全反式维甲酸对肾小球硬化的延缓效应

全反式维甲酸（ATRA）是维生素A在体内的天然活性衍生物，具有介导细胞分化、增殖、凋亡和免疫调节多种生物学活性。实验证明应用ATRA后对多种肾脏疾病动物模型有保护作用，可以减轻足细胞凋亡，抑制系膜细胞增殖及表型转化，促进基质金属蛋白酶-2表达上调，减少转化生长因子-β1、血小板源性生长因子-β的分泌及细胞外基质的沉积，延缓肾小球硬化的发生与发展，从而可能为肾小球硬化的防治找到新的防治方案。该文就ATRA延缓肾小球硬化的作用机制进行综述。     

酪氨酸激酶受体B及其配体脑源性神经营养因子水平对神经母细胞瘤耐药的影响

目的 研究酪氨酸激酶受体B（tyrosine kinase receptor,TrkB）及其配体脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）的表达水平对神经母细胞瘤（neuroblastoma,NB）细胞化疗敏感性的影响。方法 Western-blot技术检测不同纳摩尔浓度全反式维甲酸（all trans-retinoic acid,ATRA）诱导后TrkB蛋白水平变化;四甲基偶氮蓝比色（MTT）法检测细胞存活率;流式细胞仪（flow cytometer,FCM）检测细胞凋亡率;透射电镜检测凋亡细胞的形态。结果 （1）不同浓度ATRA（1、10、100nmol／L）处理神经母细胞瘤细胞SY5Y5d,TrkB蛋白水平随ATRA浓度增加而增加;（2）BDNF10ng／ml＋ATRA 10nmol／L＋顺铂（Cisplatin,CP）5μg／ml作用组细胞存活率、凋亡率同单用CP组比较均无显著差异,BDNF（50、100ng／m1）加相同浓度ATRA及CP组细胞存活率均明显高于单用CP组,凋亡率均明显低于单用CP组,BDNF 100ng／ml组存活率高于BDNF 50ng／ml组,凋亡率低于BDNF 50ng／ml组。ATRA 1nmol／L＋BDNF 50ng／ml＋CP 5μg／ml组细胞存活率、凋亡率同单用CP组比较无显著差异,ATRA 10、100 nmol／L加相同浓度BDNF及CP组细胞存活率均明显高于单用CP组,凋亡率均明显低于单用CP组,ATRA 100 1nmol／L组细胞存活率高于ATRA 10nmol／L组,凋亡率低于ATRA 10nmol／L组。（3）透射电镜技术观察到CP作用组可见到较多细胞呈凋亡改变,而ATRA 10nmol／L＋BDNF 50ng／ml＋CP 5μg／ml组细胞形态多数正常。结论 SY5Y对化疗药顺铂的敏感性受TrkB及BDNF水平的影响,二者水平越高越容易产生化疗耐药。     

全反式维甲酸、三氧化二砷联合地西他滨对SK-N-SH细胞系活性及分化的影响

目的通过检测全反式维甲酸(ATRA)、三氧化二砷(ATO)联合地西他滨(DAC)对神经母细胞瘤(NB)细胞系SK-N-SH活性及分化的影响,探讨上述药物联合应用提高NB疗效的可能性。方法不同浓度ATRA和DAC处理SK-N-SH细胞,测定其IC50。测定单药或联合用药处理后细胞的凋亡率并记录细胞形态;采用SPSS 20.0分析数据。结果 (1)ATRA及DAC均可抑制NB细胞增殖、促进凋亡,IC50_((ATRA))=372.5μM,IC50_((DAC))=452.5μM。(2)10μM ATRA联合DAC处理NB细胞,其凋亡率为(7.31±0.94)%,高于ATRA单药组(4.90±1.58)%和DAC单药组(4.62±0.99)%。3μM ATO联合DAC处理细胞,其凋亡率由(8.44±0.86)%增加至(15.51±1.80)%。(3)1μM、10μM浓度ATRA处理SK-N-SH细胞,开始分化的时间分别为7天和3天;随时间延长,细胞分化、死亡增多。5μM DAC单药,持续观察9天,未见分化细胞。联合用药组细胞分化出现更早。结论 (1)ATRA、DAC对SK-N-SH细胞有抑制增殖、促进凋亡和诱导分化的作用;(2)联合去甲基化药物DAC可提高ATRA对SK-N-SH细胞的杀伤作用和诱导分化作用;(3)联合去甲基化药物DAC可提高ATO对SK-N-SH细胞的杀伤作用。     

