DNA拓扑异构酶Ⅱα与乳腺癌的研究进展

DNA拓扑异构酶IIα是DNA代谢过程中重要核酶。因其特有的生物学功能,TopoIIα对乳腺癌发生发展的影响已成为当今的研究热点。TopoⅡα是预测蒽环类化疗药物疗效的敏感性指标,为患者的个体化治疗提供临床指导。本文就TopoIIα作为抗癌药物作用靶点的作用机制及其在乳腺癌治疗中的作用研究进展综述如下。     

4′,5′,7-三羟基异黄酮对NB4人急性早幼粒白血病细胞生长和分化的影响

目的：研究4′,5′,7-三羟基异黄酮（genistein）对NB4白血病细胞生长和分化的影响,揭示其诱导细胞凋亡作用。方法：分别用NBT还原力分析、DNA电泳分析观察药物诱导分化和凋亡作用;Northern杂交分析和质粒DNA断裂分析检测bcl-2基因表达和DNA拓扑异构酶II活性。结果：Genistein可明显抑制NB4细胞生长,并致细胞大量死亡。在浓度高于40 μmol.L^-1时,可诱导典型的凋亡形态,同时,细胞bcl-2基因表达受到抑制。Genistein可促进DNA拓扑异构酶II介导的DNA断裂, 但诱导NB4细胞分化作用较弱。结论：Genistein通过诱导细胞凋亡来杀伤和抑制NB4细胞的生长,其机制与抑制DNA拓扑异构酶II活性有关。     

拓扑替康与顺铂联用治疗恶性肿瘤研究进展

拓扑替康 (Topotecan ,TPT)为新一代半合成、水溶性喜树碱类抗肿瘤药 ,是细胞核内拓扑异构酶Ⅰ的特异性抑制剂 ,其与拓扑异构酶Ⅰ (TopoⅠ )和DNA形成的复合物结合 ,以阻止断裂的DNA单链重新聚合 ,进而在DNA合成过程中导致DNA双链的破坏。 1996年拓扑替康被美国FDA批准上市以来 ,此药在世界各国陆续应用于临床 ,已有大量临床报告显示其对小细胞肺癌、卵巢癌、乳腺癌、消化道肿瘤有较好疗效。顺铂 (DDP)为铂的金属络合物 ,抗癌作用的主要靶点为DNA ,在鸟嘌呤胞嘧啶位点与DNA发生交联 ,阻止其复制和转录 ,造成细胞死亡。二者作用…     

氧氟沙星的临床用药进展

氧氟沙星是日本第一制药株式会社于1981年研制成功,至1985年在日本和德国上市以来,已在英美等80多个国家应用.1987年在我国进行该制剂的临床验证,1988年获得批准应用[1]. 氧氟沙星是喹诺酮类广谱抗菌药,通过抑制DNA拓扑异构酶发生作用.DNA拓扑异构酶Ⅱ对于细菌DNA复制以及翻译、修复、重组、转运的某些方面起着很重要的作用.氧氟沙星在体内攻击该酶的A亚单位,通过对易感生物体中DNA促旋酶的抑制作用,抑制了DNA的ATP依赖反向超螺旋结构,同时抑制了超螺旋DNA独立于ATP的松弛,并促进了双螺旋DNA的裂解[2].     

从黄连根茎中分离出的拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ的抑制剂

DNA 拓扑异构酶可改变 DNA 的拓扑构型,对细胞中的 DNA 复制、转录和重组等起重要作用。有2种类型的 DNA 拓扑异构酶:Ⅰ型和Ⅱ型。除了在 DNA 代谢中的重要作用,拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ在癌症的化疗中引起了广泛的兴趣。在80年代表明拓扑异构酶是临床上应用的抗癌剂的主要目标。如拓扑     

海南哥纳香醇甲GHM-10对L1210细胞DNA分子结构及拓扑异构酶II活性的影响

目的： 研究海南哥纳香醇甲（GHM-10）抑癌细胞DNA合成的作用机制。 方法： 用单细胞凝胶电泳法检测GHM-10对L1210细胞DNA分子的损伤,碱洗脱法测定GHM-10对L1210细胞DNA单链长度的影响,用GHM-10对超螺旋pUC18 DNA的解旋能力测定它对DNA拓扑异构酶II活性的影响。 结果： L1210细胞用GHM-10 (4～10) μg.ml^-1处理4.5 h后,DNA分子受损,表现为电泳后在荧光显微镜下可见彗星状拖尾。GHM-10 (4～25) μg.ml^-1处理L1210细胞5 h, 可引起DNA单链断裂。 L1210细胞或从L1210细胞分离的蛋白质在用GHM-10处理后,DNA拓扑异构酶II的活性均被抑制。结论： GHM-10可引起L1210细胞DNA分子损伤; 无论在细胞内还是细胞外,GHM-10可抑制拓扑异构酶II的活性。     

