缺血后处理通过水通道蛋白-4对大鼠缺血再灌注损伤的脑保护作用及其机制

目的研究缺血后处理(IP)对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,探讨各组大鼠水通道蛋白-4(AQP4)的表达。方法实验分组:48只雄性SD大鼠,随机分为3组(n=16)。假手术组;对照组:行单纯缺血再灌注;缺血后处理组:IP组。采用线栓法阻断大脑中动脉制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。大鼠脑缺血再灌注后24 h进行神经行为学评分和脑梗死体积测定,干湿重法测定脑水含量。并行免疫组织化学方法检测海马CA_1区细胞凋亡及AQP4表达的变化并行统计学分析。结果与对照组比较,IP组神经行为学评分明显降低,脑梗死体积、脑组织中的水分含量明显减少(P 0. 05)。再灌注24 h后,对照组海马CA_1区AQP4、凋亡细胞24 h表达量明显增加,IP组与对照组之间比较有差异(P 0. 05)。结论 IP组脑神经行为学评分、脑含水量、脑梗死体积均明显降低,提示缺血后处理可通过抑制AQP4的表达减轻缺血再灌注损伤后的脑水肿,起到脑保护作用。     

促红细胞生成素预处理对脑缺血再灌注大鼠水通道蛋白4的影响

目的研究促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对大鼠脑缺血再灌注后脑水肿和水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)的影响。方法采用大鼠大脑中动脉栓塞模型,干湿重法测定脑水含量,免疫组织化学法测定AQP4蛋白表达,RT-PCR法测定AQP4 mRNA表达。结果 EPO能够显著减轻脑缺血再灌注后脑水肿的程度(P<0.01),显著降低缺血脑组织中AQP4蛋白及mRNA的表达水平(P<0.01)。结论 EPO通过下调脑组织中AQP4的表达,减轻脑水肿的程度,这可能是EPO保护脑缺血再灌注后神经组织机制之一。     

依达拉奉对脑缺血-再灌注大鼠的神经保护作用及其机制研究

目的探讨依达拉奉对局灶性脑缺血-再灌注损伤的影响及其可能的神经保护机制。方法用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤模型,用试剂盒检测脑组织丙二醛(MDA)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性;分别测定脑组织含水量;免疫组织化学染色检测水通道蛋白4(AQP-4)的表达水平。结果缺血再灌注损伤后,大鼠脑组织脂质过氧化产物丙二醛含量和一氧化氮合酶活性增高,MDA含量和NOS合酶活性于脑缺血-再灌注后30min开始增高,于3d达到高峰,于7d基本恢复正常;脑组织含水量于脑缺血再灌注后1d开始增高,于3d达到高峰,于7d时下降至大致正常水平;AQP-4的表达于脑缺血-再灌注后6h开始增高,于3d达到高峰,于7d时下降至大致正常水平。依达拉奉干预能显著降低MDA含量和NOS活性,降低脑组织的含水量,并使AQP-4的表达明显下降。结论在脑缺血-再灌注损伤后,依达拉奉能通过清除自由基而减轻脂质过氧化损伤,并通过抑制AQP-4的表达减轻脑水肿,从而起到神经保护作用。     

大鼠局灶性脑缺血/再灌注后Ku70mRNA的表达

目的　研究大鼠脑缺血 /再灌注后 Ku70 m RNA的表达 ,以了解脑缺血 /再灌注后缺血半暗带 DNA修复酶的动态变化。方法　健康雄性 Wistar大鼠 ,体重 ( 2 5 0± 3 0 ) g,随机分为 2组即造模组和假手术组。造模组大鼠用线栓法成功制作可复流的 MCAO模型 ,2 h后再灌注。再灌注 6、2 4、48h时将大鼠断头取脑 ,作冷冻切片。通过原位杂交方法及末端标记法检测 Ku70 m RNA的表达及 Tunel阳性细胞数。结果　造模组脑缺血 /再灌注各时点 Ku70 m RNA表达均较假手术组明显减少 ( P <0 .0 1 )。随再灌注时间的增加 ,脑缺血半暗带 Ku70 m RNA的表达逐渐减少 ( P<0 .0 5 ) ,造模组脑缺血半暗带 Tunel阳性细胞数逐渐增加 ( P<0 .0 1 )。结论　 Ku70下降可能在脑缺血损伤所致的细胞凋亡中起重要作用。     