ATRA对K562细胞HOXA5基因表达与细胞周期、凋亡的影响

目的本研究旨在通过全反式维甲酸(ATRA)对人髓系白血病细胞株K562细胞的干预来分析同源盒基因(HOX)A5的表达变化及其与细胞周期、凋亡的关系,探讨HOXA5在髓系白血病发生、发展过程中的作用,为临床治疗白血病提供实验依据。方法通过细胞增殖-毒性实验(CCK-8)筛选出ATRA干预K562细胞的最佳浓度值。流式细胞术检测10μmol/LATRA分别干预K562细胞24 h、48 h和72 h后,各组细胞的凋亡情况及细胞周期分布的变化。实时荧光定量PCR技术、蛋白免疫印迹法测定K562细胞中HOXA5 mRNA及蛋白的表达情况,并分析HOXA5 mRNA及蛋白的表达与细胞周期、凋亡的关系。结果 K562细胞中可以检测到HOXA5 mRNA及蛋白的表达,ATRA干预K562细胞后HOXA5 mRNA及蛋白的表达量升高,细胞凋亡率明显增加(P0.05),细胞增殖周期被阻抑在G_0/G_1期,细胞增殖受抑,且HOXA5 mRNA及蛋白的表达量与细胞凋亡率呈正相关(r=0.944,r=0.826),与细胞周期G0/G1期增加百分比呈正相关(r=0.870,r=0.962),与S期降低百分比呈负相关(r=-0.946,r=-0.926)。结论 ATRA干预K562细胞后,细胞中HOXA5 mRNA及蛋白的表达量升高;ATRA可能通过上调HOXA5 mRNA及蛋白的表达抑制K562细胞增殖,促进细胞凋亡。     

苦参碱联合顺铂对SH-SY5Y细胞药物敏感性及TrkB表达的影响

目的探讨不同浓度苦参碱对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞存活及凋亡的影响,及苦参碱降低顺铂化疗耐药性的作用及可能机制。方法分别以全反式维甲酸(ATRA)、脑源性神经生长因子(BDNF)、顺铂、苦参碱处理SH-SY5Y细胞,实验分对照组、ATRA诱导的顺铂干预组、顺铂干预组、苦参碱干预组、苦参碱联合顺铂干预组。应用四甲基偶氮蓝比色法检测苦参碱与顺铂对SH-SY5Y细胞存活率的影响,流式细胞仪检测苦参碱与顺铂对SH-SY5Y细胞凋亡率的影响,Western-blot方法检测SH-SY5Y细胞的p-TrkB表达。结果除ATRA诱导的顺铂干预组外,其余各组SH-SY5Y细胞的存活率及凋亡率与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);顺铂干预组与ATRA诱导的顺铂干预组比较,SH-SY5Y细胞的存活率及凋亡率差异有统计学意义(P<0.05);相同浓度的苦参碱干预组与苦参碱联合顺铂干预组比较,SH-SY5Y细胞的存活率及凋亡率差异有统计学意义(P<0.05);苦参碱联合顺铂组与顺铂干预组比较,SH-SY5Y细胞的存活率及凋亡率差异有统计学意义(P<0.05)。苦参碱0.5 mg/ml组与顺铂干预组比较,SH-SY5Y细胞的存活率及凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。各组SH-SY5Y细胞间,p-TrkB的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论苦参碱可以抑制SH-SY5Y细胞的增殖并诱导凋亡,从而提高顺铂化疗的敏感性,该作用与TrkB/BDNF信号通路(间)无相关性。     

