胚胎期铅暴露对子代大鼠摄食和排便行为的影响及可能机制

目的探讨胚胎期铅暴露对子代大鼠摄食、排便行为的影响及可能机制。方法采用SpragueDawley大鼠孕期自由饮用0.1%(低剂量铅暴露组)和0.2%醋酸铅(高剂量铅暴露组)溶液的方法建立胚胎期铅暴露模型,并设空白对照组。将各组母鼠娩出的雄性仔鼠纳入研究,各组分别取10只仔鼠观察其在摄食、排便、胃排空、小肠推进及胃黏膜病理性炎性反应等方面的变化特点;各组分别取8只仔鼠,应用电镜技术、免疫组化等方法从空肠微绒毛及细胞连接超微结构变化,以及摄食中枢胆囊收缩素-8(CCK-8)、胃动素(MTL)的表达等方面揭示胚胎期铅暴露仔鼠胃肠动力异常的可能机制。结果与对照组比较,高、低剂量铅暴露组仔鼠每日摄食量下降,粪便含水量增加,粪粒质量减少,小肠推进速度增加(P0.05);高剂量铅暴露组仔鼠胃排空能力较对照组下降(P0.05)。与对照组比较,胚胎期铅暴露仔鼠胃黏膜出现明显的病理炎性改变(P0.05);空肠微绒毛减少、长度短缩及上皮间桥粒数目减少、致密斑间隙扩大(P0.05);摄食中枢MTL、CCK-8表达增加(P0.05);上述改变的程度与铅暴露剂量间有剂量-效应关系。结论胃肠结构损害程度,以及CCK和MTL在中枢的表达水平具有铅剂量依赖性,这可能是胚胎期铅暴露仔鼠出现异常的摄食、排便及消化功能改变的重要机制。     

热性惊厥大鼠海马区c-Fos蛋白表达及苔藓纤维发芽特征

目的探讨热性惊厥(FS)大鼠海马区c-Fos蛋白表达及苔藓纤维发芽(MFS)特征。方法21日龄雄性SD大鼠36只分为热性惊厥(FS)组、发热对照(FG)组及正常对照(NG)组,每组12只。采用热水浴法建立FS模型,应用免疫组织化学和Timm′s染色方法对海马CA1、CA3区的c-Fos蛋白表达和MFS进行观察。结果FS组大鼠海马CA1区有c-Fos蛋白过度表达,FS组c-Fos蛋白面积百分比[(2.26±0.23)%]较FG组[(1.08±0.19)%]和NG组[(0.71±0.14)%]高,FS组与其他两组的差异有显著意义(χ2=10.48 P<0.01);FS、FG、NG组c-Fos蛋白平均灰度值依次为(139.43±3.64)(、159.26±3.66)、(170.88±3.58),3组差异有显著意义(F=12.31 P<0.01)。NG组海马CA3区未见MFS,FS、FG组的MFS评分依次为(4.30±0.80)、(1.45±0.68)分,两组差异有显著意义(t=12.14 P<0.001),提示FS组海马CA3区出现显著的MFS;FS组大鼠惊厥2、6、10次后MFS的平均宽度及面积百分比依次为[(19.71±4.68)μm、(21.53±6.87)%]、[(28.57±5.19)μm、(38.22±7.15)%]及[(43.16±5.65)μm、(54.42±7.69)%],不同惊厥次数间的差异有显著意义(F=22.47 P<0.01;χ2=18.77 P<0.01)。结论FS发作可引起大鼠海马CA1区c-Fos蛋白过度表达,并促使CA3区异常苔藓纤维发芽。FS可导致近期及远期海马结构病变。     

