五味子总木脂素与顺铂抑制大鼠胶质瘤细胞增殖的作用

目的 探讨大鼠脑胶质瘤细胞对五味子总木脂素作用的敏感性及五味子总木脂素与顺铂作用后对胶质瘤细胞增殖的影响.方法 培养大鼠C6脑胶质瘤细胞,在倒置显微镜下观察细胞的形态及生长特性,应用MTT法检测五味子总木脂素单独及联合顺铂作用后细胞的增殖程度.结果 大鼠C6脑胶质瘤细胞在五味子总木脂素低浓度作用时抑制生长作用不明显,甚至出现轻微的增殖现象,药物浓度达到200 μg/ml时,明显抑制细胞增殖.总木脂素与顺铂联合作用检测结果为0.43 ±0.01,与对照组(0.75 ±0.04)相比,具有显著性差异(P＜0.01).结论 五味子总木脂素与顺铂联合可发挥协同作用,从而抑制细胞增殖.     

五味子木脂素对裸鼠胶质瘤细胞增殖的影响

目的探讨不同浓度五味子木脂素对体外原代培养裸鼠神经胶质瘤细胞增殖的影响。方法体外原代提取和培养裸鼠神经胶质瘤细胞,采用噻唑蓝(MTT)法观察0、50、100和200μg/ml五味子木脂素作用裸鼠神经胶质瘤细胞24、48、72 h时对其生长的影响。结果五味子木脂素对体外培养裸鼠神经胶质瘤细胞生长随浓度增高呈现抑制作用,药物浓度在200μg/ml时抑制作用显著(P<0.01)。结论五味子木脂素对体外培养神经胶质瘤细胞的增殖起抑制作用,提示五味子木脂素可能在治疗神经胶质瘤方面发挥重要作用。     

五味子粗多糖对脑胶质瘤细胞生长的作用

目的 观察不同浓度五味子粗多糖对体外培养大鼠脑胶质瘤细胞生长的作用.方法 用0、1.25、2.5、5 mmol/L五味子粗多糖作用于体外培养的大鼠脑胶质瘤C6细胞,采用MTT法检测五味子粗多糖对细胞增殖的抑制作用.结果 不同浓度(1.25、2.5、5 mmol/L)五味子粗多糖作用3、12、24、48 h,均能明显降低大鼠脑胶质瘤C6细胞的存活率;药物作用48 h时(0.53±0.07、0.45±0.04、0.40±0.02),细胞生长抑制最为明显,与对照组(0.54±0.03)相比有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 五味子粗多糖对大鼠脑胶质瘤C6细胞的生长具有抑制作用,提示五味子粗多糖可能在治疗脑胶质瘤方面发挥重要作用.     

五味子多糖对裸鼠脑胶质瘤细胞增殖的影响

目的探讨不同浓度五味子多糖对体外培养裸鼠脑胶质瘤细胞生长的影响。方法体外培养原代裸鼠脑胶质瘤细胞,采用MTT方法,检测不同浓度五味子多糖作用24、48、72 h时对其增殖的影响。结果五味子多糖浓度在200μg/ml时,细胞生长无明显影响;在24、48 h时,药物浓度在400、800μg/ml时,对细胞生长的作用也不明显;但在72 h时,药物浓度在400和800μg/ml时,对细胞增殖的抑制作用很明显(P<0.01)。结论高浓度五味子多糖对体外培养裸鼠脑胶质瘤细胞的增殖具有抑制作用,提示五味子多糖可能在治疗脑胶质瘤方面发挥重要作用。     

抑胶素对大鼠脑胶质瘤增殖细胞核抗原表达的影响

目的 研究抑胶素对大鼠脑胶质瘤增殖细胞核抗原的影响.方法 采用鼠脑立体定向的方法建立大鼠脑胶质瘤动物模型并进行分组:抑胶素不同浓度实验组(Ⅰ:8 μg/kg;Ⅱ:16 μg/kg;Ⅲ:32 μg/kg;Ⅳ:64 μg/kg)、对照组,于治疗14 d后计算瘤体变化,应用免疫组化方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,观察瘤细胞增殖变化情况.结果 抑胶素Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组对C6脑胶质瘤细胞有显著抑制作用,其瘤体积及抑瘤率与对照组比较有统计学差异(P＜0.05,P＜0.01);抑胶素能够使胶质瘤PCNA指数下降,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组PCNA指数(%)与对照组相比较有统计学差异(P＜0.05,P＜0.01).结论 抑胶素能够抑制大鼠脑胶质瘤体内生长.其机制之一可能与胶质瘤内PCNA表达,使肿瘤细胞增殖水平下降有关.     

