胃癌活检组织中p73基因mRNA表达

应用反转录多聚酶链反应技术(RT-PCR)及单链长度多态性分析法(SSLP),对45例胃镜活检取材的胃癌及相应正常组织标本中p73基因mRNA表达水平及p73基因微卫星位点的杂合缺失(LOH)进行分析,探讨该基因表达水平改变及杂合缺失与胃癌发生、发展的关系.     

幽门螺杆菌感染与ras和p53基因的关系

为明确幽门螺杆菌 (Ｈｐ)感染在胃癌及胃癌前病变中的作用机制 ,我们选择在本院行胃镜检查的患者 ,用聚合酶链反应 (ＰＣＲ) 单链构象多态性 (ＳＳＣＰ)直接测序 ,以检测胃黏膜标本中Ｃ Ｈａ ｒａｓ和ｐ5 3基因的突变情况。一、检测对象1997年 1～ 11月在本院行胃镜检查患者 12 0例 ,事先未接受抗Ｈｐ治疗。全部黏膜活检组织均经过病理证实 ,其中胃癌 30例 ,不典型增生 2 5例 ,肠化生 (胃溃疡或萎缩性胃炎伴肠化生 ) 2 5例 ,浅表性胃炎 2 0例 ,正常对照胃黏膜 2 0例。二、研究方法1 基因组ＤＮＡ的抽提 :方法参照文献 [1]。简述如下 :新鲜…     

幽门螺杆菌感染和端粒酶表达在胃黏膜癌变中的相关性研究

本文观察并比较了慢性浅表性胃炎 (ＣＳＧ)、慢性萎缩性胃炎 (ＣＡＧ ,伴肠化和不伴肠化 )及胃癌 (ＧＣ)组织中的端粒酶活性 ,并检测它们的幽门螺杆菌 (Ｈｐ)感染状况及患者血清Ｈｐ ＣａｇＡ ＩｇＧ水平 ,以分析胃黏膜癌变过程中 ,Ｈｐ感染与端粒酶表达的关系以及ＣａｇＡ阳性Ｈｐ与端粒酶表达的关系 ,从而探讨Ｈｐ致胃癌的作用机制。一、材料与方法1.组织标本来源 :14 2例组织标本为我院胃镜室 2 0 0 0年 9月至 2 0 0 1年 5月胃黏膜活检标本。在患者胃黏膜相邻活检部位钳取 7块组织 ,2块立即放入液氮中休克性冷冻 2 0ｍｉｎ后送 - 70°Ｃ…     

p27KIP1蛋白在胃癌组织中表达的意义

ｐ2 7ＫＩＰ1是在 1994年发现的一种细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂[1] 。它的过度表达能引起肿瘤细胞在Ｇ1到Ｓ期的阻断 ,与多种肿瘤形成有关。我们应用敏感而特异的免疫组化ＳＰ法 ,检测胃癌组织及正常胃组织中ｐ2 7ＫＩＰ1蛋白的表达 ,探讨 ｐ2 7ＫＩＰ1在胃癌发生、发展中的作用。材料和方法6 0例胃癌取自手术切除标本 ,正常胃组织标本 30例。取材后用 10 %中性甲醛固定 ,石蜡包埋 ,制成 5 μｍ厚切片 ,经苏木精 伊红染色和组织学观察 ,按ＷＨＯ标准分类 :6 0例胃癌中管状腺癌 38例 ,黏液癌 15例 ,未分化癌 7例。采用链菌素亲生物素 -过…     

胃癌组织中Survivin、PTEN、P53基因的表达及意义

目的　探讨凋亡抑制基因 Survivin和抑癌基因 PTEN、P53在胃癌组织中的表达及其与胃癌发生发展、临床病理特征之间的关系。方法　应用免疫组织化学链霉亲和素方法 (SABC) ,检测 Survivin、PTEN和 P53基因在 6 5例胃癌、2 6例不典型增生胃黏膜、10例浅表性胃炎和 30例正常胃黏膜组织中的表达。结果　胃癌组织中Survivin、PTEN、突变型 P53基因的阳性表达率分别为 70 %、4 8%、6 5 % ,不典型增生胃黏膜中分别为 4 2 %、85 %、31% ,Survivin和突变型 P53基因在正常胃黏膜和浅表性胃炎组织中不表达 ,PTEN基因在正常胃黏膜和浅表性胃炎组织中全部呈阳性表达。胃癌组织中 PTEN基因的表达与正常胃黏膜组织中的表达差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,胃癌组织、不典型增生胃黏膜以及正常胃黏膜中 Survivin和突变型 P53基因的表达差异均有显著性 (P<0 .0 5 )。随临床分期增加、胃癌分化程度降低、浸润深度加深、淋巴结的转移 ,突变型 P53基因的阳性表达率逐渐上升 (P<0 .0 5 ) ,PTEN基因的阳性表达率逐渐降低 (P<0 .0 5 )。在胃癌组织中 Survivin与突变型 P53基因的表达呈正相关 (P<0 .0 5 ) ,与 PTEN基因的表达呈负相关 (P<0 .0 5 ) ,PTEN基因与突变型 P53基因的表达呈负相关 (P<0 .0 5 )。结论　 Survivin、PTEN和 P53     