胚胎期和哺乳期铅暴露对仔鼠海马代谢型谷氨酸受体5表达的影响

目的探讨胚胎期和哺乳期不同程度的铅暴露对断乳仔鼠海马组织代谢型谷氨酸受体5亚型(mGluR5)mRNA和蛋白表达的影响。方法健康成年雌性SD大鼠分为高铅组、中铅组、低铅组和对照组,分别给予0.5%、0.2%、0.05%醋酸铅溶液和双蒸水自由饮水,1周后雌雄合笼,仔鼠断乳时用原子吸收和等离子电感耦合质谱仪测定仔鼠血铅和海马铅含量,用荧光定量PCR和Western blot检测发育脑海马mGluR5mRNA和蛋白的表达水平。结果铅暴露组血铅和海马铅含量高于对照组,且铅暴露剂量越大,血铅和海马铅含量越高(P<0.05)。高铅组、中铅组和低铅组mGluR5mRNA表达量与正常对照组相比下降,比值分别为0.66、0.78和0.82。高铅组、中铅组和低铅组mGluR5蛋白表达较正常对照组下调,铅暴露剂量越高,mGluR5蛋白表达水平越低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论海马mGluR5可能参与了铅对神经发育的毒性作用,可能是铅神经发育毒性的中间环节之一。     

发育期慢性铅暴露对大鼠血浆、脑脊液和海马中瘦素表达的影响

目的 研究发育期铅暴露对大鼠血浆、脑脊液和海马中瘦素表达的影响,探索瘦素是否和铅暴露引起的认知损伤机制有关。方法 通过在大鼠饮水中添加醋酸铅建造慢性铅暴露后大鼠认知损伤模型,根据饮水中醋酸铅的浓度可分为对照组 （0 ppm）、低铅组 （50ppm）、中铅组 （200ppm） 和高铅组 （1000ppm）,每组16只。采用原子吸收光谱法检测各组大鼠血浆、脑脊液和海马中铅含量;ELISA法检测大鼠血浆和脑脊液中的瘦素水平;免疫组化法观察瘦素在海马组织中的分布;Western blot法对大鼠海马中瘦素蛋白水平进行相对定量分析。结果 与对照组相比,铅暴露组大鼠血浆、脑脊液和海马中铅含量均升高,而血浆和脑脊液中瘦素水平均下降 （P < 0.05）。免疫组化结果显示,瘦素主要分布于海马CA区锥体神经细胞胞浆中。Western blot结果显示,与对照组相比,3个铅暴露组大鼠海马中瘦素蛋白表达水平略升高,但差异均无统计学意义 （P > 0.05）。结论 铅暴露可使大鼠血浆和脑脊液瘦素水平降低,这可能与铅暴露引起大鼠认知能力损伤的机制有关。     

EphA5/ephrinA5在癫癎大鼠海马CA3区的表达变化及作用

探讨EphA5及其配体ephrinA5在癫癎大鼠模型海马内表达变化及其在颞叶癫癎发病中的作用。方法将240只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为对照组(n=120)和癫癎组(n=120),建立氯化锂-匹罗卡品颞叶癫癎大鼠模型。致癎后分别选取12 h、24 h、7 d、15 d、30 d和60 d 6个时间点为亚组(n=20),采用原位杂交法检测各亚组大鼠海马CA3区和齿状回(DG)ephrinA5 m RNA表达水平(n=9);采用免疫组化法检测各亚组大鼠海马CA3区和DG EphA5蛋白的表达水平(n=9);采用Neo-Timm银染法观察各亚组大鼠海马CA3区的苔藓纤维出芽情况(n=2)。结果原位杂交结果显示:ephrinA5 m RNA在海马CA3区可见表达,但在DG无表达;与同时间点对照组相比,致癎后7 d、15 d,癫癎组大鼠海马CA3区ephrinA5 m RNA表达明显下调(P0.05),在致癎后30 d、60 d,癫癎组大鼠海马CA3区ephrinA5 m RNA表达逐渐上调(P0.05),且与对照组相比差异无统计学意义(P0.05)。免疫组化结果显示:EphA5蛋白在大鼠海马CA3区及DG区均有表达,其水平变化趋势与ephrinA5 m RNA相一致。Neo-Timm银染法结果显示:致癎后7 d、15 d,癫癎组大鼠海马CA3区存在明显苔藓纤维出芽。结论配体ephrinA5协同受体EphA5在海马CA3区的表达下调,可能共同参与了CA3区的苔藓纤维出芽作用机制,并与癫癎的发生、发展关系密切。     