谷氨酸对原代培养的SD大鼠皮层神经元毒性作用量效关系研究

目的 探讨谷氨酸（Glu）对体外培养的大鼠皮层神经细胞作用的量效关系及其毒性损害作用。方法 原代培养新生SD大鼠（1d）大脑皮层神经细胞，分别加入不同浓度的Glu作用20min，24h后测定细胞存活率，比较不同浓度的Glu对细胞的毒性作用并对其进行形态学观察。结果 大鼠皮层神经细胞在20μmol／LGlu作用20min后，细胞存活率开始降低，胆碱乙酰转移酶（CHAT）活性降低。随着Glu浓度的增加，上述变化更明显。结论 体外Glu引起神经元损伤的亚毒性浓度为20μmol／L，随着Glu浓度的增加，神经细胞受损伤程度加重。     

脂联素对大鼠原代Kupffer细胞白细胞介素10表达的影响

目的本研究观察外源性脂联素对体外培养的大鼠原代Kupffer细胞白细胞介素（IL）-10表达的调节作用,以阐明脂联素的抗炎作用机制。方法通过两步胶原酶灌流、密度梯度离心和2 h选择性贴壁方法分离纯化大鼠肝脏Kupffer细胞。酶联免疫吸附试验方法检测脂联素作用下原代Kupffer细胞上清液中IL-10的表达水平。荧光定量PCR法检测脂联素作用下原代Kupffer细胞IL-10 mRNA表达。结果 0.5、1.0、1.5μg/ml脂联素处理Kupffer细胞4、8、12、16 h,与对照组相比,同一浓度的脂联素随着培养时间的延长,Kupffer细胞IL-10分泌逐渐增加;而同一作用时间下,随着脂联素浓度的增加,Kupffer细胞IL-10分泌量并没有逐渐增加。1.0和1.5μg/ml脂联素作用Kupffer细胞16 h,IL-10基因表达量与对照组相比显著增加,各处理组间无明显差异。结论脂联素可上调大鼠原代Kupffer细胞IL-10的表达,这可能是其抗炎作用机制之一。     

鹅膏蕈碱对C6胶质瘤细胞的毒性作用研究

目的 比较不同浓度的鹅膏蕈碱(α-amanitin)对C6胶质瘤细胞毒性作用.方法 采用体外培养方法.结果 C6胶质瘤细胞在不同浓度的鹅膏蕈碱分别作用12和24 h后呈无规律改变;但48 h后,随着浓度的增强,C6胶质瘤细胞的增殖能力越来越差,细胞坏死也随之增多.结论 鹅膏蕈碱对C6胶质瘤细胞作用一定的时间后,对C6胶质瘤细胞的抑制作用随浓度的增加而增加,呈浓度依赖性.     

胰岛素对大鼠骨骼肌细胞脂联素受体基因表达的影响

目的了解体外胰岛素对原代培养大鼠骨骼肌细胞脂联素受体1表达的影响。方法体外原代培养骨骼肌细胞,应用SYBRGreenⅠ染料建立一种快速、可靠的实时定量PCR,对其主要要素进行优化。观察不同胰岛素浓度不同作用时间下,大鼠骨骼肌细胞脂联素受体基因表达水平的动态变化。结果建立敏感、特异、快速检测脂联素受体1mRNA的实时定量PCR方法,随着胰岛素浓度的增加,脂联素受体1表达逐渐降低。在较低浓度（胰岛素浓度〈1nmol/L）时,脂联素受体1表达的降低无统计学意义,当胰岛素浓度增加到10nmol/L及以上时,骨骼肌细胞脂联素受体1表达的降低有统计学意义（P〈0.05）,这种抑制作用1h后出现,24h后达到高峰。结论成功地建立SYBRGreenⅠ实时定量PCR检测脂联素受体基因的表达方法,体外高胰岛素对骨骼肌细胞脂联素受体1mRNA表达有抑制作用,并呈时间和剂量依赖性。     