脑缺血再灌注大鼠脑组织水孔蛋白4的动态表达及其与脑水肿的关系

目的 探讨水孔蛋白4（aquaporin-4,AQP-4）在大鼠脑缺血再灌注后的动态表达及其与脑水肿的关系。方法 60只健康成年雄性SD大鼠,随机分成2组：大脑中动脉闭塞/再灌注（middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R）组和假手术组,采用Longa、Berderson、平衡木评分法进行行为学评分,干-湿重法测定脑组织含水量,HE染色观察大鼠脑组织的病理改变,免疫组化法检测脑组织AQP-4的表达。结果 MCAO/R组大鼠行为学异常,以48 h和72 h为著,7 d时已基本恢复至正常水平;脑含水量24 h开始升高（82.42%±0.12%）,48 h达高峰（85.40%±0.10%）,并持续到72 h（84.87%±0.15%）,7 d时下降至大致正常水平。脑水肿及炎性细胞浸润,以48 h和72 h为著。AQP-4阳性表达于梗死后6 h开始增多（110.0±4.4）,48 h～72 h达高峰（126.2±2.6;140.1±1.2）,7 d时有所下降（111.3±8.0）,但仍处于较高水平,与假手术组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 脑缺血再灌注后脑组织AQP-4的表达的变化与脑水肿的动态变化存在时间上的一致性,提示AQP-4可能参与了早期脑缺血再灌注后脑水肿形成的病理生理过程,而后期可能与脑内多余水分的清除有关。     

水通道蛋白4在大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用

目的研究水通道蛋白4(AQP4)在缺血再灌注损伤大鼠脑内表达及作用。方法以大脑中动脉线栓法建立大鼠缺血再灌注模型,采用干湿法测定模型的脑组织含水量及伊文氏蓝含量;免疫蛋白印记(WesternBlot)技术分析在缺血再灌注不同时程脑内AQP4的表达情况,以及AQP4与脑含水量和伊文氏蓝水平的相关性,并与对照组比较。结果与对照组相比,实验组大鼠脑组织含水量及伊文氏蓝水平在缺血再灌注后不同时间点明显高于对照组(P<0.05～0.01);AQP4蛋白表达明显增高(均P<0.05),并随着缺血再灌时间的延长,其表达量亦逐渐增加,在再灌后24～48h达到高峰。缺血再灌注后AQP4脑内的表达与脑组织含水量及伊文氏蓝水平呈正相关(r=0.38、r=0.45,均P<0.05)。结论AQP4的高表达参与了脑缺血再灌注后继发的血脑屏障的开放和脑水肿的发生,是脑水肿产生的重要分子基础。     

线粒体钙单向转运体对脑缺血再灌注大鼠脑水肿的影响

实验探讨线粒体钙单向转运体抑制剂钌红及激动剂精胺对缺血再灌注大鼠脑水肿的影响。采用线栓法建立大鼠左侧大脑中动脉闭塞大鼠模型,缺血再灌注24 h后,脑缺血再灌注模型大鼠、钌红及精胺干预的脑缺血再灌注大鼠神经功能评分均显著低于假手术大鼠,脑组织含水量,水通道蛋白4蛋白表达、IgG渗出含量均显著高于假手术大鼠;与脑缺血再灌注模型大鼠和脑缺血再灌注后精胺干预大鼠比较,钌红干预的脑缺血再灌注大鼠神经功能评分明显升高,脑组织含水量,水通道蛋白4蛋白表达及IgG渗出含量明显减少。提示预防性应用线粒体钙单向转运体抑制剂钌红可显著的降低水通道蛋白4和IgG的表达,影响血脑屏障通透性,进而降低脑水肿的程度。结论 线粒体钙单向转运体可能在大鼠脑缺血再灌注损伤中起重要作用,并能影响AQP4的表达和血脑屏障通透性。     