不同成熟期大鼠致(癎)后海马结构损伤的年龄依赖性

目的观察不同成熟期大鼠脑致后海马结构损伤的年龄依赖关系。方法对生后10、20、60d(P10、P20、P60)不同发育期大鼠(每组各8只),用戊四氮(PTZ)反复点燃5d,对照组(18只)用9g/L盐水。应用常规病理观察海马结构的形态学改变,并对海马CA1、CA3、DG及门区进行细胞计数,应用Timm组织化学染色方法进行苔藓纤维发芽的研究,观察不同成熟期脑致后大鼠海马结构损伤是否存在年龄依赖性。结果1.P10、P20实验组与对照组比较海马齿状回CA1、CA3区无明显的神经元丢失;P10齿状回DG区颗粒细胞计数实验组(23.25±3.058)较对照组(16.25±1.58)显著增多(t=5.752P<0.01);P60组CA1、CA3区神经元计数实验组(8.22±1.88,5.62±1.68)较对照组(6.31±1.50,3.62±1.40)明显减少(t=2.246,2.587Pa<0.05),DG区无明显改变(t=0.571P>0.05);2.各组海马CA3区锥体细胞层均可见苔藓纤维发芽,其中P60(3.25±1.03)较P10、P20(1.5±0.92,2.12±0.83)明显增加(F=6.514P<0.01)。结论1.年龄越小,致后大鼠海马神经元损伤、病理性苔藓纤维发芽越轻,对惊厥性脑损伤具有更强的耐受性。2.发育鼠齿状回颗粒细胞增生可能是苔状纤维发芽的启动机制。     

黄芩苷对注意缺陷多动障碍模型大鼠行为学特征的影响研究

目的研究黄芩苷对注意缺陷多动障碍(ADHD)模型大鼠行为学特征的影响,为黄芩苷治疗ADHD的进一步研究提供依据。方法将40只SHR大鼠随机分为模型组、盐酸哌甲酯组及黄芩苷低、中、高剂量组,每组8只,另设8只WKY大鼠为正常对照组。盐酸哌甲酯组(0.07 mg/mL)及黄芩苷低剂量(3.33 mg/mL)、中剂量(6.67 mg/mL)、高剂量(10 mg/mL)组分别按体重(1.5 mL/100 g)给予对应药物灌胃,正常对照组、模型组给予等量生理盐水灌胃,各组大鼠灌胃4周,每日2次。旷场实验观察实验第0天及灌胃后7、14、21、28 d各组大鼠的总运动距离及平均运动速度,评估药物对大鼠多动、冲动行为的控制作用;Morris水迷宫实验观察各组大鼠的潜伏期、目标象限活动比率及穿越平台次数,评估药物对大鼠注意力的影响。结果旷场实验数据显示,第0天,模型组及各用药组大鼠的总运动距离及平均运动速度均显著高于正常对照组(P0.05);第7天,盐酸哌甲酯组总运动距离及平均运动速度较模型组显著降低(P0.05);第14天,盐酸哌甲酯组及黄芩苷高剂量组大鼠在总运动距离及平均运动速度上均较模型组显著降低(P0.05);第21天及第28天,黄芩苷各剂量组在总运动距离及平均运动速度上较模型组均呈不断下降趋势(P0.05)。水迷宫空间探索实验结果显示,盐酸哌甲酯组及黄芩苷中、高剂量组目标象限停留时间比率显著高于模型组(P0.05),盐酸哌甲酯组、黄芩苷高剂量组目标象限运动距离所占比率亦显著高于模型组(P0.05);黄芩苷高剂量组穿越平台次数高于其余各组(P0.05)。结论黄芩苷及盐酸哌甲酯均能够调控ADHD模型SHR大鼠的运动能力及学习记忆能力,从而控制ADHD多动、冲动及注意力不集中的核心症状;黄芩苷药效呈剂量依赖性,高剂量黄芩苷疗效最为显著,但其药效的发挥迟于盐酸哌甲酯。     

