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1.
间隙连接Cx32 mRNA、Cx43 mRNA及其蛋白产物在肝细胞肝癌中的表达 总被引:10,自引:0,他引:10
目的:探讨间隙连接基因Cx32mRNA、Cx43mRNA及其蛋白产物在肝细胞癌(hepatocelularcarcinoma,HCC)发生的重要意义。方法:应用S-P免疫组织化学法、原位杂交和流式细胞仪分析技术,研究61例HCC、14例正常肝组织以及肝癌细胞系HHCC、SMMC-7721、正常肝细胞系QZG中,Cx32mRNA、Cx43mRNA及其蛋白产物的表达规律。结果:Cx32蛋白在HCCⅠ、Ⅱ、Ⅲ级和正常肝组织中的阳性率分别为55.6%、42.1%、18.2%和92.9%;Cx32蛋白在HHCC、SMMC-7721和QZG中阳性细胞计数率分别为1.9%、1.7%和99.0%。Cx43蛋白在HCCⅠ、Ⅱ、Ⅲ级和正常肝组织中的阳性率分别为44.4%、26.3%、12.1%和78.6%。Cx43蛋白在HHCC、SMMC-7721和QZG中阳性细胞计数率分别为7.3%、2.3%和99.1%。Cx32、Cx43在HCC各级和正常肝组织中差异有显著性(P<0.01),在肝癌细胞系HHCC、SMMC-7721和正常肝细胞系QZG中阳性细胞计数率差异有显著性(P<0.01)。原位杂交显示,Cx32mRNA在HCCⅠ、 相似文献
2.
c-erbB-2蛋白和表皮生长因子受体在肝脏病变中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
对184例乙型肝炎、肝硬变和肝细胞癌(HCC)及29例正常肝组织的标本作了ABC法染色,观察其c-erbB-2蛋白和表皮生长因子受体(EGFR)的表达情况。36%(48/134)的慢性肝炎、肝硬变和HCC组织中有EGFR表达,主要定位于血窦内皮。良、恶性病变肝组织之间在EGFR表达强度上无显著差别,提示EGFR可能与慢性肝脏病变中血窦内皮的增生有关。在正常肝,仅少数标本(5/29)中见到c-erbB-2微弱表达;在HBV相关的慢性肝脏病变,所有标本中均检测到c-erbB-2蛋白,主要定位于肝小多角细胞(SPLC)、小细胞性不典型增生(SCD)及小管状化生(DM)的肝细胞;HCC细胞中c-erbB-2蛋白阳性较弱。这提示c-erbB-2基因的活化与人HCC发生有关。其作用机制可能是促进SPLC向SCD的转化及促进SCD的进展。c-erbB-2与HBxAg表达的密切关联提示这种原癌基因的活化可能也与HBVX基因有关。 相似文献
3.
采用细胞因子活性检测,Northernblot及RT-PCR等方法,在体外研究了抗细菌核心糖脂域McAb(EL1、EL3和3H4)对LPS诱导人外周血单核细胞(hPBMC)释放IL-1及其mR-NA表达水平的影响。结果表明,EL1、EL3和3H4在体外有抑制LPS诱导细胞释放IL-1的作用;Northernblot及RT-PCR结果证实,这3株McAb能降低IL-1mRNA表达的水平;提示抗细菌核心糖脂域McAb可通过与LPS的结合而中和LPS作用于效应细胞,从而降低或阻碍了效应细胞中IL-1mRNA的表达,达到抑制细胞释放IL-1的作用。 相似文献
4.
用细胞因子活性检测,Northernblot方法,在体外研究了抗细菌核心糖脂域McAb(EL1、EL3和3H4)对LPS诱导人外周血单核细胞(hPBMC)释放TNF-α和IL-6及其mRNA表达水平的影响。结果表明,EL1、EL3和3H4在体外有抑制LPS诱导细胞释放TNF-α和IL-6的作用;Northernblot结果证实,这3株McAb能分别降低细胞TNF-α和IL-6mRNA表达的水平;提示抗细菌核心糖脂域McAb可能通过与LPS的结合而中和LPS,从而降低或阻碍了效应细胞炎性细胞因子mRNA的表达,达到降低相应细胞因子的作用。 相似文献
5.