人胃癌p16/CDKN2基因蛋白质水平的异常表达

目的ｐ１６／ＣＤＫＮ２基因是新近发现的肿瘤抑制基因，已有研究表明该基因在许多肿瘤出现缺失、突变或重排．胃癌细胞系中有高频率纯合子缺失，应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和ＳＳＣＰ技术在胃癌手术标本中未发现有该基因的缺失．本文首次研究胃癌中ｐ１６／ＣＤＫＮ２基因在蛋白水平的表达．方法应用蛋白Ａ金探针免疫组化技术对３０例胃癌和２０例正常胃粘膜标本的ｐ１６进行分析．结果所有正常对照组均有ｐ１６表达，其阳性细胞百分率为７２５５％±１７２２％；而胃癌中的阳性细胞百分率为５４９０％±２８９０％，明显低于正常对照（Ｐ＜００５）．在肿瘤病例中有２３３３％（７／３０）ｐ１６表达减低，１０％（３／３０）未表达ｐ１６．此外有１例呈过度表达．结论胃癌中有ｐ１６的异常表达，免疫组化技术可能较准确地反映ｐ１６的表达，更适合于临床研究．     

p53基因突变及p53、APC基因缺失与胃癌关系的研究

为明确ｐ５３基因突变、缺失，ＡＰＣ基因缺失在胃癌发病机制中的作用，应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法对抑癌基因ｐ５３第４、５、６、７、８外显子、第６内含子在８７例胃癌及癌前病变中的突变规律以及ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法对ｐ５３基因第４外显子、第６内含子、ＡＰＣ基因在２５对胃癌及癌旁组织中的杂合缺失规律进行了探讨。结果发现，ｐ５３突变率在肠化、不典型增生、胃癌分别为３７．５％ （３／８），４２．１％（８／１９），５３．３％（１６／３０）。正常组织、浅表胃炎未发现ｐ５３突变。肠化、不典型增生、胃癌与正常对照组、浅表胃炎组相比均存在显著差异（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０１）。在肠化、不典型增生病变中未发现Ｅｘｏｎ８的突变，而在胃癌组Ｅｘｏｎ８的突变为４例（４／３０），提示Ｅｘｏｎ８的突变主要发生在晚期。在各病变组未发现Ｅｘｏｎ４、Ｉｎｔｒｏｎ６的突变。对Ｅｘｏｎ４、Ｉｎｔｒｏｎ６、ＡＰＣ基因的杂合缺失研究表明，２５对胃癌标本中有１９对Ｅｘｏｎ４杂合子，杂合率为７６．０％，９对有杂合缺失，ＬＯＨ为４７．４％，２３对Ｉｎｔｒｏｎ６杂合子，杂合率为９２．０％，其中２对为杂合缺失，ＬＯＨ为８．７％，１８对ＡＰＣ杂合子（１８／２５     

胃癌组织转化生长因子βⅡ型受体基因突变及表达的研究

肿瘤的发生、发展涉及到多基因的变异蓄积。转化生长因子 βⅡ型受体 (ＴβＲⅡ )基因是一种新的抑癌基因 ,其基因突变及表达降低或缺失是肿瘤细胞逃避转化生长因子 β(ＴＧＦ β)生长控制的原因之一 ,并参与人类许多肿瘤的演进过程。为了解胃癌组织ＴβＲⅡ的基因突变及表达情况 ,我们采用了ＰＣＲ ＳＳＣＰ法及ＤＮＡ序列分析技术和免疫组化ＳＰ法 ,对ＴβＲⅡ基因及表达产物进行了研究。材料与方法一、材料34例新鲜胃癌标本为湖南医科大学湘雅医院 1998年11月～ 1999年 7月手术切除标本 ,收集癌及手术断端切缘处正常胃黏膜组织 ,每份标…     