五味子木脂素与顺铂抑制SHG-44神经球细胞的生长

目的研究五味子木脂素和顺铂对人脑胶质瘤SHG-44神经球细胞生长的作用。方法 MTT法分析检测五味子木脂素和顺铂对SHG-44神经球细胞生长的影响;ELISA法检测细胞培养上清中bcl-2及caspase 3蛋白的变化。结果 50、100、200 mg/L五味子木脂素作用24、48、72h,均能明显地抑制SHG-44神经球细胞的生长,作用呈浓度依赖性;10 mg/L顺铂作用后也可明显抑制神经球细胞的生长,作用呈时间依赖性。Elisa结果显示,药物作用后bcl-2蛋白水平明显下调,而caspase 3蛋白水平明显上调。结论五味子木脂素和顺铂都可以通过下调抗凋亡蛋白bcl-2的水平,进而抑制SHG-44神经球细胞的生长。     

嘌呤核苷酸对海洛因处理过大鼠C6神经胶质瘤细胞增殖的影响

目的 探讨海洛因及嘌呤核苷酸对大鼠C6神经胶质瘤细胞增殖的影响.方法 体外培养大鼠C6神经胶质瘤细胞,分别以不同浓度的海洛因及嘌呤核苷酸处理细胞,MTT比色法检测海洛因和嘌呤核苷酸对细胞增殖的影响.结果 MTT实验表明,海洛因对大鼠C6神经胶质瘤细胞的增殖有抑制作用,120 mg/L海洛因作用24 h对C6细胞的抑制率达52%,并表现为剂量依赖性;嘌呤核苷酸对C6细胞的增殖有促进作用,120 mg/L嘌呤核苷酸作用24 h,细胞增殖率为30%,并表现为剂量依赖性.结论 海洛因抑制大鼠C6神经胶质瘤细胞的增殖;嘌呤核苷酸促进大鼠C6神经胶质瘤细胞的增殖,并在某种程度上对抗海洛因对C6细胞增殖的抑制作用.     

脂联素对原代大鼠肝星状细胞表达MMP-2和MMP-13的影响

目的观察外源性脂联素对体外培养原代大鼠肝星状细胞（HSC）表达基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-13（MMP-13）的影响,探讨脂联素对肝纤维化的影响。方法改良的肝脏二步原位灌注法分离肝星状细胞,外源性脂联素（125μg/L、250μg/L、500μg/L）处理体外培养的原代肝星状细胞。Real-time PCR方法分析其对原代HSCMMP-2和MMP-13 mRNA表达的影响,ELISA方法检测原代HSC分泌MMP-2和MMP-13蛋白水平,酶谱法检测细胞外MMP-2的酶活性。结果脂联素促进MMP-2和MMP-13 mRNA表达,随脂联素浓度增加,作用更加明显。脂联素可促进HSC分泌MMP-2及MMP-13蛋白,提高MMP-2酶活性,但均无剂量依赖性。结论脂联素调节MMP-2表达和活性,促进MMP-13表达,可能对肝纤维化产生影响。     

五味子多糖诱导裸鼠胶质瘤细胞凋亡过程中Caspase-3的表达

目的探讨五味子多糖对裸鼠胶质瘤细胞的诱导凋亡作用及其诱导凋亡的机制。方法体外提取和原代培养裸鼠胶质瘤细胞,将质量浓度为0、200、400、800μg/ml的五味子多糖作用于裸鼠胶质瘤细胞中培养48 h后,采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)和细胞免疫组织化学方法观察五味子多糖作用后裸鼠胶质瘤细胞Caspase-3蛋白表达情况。结果不同浓度(200、400、800μg/ml)五味子多糖作用裸鼠胶质瘤细胞48 h后,与对照组相比较,五味子多糖组培养上清中Caspase-3蛋白表达水显著升高(P<0.01);细胞免疫组化结果显示,200、400、800μg/ml多糖组Caspase-3蛋白表达阳性率均明显升高(P<0.01)。结论五味子多糖诱导裸鼠胶质瘤细胞凋亡的机制可能是通过激活Caspase-3而使胶质瘤细胞发生凋亡。     

五味子乙素联合顺铂对H22肿瘤小鼠的抑瘤作用

目的探讨五味子乙素联合顺铂对H22小鼠的抑瘤作用及其对p53表达的影响。方法建立小鼠H22实体瘤模型,并对小鼠H22实体瘤模型进行五味子乙素、顺铂和两者联合处理,HE染色观察细胞形态变化,免疫组化方法检测实体瘤组织中p53的表达。结果用药组细胞呈现凋亡形态,联合组中p53蛋白表达率为21.51%,肿瘤抑制率为68.80%。结论五味子乙素联合顺铂对H22肿瘤抑制作用较单独应用有明显增强。其抗瘤作用与诱导细胞凋亡有关。     

