雷帕霉素促进自噬减轻脓毒症相关性脑病(SAE)小鼠认知功能障碍

目的 明确雷帕霉素促进自噬在脓毒症相关性脑病(SAE)小鼠认知功能障碍中的作用。方法 通过盲肠结扎穿孔术(CLP)建立SAE小鼠模型,采用小鼠脓毒症严重程度评分(MSS)评估SAE小鼠脓毒症的严重程度,条件恐惧记忆实验观察小鼠认知功能。Western blot法检测SAE小鼠海马组织微管相关蛋白1轻链3(LC3)与P62的表达水平,免疫荧光组织化学染色观察LC3在海马区神经元中的表达和分布。结果 CLP术后14 d小鼠死亡率高达41.7%,而幸存小鼠存在显著认知功能障碍。同时,CLP术后14 d小鼠海马组织自噬水平降低。雷帕霉素可促进SAE小鼠海马神经元自噬,减轻其认知功能障碍。结论雷帕霉素促进SAE小鼠海马神经元自噬,减轻其认知功能障碍。     

芫根对脓毒症小鼠认知功能障碍的保护作用及机制初探#

目的:初步探究芫根对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导脓毒症小鼠认知功能障碍的保护作用及机制.方法:选取21只KM小鼠根据体重随机分为对照组(n=4)、模型组(n=8)以及治疗组(n=9),治疗组预防性给予芫根提取液灌胃7 d、14 d后腹腔注射LPS10 mg?kg-1构建脓毒症小鼠模型.LPS注射7 d后采用旷场实验评价小鼠焦虑情绪,通过HE染色评价海马神经元损伤情况,以Western Blot检测全脑RACK1、HIF-1α 蛋白表达水平.结果:模型组小鼠角落区域停留时间及总静止时间增加,而中央及四周停留时间缩短,HE结果显示海马神经元明显出现核固缩,同时,脑RACK1蛋白水平明显降低(P<0.05)而HIF-1α表达有所升高;芫根提取液灌胃后,相对于模型组,小鼠四周及中央区域的停留时间明显增加(P<0.05),角落停留时间及总静止时间明显降低(P<0.05),海马神经元核固缩明显减少,同时脑RACK1蛋白水平升高,HIF-1α 表达降低.结论:芫根对脓毒症小鼠认知功能障碍具有一定的改善作用,其机制可能与调控RACK1/HIF-1α、保护海马神经元有关.     

DMXB对β淀粉样蛋白所致痴呆小鼠的空间记忆及回避记忆的影响

目的:探讨选择性激动α7-N型乙酰胆碱受体(α7n ACh R)对痴呆小鼠空间参考记忆和被动回避记忆功能的影响。方法:小鼠45只随机分为3组:对照组、模型组、干预组。对照组侧脑室内注射生理盐水,模型组侧脑室内注射Aβ25-35,干预组连续14天腹腔注射α7n ACh R激动剂DMXB,采用Morris水迷宫和Y型电迷宫观察3组小鼠的行为学表现,电生理检测脑片海马CA1区突触长时程增强(LTP)以观察小鼠的学习记忆功能。结果:水迷宫训练第5天,模型组小鼠与对照组相比逃逸潜伏期增加,目标象限探索距离百分比、目标象限探索时间百分比、穿越原平台位置次数显著减少,干预组与对照组小鼠之间各项指标无显著性差异。与对照组相比,模型组小鼠在Y型电迷宫训练第5天的错误反应次数和全天总反应时间明显增加,干预组与模型组小鼠之间无显著性差异。侧脑室内注射Aβ25-35损害海马LTP诱导,DMXB的干预可恢复LTP。结论:Aβ25-35介导的神经毒性作用诱导AD小鼠,空间参考记忆和被动回避记忆明显减退,选择性激动α7n ACh R可以改善小鼠空间参考记忆,对被动回避记忆没有影响。     