胃癌、胃黏膜异型增生组织中bcl-2、P53蛋白的表达及意义

胃癌是消化道最常见的肿瘤之一。在胃癌发生发展过程中的不同阶段 ,致病因素作用于于不同基因可引起相关基因结构和表达水平改变。 bcl- 2和 P53基因是较为重要的调控基因 ,了解胃癌组织中这两种癌基因表达状态的变化 ,有助于揭示胃癌的发生机制。2 0 0 1年 10月至 2 0 0 3年 4月 ,我们采用免疫组织化学 S- P法检测了 4 8例胃癌组织及 33例胃黏膜异型增生组织中 bcl- 2、P53的表达情况 ,以探讨其在胃癌发生发展中的作用。临床资料 :4 8例胃癌标本来自附属医院胃镜室胃黏膜活检或普外科手术切除的胃组织 ,均经病理证实。其中男 2 7例 ,女 2…     

p53、c-erbB-2、视网膜母细胞瘤和增殖细胞核抗原在胃癌和肠化生组织中的表达

胃癌的发生和发展是一复杂的过程 ,涉及到多基因多分子水平的变化。本实验用针对胃癌基因蛋白产物 [p5 3、c erbB 2和视网膜母细胞瘤 (Rb) ]和增殖细胞核抗原 (PC NA)的抗体进行免疫组化染色 ,对胃癌及肠化生组织连续切片同步进行多基因检测 ,分析不同蛋白产物在胃癌及肠化生组织中表达的差异 ,进而对筛检胃癌高危人群及临床早期诊断起到一定的帮助。一、资料与方法1.临床资料 :随机抽取复旦大学附属华山医院病理室存档 1995、1996年门诊胃镜活检标本共 73例 ,其中男 5 3例 ,女 2 0例 ,年龄 2 5～ 88岁 ,平均年龄为 5 2岁。所有标本切片…     

p53基因突变及p53,APC基因缺失与胃癌关系的研究

为明确ｐ５３基因突变，缺失，ＡＰＣ基因缺失在胃癌发病机制中的作用，应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法对抑癌基因ｐ５３第４，５，６，７，８外显子，第６内含子在８７例胃癌及癌前病变中的突变规律以及ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法对ｐ５３基因第４外显子，第６内含子，ＡＰＣ基因在２５对胃癌及癌旁组织的杂合缺失规律进行了探讨，结果发同，ｐ５３突变率在肠化，不典型增生，胃癌分别为３７．５％（３／８），４２．１％（８／１９），５３．     

TFF2、CLDN18、MUC5AC蛋白在胃黏膜病变过程中的表达变化及其临床意义

背景:胃癌是我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一,胃黏膜病变过程中早期分子标记是近年胃癌研究的重点。目的:探讨三叶因子2(TFF2)、闭合蛋白18(CLDN18)和黏蛋白5AC(MUC5AC)在不同胃黏膜病变中的表达情况及其临床意义。方法:选取2008年12月-2009年5月内蒙古自治区人民医院的胃镜活检和手术标本71例,其中正常胃黏膜组织20例,肠化生组织20例,异型增生组织11例,胃癌组织20例,采用免疫组化SP法检测TFF2、CLDN18和MUC5AC蛋白表达情况。结果:正常胃黏膜组织中TFF2、CLDN18和MUC5AC蛋白均为阳性表达,表达率为100%,而肠化生、异型增生以及胃癌组织中,三种蛋白阳性表达率依次逐渐下降,组间差异有统计学意义(P0.01)。结论:TFF2、CLDN18和MUC5AC蛋白表达水平与胃黏膜组织恶性程度密切相关,是潜在的预测胃癌发生、发展和预后的重要生物学标记。     

幽门螺杆菌感染的胃黏膜病变p16基因甲基化变化

幽门螺杆菌 (Ｈｐ)感染是胃癌发生的环境因素之一 ,已被国际癌症研究中心列为第一类致癌因子。但其致癌机制未明 ,更缺乏直接的分子生物学证据 ,为此 ,我们探讨了Ｈｐ感染的胃黏膜病变中抑癌基因 ｐ16甲基化变化。材料与方法一、材料1.标本 :183例患者中 ,5 7例胃癌 (ＧＣ)为本院手术标本(均为非贲门部胃癌 ) ,并经病理证实 ,12 6例为胃镜活检标本 ,作胃黏膜组织学检查 ,其中慢性浅表性胃炎 (ＣＳＧ) 30例 ,慢性萎缩性胃炎 (ＣＡＧ) 2 8例 ,肠化 (ＩＭ ) 32例 ,不典型增生(ＤＹＳ) 36例。Ｈｐ感染由快速尿素酶法和组织学Ｇｉｅｍｓａ染色确…     