幼年大鼠热性惊厥后海马区Nogo-A mRNA及Nogo-R mRNA的表达

目的探讨热性惊厥（FS）幼年大鼠海马区Nogo-A及Nogo受体（Ng-R）mRNA表达变化及其意义。方法15日龄健康雄性SD大鼠127只随机分为正常对照组（n=40，37℃水浴）与高热组（n=87，44，5℃热水浴）；高热组根据是否发生惊厥再分为高热对照组（n=42）和FS组（n=45）；各组再分为5个处理组（1、3、5、7、10次水浴）。各处理组随机选取5只大鼠，断头处死，取海马组织，冷冻切片，采用反转录聚合酶链反应法检测其海马组织Nogo-A mRNA、Ng-R mRNA的相对表达量；另3只大鼠采用同样方法制备海马组织冷冻切片，分别采用Nissl染色及Timm染色观察其海马组织神经元变化及海马齿状回苔藓纤维发芽（MFS）现象。应用SPSS 13．0软件进行统计学分析。结果1．正常对照组无惊厥发作。高热对照组中2只大鼠出现惊厥后弃用。FS组大鼠有多种形式惊厥发作：点头、强直、阵挛或强直阵挛发作，2只淹死，3只死于惊厥持续状态。2．与正常对照组和高热对照组比较，第7次及第10次黔后大鼠海马区Nogo-A mRNA和Ng-R mRNA的表达均升高，均有显著性差异（Pa〈0．01）。3．Nissl染色显示第5次FS后大鼠海马CA1、CA3、Hile区神经元排列松散，第7、10次FS后改变更甚；2个对照组大鼠海马神经元排列紧密，各组均未见神经元丢失。4．Timm染色显示，第5、7、10次FS后大鼠海马齿状回出现MFS现象，正常对照组和高热对照组海马齿状回未见明显MFS现象。结论FS后大鼠海马区Nogo-A mRNA、Ng-R mRNA的表达上调可影响海马损伤修复。     

反复热性惊厥大鼠体内皮质醇水平变化

目的探讨反复热性惊厥(FS)大鼠体内糖皮质激素水平的变化。方法将大鼠随机分为正常对照组(n=10,NC组),高热对照组(n=12,HC组)和热性惊厥组(n=21,FS组)。用ELISA方法测大鼠海马匀浆和血清皮质醇水平;电镜观察大鼠海马CA1区神经元超微结构变化。结果1.FS组大鼠海马CA1区出现部分神经元肿胀,线粒体嵴模糊或消失;亦有表现为核固缩。2.FS组大鼠血清、海马皮质醇水平[分别为(26.57±15.94)μg/L,(4.11±1.74)μg/L]明显低于HC组[分别为(40.04±15.72)μg/L,(6.70±3.45)μg/L](P均<0.05)。HC组大鼠血清皮质醇水平明显高于NC组[(22.74±12.97)μg/L](P<0.05)。FS组大鼠血清、海马皮质醇水平与NC组比较无显著差异(P均>0.05)。血清和海马皮质醇水平间存在正相关(r=0.40 P<0.05)。结论反复FS可抑制发热刺激的皮质醇分泌;皮质醇未参与反复FS导致的脑损伤过程。     

脑发育不同阶段低水平铅暴露对大鼠空间学习记忆能力的影响及海马CA1 区超微结构的变化

目的 研究不同发育阶段慢性低水平铅暴露对大鼠空间学习记忆能力的影响及发育早期铅暴露后海马CA1区超微结构的改变。方法 采用Morris水迷宫及电镜技术观察实验动物学习记忆能力及海马CA1区超微结构的改变。结果 持续铅暴露线和围生期铅暴露组的学习记忆能力均显著低于对照组（P＜0．05），而断乳后铅暴露组与对照组无显著差异（P＞0．05）。海马CA1区超微结构显示有髓鞘分层起泡、神经毡空泡、血管周细胞胞浆溶酶体内有异常致密物，胶质细胞固缩致密，周围间质水肿，胞浆胶质丝紊乱，线粒体致密等改变；而突触结构未见有明显变化。结论 神经系统发育早期（尤胎儿期和婴儿期）对铅的神经毒性作用更为敏感，即孕母与婴儿期小儿是铅暴露的高危人群，宜作为铅中毒筛查的重点对象。海马CA1区超微结构的改变提示发育早期低水平铅暴露可能影响神经电冲动的传导、血脑屏障的结构及神经元的代谢等，这可能是铅影响学习记忆的形态学依据及机制之一。     