丹参酮ⅡA对HL-60细胞人端粒酶反转录酶表达的影响

目的 研究丹参酮ⅡA(TanⅡA)对HL-60细胞的人端粒酶反转录酶(hTERT)表达的影响,探讨TanⅡ诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制.方法 用RPMI 1640培养HL-60细胞,培养24 h后分为3组[TanⅡA组、全反式维A酸(ATRA)组、对照组],分别加入500 μg·L-1TanⅡA、500 μg·L-1ATRA和0.1 mL·L-1二甲基亚砜治疗5d.加药前和加药后每天分别收集细胞,采用锥虫蓝染色后计数活细胞,流式细胞仪(FCM)检测HL-60细胞凋亡率,半定量RT-PCR法测定HL-60细胞hTERT相对表达水平.结果 与对照组比较,药物治疗2d后,TanⅡA组和ATRA组HL-60细胞的生长均明显受到抑制(Pa＜0.05),TanⅡA组和ATRA组的抑制作用比较差异无统计学意义(p＞0.05).TanⅡA组和ATRA组在药物治疗2d后细胞凋亡率分别为32.11％,23.31％,均明显高于对照组(6.08％)(Pa＜0.05),且细胞凋亡率逐日上升,而对照组细胞凋亡率无明显变化.药物处理1d后,TanⅡA组和ATRA组的HL-60细胞hTERT相对表达水平均明显低于对照组(Pa＜0.05),且表达水平逐日下降,而对照组表达水平无明显变化.结论 丹参酮ⅡA抑制HL-60细胞生长、诱导细胞凋亡可能与下调hTERT基因表达水平有关.     

白细胞介素-17对足细胞相关分子和凋亡的影响及其分子机制研究

目的 研究白细胞介素(interleukin,IL)-17对足细胞相关分子及其凋亡的影响,并探讨可能的分子机制.方法 以体外培养的足细胞作为研究对象,流式细胞仪检测不同浓度(1、10、50、100nm/ml)和不同作用时间(12、24、48、72h)IL-17对足细胞凋亡的影响;将足细胞分为空白对照组及100ng/ml IL-17诱导组,Real-time RT PCR法检测IL-17对足细胞相关分子Nephrin、WT1、Synaptopodin及阴离子蛋白Podocylaxin、凋亡受体Fas和FasL mRNA表达的影响;流式细胞仪检测足细胞Fas和FasL蛋白的表达;免疫细胞化学法检测足细胞WT1、Caspase8、Caspase3蛋白的表达.结果 (1)IL-17可促进足细胞凋亡,呈时间、剂量依赖性;同时IL-17可增加足细胞凋亡受体Fas的表达(P<0.01),并且增加其下游分子Caspase8、Caspase3的表达(P<0.01);(2)IL-17减低足细胞阴离子蛋白Podocylaxin的表达(P<0.05),对Nephrin、WT1、Synaptopodin的表达无影响(P>0.05).结论 IL-17可能通过抑制足细胞阴离子蛋白Podocylaxin表达,引起足细胞凋亡的方式来发挥对肾脏的损伤作用.     

亚溶量C5b-9与足细胞损伤及其信号传导的研究进展

膜性肾病的发病机制与亚溶量C5b-9(SC5b-9)诱导足细胞损伤有关.SC5b-9刺激足细胞产生的氧化剂、蛋白酶、前列腺素类、细胞外基质及各种细胞因子对足细胞有损伤作用.SC5b-9对足细胞的作用主要表现为引起足细胞凋亡、足细胞脱落以及对细胞周期的影响.MAPK通路在SC5b-9导致足细胞损伤中起到重要的作用.     