思文霉素对胞外DNA拓扑异构酶介导产生的断裂和松驰反应的影响

思文霉素（Siwenmycin）是最先从我国土壤中的链霉菌培养物中提取的一个新型蒽环类抗生素。研究表明该药是DNA拓扑异构酶抑制剂，以ATP依赖性pBR322 DNA断裂松驰反应，观察思文霉素对从哺乳动物细胞中提取的DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用后发现该药对此酶的最大抑制浓度为25mmol/L。用思文霉素处理Bel 7402细胞后，从中提取的DNA拓扑异构酶Ⅱ所介导的DNA断裂松驰反应活性比对照组增加5倍，研究还发现，思文霉素可抑制胞外DNA拓扑异构酶Ⅰ活性，碱性洗脱实验证明该药可引起DNA单链断裂。     

拓扑异构酶Ⅱ抑制剂GL331对HepG2细胞体外生长的抑制作用

目的:研究拓扑异构酶Ⅱ抑制剂GL331体外对人肝癌HepG2细胞的生长抑制作用及其机制。方法:采用MTT法测定GL331对人肝癌HepG2细胞存活率的影响;克隆原形成法检测对细胞集落形成的影响;DAPI染色观察细胞形态学变化;流式细胞术检测细胞凋亡百分率的变化;蛋白免疫印迹技术观察Bax,Bcl-2,Fas,FasL,Akt/p-Akt,caspase-3,clea-caspase等相关蛋白水平变化;caspase-3酶活性检测试剂盒检测对蛋白酶caspase-3活性的影响。结果:GL331可以浓度和时间依赖性地抑制HepG2细胞的增殖,同时促进HepG2细胞凋亡,提高Bax/Bcl-2比率,增加FasL的表达,降低p-Akt的表达。结论:GL331对HepG2细胞的增殖有明显的抑制作用,其作用机制与诱导HepG2细胞发生凋亡,调节凋亡相关蛋白的表达,并抑制存活通路相关蛋白的活化有关。     

新喹诺酮抑制DNA旋转酶活性的作用机制

1 喹诺酮靶酶 喹诺酮靶酶被认为是细菌拓扑异构酶Ⅱ,DNA旋转酶(EC5.99.1.3)(Gy),它担负染色体或质粒DNA的拓扑学转变。Gy促进ATP偶联的DNA负超螺旋化,并当ATP很少或没有的情况下,Gy逆转这个过程。除这些作用外,Gy促使由喹诺酮或十二     

骆驼蓬种子提取物及其β咔保啉生物碱对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用

目的探讨去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱、骆驼蓬总碱及哈尔满碱(止咳药用植物)对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用。方法从体外培养的Q3肝癌细胞中,提取分离DNA拓扑异构酶Ⅱ;以阿霉素为阳性对照,用琼脂糖凝胶电泳法检测药物对DNA拓扑异构酶Ⅱ的作用。结果骆驼蓬总碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱及哈尔满碱对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性均有一定的抑制作用。结论对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用是骆驼蓬总碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱等生物碱抗癌作用和细胞毒作用的机制之一。     

拓扑异构酶Ⅰ抑制剂研究进展

综述近年来拓扑异构酶Ⅰ抑制剂的研究进展,分类介绍其抗肿瘤活性以及构效关系,并分析讨论其与靶酶结合作用的特点,旨在为设计、合成与筛选新型拓扑异构酶Ⅰ抑制剂候选化合物提供一定参考。DNA拓扑异构酶Ⅰ是抗肿瘤药的重要靶点,随着对酶的构象及其抑制剂的深入研究,多种高效低毒的化合物被相继发现并进入临床研究阶段,为肿瘤患者带来了希望。     

恶性胶质瘤DNA拓扑异构酶的表达

目的从细胞分子生物学角度探讨DNA拓扑异构酶(TopoII)在恶性胶质瘤多药耐药中的作用。方法应用流式细胞仪对20例原发与20例复发恶性胶质瘤术后标本中DNA拓扑异构酶进行测定,对照研究。结果20例复发恶性胶质瘤中DNA拓扑异构酶的表达量较20例原发者明显减少(P<0.05)。结论恶性胶质瘤在治疗过程中获得多药耐药性可能是由于DNA拓扑异构酶数量的减少或活性降低造成的。     

伊立替康治疗23例晚期结、直肠癌患者的护理体会

伊立替康（喜树碱-11，irinotecan，CPT-11，商品名艾力）为喜树碱水溶液衍生物，是新型的DNA拓扑异构酶Ⅰ（TOPOⅠ）选择性抑制剂，拓扑异构酶Ⅰ是DNA复制延续的关键酶，伊立替康及其活性代谢物SN-38与拓扑异构酶Ⅰ和DNA形成的复合物牢固结合，阻止拓扑异构酶Ⅰ修复DNA缺口，造成DNA不可逆断裂，引起细胞死亡。伊立替康的主要毒性反应包括迟发性腹泻、中性粒细胞减少。其它常见不良反应还包括乙碱胆碱能综合征、胃肠道反应、脱发等。     