老年胃癌活检标本与手术切除胃癌组织p53、c-erbB-2、p21、nm23基因表达检测的比较研究

目的 探讨胃镜活检标本与手术切除胃癌组织p53、c-erbB-2、p21、nm23联合基因产物表达检测对胃癌诊断与治疗的价值。方法 应用免疫组化技术检测了胃癌胃镜活检标本及手术切除胃癌组织p53、c-erbB-2、p21、nm23等基因产物表达并对胃镜活检标本与手术切除胃癌组织的检测结果进行了比较。结果 p53蛋白表达阳性率38．0％～46．2％，c-erbB-2为36．5％-59．2％，p21为39．4％～69．2％，nm23为34．6％-71．8％，在非胃癌组织（胃、十二指肠溃疡、胃息肉、重度不典型增生胃炎）未见c-erbB-2、p21、nm23等基因表达。c-erbB-2、p21的表达与胃癌的分化程度有关，p21、nm23基因表达与肿瘤浸润深度、肿瘤转移程度有关。p53、c-erbB-2、p21、nm23四种肿瘤蛋白在胃镜活检标本和手术切除标本中表达无显著性差异，胃镜活检标本和手术切除标本四种基因产物表达检测阳性符合率分别为92．2％、85．5％、96．9和94．2％。结论 对胃癌组织尤其胃癌胃镜活检标本p53、c-erbB-2、p21、nm23基因表达检测在胃部良恶性肿瘤鉴别、非手术临床分期的判断及指导临床治疗等方面具有一定价值。     

GFPT2在胃癌中的表达及作用的研究

目的通过检测胃癌和癌旁正常组织以及5种细胞株中谷氨酰胺果糖-6-磷酸转氨酶2(GFPT2)mRNA和蛋白的表达水平,探讨GFPT2表达与胃癌发生、转移的关系及意义。方法利用实时荧光定量PCR及Western blotting法检测GFPT2在33例患者配对的新鲜胃癌组织和癌旁正常组织(距离肿瘤边缘5 cm)标本、5种细胞株GES、MGC803、MKN45、BGC823及AGS中的表达情况,并利用免疫组织化学技术检测GFPT2在82例患者配对的胃癌及癌旁正常组织石蜡标本中的表达情况。结果 GFPT2 mRNA和蛋白在81.82%(27例)胃癌中呈高表达,且其在伴有肝转移的胃癌组织中的表达水平明显高于不伴有肝转移者。正常胃黏膜上皮细胞株GES中GFPT2 mRNA的表达水平明显低于胃癌细胞株MGC803、MKN45、BGC823和AGS(P0.05);胃黏膜上皮细胞株GES中GFPT2蛋白表达水平低于胃癌细胞株MGC803、MKN45、BGC823(P0.05),但与胃癌细胞株AGS中GFPT2蛋白表达水平差异无统计学意义。高转移潜能细胞株MKN45和BGC823中GFPT2的表达水平明显高于低转移潜能细胞株AGS及MGC803(P0.05)。GFPT2表达水平与胃癌分化程度呈负相关,与远处转移呈正相关(P0.05)。结论 GFPT2在胃癌组织中的表达上调,且与其转移密切相关,推测GFPT2可能具有促进胃癌转移的作用。     

胃癌与多肿瘤抑制基因甲基化的研究

目的：探讨抑癌基因ＭＴＳ１　５’端ＣｐＧ岛异常甲基化与原发性胃癌发病机制之间的关系。方法ＰＣＲ－甲基化检测法研究３１例胃癌标本和１９例正常胃组织中ＭＴＳ１基因５’端ＣｐＧ岛异常甲基化情况。结果：有３５．５％（１１／３１）的胃癌标本和５．３％（１／１９）正常胃组织出现ＭＴＳ１基因５’端ＣｐＧ岛异常甲基化,两者之间有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论：ＭＴＳ１基因５’端ＣｐＧ岛异常甲基化是其在原发性胃癌中的主要灭活机制,与胃癌的发生发展密切相关。     

