肺癌端粒酶活性、p53、PCNA蛋白表达的联合检测及其临床意义

目的 探讨端粒酶活性p53基因和增殖细胞核抗原（PCNA）在肺癌发生发展中的作用，以及端粒酶与临床病理特点及p53,PCNA蛋白之间的关系。方法 TRAP法检测59例肺癌和35例癌旁正常组织中端粒酶活性，采用免疫组织化学法检测44例肺癌组织和35例癌旁正常组织中p53和增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白的表达，并对端粒酶活性与临床病理特征以及p53PCNA蛋白表达的关系进行分析。结果 肺癌组织端粒酶活性,p53和PCNA蛋白阳性率分别为81．3％（48／59）、77．2％（34／44）、79．5％（35／44）；癌旁正常组织端粒酶活性,p53和PCNA蛋白阳性率分别为20．0％（7／35）、8．6％（3／35）、14．3（5／35），肺癌组织显著高于癌旁正常组织，P＜0．01，肺癌组织不同的病理类型之间、TNM各期之间以及不同的细胞分化程度之间端粒酶活性的阳性率未发现明显的差异（P＞0．05）；端粒酶活性与p53,PCNA蛋白表达之间无明显相关性。结论 端粒酶活化参与各型、各期和不同分化程度肺癌的发生发展；端粒酶在肺癌组织高表达和正常肺组织低表达的特性，有望使端粒酶成为肺癌诊断的1种标志物；p53和PCNA均参与肺癌的发生发展过程；端粒酶与p53和PCNA无明显相关性，提示肺癌是由多基因参与的疾病。     

肝细胞癌端粒酶活性及hTERT mRNA表达与术后早期复发的关系

目的：研究肝细胞癌端粒酶活性及人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA表达与肝细胞癌术后早期复发的关系。方法：采用ELISA—TRAP法检测60例肝癌组织及其癌旁组织端粒酶活性，RT—PCR法检测hTERT mRNA表达，5例正常肝脏组织作为对照。分析端粒酶活性及hTERT mRNA表达与临床病理之间的关系。结果：肝癌组织端粒酶活性及hTERT mRNA表达阳性率分别为86．7％（52／60）及90％（54／60），癌旁组织端粒酶活性及hTERT mRNA表达阳性率分别为40％（24／60）及43．3％（26／60）。正常肝脏组织均未检测到端粒酶活性及hTERT mRNA表达。癌旁组织端粒酶活性及hTERT mRNA表达与术后早期复发及包膜浸润、门静脉侵犯、肝内转移等恶性肿瘤的恶性生物学行为有关。结论：癌旁组织端粒酶活性及hTERT mRNA表达可能是肝细胞癌术后早期复发的预后指标。     

食管鳞癌端粒酶活性、端粒酶逆转录酶及bcl-X/L表达的研究

目的：探讨食管鳞癌组织中端粒酶活性、端粒酶逆转录酶（hTERT)及bcl-X/L的表达及其它们之间的关系。方法：应用TRAP－银染法检测45例食管鳞癌组织的端粒酶活性，采用原位杂交及免疫组织化学方法对癌组织进行了hTERT及bcl-X/L表达的检测。结果：癌组织端粒酶活性阳性率为82．2％，hTERT及bcl-X/L的表达阳性率分别为64．4％及71．1％，bcl-X/L的蛋白表达及hTERT的mRNA表达与端粒酶活性均有相关性。结论：食管鳞癌组织中端粒酶活性、hTERT及bcl-X/L的表达阳性率均较高。hTERT及bcl-X/L的表达对端粒酶活性有一定调节作用。     

人肺癌端粒酶活性的研究

目的 探讨端粒酶活性表达与肺癌发生发展的关系。方法 应用ＰＣＲ－ＴＲＡＰ－银染法检测５０例肺癌组织及细胞和２０例相应癌旁组织、５例肺结核瘤组织及细胞的端粒酶活性。结果 肺癌组：３６例手术切除肺癌组织中端粒酶阳性率为９１．７％,７例纤维支气管镜活检肺癌组织和７例癌性胸水细胞中端粒酶阳性例数分别为６例和５例;总检出率为８８％（４４／５０）。对照组：癌旁组织中端粒酶阳性率为１０％（２／２０）,肺结核瘤组     

端粒酶基因和抗凋亡基因bcl-2在肺组织中的表达研究

 目的　研究肺癌端粒酶基因和bcl 2的关系 ,以期阐明端粒酶基因及抗凋亡基因对端粒酶的调控机理。方法　采用TRAP、RT PCR及LSAB的方法研究了肺癌端粒酶活性、hTR、hTERT及bcl 2的表达。结果　 82 .3%的肺癌组织表达端粒酶阳性 ,38例癌组织中 ,34例表达hTR (89.4 % ) ,36例表达hTERT(94 .7% )。而在相应的癌旁组织中 ,34例表达hTR ,但只有 3例表达hTERT(7.8% )。结论　肺癌组织中具有较高的端粒酶活性 ,在肿瘤组织和正常组织中hTERT的表达有显著的差异 (P <0 .0 5 )。hTR在正常组织和肿瘤组织均有较高的表达 ,bcl 2的表达与端粒酶基因有着较高的相关性。     