高龄妊娠对子鼠海马神经干细胞发育的影响

目的 探讨高龄妊娠对子鼠海马神经干细胞发育的影响。方法 将3月龄（n=10）与12月龄（n=10）的雌性大鼠分别与3月龄雄性大鼠（n=20）合笼,以其子鼠为研究对象,分为适龄子代组和高龄子代组,每组40只。分别采用免疫荧光及Western blot法定位及定量检测生后第7天两组海马组织巢蛋白（Nestin）、双皮质素（DCX）及生后第28天成熟神经元标志物NeuN、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达水平;采用免疫荧光法定位检测生后第14天两组海马组织多聚唾液酸神经细胞黏附分子（PSA-NCAM）表达情况;每组各检测指标随机取8只大鼠。结果 Western blot检测结果发现高龄子代组海马DCX蛋白的表达明显低于适龄子代组（P < 0.05）,Nestin、NeuN及GFAP蛋白表达在两组间比较差异均无统计学意义（P > 0.05）。免疫荧光检测结果显示,高龄子代组海马齿状回（DG）区Nestin、DCX及PSA-NCAM的表达均明显低于适龄子代组（P < 0.05）,而上述指标分别在两组海马CA1区、CA3区的表达比较差异均无统计学意义（P > 0.05）。高龄子代组海马CA1区NeuN的表达高于适龄子代组（P < 0.01）,两组CA3区和DG区NeuN的表达比较差异无统计学意义（P > 0.05）。高龄子代组海马CA1区、CA3区、DG区GFAP的表达均低于适龄子代组（P < 0.05）。结论 高龄妊娠可能引起子鼠海马神经干细胞的增殖、存活及迁移受到抑制,并影响其向神经元和星形胶质细胞的分化,最终导致子鼠海马神经干细胞发育障碍。     

高龄妊娠对子鼠海马神经干细胞发育的影响

目的 探讨高龄妊娠对子鼠海马神经干细胞发育的影响。方法 将3月龄（n=10）与12月龄（n=10）的雌性大鼠分别与3月龄雄性大鼠（n=20）合笼,以其子鼠为研究对象,分为适龄子代组和高龄子代组,每组40只。分别采用免疫荧光及Western blot法定位及定量检测生后第7天两组海马组织巢蛋白（Nestin）、双皮质素（DCX）及生后第28天成熟神经元标志物NeuN、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达水平;采用免疫荧光法定位检测生后第14天两组海马组织多聚唾液酸神经细胞黏附分子（PSA-NCAM）表达情况;每组各检测指标随机取8只大鼠。结果 Western blot检测结果发现高龄子代组海马DCX蛋白的表达明显低于适龄子代组（P < 0.05）,Nestin、NeuN及GFAP蛋白表达在两组间比较差异均无统计学意义（P > 0.05）。免疫荧光检测结果显示,高龄子代组海马齿状回（DG）区Nestin、DCX及PSA-NCAM的表达均明显低于适龄子代组（P < 0.05）,而上述指标分别在两组海马CA1区、CA3区的表达比较差异均无统计学意义（P > 0.05）。高龄子代组海马CA1区NeuN的表达高于适龄子代组（P < 0.01）,两组CA3区和DG区NeuN的表达比较差异无统计学意义（P > 0.05）。高龄子代组海马CA1区、CA3区、DG区GFAP的表达均低于适龄子代组（P < 0.05）。结论 高龄妊娠可能引起子鼠海马神经干细胞的增殖、存活及迁移受到抑制,并影响其向神经元和星形胶质细胞的分化,最终导致子鼠海马神经干细胞发育障碍。     