低氧预处理对大鼠脑缺血再灌注后梗死体积和血脑屏障通透性的影响

目的　探讨低氧预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法　将SD大鼠分为 3组 ,即假手术组、缺血再灌注组、缺氧预处理 +缺血再灌注组。连续吸入 8%O2 +92 %N2 3h作缺氧预处理 ,12h后再经插线左大脑中动脉栓塞 (MCAO)制作缺血再灌注模型 ,到相应时间点后观察缺氧预处理对MCAO大鼠的行为、脑含水量、血脑屏障通透性和脑梗死体积的影响。结果与缺血再灌注组相比 ,缺氧预处理组大鼠的行为明显改善 ,脑伊文思蓝 (EB)含量、脑含水量 (P <0 0 5 ) ,脑梗死体积缩小。结论　低氧预处理降低缺血再灌注脑组织血脑屏障通透性 ,抑制脑水肿 ,缩小梗死体积 ,对缺血再灌注损伤具有保护作用     

大鼠全脑缺血再灌注后额叶神经细胞凋亡与P53蛋白表达的实验研究

目的 探讨大鼠全脑缺血再灌注后不同时间对额叶神经细胞凋亡及P~(53)蛋白表达的影响。方法采用改良的Pulsineli 4-血管阻断(4-VO)方法建立SD大鼠急性全脑缺血模型,随机分为3组:正常组(n=7);假手术组(n=49);手术组(n=49)。缺血15min,分别于再灌注1、6、12、24、48、72h和7d断头取脑,采用TUNEL方法检测神经细胞凋亡,SP免疫组化方法观察额叶P~(53)蛋白的表达。结果 全脑缺血再灌注24h,可见少量TUNEL阳性细胞,再灌注48h可见较多TUNEL阳性细胞,72h出现大量TUNEL阳性细胞,7d明显减少。免疫组化染色:缺血组于再灌注24h可见少量P~(53)蛋白表达,48h达高峰,72h有所下降,7d明显下降,这种表达主要在细胞核内。结论 急性全脑缺血再灌注后的迟发性神经元坏死是以凋亡的方式发生的,全脑缺血再灌注后,额叶P~(53)蛋白表达增加,神经细胞凋亡和P~(53)蛋白的表达在一定时间内呈正相关。     

大鼠脑缺血-再灌注损伤早期DWI参数和AQP4蛋白表达相关性研究

目的脑水肿是脑缺血后主要的病理表现之一,研究表明水通道蛋白4(AQP4)在脑梗死后脑水肿的形成和发展中起着重要作用,目前尚缺乏磁共振弥散加权成像(DWS)与AQP4表达在急性脑缺血-再灌注早期相关性的研究。本文旨在评估大鼠脑缺血—再灌注早期脑损伤区水通道蛋白4表达、DWI信号强度(SI)及表观扩散系数(ADC)之间的相关性以及AQP4表达与缺血性脑水肿之间的关系。方法健康成年SD雄性大鼠(n=40),随机分成4组,分别为脑缺血—再灌注12h、1d、3d组和假手术组,采用线栓法制作大鼠右侧大脑中动脉缺血—再灌注(MCAO/R)模型,Zea Longa评分评价神经功能损伤程度,Philips Achieva 3.0T MRI扫描仪对假手术组和缺血—再灌注后不同时间点大鼠脑部行冠状位DWI扫描,在工作站上重建ADC图,测量基底核层面梗死灶DWI-SI和ADC值,计算相对ADC值(rADC)和相对DWI—SI(rDWI—SI)值。2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色评价梗死体积的变化。免疫组化染色测定AQP4蛋白表达,用平均吸光度(MOD)值评价染色程度。结果假手术组动物麻醉苏醒后未见神经功能缺损,脑缺血—再灌注后12h、1d和3d组大鼠出现不同程度神经功能损伤,1d组最重。假手术组TTC染色未见梗死体积,脑缺血—再灌注后12h、1d和3d梗死体积逐渐增加,3d时最大。水肿变化规律同梗死体积相仿。假手术组海马区及皮质区AQP4免疫组化染色较浅淡,MCAO/R后12h缺血侧海马区及皮质均可见AQP4阳性细胞,12h-3d AQP4的MOD值随时间延长逐渐增高,3d时达到高峰。12h、1d和3d组大鼠脑水肿体积与相应时间点缺血侧皮质区和海马区AQP4表达均呈正相关(r=0.642,r=0.605,均P0.05);三组大鼠基底核区梗死灶rADC值与缺血侧皮质区、海马区AQP4表达均呈正相关(r=0.542,P=0.037;r=0.655,P=0.008)。结论大鼠脑缺血—再灌注早期脑水肿体积、rADC值与AQP4的表达水平存在时间上的相关性。因此结合DWI检查对脑缺血后AQP4表达部位、作用及调节机制进行更深入系统的研究,可能为临床早期治疗缺血性脑水肿提供新的思路。     