TO901317对脂多糖LPS致小鼠中脑内炎症反应的调节作用

目的观察肝脏X受体(LXR)激动剂TO901317对脂多糖LPS致小鼠中脑内炎症反应的调节作用。方法提取小鼠中脑mRNA行RT-PCR及中脑免疫组织化学方法检测LXR激动剂TO901317对LPS致炎小鼠中脑内炎症因子IL-1β,IL-6和TNF-α的影响及小胶质细胞活化的调节作用。结果 TO901317处理组小鼠中脑IL-1β,IL-6和TNF-αmRNA含量明显低于单纯LPS注射组。TO901317预处理抑制LPS引起的中脑小胶质细胞的活化。结论 LXR受体激活能有效抑制中脑小胶质细胞激活及前炎因子的释放。     

小鼠海马NONO基因沉默对焦虑样行为的影响

目的:探索小鼠海马区不含POU结构的八聚核苷酸结合蛋白（NONO）基因沉默后突触相关基因的表达及行为学变化。方法:构建并包装表达NONO基因靶向shRNA的重组慢病毒（LV-NONO）,海马区显微注射重组慢病毒干扰NONO基因的表达，实验小鼠分为对照组（control）,对照病毒组（LV-Con）和NONO慢病毒干扰组（LV-NONO）。慢病毒感染5 d检测海马NONO的表达，14 d检测海马γ-氨基丁酸A型受体α2亚基(GABA_A2)和桥尾蛋白（gephyrin）的表达，旷场实验和O迷宫实验检测实验小鼠的行为学变化。结果:LV-NONO组小鼠海马区NONO、GABA_A2和gephyrin的表达显著低于对照组小鼠。旷场实验和O迷宫实验结果显示，LV-NONO组小鼠进入开放臂的次数和中央区（开放臂）停留时间显著低于对照组小鼠。结论:海马区注射NONO干扰病毒抑制NONO基因的表达可以下调GABA_A2和gephyrin的表达，进而增强小鼠焦虑样行为。     

APP/PS1双转基因AD小鼠术后认知功能紊乱及其机制

目的探究阿尔茨默海病(AD)双转基因小鼠(APP/PS1)在麻醉手术后不同时程的认知功能改变及其可能的机制。方法将APP/PS1小鼠随机分为对照组(不予手术麻醉干预)和实验组(2.5%七氟烷麻醉下行剖腹探查术)。术后1和3 d行条件恐惧实验评估小鼠认知功能;并分别在术后12及24 h和3 d用酶联免疫吸附实验检测海马组织炎性因子IL-6、IL-1β、TNF-α及淀粉样蛋白Aβ_(42)蛋白含量;用Western blot检测α-突触核蛋白的表达。结果与对照组相比,实验组小鼠在术后1和3 d,与场景有关的僵直时间均显著减少。术后24 h实验组小鼠海马组织内IL-1β、IL-6及TNF-α的含量显著高于对照组(P0.05);同时Aβ_(42)蛋白和α-突触核蛋白的表达在术后24 h也显著上调(P0.05)。结论 AD双转基因小鼠接受麻醉手术后,在术后早期即可出现认知功能障碍,其发生机制可能与海马区α-突触核蛋白与Aβ_(42)表达异常及神经炎性反应相关。     

盐酸小檗碱通过抑制TNF-α/caspase-8/caspase-3信号通路减轻急性低氧暴露引起的肝损伤

目的 研究盐酸小檗碱(BBR)对急性低氧暴露后肝脏的保护作用及相关机制.方法 C57BL/6小鼠分为常氧组、低氧暴露组、低氧暴露联合BBR组.实验第7天处死小鼠,取肝脏组织.称量小鼠及肝组织的质量,利用HE染色观察肝组织病变情况,利用实时定量PCR检测肝组织白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF...     