DNA拓扑异构酶与抗肿瘤

DNA拓扑异构酶是真核细胞和原核细胞中的基本酶,广泛分布于细胞核内,在复制、转录、翻译、重组及染色体单体分离等过程中控制、维持和修饰DNA拓扑结构。研究发现,拓扑异构酶在肿瘤组织中高表达,许多抗肿瘤药物的作用机制与抑制拓扑异构酶有关。     

拓扑异构酶抑制剂——一种新型的抗肿瘤药物

拓扑异构酶控制、维持和修饰DNA拓扑结构。拓扑异构酶抑制剂通过作用于拓扑异构酶 ,对很多肿瘤发挥抑制活性。论述了拓扑异构酶抑制剂的作用机理、杀伤肿瘤细胞的机制及耐药性问题。     

原花青素对MNNG致DNA损伤及拓扑异构酶Ⅱ的影响

目的　观察原花青素对DNA损伤的保护作用及对黑色素瘤细胞中拓扑异构酶的影响 ,探讨原花青素癌化学预防的作用机制。方法　单细胞电泳法检测羟自由基对L92 9细胞DNA损伤的尾迹 ,用 [H3]TdR参入细胞DNA中进行标记 ,测定上清液中的放射强度来判定MNNG对DNA损伤 ;从黑色素瘤肿瘤细胞中提取拓扑异构酶 ,用琼脂糖凝胶电泳测定活性。结果　原花青素可以减轻DNA损伤尾迹及MNNG对DNA的损伤。但对黑色素瘤肿瘤细胞中拓扑异构酶无抑制作用。结论　原花青素对羟自由基及致癌剂MNNG引起的细胞DNA损伤有一定的保护作用。但对拓扑异构酶的活性无抑制作用     

喹诺酮类药物临床应用

喹诺酮类药物的主要作用机制是抑制细菌的DNA合成酶之——回旋酶，又称拓扑异构酶。该酶在ATP、Mg^2 存在下，能使DNA链切断与再结合，以形成螺旋，为DNA的复制所必需。回旋酶有A、B两个亚型。喹诺酮类药物主要作用于A型，致使DNA、RNA、蛋白质的合成受阻，使细胞不能再分裂，并迅述死亡．因细菌细胞DNA呈裸露状态，而人体细胞DNA呈包被状态，故喹诺酮类药物易进入菌体，直接与DNA接触，阻止细菌细胞分裂繁殖迅速死亡，使其作用呈选择性。     

拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对耐阿霉素淋巴瘤细胞株杀伤和诱导凋亡作用的研究

目的 研究拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对耐阿霉素淋巴瘤细胞株(L1210/ADM)的杀伤和诱导凋亡的作用.方法 采用噻唑蓝(MTT法)、钙依赖性磷脂结合蛋白(Annexin V)染色、梯状DNA电泳与细胞形态学观察等方法分析不同浓度(0.05、0.10、0.20、0.40μmol/L)拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对L1210/ADM细胞的杀伤和凋亡作用,采用半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)8、Caspase-3抑制剂IETD-fmk、DEVD-CHO分析拓扑异构酶Ⅰ抑制剂介导的靶细胞杀伤和凋亡作用与Caspase的关系.结果 0.10 μmol/L拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对靶细胞株的杀伤作用,与对照组和0.05 μmol/L组之间差异均有统计学意义(均P＜0.05).加用Caspase酶特异性抑制剂3组各时间点的靶细胞存活率均高于单用拓扑异构酶Ⅰ抑制剂组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).靶细胞株经拓扑异构酶Ⅰ抑制剂处理后,部分靶细胞株出现了细胞凋亡;加用Caspase酶特异性抑制剂组中,有部分细胞死亡,但无凋亡小体形成,死亡细胞均为锥虫蓝染色.经拓扑异构酶Ⅰ抑制剂处理的靶细胞株大部分细胞出现胞体解离,并彼此黏附成簇状的、锥虫蓝拒染的凋亡小体,靶细胞株DNA电泳表现为特征性梯状图谱;加入Caspase酶特异性抑制剂的各组可以看到阻断了梯状DNA的产生.结论 拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对L1210/ADM细胞株具有较强的杀伤和诱导凋亡作用,其机制可能涉及Caspase-8、Caspase-3的有序性活化.     

结核分枝杆菌中能模拟DNA的氟喹诺酮耐药蛋白

氟喹诺酮类(fluoroquinolones)药物在肺结核治疗中发挥着强大的作用。它作用于菌体DNA促旋酶和DNA拓扑异构酶Ⅳ,通过形成DNA-拓扑异构酶-氟喹诺酮复合物来阻止DNA拓扑异构改变,抑制DNA复制转录的进行,而达到杀菌目的。但是,随着氟喹诺酮在治疗多药耐药结核分枝杆菌中应用日益广     

鬼臼毒素类环木脂素的甲醚衍生物

鬼臼毒素(1)是一种临床上用于抗肿瘤等的木脂素类化合物。鬼臼毒素类的抗肿瘤作用机制已知有两种:一种为抑制微管蛋白的聚合作用和阻断中期相细胞分裂,另一种为抑制 DNA 拓扑异构酶活性。鬼臼毒素7位差向异构体的醚或糖甙类衍生物多是通过