应用原位分子杂交(ISH)技术,检测88例胃癌组织中K-ras、H-ras、C-myc和肿瘤转移抑制基因nm23(H1)mRNA.其阳性结果分别为78.4%、70%、58%和38.6%,胃癌癌旁移行区正常粘膜和正常胃粘膜上皮的阳性率分别为18.2%、17%、19.3%、21.6%和0、0、0、3/5,与肿瘤区相比较,除nm23外差异均非常显著(P<0.01)。K-ras、H-rasmRNA表达在在细胞膜内侧,C-mycmRNA主要表达在细胞核内,nm23-H1mRNA表达在胞浆内。4种癌基因表达与组织学类型无关,nm23-H1的表达与胃癌病人有无淋巴结转移有关(P<0.01)。 相似文献
6.
中国人中发现一例Charcot—Marie—Tooth病连接蛋白32基?… 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 了解中国人进行性腓骨肌萎缩症(Charcot-Marie-Tooth disease,CMT)连接蛋白32(connexin32,Cx32)基因外显子2的突变情况。方法 对6例无亲缘关系的,无重复的CMT1患者和10例无亲缘关系的CMT2患者进行SSCP分析,对有异常者进行测序,根据突变点序列设计合适的内切酶,对50名正常对照进行酶切分析。结果 在1例CMT1患者发生了Gly21Asp(62 相似文献
7.
对60例肝细胞癌、癌旁肝组织和47例肝硬变石蜡切片进行IGF-2和HBxAg免疫组化染色。结果表明,在HBxAg阳性的肝癌和肝硬变中IGF-2阳性率分别为100%(32/32例)和94.6%(35/37例),而HBxAg阴性组分别为82.1%(23/28例)和60%(6/10例)。IGF-2在肝癌中的阳性强度明显高于癌旁肝和肝硬变。IGF-2的分布形态有:(1)胞浆包涵体样、(2)全胞浆、(3)核内分布三种。癌旁肝及肝硬变中可见小多角细胞(SPLC)呈IGF-2和HBxAg阳性。对IGF-2在肝癌、癌旁肝和肝硬变中表达的意义及其与HBxAg的关系以及SPLC的性质进行了讨论。 相似文献
8.
采用细胞因子活性检测,Northern blot及RT-PCR等方法,在体外研究了抗细菌核心糖脂域McAb(EL1,EL3和3H4)对LPS诱导人外周血单核细胞释放IL-1及其mRNA表达水平的影响。结果表明,EL1,EL3和3H4在体外有抑制LPS诱导细胞释放IL-1的作用;Northern blot及RT-PCR结果证实,这3株McAb能降低IL-1 mRNA表达的水平;提示抗细菌核心糖脂域M 相似文献
9.
用免疫组织化学方法和单克隆抗体检测57例老年慢性乙肝患者肝组织内Pre-S2蛋白和HBsAg、HBcAg,并与63例非老年患者进行比较。老年组Pre-S2蛋白总阳性率为75.4%(43/57),非老年组为54.0%(34/63),两组差异显著。老年组Pre-S2蛋白阳性细胞数非常显著地高于非老年组,膜型Pre-S2阳性率93.0%(40/43),Pre-S2与HBsAg符合占91.2%(52/57)。43例Pre-S2蛋白阳性标本中血清HBeAg阳性53.5%(23/43),HBeAb阳性41.9%(18/43)。认为老年慢性乙肝肝内Pre-S2蛋白表达高于非老年的,Pre-S2蛋白免疫反应与HBsAg相似并可能在HBsAg免疫特性中起作用。 相似文献
10.