丰富环境对脓毒症相关性小鼠认知功能障碍的影响

目的:探讨幼年期丰富环境(EE)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠认知功能障碍及海马区小胶质细胞活化的影响。方法:36只幼年雌性昆明小鼠随机分为对照组(Control)、脂多糖(LPS)组、丰富环境+脂多糖组(EE+LPS)。给予小鼠单次腹腔注射LPS(O.83 mg/kg)构建脓毒症小鼠模型.EE+LPS组小鼠在注射LPS前给予8周的丰富环境干预。新旧事物识别实验检测小鼠认识功能,免疫组织化学法检测小鼠海马区lba-1的表达,Western Blot检测CD68和IL-1β的表达。结果:与Control组相比,LPS组小鼠新事物辨别指数明显下降;与LPS组相比,EE+LPS组小鼠新事物辨别指数明显增加。LPS可诱导小鼠海马区小胶质细胞活化,表现为Iba-1阳性细胞数目增加,CD68和IL-1β的上调;而丰富环境干预可明显抑制小胶质细胞活化,表现为lba-1阳性细胞数目减少,CD68和IL-1β表达下调。结论:丰富环境可能通过抑制海马区小胶质细胞的激活从而改善LPS诱导的小鼠认知功能障碍。     

右美托咪定对脓毒血症大鼠血脑屏障的影响

目的探讨右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对内毒素血症大鼠模型血脑屏障及认知功能的影响。方法健康SD雄性大鼠24只,随机分为4组(n=6):空白对照组(C组)、脂多糖组(LPS组)、右美托咪定组(DEX组)和右美托咪定+脂多糖组(DEX+LPS组)。采用尾静脉注射LPS方法制备内毒素血症模型。各组大鼠进行Morris水迷宫实验,记录大鼠逃避潜伏期、穿越平台次数、在平台所在象限时间。处死大鼠,取海马组织,采用免疫组化法和Western blot检测各组大鼠海马组织血脑屏障(BBB)结构蛋白Occludin和ZO-1蛋白表达,采用ELISA方法检测各组大鼠海马组织炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6。结果 LPS组大鼠认知功能受损严重,海马组织Occludin和ZO-1蛋白的表达水平降低,炎症因子TNF-α、 IL-1β和IL-6含量显著升高;DEX+LPS组大鼠认知功能受损程度较LPS组轻,海马组织Occludin蛋白和ZO-1的蛋白表达升高,炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量显著降低。结论右美托咪定改善内毒素血症大鼠的认知功能,与上调Occludin以及ZO-1蛋白表达水平相关。     

普兰林肽对5×FAD小鼠和WT小鼠认知行为及脑和视网膜β淀粉样蛋白6E10、炎症因子和神经细胞形态的影响

目的 探讨普兰林肽对5×FAD小鼠和WT小鼠认知行为及脑和视网膜的β淀粉样蛋白(Aβ)6E10、炎症因子和神经细胞形态的影响。方法 实验选取5×FAD小鼠32只、WT小鼠16只，均为雌性。随机将5×FAD小鼠分为空白组、治疗组；WT组不进行任何处理；空白组腹腔注射PBS溶液；治疗组每天腹腔注射1次普兰林肽[200μg/(μ·d)],治疗8周。Morris水迷宫实验测定其认知行为的变化；采用免疫组织化学检测小鼠海马组织细胞、视网膜中Aβ6E10蛋白的表达；ELISA测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)炎症因子的含量。HE染色测定小鼠海马组织中神经细胞的排列和形态。结果 治疗组的潜伏时间短于5×FAD组，差异有统计学意义(P<0.05);治疗组的穿越平台次数和目标象限停留百分比高于5×FAD组，差异有统计学意义(P<0.05);5×FAD组脑内和视网膜内的Aβ6E10面积高于治疗组，差异具有统计学意义(P<0.05);视网膜和脑内的Aβ6E10具有正相关(P<0.05)。治疗组与5×FAD组脑中和视网膜中的TNF-α和IL-1β比较，差异无...     