甘草甜素及地塞米松干预嘌呤霉素诱导足细胞损伤的体外研究

目的 观察甘草甜素(GL)及地塞米松(DEX)对受损足细胞凋亡的影响,探讨其细胞学作用机制.方法 建立嘌呤霉素(PAN)致足细胞损伤模型,应用不同水平PAN(12.5mg?L-1“、25.0mg?L-1、50.0 mg?L-1、75.0 mg?L-1、100.0 mg?L-1)作用于足细胞,培养48 h后检测细胞凋亡率,选取合适的PAN作用质量浓度.将体外培养小鼠足细胞(MPC5)分为对照组、PAN组、DEX1组、DEX2组、DEX3组、GL1组、GL2组、GL3组,对照组加入等体积RPMI 1640培养液培养;PAN组加入PAN,终质量浓度50 mg?L-1;DEXL、2、3组同时加入PAN(终质量浓度50 mg?L-1)和DEX(终浓度分别为0.1μmol?L-1、1.0 μmol?L-1、10.0 mol?L-1);GL1、2、3组同时加入PAN(终质量浓度50.0 mg?L-1)和GL(终质量浓度分别为400 n1g?L-1、600 mg?L-1、800 mg?L-1),培养48 h.流式细胞仪检测各组细胞凋亡率.结果 50.0 nmg?L-1 PAN诱导足细胞凋亡较对照组明显升高(P＜0.05),75.0 mg?L-1、100.0 nmg?L-1PAN诱导足细胞凋亡率显著升高,大部分足细胞死亡(Pa＜0.01).DEX1组、2组足细胞凋亡率明显低于PAN组(Pa＜0.05),DEX 3组(10.0 μmol?L-1)干预后足细胞凋亡率显著低于PAN组(P＜0.01).不同质量浓度GL组干预后足细胞凋亡率均显著低于PAN组(Pa＜0.01),随GL质量浓度升高,其抗足细胞凋亡作用降低(P＜0.05).结论 PAN可呈剂量依赖性诱导足细胞损伤,50.0 mg?L-1 PAN为诱导合适的质量浓度.GL及DEX对PAN诱导足细胞损伤均有保护作用,DEX呈剂量依赖方式抑制足细胞凋亡,GL发挥抗足细胞凋亡作用与剂量有关.     

小剂量维甲酸诱导对神经母细胞瘤耐药的影响

目的探讨小剂量维甲酸诱导对神经母细胞瘤(NB)化疗耐药的影响。方法选择人NB细胞株SH SY5Y,用RT PCR方法检测小剂量全反式维甲酸(ATRA)作用下TrkB mRNA水平;通过四甲基偶氮蓝比色(MTT)法及流式细胞仪(FCM)检测ATRA诱导前后顺铂对人NB细胞株SH SY5Y的生长及凋亡的影响。结果SH SY5Y中未检测到TrkB mRNA表达,用1、10、100nM/LATRA诱导5d后可检测到TrkB mRNA表达,且随ATRA浓度增加TrkB mRNA水平逐渐升高。100nM/LATRA诱导7d,TrkB mRNA的相对比值与诱导5d比差异无显著性意义(P>0.05);MTT分析显示:BDNF+顺铂组(无TrkB表达)、ATRA+顺铂组(无BDNF刺激)细胞存活率同单用顺铂组比较无显著性差异(P>0.05);10nM/LATRA+BDNF+顺铂组NB细胞存活率明显高于单用顺铂组(P<0.01);FCM分析显示:ATRA+BDNF+顺铂组NB细胞凋亡率明显低于单用顺铂组(P<0.01)。结论存在BDNF的条件下,小剂量ATRA能阻断顺铂对SH SY5Y的细胞毒性作用,从而使SY5Y细胞对化疗耐药。     

