块（均包括淋巴反应性增生和Ｔ、Ｂ常见类型淋巴瘤）,用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和免疫组化枸橼酸－微波－ＡＢＣ法分别观察ｂｃｌ－ｘ ｍＲＮＡ和其蛋白的表达及分布。结果 ＲＴ－ＰＣＲ显示３０例新鲜标本中均有ｂｃｌ－ｘ的转录,其中２９例可见ｂｃｌ－ｘ条带,１３例出     

人巨细胞病毒单克隆抗体的研制检定和应用

采用人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＡＤ１６９株作为免疫原，制备出１３株鼠－鼠杂交瘤细胞系。对其中的６株进行了检定．免疫印迹试验结果表明：单克隆抗体（ＭｃＡｂ）７Ｂ４、７Ｄ７、７Ｅ１１、８Ｅ８和８Ｄ６相对应的ＨＣＭＶ多肽分子量分别为４６、１５０、３８、５１７２和６５ｋＤ．ＨＣＭＶ感染人胚肺二倍体细胞（２ＢＳ）后不同时间制成抗原片，与ＭｃＡｂ作间接免疫荧光试验。结果表明：ＭｃＡｂ８Ｂ８相应的病毒多肽为即刻早期抗原，其它５株ＭｃＡｂ相应的病毒多肽均为晚期抗原，６株ＭｃＡｂ等量混合后，标上辣根过氧化物酶，用于ＩｇＭ抗体捕获法ＥＬＩＳＡ（ＭａｃＥＬＩＳＡ）中，并与间接ＥＬＩＳＡ（ＩＥＬＩＳＡ）同时检测ＨＣＭＶ－ＩｇＭ．在未经选择的１００份脐带血中，两法均为阳性的３份，两法均为阴性的９４份；ＭａｃＥＬＩＳＡ阳性而ＩＥＬＩＳＡ阴性的２份血清的特异性试验证明，ＨＣＭＶ－ＩｇＭ确为阳性．ＩＥＬＩＳＡ阳性而ＭａｃＥＬＩＳＡ阴性的１份血清的特异性试验证明，它是由ＲＦ引起的假阳性。     

定量测定IL—4和IFN—γmRNA的RT—竞争PCR法及其 …

目的 建立测定ＩＦＮ－γｍＲＮＡ和ＩＬ－ｍＲＮＡ和ＲＴ－竞争ＰＣＲ方法，探讨体外诱生条件并作临床初步应用。方法 用自行设计和制备的ＩＦＮ－γ ＣＤＮＡ和ＩＬ－４ ｅＤＮＡ竞争模板，作ＲＴ－竞争ＰＣＲ，对健康人经ＰＭＡ和ｃａｌｃｉｕｍ ｉｏｎｏｐｈｏｒｅ（钙离子载体）诱导的ＰＢＭＣ、１１例健康人和１３例哮喘患者ＰＢＭＣ作ＩＦＮ－γ ｍＲＮＡ和ＩＬ－４ ｍＲＮＡ定量测定。结果 在建立了准确的定量测定ｍ     

红景天甙对缺氧状态下兔肺动脉平滑肌细胞增殖和c—fos,c— …

目的：研究红景天甙对缺氧（２－３％）状态下兔肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）增殖、ＤＮＡ合成、细胞周期和ｃ－ｆｏｓ、ｘ－ｍｙｃ原癌基因表达的影响。方法：应用细胞培养，四唑盐比色试验（ＭＴＴ），「＾３Ｈ」－胸腺嘧啶核苷（「＾３Ｈ」－ＴｄＲ）掺入、细胞周期测定和斑 交的方法。结果：发现缺氧２４ｈ可直接刺激ＰＡＳＭＣ，使ＭＴＴ之ＯＤ值增加９５％，「＾３Ｈ」－ＴｄＲ的掺入量增加１４０％；在缺氧的ＰＡＳＭＣ培     

分泌抗rHuIL—6McAb杂交瘤细胞系的建立及其应用研究

应用常规方法建立了４株稳定分泌抗重组人ＩＬ－６（ｒＨｕＩＬ－６）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）小鼠杂交瘤细胞系１Ｈ３、２Ａ１０、３Ａ３和４Ｂ１。其中，１Ｈ３为ＩｇＧ２ｂ（Ｋ），２Ａ１０为ＩｇＧ１（Ｋ），３Ａ３和４Ｂ１为ＩｇＧ２ａ（Ｋ）。４株ＭｃＡｂ特异性强，与细胞因子ＩＬ－１β、ＩＬ－３、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α、ＧＭ－ＳＣＦ、ＩＣＡＭ－１，以及受体菌菌体蛋白成分均无交叉反应。间接ＥＬＩＳＡ测定小鼠腹水ＭｃＡ