帕瑞昔布钠预给药可减轻脂多糖诱导的小鼠认知功能损伤及神经炎症反应

目的:探讨帕瑞昔布钠(PA)预给药对脂多糖(LPS)诱导的小鼠疾病行为模型认知功能改变及神经炎症的影响。方法:雌性C57BL/6J小鼠80只,10～12月龄,随机分为4组(n=20):空白对照组(CON组)、PA组、LPS组和PA预处理组(P+L组)。LPS腹腔注射制备疾病行为模型,PA组和P+L组在注射LPS前1 h按10 mg/kg剂量腹腔注射PA。采用Morris水迷宫实验评价认知功能;ELISA检测血液及海马区IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α和PGE_2的表达;HE染色观察肺组织和海马组织的病理形态改变;免疫荧光法观察海马区小胶质细胞和星形胶质细胞的数目;Western blot法检测海马区COX-2、iNOS、NLRP3、ASC及caspase-1蛋白的表达。结果:与CON组相比,LPS组小鼠Morris水迷宫的逃避潜伏期显著延长,目标象限停留时间及穿越平台次数显著减少(P0.01),IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α和PGE_2的含量显著增多(P0.01),海马CA1区神经元细胞深染,坏死损伤明显,小胶质细胞和星形胶质细胞的数目显著增加(P0.05),COX-2、iNOS、NLRP3、ASC及caspase-1蛋白表达量显著增加(P0.01)。而与LPS组相比,PA明显降低小鼠的神经炎症水平,提高小鼠的记忆能力。结论:帕瑞昔布钠预给药对LPS诱发的认知功能障碍和神经炎症具有一定的预防和改善作用,其作用机制可能与特异性拮抗COX-2,抑制中枢小胶质细胞和星形胶质细胞的活化,减少NLPR3炎症小体的激活,从而降低炎症因子的水平有关。     

卡氏肺大鼠肺泡巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达的变化

目的探讨卡氏肺孢子虫肺炎(Pneumocysitis carinii pneumonia,PCP)大鼠肺泡巨噬细胞(Alveolar macrophage,AM)TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达的变化。方法采用AM体外培养技术,应用RT-PCR法分别测定脂多糖(LPS)诱导的AM中TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达的动态变化。结果肺泡巨噬细胞受LPS刺激后,PCP模型大鼠TNF-αmRNA在1、4 h表达高于正常组(P<0.05),IL-1βmRNA表达在4、8 h时表达高于正常组(P<0.01),IL-6mRNA表达在8 h时PCP高于正常(P<0.05),表达峰值都提前,并且在4 h达到峰值。结论LPS刺激后,PCP大鼠肺泡巨噬细胞在早期可能更易分泌TNF-α、IL-1β、IL-6作为免疫分子,起免疫防御和免疫损伤作用。     