全反式维甲酸对脐血粒-单系祖细胞HOXB6基因表达的影响

目的探讨脐血造血干祖细胞(HSPC)向粒-单系(CFU-GM)增殖过程中HOXB6mRNA表达及全反式维甲酸(ATRA)对HOXB6mRNA表达的影响。方法1.采用造血祖细胞体外培养技术,以ATRA持续干扰人类造血干祖细胞,观察人脐血HSPC经人粒细胞-单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)诱导后,在培养过程第3天,7天和12天的CFU-GM集落生成情况。2.采用实时荧光定量PCR技术(FQ-RT-PCR)检测造血祖细胞增殖分化过程中HOXB6基因的表达水平。3.结果用DNA相对拷贝数和RNA表达相对量(2-△△Ct)表示HOXB6基因相对表达量。结果1.人类造血干祖细胞向粒单系增殖分化过程中,各组细胞HOXB6基因均表达;2.随时间延长,CFU-GM-HOXB6-mRNA在增殖分化的第7天表达最强烈,第12天表达明显减弱;3.与正常对照组比较,ATRA可上调HOXB6基因的表达。结论1.在脐血CFU-GM祖细胞的不同增殖阶段,HOXB6基因呈现持续稳定的表达,提示HOXB6是人类造血干祖细胞向粒单系正常增殖分化过程中的调控基因之一;2.ATRA能显著上调HOXB6基因的表达。     

脐血粒系祖细胞发育过程同源盒基因B7的表达及干预

目的 探讨人类脐血造血干细胞向粒系祖细胞发育过程中同源盒(HOX)B7 mRNA和蛋白的表达及全反式维A酸(ATRA)和(或)三氧化二砷(As2O3)对脐血粒系祖细胞发育过程中HOXB7表达的影响.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)、Western-blot技术测定空白对照组、ATRA组、As2O3组、ATRA+As2O3组造血干细胞向粒系祖细胞增殖过程中HOXB7 mRNA及蛋白表达水平.结果 1.琼脂糖凝胶电泳显示RNA电泳图的5 S,18 S,28 S 3条带型整齐,无明显拖尾及弥散,说明RNA结构完整,无明显降解.2.反转录PCR扩增各组均有目的 基因HOXB7和内参照ACTB基因的cDNA产物,与DNA分子Marker相比扩增产物大小分别如下:HOXB7为129 bp,ACTB基因为111 bp,与预定理论值大小符合.3.人类造血干细胞向粒系祖细胞增殖分化过程中,空白对照组、ATRA组、As2O3组及ATRA+As2O3组的HOXB7 mRNA第3天少量表达,第7天表达较强烈,第12天表达减弱;空白对照组、ATRA组的HOXB7蛋白在增殖分化的第3天少量表达,第7天表达较高,第12天表达减弱,As2O3组及ATRA+As2O3组的HOXB7蛋白的表达在各时间点无明显差异.4.与空白对照组比较,ATRA组HOXB7 mRNA及蛋白的表达上调(P<0.05),而As2O3组HOXB7的表达无明显差异(P>0.05).结论 HOXB7基因可能是人类造血干祖细胞向粒系祖细胞增殖分化过程的调控基因之一,HOXB7基因与粒系造血有相关性.ATRA治疗白血病的作用可能与调节HOX基因的表达有关.As2O3对HOXB7 mRNA及蛋白的表达无明显调节作用.     

正常骨髓基质细胞对全反式维甲酸诱导分化HL-60细胞的作用

目的研究BMSC对ATRA抑制HL-60细胞增殖、诱导其分化的作用。方法分别将融合的基质细胞层(SC)、2%戊二醛固定的基质细胞层(FSC)和基质细胞,条件培养液(SCM)与HL-60细胞共同培养。SC、FSC、SCM组分别加或不加ATRA为实验组,另设阴性对照和ATRA对照组。通过细胞计数观察细胞增殖情况及通过细胞形态观察,NBT还原试验,分析细胞分化状态。结果细胞计数示SC、FSC、SCM各组均能抑制悬浮生长的HL-60细胞的增殖;SC和FSC能增强ATRA对HL-60细胞的抑制增殖作用(P<0·01)。SC、FSC、SCM各组的诱导分化率、NBT还原率等分化指标均与阴性对照组无差异(P>0·05);SC和FSC可促进ATRA对HL-60细胞的诱导分化作用(P<0·01)。结论BMSC可增强ATRA对悬浮生长的HL-60细胞的抑制增殖和诱导分化作用,这可能是通过BMSC与HL-60细胞之间的相互作用调节的。     