卵巢癌及其癌旁正常组织端粒长度、端粒酶活性的测定及意义

目的端粒酶的激活与肿瘤增殖密切相关，本实验旨在评价卵巢癌及其癌旁正常组织端粒长度、端粒酶活性及意义．方法，用Southern印迹杂交法测定卵巢癌及癌旁正常组织端粒长度，TRAP-PCR-银染法测定端粒酶活性的改变、RT-PCR扩增端粒酶基因hTERT的表达．结果：卵巢癌组织与癌旁正常组织中hTERT的mRNA表达与端粒酶活性表达一致，卵巢癌组织中84．0％（42／50）有端粒酶活性表达，而在卵巢癌旁正常组织中只有8．0％（4／50）有端粒酶活性表达。不同卵巢癌组织的端粒长度差异无统计学意义，卵巢癌组织端粒长度短于癌旁正常组织，但差异无统计学意义．结论：检测端粒酶活性可用于卵巢癌临床诊断，端粒的长度不能精确地反映端粒酶活性．     

胆管癌组织及胆汁中端粒酶活性的检测及意义

目的：检测胆管癌组织和胆汁中的端粒酶活性，以研究与端粒酶与胆管癌的关系及对胆管癌的诊断意义。方法：用PCR—ELISA方法检测20例胆管癌的癌组织和胆汁中端粒酶活性，同时用相同的方法检测20例正常胆管组织和胆汁中的端粒酶活性以作对照。结果：20例胆管癌组织中，端粒酶活性阳性为80％（16／20），胆汁中端粒酶活性阳性率75％（15／20）。正常胆管组织端粒酶活性阳性表达率为0（0／20），胆汁中端粒酶活性阳性率为0（0／20）。结论：端粒酶可能参与了胆管癌的发生发展过程，检测胆汁中端粒酶活性可有助于胆管癌的诊断。     

肝癌及癌旁组织中端粒酶检测的临床意义

目的研究端粒酶作为原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）肿瘤标志物的可能性。方法采用ＴＲＡＰ方法检测了３３例原发性肝细胞癌及其３３例癌旁组织、４例肝转移癌及其４例癌旁组织、６例肝良性肿瘤和６例正常肝组织中的端粒酶活性。结果３３例原发性肝细胞癌组织中，有３０例端粒酶表达阳性，其阳性率为９０．９％。３３例癌旁组织中，有９例端粒酶表达阳性，其阳性率为２７．３％。４例肝转移癌端粒酶活性均阳性，４例癌旁组织中，２例端粒酶表达阳性。６例肝良性肿瘤中，仅１例端粒酶表达阳性。６例正常肝组织端粒酶表达均阴性。肝癌组织端粒酶表达与肿瘤临床病理特征无关。结论肝癌组织中普遍存在端粒酶活性表达，而良性和正常肝组织中端粒酶活性较少表达。端粒酶有可能成为诊断原发性肝细胞癌的肿瘤标志物     

子宫颈病变中端粒酶活性的表达

目的：探讨宫颈糜烂，宫颈上皮内瘤样变（CIN）及宫颈癌中端粒酶的表达及其意义，方法：采用TRAP法检测30例宫颈糜烂，16例CIN组织，20例宫颈癌及20例正常宫颈组织中端粒酶活性。结果：宫颈糜烂者端粒酶活性阳性率为3．0％（1／30），CIN端粒酶活性阳性率为56％（9／16），20例宫颈癌组织中端粒酶阳性表达率为805（16／20），正常宫颈组织中端粒酶表达阴性。恶性肿瘤与正常或良性病变组织中端粒酶活性差异有显著性（P＜0．05）。结论：端粒酶的活化在宫颈癌的发生过程中起重要作用，端粒酶活性检测可能成为宫颈癌及宫颈癌前病变早期诊断诊断和病情监测的指标。     

Differential telomerase activity, expression of the telomerase catalytic sub-unit and telomerase-RNA in ovarian tumors.