白藜芦醇甙对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠学习记忆和海马突触素表达的影响

目的 探讨白藜芦醇甙(PD)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠空间学习记忆的影响及海马CA1区突触素表达的变化.方法 7日龄SD大鼠37只随机分为假手术组、HIBD自然恢复组和PD治疗组,采用经典的Rice方法制备缺氧缺血性脑损伤动物模型,分别在生后28 d(缺氧缺血后21 d)进行Morris水迷宫测试,评价其学习记忆能力,用免疫组织化学方法来观察各组大鼠海马CA1区突触素的变化.结果 HIBD后3周Morris测验,假手术组、HIBD自然恢复组和PD治疗组大鼠4 d的平均逃避潜伏期分别为(39.55±8.08)s、(52.37±8.03)s、(43.29±7.63)s,PD治疗组大鼠逃避潜伏期明显短于HIBD自然恢复组(P＜0.05),且3组大鼠在4 d内的逃避潜伏期均逐渐变短;3组大鼠穿过平台次数分别为(5.29±2.62)次、(2.36±1.80)次、(4.25±1.66)次,PD治疗组大鼠穿过平台次数显著多于HIBD自然恢复组(P＜0.05);3组大鼠在目标象限内游泳时间分别为(15.74±3.85)s、(10.63±3.66)s、(14.32±2.52)s,PD治疗组在目标象限内游泳时间明显多于HIBD自然恢复组(P＜0.05).3组大鼠海马CA1区突触素的平均密度值分别为0.1674±0.0111、0.261 2±0.0323和0.295 2±0.044 3,PD治疗组大鼠海马CA1区突触素表达明显多于HIBD自然恢复组(P＜0.05).结论 白藜芦醇甙能减轻新生大鼠缺氧缺血引起的脑损伤,提高新生大鼠缺氧缺血后远期的学习记忆能力.这种保护作用与白藜芦醇甙能促进HIBD后神经元重塑的突触素表达有关.     

新生大鼠缺氧缺血脑损伤后μ-calpain活化及其他相关因子表达变化的时程及意义

目的　探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)后脑内 μ calpain的活化、其他相关因子表达变化的时程及相互关系 ,进一步研究HIBD的发病机制。方法　HIBD模型采用改良的Rice法。应用Westernblot法半定量测定缺氧缺血 (HI)后 0、1、2、4、12和 2 4h大脑皮层和海马μ calpain、c Fos、c Jun、HSP70和HSP2 7的表达。蛋白浓度测定采用改良的Bradford法。结果　新生大鼠HI后 μ calpain裂解为 76和 80两个片段 ,两者比值在HI后显著提高 ,以海马更为明显 ,其中皮层在 2 4h、海马在 12h达到高峰。c Fos在HI后 2～ 12h海马显著高于皮层 (P <0 0 5 ) ,2 4h海马却低于皮层 (P <0 0 5 ) ;c Jun则 0～ 1h海马高于皮层 (P <0 0 5 ) ,4h以后皮层均高于海马 (P <0 0 5 ) (其中 12h差异无显著意义 )。c Fos和c Jun在HI后呈上升趋势 ,无论皮层或海马均在 2～ 4h达到高峰 ,以后渐下降 ,但 2 4h仍高于正常对照组。与对照组相比 ,c Fos在 1,2 ,4 ,12和 2 4h差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ;c Jun在 0 ,1,2 ,4 ,12和 2 4h差异有显著意义 (P <0 0 5 )。HSP70在HI后 0h皮层显著高于海马 (P <0 0 5 ) ,1h海马显著高于皮层 (P <0 0 5 ) ,4h后皮层又均高于海马 (P <0 0 5 ) ;HSP2 7则HI后 1～ 2 4h海马均显著高于皮层 (P <0     

反复热性惊厥大鼠海马IL-1β和IL-1ra表达的变化

目的 探讨大鼠反复热性惊厥(FS)后海马白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-1受体拈抗剂(IL-1ra)表达的变化.方法 清洁级21日龄雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NC组)、高热对照组(HC组)和热性惊厥组(FS组).末次热水浴后12 h处死动物,用ELISA法检测海马IL-1β和IL-1ra的含量;RT-PCR法测海马IL-1β和IL-1ra mRNA的表达水平.结果 Fs组大鼠海马IL-1β蛋白和IL-1β mRNA水平均明显高于NC组和HC组,差异均具有显著性(P＜0.01和P＜0.05);FS组大鼠海马IL-1ra蛋白及IL-1ra mRNA水平亦明显高于HC组和NC组,差异均具有显著性(P＜0.01和P＜0.05).各组大鼠海马IL-1ra/IL-1β蛋白比值差异无显著性(P＞0.05).结论 短期内反复FS可导致海马IL-1β和IL-1ra表达增加,提示IL-1β和IL-1ra可能参与FS脑损伤发病的病理过程.     