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??Abstract??Objective??To observe the expression of hoxa9 gene and hoxa10 gene in the process of the differentiation and proliferation of hematopoietic stem cell to Colony Forming Unit-Granulocyte??CFU-G??in vitro??and to explore the possible mechanism of HCMV-induced maldevelopment to human cord blood Granulocyte Progenitor in genic level. Methods??Twelve cases of cord blood were collected from fetal placenta umbilical vein. By the colony culture in vitro?? the impact of HCMV-AD169 and ATRA on the CFU-G colony formation was observed?? then detect the expression of hoxa9 and hoxa10 genes in the differentiation progress of Hematopoietic Stem Cell ??HSC?? to CFU-G affected by HCMV and/or ATRA on the third?? seventh?? and twelfth day. Results??Homeobox genes did have a regulatory function in the differentiation process of hematopoiesis. Compared with the expression of hoxa9 and hoxa10 genes on day 3?? the quantity of hoxa9 and hoxa10 genes was obviously higher on day 7 and lower on day 12 respectively in each group. Compared with the expression of hoxa9 and hoxa10 genes of normal group?? the expression of hoxa9 and hoxa10 of the group ATRA was up-regulated remarkably??while the expression of hoxa9 and hoxa10 of the group HCMV was down-regulated. ATRA was against the down-regulated effect caused by HCMV. Conclusion??The hoxa9 and hoxa10 gene are correlated to the manipulation of the proliferation and differentiation of granulocyte progenitor cell. The abnormal expression of hoxa9 and hoxa10 gene induced by HCMV may play an important role in HCMV-induced abnormal hematogenic damage. ATRA?? 6×10-8 mol/L??can up-regulate the expression of hoxa9 and hoxa10 genes??which confirms the theory that the normal hematopoietic lineage determination and maturation rely on the stable and consistently expression of Homeobox genes.     

ATRA诱导神经母细胞瘤细胞分化及TrkB表达的研究

通过对神经母细胞瘤 (ｎｅｕｒｏｂｌａｓｔｏｍａ,ＮＢ)细胞系ＳＭＳ ＫＣＮＲ的体外实验 ,探讨全反式维甲酸 (ＡＴＲＡ)对ＮＢ细胞增殖抑制的可能分子机制及ＢＤＮＦ(脑源性神经 营养因子 ) ＴｒｋＢ信号转导途径在ＮＢ细胞分化中的作用。通过台盼蓝拒染计数活细胞 ;用倒置相差显微镜观察加药处理前后细胞形态学变化 ;通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交来分析ＴｒｋＢ基因表达情况的改变。结果 :5μＭＡＴＲＡ抑制ＮＢ细胞系ＳＭＳ ＫＣＮＲ细胞增殖 ,而 5ｎＭＡＴＲＡ无此作用 ;ＡＴＲＡ可诱导ＳＭＳ ＫＣＮＲ细胞分化成熟 ;细胞分化过程中伴随ＴｒｋＢ基因表达水平增高。结果显示 :5μＭＡＴＲＡ对人ＮＢ细胞系ＭＳＭ ＫＣＮＲ细胞的体外增殖有抑制作用 ;ＡＴＲＡ能诱导人ＮＢ细胞系ＳＭＳ ＫＣＮＲ细胞分化成熟 ;ＴｒｋＢ基因表达水平的增高可能是ＡＴＲＡ体外诱导ＮＢ细胞分化逆转的分子生物学机制之一。     