应重视脑卒中的综合预防

脑卒中高居人口死亡原因的第 2位 ,每年新发患者 >15 0万例 ,现有幸存者 >6 0 0万例 ,其中 75 %丧失劳动力 ,4 0 %中度致残 ,是老年人致残和认知障碍的主要原因 ,年直接或间接经济损失高达数百亿元。高血压、心脏病、房颤、糖尿病、高脂血症、无症状颈动脉狭窄以及不良生活方式 ,包括吸烟、酗酒等均为脑卒中的危险因素 ,应针对危险因素予以控制 ,并长期有效坚持 ,大部分脑卒中是可以预防的。1.高血压 :我国高血压超过 1亿人口 ,是脑卒中最常见的可控危险因素。 14项随机对照研究结果表明 ,舒张压降低 5～ 6ｍｍＨｇ可以减少脑卒中发生率的 4…     

Brazilian consensus on public policies on alcohol

This is the summary of a meeting where a group of experts, representing several health organizations and academic departments from different parts of Brazil, created a consensus about the main alcohol policies which should be implemented by different levels of the Brazilian government. The World Health Organization has been suggesting for 30 years the actions that should be implemented for the public good. Two important conclusions were reached: 1) The research establishes beyond doubt that public health measures of proven effectiveness are available to serve the public good by reducing the widespread costs and pain related to alcohol use; 2) To that end, it is appropriate to deploy responses that influence both the total amount of alcohol consumed by a population and the high-risk contexts and drinking behaviours that are so often associated with alcohol-related problems. To conceive of these intrinsically complementary approaches as contractory alternatives would be a mistake. The objectives of the consensus are: 1) To make the scientific evidences more available to the Brazilian policy makers; 2) To facilitate the evaluation of the available strategies according their effectivity, scientific support, cost and cultural adaptability; 3) To make the Brazilian health professionals familiar with the priorities of alcohol policies.     

Clinical and experimental studies on the action of ethamsylate on haemostasis and on platelet functions

In a series of tests,the action of ethamsylate on haemostasis and on platelet functions was examined. After oral administration of the drug,a highly significant diminution of the bleeding time and of the blood loss from a standard wound was observed. This effect was demonstrated in healthy individuals and in patients suffering from platelet dysfunctions,and there was a distinct dose relation. There was also an increase of platelet adhesion,of PF 3 availability and of PF 4 release. The action of prostacyclin on the epinephrine induced platelet aggregation could be inhibited by ethamsylate. This offers a possible explanation for some of the effects on hemostasis. In addition,an action of ethamsylate on the platelet membrane was assumed since an in vitro increase of functions of the platelet membrane like PF 3 availability would not be explainable by a possible inhibition of prostacyclin.     

不同病房模式对精神分裂症病情影响的研究

目的探讨不同病房模式对首发精神分裂症患者病情的影响及康复情况。方法开放式病房的患者为研究组68例,同时选择住封闭式病房患者为对照组130例,对两组患者的临床资料进行比较分析。结果对照组患者入院时焦虑抑郁及敌对猜疑出现明显变化（P＜0.05）;研究组患者在第1周时焦虑抑郁已经开始改善,第2周时病情、阳性症状、一般精神病理、敌对猜疑、激活性也出现明显变化（P＜0.05）;第4周时研究组病情及各因子、认知功能及自知力显著改善,与对照组比较存在统计学差异（P＜0.05）。结论开放式病房模式可以减少患者的负性影响,更快改善患者的认知功能,有利于患者自知力的恢复,使患者的病情达到更全面的康复。