Telomerase activity has been found in a variety of malignant tumors but only rarely in benign tumors or normal tissues. In this study, we investigated telomerase activation in 37 ovarian tumors, including benign, borderline and malignant neoplasms. Telomerase activity was detected using the telomeric repeat amplification protocol (TRAP) in 13/16 ovarian carcinomas, 9/10 borderline tumors and 3/11 cystadenomas/fibromas. mRNA expression of the putative human telomerase catalytic sub-unit gene (hTERT) was detected by RT-PCR in 14/15 ovarian carcinomas, 8/10 borderline tumors and 4/11 cystadenomas/fibromas. In situ hybridization was performed to evaluate telomerase-RNA (hTR) expression in the corresponding paraffin-embedded tumors. Variable expression levels of hTR were found over neoplastic tumor cells. The highest levels of hTR expression were found predominantly in ovarian carcinomas. Although the amount of telomerase activity varied, significantly high levels of telomerase activity were found predominantly in ovarian carcinomas. hTERT mRNA expression was closely associated with telomerase activity. These findings suggest that up-regulation of hTERT and hTR is important for telomerase activation during malignant-tumor progression. Telomerase activation might therefore be a valuable diagnostic parameter that could help to identify potentially progressive lesions. However, the diagnostic and therapeutic implications of telomerase activation need to be clarified in clinical trials. Int. J. Cancer (Pred. Oncol.) 84:426-431, 1999.     

Expression of telomerase genes in thyroid carcinoma

Telomerase (T) is a ribonucleoprotein complex that includes the telomerase RNA component (hTR), telomerase associated protein (TP1) and the telomerase catalytic subunit (hTERT). Telomerase has been shown in stem cells and found to be activated in tumor tissues and immortalized cells. We wanted to test whether the expression of the telomerase complex subunits correlate with the enzyme activity in human thyroid tissue. Hence, we determined the expression of hTERT, hTR and TP1 mRNA by RT-PCR and compared the results to telomerase activity as detected by the telomeric repeat amplification protocol (TRAP) assay. Fifteen benign goiters (G), 11 follicular carcinomas (FTC) including 2 oncocytic follicular carcinomas (also called Hurthle cell carcinoma, oFTC), 12 papillary carcinomas (PTC) including 3 microcarcinomas (mPTC), and 12 undifferentiated anaplastic thyroid carcinomas (UTC) were investigated. Experienced pathologists performed histological and pTNM classification in each specimen. RT-PCR analysis revealed that TP1 was ubiquitously expressed in all G and carcinomas. hTR was expressed in 4 out of 15 G, in 2 out of 3 mPTC, in 5 out of 9 PTC, in 5 out of 9 FTC, in all oFTC and in 9 out of 12 UTC samples. Regarding all carcinomas, no statistically significant correlation was observed between hTR-expression and tumor stage, lymph node or distant metastasis. hTERT-expression was associated with malignancy and tumor stage. All mPTC and 13 out of 15 G did not express hTERT, whereas all samples of pT3-4 tumor stage of FTC, PTC, UTC and all oFTC were positive for hTERT. No telomerase activity could be detected in G. Telomerase activity in carcinoma was only measurable in tissues that expressed the catalytic subunit hTERT. Our data indicate that telomerase activity is up-regulated in neoplastic cells. In contrast to TP1 and hTR, hTERT and telomerase activity may be of help in identifying invasive tumors and may be additional markers for classification of benign goiter and malignant thyroid carcinoma.     

非小细胞肺癌端粒酶活性与端粒酶RNA、端粒酶催化亚单位的相关性及其意义

目的 探讨非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC)端粒酶活性（telomerase activity,TA)、端粒酶RNA（telomerase RNA,hTR）端粒酶催化亚单位（telomerase catalytic subunit,hTRT/hEST2)编码基因的表达,彼此间相关性及其预后意义。方法 TRAP－PCR（telomerase repeat amplification protocol PCR)检测TA,RT－PCR检测hTR,原位杂交检测hTRT/hEST2mRNA表达。结果 非小细胞肺癌TA、hTR和hTRT/hEST2 mRNA阳性率分别为68．4％（26／38）、55．2％（32／58）和74．1％（43／58）,TA与hTRT/hEST2阳性相关（r=0.84,P=0.01),与hTR无相关性（r=0.16,P=0.23）。低分化以及有淋巴结或远处转移者TA及hTRT/hEST2阳性率增高;TA及hTRT/hEST2阳性组中位生存期（10．4个月,7．5个月）低于阴性组（13．5个月,14．7个月;P＝0．074,P＝0．01）,hTR阳性组中位生存期（12．9个月）略高于阴性组（11．5个月,P＝0．23）,仅hTRT/hEST2阳性与阴性组生存期差异有显著性;多因素Cox回归分析hTRT/hEST2对生存期有影响。结论 非小细胞肺癌TA、hEST2阳性与阴性组生存期差异有显著性;多因素Cox回归分析hTRT/hEST2对生存期有影响。结论 非小细胞肺癌TA、hTR和hTRT/hEST2表达高于癌旁正常组织;hTRT/hEST2够能反应TA活性,二者为NSCLC恶性表型增高的标志;hTRT/hEST2具有独立的预后意义。