TAK-242对脂多糖诱导的脓毒症脑病小鼠学习记忆功能障碍的改善作用

目的:探究TAK-242对脂多糖诱导的脓毒症脑病小鼠学习记忆功能障碍的改善效果,观察小鼠大脑病理学形态的改变,并探究起效的相关蛋白通路机制。方法:健康雌性C57BL/6小鼠80只,10～12月龄,体重20～30 g,采用随机数字表法分为4组(n=20):空白对照组(CON组)、TAK-242对照组(TAK组)、脓毒症脑病模型组(LPS组)和TAK-242预处理组(T+L组);取小鼠动脉血及肺脏组织检测外周炎症情况,应用旷场、高架十字和Morris水迷宫实验观察小鼠的行为学变化,后进行免疫组化实验观察海马区小胶质细胞特异性标志物离子钙结合衔接分子1(Iba-1)的形态和数量,最后通过Western blot实验检测海马区NF-κB p65、TLR4、Aβ1-42和p-tau (S396)蛋白的表达情况。结果:与CON组相比,其余各组小鼠动脉血气和肺脏组织没有出现明显炎症改变;LPS组小鼠在旷场中央区活动时间和穿过中央区次数都显著降低(P0.01),进入高架十字开臂次数和探头区探头次数明显减少(P0.05),水迷宫空间探索潜伏期明显延长(P0.05),海马区Iba-1活化数目显著增加(P0.05),NF-κB p65、TLR4、Aβ1-42和p-tau (S396)蛋白表达量明显增加(P0.01)。与LPS组相比,T+L组小鼠在旷场中央区活动时间和穿过中央区次数显著增加(P0.01),进入高架十字开臂次数和探头区探头次数明显增加(P0.05),水迷宫空间探索潜伏期明显缩短(P0.05),海马区Iba-1活化数目显著减少(P0.05),NF-κB p65、TLR4、Aβ1-42和p-tau (S396)蛋白表达量显著降低(P0.05)。结论:TAK-242对脓毒症脑病引起的学习记忆功能障碍具有一定的预防和治疗作用,其作用机制可能与抑制中枢小胶质细胞活化的数目及下调蛋白NF-κB p65、TLR4、Aβ1-42和p-tau (S396)的表达水平有关。     

Fractalkine对脂多糖激活的小胶质细胞炎症相关因子表达的影响

目的:探讨趋化因子Fractalkine对脂多糖(LPS)诱导的小鼠小胶质细胞(N9)激活时所分泌的TNF-α、IL-1β和一氧化氮(NO)表达的影响.方法:用Fractalkine处理经LPS激活的小鼠小胶质细胞24 h,以ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α和IL-1β的浓度,以NO试剂盒检测培养上清中NO的浓度.结果:LPS能够激活小胶质细胞,使IL-1 β、TNF-α和NO的表达量与对照组相比明显升高;Fractalkine能够降低LPS激活的小胶质细胞IL-1β、TNF-α和NO的表达.结论:Fractalkine可能通过抑制炎症相关因子的产生而在中枢神经系统中发挥神经保护作用.     

IL-18在脓毒症肺损伤发生发展过程中的作用及机制研究北大核心CSCD

目的:研究IL-18在脓毒症肺损伤发展过程中的作用及调控机制。方法:成年雄性野生型C57BL/6(WT)和IL-18基因敲除(IL-18-/-)小鼠分为野生型小鼠对照组(WT组)、脂多糖(LPS)处理的野生型小鼠组(WT LPS组)、IL-18基因敲除的小鼠对照组(IL-18-/-组)、LPS处理的IL-18基因敲除小鼠组(IL-18-/-LPS组)。腹腔注射LPS(15 mg/kg)建立小鼠脓毒症模型,对照组注射等量生理盐水。观察各组小鼠72 h生存率并处死小鼠,HE染色观察肺部病理组织变化,RT-PCR及Western blot检测各组小鼠肺组织IL-18 mRNA及蛋白表达,免疫荧光检测肺组织IL-18表达及定位,TUNEL染色检测肺组织细胞凋亡,流式细胞术检测肺组织Treg/Th17比例,ELISA检测炎症因子TNF-α、IL-17A、TGF-1β、IL-10表达。Western blot检测各组小鼠肺组织RORγt、FoxP3蛋白表达及STAT3磷酸化水平。结果:LPS诱导后,小鼠肺组织高表达IL-18。与WT LPS组相比,IL-18-/-LPS组小鼠生存率显著提高,肺组织病理损伤减轻,凋亡细胞显著减少,Treg/Th17比例提高,抑炎因子TGF-1β、IL-10表达增加,而促炎因子TNF-α、IL-17A表达明显减少,肺组织RORγt蛋白表达增加,而STAT3磷酸化水平降低。结论:IL-18可通过上调STAT3磷酸化水平,促进Treg/Th17免疫失衡及炎症因子分泌,从而加剧脓毒症急性肺损伤。     