热性惊厥对大鼠行为运动及空间学习记忆的影响

目的　探讨热性惊厥对大鼠行为运动及空间学习记忆能力的影响。方法　 6 0只雄性SD大鼠随机均分为热性惊厥组 (FS) ,发热对照组 (FG)及正常对照组 (NG)。动态观察各组大鼠在斜板试验、悬吊试验、旷场活动试验中行为运动的变化以及在Morris水迷宫中空间学习记忆能力的改变。结果　在斜板试验中 ,大鼠转体时间为FS组 (9 1± 2 6 )s ,FG组 (5 3± 2 1)s,NG组 (5 3± 2 0 )s,FS组和其他两组比较差异存在显著性 (P <0 0 1) ;悬吊试验中 ,大鼠的悬吊时间分别为FS组 (33 4±18 1)s,FG组 (5 0 1± 2 0 3)s,NG组 (5 9 0± 2 0 7)s,FS组和其他两组比较差异有显著性 (P <0 0 1) ;旷场活动试验中 ,大鼠得分分别为FS组 (5 1± 2 0 )分 ,FG组 (10 4± 3 0 )分 ,NG组 (13 2± 2 3)分 ,FS组和其他两组比较差异有显著性 (P <0 0 1) ;在Morris水迷宫实验中 ,同其他两组相比 ,FS组逃逸潜伏期延长 ,搜寻策略变差 ,平台所在区域内的游泳时间百分比降低 ,穿过平台的次数减少。结论　多次热性惊厥发作可使大鼠的行为运动能力和空间学习记忆能力受损     

碱性成纤维细胞生长因子对新生鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的研究碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对新生鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）的保护作用。方法7日龄新生Wistar大鼠96只,制备HIBD模型,随机分为生理盐水对照组和bFGF治疗组;另取48只为假手术组。通过免疫组化方法检测三组大鼠（每组40只）不同时点（术后第4、7、10、17、24天）海马CA1区巢蛋白（Nestin）、生长相关蛋白（GAP-43）的表达。各组余8只大鼠于生后30d开始进行Morris水迷宫测试,观察其学习记忆功能。结果（1）Nestin表达：对照组术后第4、7、10、17、24天Nestin阳性细胞数（9．51±1．45、11．35±1．87、17．124-2．13、11．17±1．11、2．92±1．02）较假手术组（6．17±1．85、4．92±1．88、3．75±1．22、3．08±1．20、2．83±1．12）增加,治疗组各时点Nestin阳性细胞数（14．83±1．75、19．17±1．69、24．50±1．45、28．33±1．67、16．17±1．69）增加较对照组更明显,三组各时点比较差异有统计学意义（P〈0．01）。（2）GAP-43表达：三组新生鼠GAP-43表达均于术后第10天达高峰,积分光密度值对照组术后第4、7、10、17、24天（9．35±1．10、12．94±1．01、14．29±1．21、13．28±1．26、6．51±0．99）较假手术组（7．88±1．27、11．75±1．30、13．06±1．54、11．79±1．18、4．66±0．91）均升高,治疗组（10．63±1．02、13．98±0．79、15．11±0．89、14．60±1．28、7．40±1．08）升高更明显,三组各时点比较差异有统计学意义（P〈0．01）。（3）对照组逃避潜伏期（51．75±11．27s）较治疗组（40．32±11．48s）和假手术组（36．58±10．83s）明显延长（P〈0．05）;对照组拆除平台后跨越平台的次数（2．34±2．42次）较治疗组（5．08±3．86次）和假手术组（7．03±3．62次）明显减少（P〈0．05）;治疗组与假手术组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论（1）新生鼠HIBD后海马CA1区Nestin、GAP-43的表达增加,可能与脑损伤后神经再生和轴突重塑有关;（2）bFGF可明显改善大鼠HIBD后的学习记忆能力;（3）外源性bFGF可增强新生鼠脑缺氧缺血后损伤区Nestin、GAP-43的表达,在神经细胞损伤的修复中发挥一定的保护作用。     