C6/IL-24对鼠脑胶质瘤治疗作用的研究

目的 观察C6/IL-24对大鼠脑胶质瘤的治疗作用.方法 建立SD大鼠脑胶质瘤模型,实验组皮下注射C6/IL-24细胞,对照组皮下注射同等体积的生理盐水,观察大鼠的生存期及颅内肿瘤的生长变化.结果 实验组肿瘤生长速度明显减慢,实验组大鼠各时段肿瘤体积明显小于对照组,实验组大鼠存活时间明显长于对照组.结论 通过逆转录病毒将IL-24导入C6细胞而形成的C6/IL-24细胞对鼠脑胶质瘤具有较好的治疗效果,建立稳定可靠的脑胶质瘤动物模型是进行各种脑胶质瘤在体实验研究的基础,治疗时间窗的选择应在肿瘤指数生长期以前.     

黄连解毒汤对胶质瘤C6细胞增殖的影响

目的观察黄连解毒汤在体外对胶质瘤C6细胞增殖的影响。方法制备黄连解毒汤固体样品,采用细胞培养技术以含10％胎牛血清的DMEM培养基体外培养C6细胞,不同浓度的黄连解毒汤作用不同时间后,用MTY比色法观察其对C6细胞增殖的影响,倒置显微镜观察C6细胞形态变化。结果随着黄连解毒汤浓度增加、培养时间的延长,C6细胞增殖抑制率逐渐增加,抑制作用呈剂量-效应和时间-效应关系（P均〈0．05）。黄连解毒汤作用下C6细胞胞质回缩,细胞变圆、固缩,贴壁细胞数量减少。结论黄连解毒汤体外对胶质瘤C6细胞增殖有抑制作用。     

脂联素对肝星状细胞增殖和活化的影响

目的 观察外源性脂联素对体外培养大鼠肝星状细胞(HSC)增殖和活化的影响,探讨脂联素对肝纤维化的影响.方法 外源性脂联素(0.1 μtg/mL、1μtg/mL、10 μg/mL)处理体外培养的HSC-T6,MTT法分析其对HSC-T6增殖的影响,Western blot法检测HSC-T6细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 脂联素对HSC的抑制作用随药物浓度的增加而增强,α-SMA的蛋白表达随脂联素浓度增加而下降.结论 脂联素能抑制HSC-T6的增殖,从而发挥抗肝纤维化作用.     

黄连素抗胶质瘤的作用机制

目的探讨黄连素对大鼠恶性脑胶质瘤C6细胞生长的作用。方法培养恶性脑胶质瘤C6细胞,MTT法检测黄连素对C6细胞生长增殖的抑制作用,并且观察药物对细胞生长的影响。结果 12.5、25、50、100μmol/L黄连素均可以明显抑制C6细胞的生长,倒置显微镜下观察到药物作用后细胞密度明显降低。结论黄连素能明显抑制脑胶质瘤细胞的生长增殖。     

链脲佐菌素诱导培养皮层神经细胞损伤作用的观察

目的 研究链脲佐茵素(STZ)对原代培养大鼠皮层神经元是否具有损伤作用.方法 常规原代神经细胞培养的方法,培养新生1 d～3 d的wistar大鼠皮层神经元,通过检测CCK-8,乳酸脱氢酶(LDH)释放检测和calccin-AM染色,观察加入不同浓度STZ(1 μmol/L、10μmol/L、100 μmol/L、1 000μmol/L)36 h后对细胞损伤的作用.结果 STZ处理后对原代培养大鼠皮层神经细胞产生明显的损伤作用,包括细胞活力的下降,活细胞数目的 减少,LDH释放的增加并呈现剂量依赖性.结论 STZ对离体培养的神经细胞具有类似脑室注射同样的神经损伤作用.     

氟化钠对原代培养大鼠肝细胞的毒性作用及机理研究

目的探讨氟化钠(NaF)对原代培养大鼠肝细胞的毒性作用及其机制.方法采用不同剂量的氟化钠处理原代培养的大鼠肝细胞,观察由此所致的细胞酶学和形态学变化来评价其毒性作用及方式.结果肝细胞存活率呈明显的剂量-效应关系,IC50为3.58 mmol/L;当氟化钠浓度为2 mmol/L时,肝细胞培养液中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性明显增加(P＜0.05);丙二醛(MDA)含量随染氟剂量增加而增加.细胞形态改变包括收缩、变圆、变小.发生这种改变的的细胞占总细胞数的比例随剂量的增加而增加.结论氟化钠对原代培养大鼠肝细胞有明显的毒作用,其主要作用方式之一是引起细胞发生脂质过氧化.