藤黄酸减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的探讨藤黄酸(GA)对脂多糖(LPS)所致小鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。方法采用尾静脉注射LPS(4 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模型。实验将小鼠随机分为对照组(control组)、模型组(model组)、藤黄酸组(GA组)和藤黄酸预处理组(GA+LPS组),6 h后测定肺湿/干重比值(W/D);检测髓过氧化物酶(MPO)活性;检测肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量和白细胞计数;ELISA检测肺匀浆中白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果模型组小鼠肺W/D、MPO活性、BALF中蛋白含量和白细胞数量均增加,肺组织IL-1β和TNF-α水平升高(均P0.01);藤黄酸预处理可减轻LPS引起的以上指标变化(均P0.05)。结论 GA可减轻LPS诱导的急性肺损伤,其机制可能与降低肺组织IL-1β和TNF-α的含量、抑制中性粒细胞在肺部的聚集和减轻肺部水肿相关。     

HBV X蛋白即时高表达上调巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β

目的：将乙型肝炎病毒（HBV）X蛋白真核表达载体pcDNA3.1（＋）-HBx转染巨噬细胞,观察X蛋白即时高表达对巨噬细胞分泌细胞因子TNF-α、IL-1β的影响,为进一步研究HBVX蛋白的致病机制奠定实验基础。方法：将真核表达载体pcDNA3.1（＋）-HBx通过SuperFectTM脂转染试剂转染巨噬细胞24小时后,用LPS刺激巨噬细胞,利用Westernblot鉴定X蛋白在巨噬细胞中的表达,并用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测pcDNA3.1（＋）-HBx转染的巨噬细胞不同时间（12、24、48小时）培养上清液中细胞因子TNF-α、IL-1β的含量,统计软件SPSS13.0分析所得数据。结果：将真核表达载体pcDNA3.1（＋）-HBx转染巨噬细胞,Westernblot结果显示pcDNA3.1（＋）-HBx能在巨噬细胞中表达约17kD的目的蛋白,即X蛋白;ELISA法测定细胞上清液中TNF-α、IL-1β的含量,LPS刺激组及pcDNA3.1（＋）组与空白对照组有显著性差异（P〈0.01）,pcDNA3.1（＋）-HBx组与LPS刺激组及pcDNA3.1（＋）组有显著性差异（P〈0.01）,而LPS刺激组与pcDNA3.1（＋）组无显著性差异（P〉0.05）,即LPS可活化巨噬细胞分泌细胞因子,且X蛋白即时高表达可引起LPS诱导的巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β明显增加。结论：乙型肝炎病毒X蛋白即时高表达上调LPS刺激的巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β。     

短管兔耳草总黄酮降低阿尔茨海默病模型小鼠大脑皮层及海马组织炎性细胞因子的水平

目的探讨短管兔耳草总黄酮(TF-LBM)治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法 8月龄SAMP8小鼠50只,随机分为模型组,阳性药物组,低、中、高剂量TF-LBM组5组,每组10只;8月龄SAMR1小鼠10只为正常老化组。低、中、高剂量TF-LBM组以(150、300、600)mg/kg TF-LBM灌胃,阳性药物组以0.65 g/kg盐酸多奈哌齐灌胃,模型组和正常老化组用溶解TF-LBM等量蒸馏水灌胃。8周后,进行Morris水迷宫实验,计算各组小鼠定位航行潜伏期。行为学实验后进行取材,分别取各组小鼠大脑皮层组织及海马CA1区组织进行检测,应用放射免疫法检测药物对小鼠大脑皮层及海马白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的影响。结果短管兔耳草总黄酮对小鼠行为学干预结果观察:与模型组相比,正常老化组、阳性药物组、高剂量组小鼠逃逸潜伏期明显缩短;与正常老化组相比,模型组小鼠皮层组织中IL-1β、IL-6、TNF-α显著增高;与模型组相比,低剂量TF-LBM组IL-1β含量无明显差异,而中剂量TF-LBM组、高剂量TF-LBM组及阳性对照组IL-1β含量降低。低剂量TF-LBM组、中剂量TF-LBM组、高剂量TF-LBM组及阳性对照组IL-6含量均降低。低剂量TF-LBM组及中剂量TF-LBM组TNF-α含量无明显差异,而高剂量TF-LBM组及阳性对照组TNF-α含量降低。与正常老化组相比,模型组小鼠海马组织中IL-1β、IL-6、TNF-α显著增高;与模型组相比,低、中、高剂量TF-LBM组及阳性对照组IL-1β、IL-6、TNF-α含量均降低。结论短管兔耳草总黄酮可以使SAMP8小鼠行为学得到改善,TF-LBM能够降低脑皮层及海马CA1区组织IL-1β、IL-6、TNF-α含量。     