本文研究了实验性高胆固醇血症大鼠肝及小肠中低密度脂蛋白(LDL)受体mRNA和载脂蛋白(apo)A-1mRNA的水平变化以及苯甲酸雌二醇(EB)对二者的影响。发现高脂(HC)组肝及小肠LDL受体mRNA水平分别低于正常组50%和60%(P<0.05),小肠apoA-1mRNA水平低于正常组58%(P<0.05),此时血清总胆固醇(TC)及LDL胆固醇(LDL-c)均明显高于正常组(P<0.01),血清apoA-1低于正常组(P<0.05)。HC+EB组血清TC及LDL-c明显低于HC组,而肝LDL受体mRNA水平则显著高于HC组,为HC组的3.5倍(P<0.002)。结果提示:(1)高胆固醇负荷时细胞可通过转录水平下行调节LDL受体;(2)小肠可能在apoA-1的代谢中起重要作用;(3)EB可能通过诱导肝LDL受体基因表达而降血脂。 相似文献
11.
目的:分析了广西地区地癌中c-myc、N-ras癌基因的表达与乙型肝病毒(HBV)感染的关系及其在肝癌发生中的作用。方法:应用原位cDNA-RNA杂交方法和免疫组化方法检测31例广西地区肝癌和相应癌旁组织中c-myc mRNA、N-rasmRNA和HBsAg、HBxAg。结果:肝癌及癌旁均有较高的c-myc,N-ras癌基因的表达。检出率都在85%以上,其在不同发化程度肝癌中的表达差异无显著性意义 相似文献
12.
人肝癌细胞GHC-3表面抗原性质的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以人肝庙细胞株GHC-3细胞为抗原,免疫制备获得抗人肝癌细胞膜单克隆抗体HLM_3(HLM_3-McAb).应用HLM_3-McAb研究分析肝瘤细胞表面抗原性质及其对GHC-3细胞的生物效应,结果表明:HLM_3-McAb可抑制已铺展的GHC-3细胞生长;辣根过氧化物酶结合法探测受McAb作用的细胞ConA受体和ras瘤基因产物p21.反应均明显减弱;交叉-阻断测试抗原及ConA受体发现,无论是细胞先与McAb结合后再与ConA反应,抑或先与ConA反应后再与McAb结合,都显示GHC-3细胞的膜抗原与腹表面的ConA受体有密切关系。进一步作糖化学分析,从高效薄层色谱(HPTLC)区带和扫描初步显示为不完全分化的中性糖脂。 相似文献
13.
食管癌及癌旁组织中EGR-1、c-fos、cyclin D1的表达 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:研究EGR-1、c-fos、cyclinD13种基因mRNA及其相应蛋白在人食管癌癌变过程中的表达水平及其相关性,并探讨其与食管癌的发生、发展及生物学行为的关系。方法:原位杂交法检测47例食管鳞状细胞癌及其癌旁、上切缘中3种基因的mRNA、免疫组化SABC法检测蛋白表达水平。结果:3种基因原位杂交、免疫 化阳性表达产物均分别定位于胞浆及胞核中,EGR-1mRNA、cfosmRNA、cycli 相似文献
14.
目的 探讨人类连接蛋白基因26(connexin 26,Cx26)的调控机理。方法 对Cx26基因转译起始点上游的一个DNase-1超敏区片段1.6kb进行序列分析和CAT报告基因分析。结果 Cx26-1.6kb片段具有启动子功能。结论 Cx26-1.6kb中含有2个GT盒(分别位于-6158bp和-6213bp),1个TTAAA盒位于-6237bp,这是在人类Cx26基因中新发现的第2个启动区。 相似文献
15.
空肠弯曲菌HSP60家庭成员的鉴定 总被引:2,自引:1,他引:1
用针对HSP60保守区的二株单抗ILH9和ML-30进行了Western blotting和ELISA试验,发现空肠弯曲菌CJ-S131株43kD通道蛋白属HSP60家庭成员,命名其为空弯菌HSP43。SDS-PAGE和薄层扫描显示HSP43是主要菌体蛋白。虽然HSP极端保守,但用CJ-S131lysate免疫小鼠事,发现最早诱导的抗体是针对HSP43的,并且这种抗体活性在随后80d的观察期间一直 相似文献
16.