生存素转录变异体在胃癌中的表达及其与细胞增殖、凋亡的关系

目的　研究生存素各转录变异体表达及其与胃癌细胞增殖和凋亡的关系。方法　采用实时荧光定量RT PCR技术 ,对 77例胃恶性肿瘤患者的肿瘤组织和正常胃黏膜的成对冰冻标本进行mRNA定量检测。对相同病例的石蜡标本 ,采用DNA缺口原位末端标记 (TUNEL)技术检测肿瘤细胞凋亡 ,免疫组化 (Ki 6 7)检测细胞增殖。结果　与患者正常胃黏膜比较 ,肿瘤组中 3个转录变异体表达水平显著上调 (P <0 .0 0 0 1)。野生型生存素在胃癌中的表达率为 10 0 .0 % (77/77) ,生存素 2B表达率是 79.2 % (6 1/77) ,并且高表达组为早期胃癌 (P =0 .0 0 1)、分化型胃癌 (P =0 .0 0 7)以及浸润浅的胃癌组织 (P =0 .0 31) ;生存素△Ex3在胃癌中的表达率为 6 4 .9% (5 0 /77) ,并且高表达组的凋亡指数显著降低(P =0 .0 19,r =0 .2 6 7)。本实验未发现生存素的 3个转录变异体表达水平与肿瘤细胞增殖指数相关。结论　生存素 2B的表达与肿瘤的分期、分化和肿瘤浸润深度相关 ,表明生存素 2B可能是野生型生存素和生存素 △Ex3的天然拮抗物 ;同时还发现生存素 △Ex3在胃癌组织中的表达与凋亡指数负相关。     

人胃癌细胞株和胃癌组织中XAF1基因表达缺失机制的研究

背景：X染色体连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）相关因子1（XAF1）是新发现的肿瘤抑制因子，其在多种肿瘤细胞株中表达降低或缺失。目的：探讨XAF1在人胃癌细胞株和胃癌组织标本中表达缺失的机制及其潜在临床意义。方法：收集46例原发性胃癌手术切除石蜡包埋组织标本和30例非肿瘤患者内镜活检胃黏膜标本，提取基因组DNA。采用逆转录聚合酶链反应（RT．PCR）和蛋白质印迹法检测人胃癌细胞株BGC-823和AGS中XAF1mRNA和蛋白水平的表达。采用重亚硫酸盐修饰的基因组DNA序列PCR（BS．PCR）检测胃癌细胞株中XAF1启动子区域CpG位点的甲基化状态：采用甲基化特异性（MS）-PCR和非甲基化特异性（US）-PCR检测胃组织标本中相同区域的甲基化状态。结果：XAF1在BGC-823和AGS细胞中低表达，同时伴有异常DNA高甲基化；经5-氮-2’-脱氧胞苷（5-Aza—CdR）处理48h后．XAF1表达显著增强。胃组织标本中，XAF1甲基化阳性率在癌组织中为78_3％（36／46），癌旁组织中为65．2％（30／46），癌远端切缘正常组织中为28_3％（13／46），差异有统计学意义（P〈0．05）；癌组织与癌远端切缘正常组织比较，XAF1甲基化阳性率差异有统计学意义（P〈0．01）；非肿瘤胃黏膜XAF1甲基化阳性率仅为6．7％（2／30），较癌远端切缘正常组织明显降低，但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：XAF1基因组DNA异常高甲基化是人胃癌组织中XAF1表达缺失的重要原因之-。XAF1高甲基化检测可作为-个潜在的胃癌早期诊断指标。     

p73基因在肺鳞癌组织中的表达

最近 ,Ｋａｇｈａｄ等[1] 发现了ｐ5 3基因家族的一个新成员 ,命名为ｐ73并定位于 1ｑ36 .2 36 3。它与ｐ5 3在氨基酸序列水平保持很高的同源性 ,却又存在着众多不同。ｐ5 3是迄今为止在人类肿瘤中最为常见的抑癌基因[1,2 ] 。其抑制细胞生长的能力是由于其可以特异性地结合到ＤＮＡ序列上并且激活包括细胞周期抑制因子ｐ2 1Ｗａｆ1/Ｃｉｐ1在内的一些靶基因的转录所致[3 ] 。大量研究表明 ,接近 5 0 %的肿瘤中存在着ｐ5 3基因的突变或表达异常[1,2 ] 。我们对 82份肺鳞癌组织及其相邻的正常肺组织的ｐ73基因进行了定量表达水平及突变情况…     

胃癌组织中幽门螺杆菌感染与某些抑癌基因杂合缺失相关性 …

流行病学研究提示,胃粘膜幽门螺杆菌 (Hp)感染与胃癌的发生有关。动物实验与体外实验发现 Hp慢性感染易引起胃粘膜细胞恶性转化 [1],分子生物学方面的研究亦证实 Hp感染与某些癌相关基因的改变存在相关关系 [2]。为从分子水平揭示 Hp感染在胃癌发生中的作用,本文采用 PCR技术对胃癌组织 Hp进行检测,并对 Hp感染与 APC、 MCC、 DCC基因和 YNZ22位点杂合缺失 (LOH)之间的关系进行分析。 材料与方法 　　 1.标本收集和 DNA提取： 51例胃癌组织均为我院 1995年 1月至 1997年 1月手术切除标本。手术切下肿瘤后立即收集癌组织和手…