激活α7烟碱型乙酰胆碱能受体(α7nAchR)增加小鼠海马组织M2型小胶质细胞数量并减轻脓毒症脑病

目的检测α7烟碱型乙酰胆碱能受体(α7nAchR)对M2型小胶质细胞的影响,探索其减轻脓毒症脑病(SAE)的机制。方法采用盲肠结扎穿刺术(CLP)于2月龄雄性C57BL/6小鼠构建SAE模型,比较两组小鼠学习记忆能力的改变。采用Western blot法检测海马组织中α7nAchR的表达变化。给予腹腔注射α7nAchR的激动剂二甲氧基苯亚胺基假木贼碱(GTS-21),观察给予激动剂后海马组织中α7nAchR的表达变化,同时探索GTS-21是否能减轻SAE小鼠的学习记忆障碍。通过免疫荧光细胞化学染色法检测精氨酸酶1(ARG1)、离子钙结合接头蛋白1(Iba-1)的表达确定SAE小鼠M2型小胶质细胞数量的变化,以及GTS-21对M2型小胶质细胞数量的影响。结果 SAE小鼠的新物体识别及恐惧记忆能力显著下降,小鼠海马组织中α7nAchR表达显著降低。GTS-21可改善SAE小鼠的学习记忆障碍,增加脑组织中α7nAchR的表达。同时,脓毒症小鼠海马组织中M2型小胶质细胞显著减少,而GTS-21可显著增加M2型小胶质细胞的数量。结论 SAE小鼠海马组织中α7nAchR表达降低,使抑制炎症反应的M2型小胶质细胞减少, GTS-21可显著增加M2型小胶质细胞数量,减轻SAE小鼠的学习记忆障碍。     

慢性束缚应激对小鼠海马N6-甲基腺苷及相关酶表达的影响

目的 探讨慢性束缚应激对小鼠海马N6-甲基腺苷(m6A)及相关酶表达影响。方法 将20只C57BL/6J雄鼠随机分成对照(control)组、慢性束缚应激模型(CRS)组；给予CRS组小鼠3周慢性束缚应激建立小鼠焦虑模型，采用旷场实验和高架十字迷宫实验检测各组小鼠焦虑样行为变化；采用免疫组织化学法和m6A RNA甲基化检测试剂盒检测小鼠海马m6A的表达变化；采用Western blotting和Real-time PCR方法分析海马m6A相关酶表达变化。结果 1.小鼠焦虑相关行为学检测结果显示，与control组相比，CRS组小鼠在旷场内框停留时间明显下降(P<0.01);高架十字迷宫开放臂探索时间减少(P<0.0001);2. m6A RNA甲基化检测试剂盒检测结果显示，与control组相比，CRS组小鼠海马m6A含量明显减少(P<0.05);免疫组化结果显示，与control组相比，CRS组小鼠海马m6A阳性产物明显减少(P<0.001);3. PCR结果显示，与control组相比，CRS组小鼠海马去甲基化酶间变性淋巴瘤激酯B(AlkB)同源蛋白5(AL...