淋巴瘤凋亡调节基因bcl—x mRNA及蛋白的表达 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 探讨凋亡调节基因bcl-x在淋巴瘤细胞凋亡调控和肿瘤发生中的作用及在淋巴瘤诊断中的价值。方法 收集30例新鲜标本和109例存蜡块(均包括淋巴反应性增生和T、B常见类型淋巴瘤),用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化枸橼酸-微波-ABC法分别观察bcl-x mRNA和其蛋白的表达及分布。结果 RT-PCR显示30例新鲜标本中均有bcl-x的转录,其中29例可见bcl-x条带,13例出 相似文献
17.
采用人巨细胞病毒(HCMV)AD169株作为免疫原,制备出13株鼠-鼠杂交瘤细胞系。对其中的6株进行了检定.免疫印迹试验结果表明:单克隆抗体(McAb)7B4、7D7、7E11、8E8和8D6相对应的HCMV多肽分子量分别为46、150、38、5172和65kD.HCMV感染人胚肺二倍体细胞(2BS)后不同时间制成抗原片,与McAb作间接免疫荧光试验。结果表明:McAb8B8相应的病毒多肽为即刻早期抗原,其它5株McAb相应的病毒多肽均为晚期抗原,6株McAb等量混合后,标上辣根过氧化物酶,用于IgM抗体捕获法ELISA(MacELISA)中,并与间接ELISA(IELISA)同时检测HCMV-IgM.在未经选择的100份脐带血中,两法均为阳性的3份,两法均为阴性的94份;MacELISA阳性而IELISA阴性的2份血清的特异性试验证明,HCMV-IgM确为阳性.IELISA阳性而MacELISA阴性的1份血清的特异性试验证明,它是由RF引起的假阳性。 相似文献
18.
定量测定IL—4和IFN—γmRNA的RT—竞争PCR法及其 … 总被引:2,自引:1,他引:1
目的 建立测定IFN-γmRNA和IL-mRNA和RT-竞争PCR方法,探讨体外诱生条件并作临床初步应用。方法 用自行设计和制备的IFN-γ CDNA和IL-4 eDNA竞争模板,作RT-竞争PCR,对健康人经PMA和calcium ionophore(钙离子载体)诱导的PBMC、11例健康人和13例哮喘患者PBMC作IFN-γ mRNA和IL-4 mRNA定量测定。结果 在建立了准确的定量测定m 相似文献
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红景天甙对缺氧状态下兔肺动脉平滑肌细胞增殖和c—fos,c— … 总被引:20,自引:0,他引:20
目的:研究红景天甙对缺氧(2-3%)状态下兔肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖、DNA合成、细胞周期和c-fos、x-myc原癌基因表达的影响。方法:应用细胞培养,四唑盐比色试验(MTT),「^3H」-胸腺嘧啶核苷(「^3H」-TdR)掺入、细胞周期测定和斑 交的方法。结果:发现缺氧24h可直接刺激PASMC,使MTT之OD值增加95%,「^3H」-TdR的掺入量增加140%;在缺氧的PASMC培 相似文献
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分泌抗rHuIL—6McAb杂交瘤细胞系的建立及其应用研究 总被引:1,自引:0,他引:1
应用常规方法建立了4株稳定分泌抗重组人IL-6(rHuIL-6)单克隆抗体(McAb)小鼠杂交瘤细胞系1H3、2A10、3A3和4B1。其中,1H3为IgG2b(K),2A10为IgG1(K),3A3和4B1为IgG2a(K)。4株McAb特异性强,与细胞因子IL-1β、IL-3、IL-8、TNF-α、GM-SCF、ICAM-1,以及受体菌菌体蛋白成分均无交叉反应。间接ELISA测定小鼠腹水McA 相似文献