造血干细胞分化过程中HOXB6基因表达及干预研究

目的探讨脐血造血干细胞(HSC)向粒-单系(CFU-GM)、红系(CFU-E)和淋巴系祖细胞(CFU-TL)增殖分化过程中HOXB6基因的表达情况及全反式维A酸(ATRA)对其的影响。方法1.采用造血干/祖细胞体外培养技术,以ATRA持续干扰人类脐血造血干/祖细胞,观察HSC经人粒细胞-单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)、促红细胞生成素(EPO)和植物血凝素(PHA)分别诱导后,在培养第3天、第7天和第12天的CFU-GM、CFU-E及CFU-TL集落生成情况。2.采用实时荧光定量RT-PCR技术(FQ-RT-PCR)检测造血干细胞增殖分化过程中HOXB6基因的表达水平。结果1.人类造血干细胞向CFU-GM、CFU-E和CFU-TL增殖分化过程中,各组细胞HOXB6基因均有表达。2.随时间推移,CFU-GMHOXB6 mRNA在增殖分化的第3天开始表达,第7天表达最强烈,第12天表达明显减弱;CFU-E HOXB6 mRNA表达在第3天、第7天和第12天均持续增强;而在CFU-TL中,HOXB6 mRNA表达在第7天最强烈,第12天表达减弱。3.与对照组比较,ATRA可上调各组HOXB6基因的表达。结论1....     

全反式维甲酸对K562细胞的诱导分化作用

目的：全反式维甲酸(ATRA)对肿瘤细胞具有广泛的抑制增殖、促进分化作用。本研究通过体外培养检测ATRA对K562细胞是否具有诱导分化作用。方法：采用联苯胺染色、瑞氏染色、非特异性酯酶染色、硝基四唑氮蓝还原试验4种不同的染色方法及流式细胞术,观察经1μmol/L及2.5μmol/L ATRA诱导1d,4d,5d后,K562细胞出现诱导分化特征。结果：1μmol/L及2.5μmol/L ATRA均可诱导K562细胞向粒系分化。培养4d,1μmol/L ATRA组61.5％的K562细胞、2.5μmol/L组39％的K562细胞显示出向粒系成熟方向分化;培养5d,处理组的分化细胞数仍明显高于对照组(P<0.05),但两种浓度ATRA的诱导分化强度无统计学差异(P>0.05)。且均未出现向红系或单核细胞方向分化的特征。流式细胞仪检测ATRA诱导前后CD13及CD71的表达,1μmol/L ATRA诱导K562细胞1d,CD13抗原表达阳性率为8.0％,2.5μmol/L组则为6.7％,均高于对照组(2.1％)。培养5d,1μmol/L和2.5μmol/L AFRA组的CD13分别升高到28.1％,37.8％,而CD71则分别下降至1.2％和0.9％。与对照组比差异均具有显著性(P<0.05)。结论：ATRA可诱导K562细胞向粒系成熟方向分化。     

造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中HOXC6基因表达的研究

目的探讨人脐血造血干细胞(HSC)向淋巴系祖细胞增殖分化过程中HOXC6基因表达的情况及全反式维甲酸(ATRA)对HOXC6基因表达的影响。方法采用造血干/祖细胞体外培养技术,以ATRA持续诱导人脐血造血干细胞,观察人脐血HSC经植物血凝素(PHA-M)诱导后,在培养过程第3、7和12天的淋巴系祖细胞集落生成情况;采用实时荧光定量PCR技术检测人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中HOXC6基因的表达水平。结果人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中,HOXC6基因表达呈现时间规律性。结论HOXC6基因在增殖分化的第7天表达最强烈,第12天表达明显降低,提示HOXC6基因与人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程密切相关,可能是其调控基因之一。ATRA能显著上调HOXC6基因的表达。