免疫球蛋白对戊四氮致惊大鼠海马神经元死亡及IL-1β和IL-1ra表达的影响

目的探讨免疫球蛋白对戊四氮致惊大鼠海马神经元死亡及IL-1β和IL-1 ra表达的影响。方法在W istar大鼠腹腔内注射戊四氮(pentylenetetrazol,PTZ)诱发大鼠惊厥发作,制作癫模型。将45只大鼠随机分为3组,正常对照组,PTZ静脉注射免疫球蛋白组(PTZ-IVIG),PTZ-生理盐水组(PTZ-NS)。经HE和TUNEL染色,在光镜下,观察神经细胞死亡,采用免疫组织化学方法检测神经细胞内IL-1β和IL-1 ra表达。结果海马CA1区IL-1β/IL-1 ra比值PTZ-IVIG组(0.5±0.1)较PTZ-NS组(1.9±0.5)低,两者比较差异有统计学意义(t=12.9,P<0.05)。PTZ-IVIG组海马CA1区凋亡细胞数较PTZ-NS组少,阳性细胞数前者为(16.4±3.3)个/1000μm2,后者为(41.7±3.5)个/1000μm2,两者差异有统计学意义(t=27.1,P<0.05)。PTZ-IVIG组海马CA1区坏死细胞数少,为(19.0±2.6)个/1000μm2,PTZ-NS组为(42.3±4.9)个/1000μm2,两者差异有统计学意义(t=20.9,P<0.05)。结论免疫球蛋白具有抑制惊厥所致的神经元死亡的作用,其作用可能机制为调节神经细胞内白介素1网络系统。     

边缘型维生素A缺乏对幼鼠学习记忆的影响及干预效果

目的了解胚胎期开始的边缘型维生素A缺乏(MVAD)对幼鼠学习记忆的损害及幼年期干预的效果。方法实验分为正常对照组、边缘型维生素A缺乏组(MVAD组)、维生素A干预组(VAI组)。正常对照组(幼鼠10只)母鼠和幼鼠均给予VA充足饲料;MVAD组(幼鼠19只)母鼠和幼鼠均给予边缘型维生素A缺乏饲料;VAI组(幼鼠9只)母鼠给予边缘型维生素A缺乏饲料,幼鼠于生后4周开始给予VA充足饲料。待各组幼鼠长至7周龄,用穿梭箱主动回避反应实验测试学习记忆功能,离体脑片检测海马长时程增强(LTP),激光共聚焦检测脑片强直刺激后细胞内钙离子浓度的变化。结果(1)穿梭箱主动回避反应实验达到学会标准的训练次数:VAI组(28.8±4.1)次和MVAD组(45.6±12.1)次分别多于正常对照组(17.1±4.4)次(P<0.01),MVAD组的训练次数多于VAI组(P<0.05);(2)海马脑片诱发LTP的场兴奋性突触后电位(fEPSP)斜率增加的百分比:MVAD组(22.9±9.4)%和VAI组(29.5±13.7)%小于正常对照组(57.5±27.3)%(P<0.01),VAI组与MVAD组差异无统计学意义;(3)激光共聚焦检测脑片强直刺激后细胞内相对荧光强度:MVAD组(65.1±17.0)和VAI组(85.8±17.1)低于正常对照组(113.6±20.5)(P<0.01),MVAD组低于VAI组(P<0.05)。结论胎儿期开始的MVAD可导致幼鼠学习记忆功能和海马LTP受损,生后4周给予VA干预,其学习记忆功能有部分恢复;VA可以通过调节细胞钙离子内流而影响LTP。     

参附注射液对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马神经元凋亡影响

目的研究参附注射液对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠海马神经元凋亡的影响。方法实验分成两部分：1.流式细胞术检测缺氧缺血（HI）前2 h、HI后2、12、24 h,3、7、14和28 d各时间点新生大鼠海马CA1区神经元凋亡率;2.免疫组织化学测HI前2 h、HI后2、12、24 h,3、7、14和28 d各时间点新生大鼠海马CA1区神经元Bcl-2、Bax蛋白表达。建立新生大鼠HIBD模型。每组实验随机分为4组：假手术组（S）,9 g/L盐水对照组（C）,参附预处理组（P）,参附治疗组（SF）。结果SF和P组海马神经元凋亡情况明显低于C组（P〈0.01,〈0.05）,且Bcl-2表达显著增多（P〈0.05,〈0.01）,而Bax表达明显下调（P〈0.05,〈0.01）。结论参附注射液可明显上调新生大鼠HIBD后海马神经元Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,减少HIBD新生大鼠海马神经元凋亡发生。