弱畸形精子症与体外受精受精率和胚胎发育的相关性分析

目的比较弱畸形精子症(同时患有弱精子症和畸形精子症者)和精液正常患者行常规体外受精(IVF)的受精率和胚胎发育的差异,分析原发性与继发性不育对于弱畸精子症患者IVF受精率的影响,同时分析弱畸精子行分半ICSI(H-ICSI)和早补救ICSI是否改善受精结局,为今后选择合适的治疗方案提供参考。方法将2016年1月至12月在沈阳九州家圆医院生殖医学中心行IVF-胚胎移植(IVF-ET)的患者分为弱畸精子症组(A组)和精液正常组(B组),A组内分为原发不育组(P组)和继发不育组(S组)。分别比较各组间的受精率、2PN受精率、卵裂率、2PN卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率等指标有无显著性差异。结果 A组受精率和2PN受精率显著低于B组(61.23%vs.75.19%,43.05%vs.56.58%,P<0.01),卵裂率、2PN卵裂率、优质胚胎率差异无统计学意义(P>0.05)。P组受精率显著低于S组(56.35%vs.66.37%,P<0.01),妊娠率显著低于S组(33.333%vs.73.33%,P<0.05)。R-ICSI中,ICSI优质胚胎率B组显著高于A组(60.61%vs.39.74%,P<0.01)。结论弱畸精子症显著影响IVF的受精率和2PN受精率,但是不影响后续胚胎发育和妊娠。原发不育的弱畸精子症会显著影响IVF周期中的受精率和临床妊娠率。对于这类患者,在IVF周期中应采取相应的短时受精以防止受精失败和低受精。精子活力和形态对受精和胚胎发育都有重要影响。     

不同受精方式在微刺激周期中的应用

目的:探讨助孕周期行微刺激治疗患者采用不同体外受精方式对胚胎实验室指标的影响。方法回顾性分析我院行微刺激治疗的718例患者资料,根据受精方式分为体外受精(in vitro fertilization,IVF)和单精子卵母细胞内注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI),其中ICSI组根据精液情况分为正常精液ICSI组和少弱精ICSI组。分别比较各组的实验室指标,包括受精率、两原核(pronucleus,PN)率、多PN率、卵裂率、完全受精失败率、优质胚胎率、冷冻胚胎率、囊胚形成率。结果:正常精液ICSI组的2PN率显著高于IVF组(P<0.05),多PN率显著低于IVF组(P<0.05),但卵裂率、优质胚胎率、冷冻胚胎率、囊胚形成率与IVF组差异无统计学意义;正常精液ICSI组的完全受精失败率显著低于少弱精ICSI组(P<0.05),受精率、优质胚胎率、冷冻胚胎率、囊胚形成率无明显差异。结论:采用微刺激促排的IVF治疗中,男方精液正常者单精子卵母细胞内注射并不能改善胚胎质量。     

体外受精-胚胎移植同周期同胞卵子不同授精浓度对胚胎的影响

目的:探索体外受精一胚胎移植(IVF-ET)中合适的受精精子浓度,以期改善胚胎质量.方法:采用同周期同胞卵子在3种不同精子浓度下孵育4h后剥脱颗粒细胞,比较其受精率、多精受精率、卵裂率、优质胚胎率.结果:3组卵裂率、多精受精率、优质胚胎率差异无显著性(P＞0.05),但B组的优质胚胎率有增高的趋势;A组的受精率显著低于B组和C组(P＜0.05).结论:IVF时的加精浓度在7 500个前向运动精子/每卵母细胞时可得到较好的胚胎,精子浓度降至5 000个前向运动精子/每卵母细胞时,受精率下降,提示有受精失败的风险.     

早期补救卵胞浆内单精子注射在常规受精失败周期中的应用

目的评估早期补救卵胞浆内单精子注射(r-ICSI)在常规体外受精(IVF)失败(低下)中的有效性。方法对59周期因全部受精失败或受精率低下进行早期r-ICSI受精(部分受精失败38周期,全部受精失败21周期)的不孕患者资料进行回顾性分析,统计其受精率、卵裂率、胚胎质量、妊娠率及种植率,与同期常规ICSI周期的数据进行比较。结果与同期299ICSI周期相比,早期r-ICSI组受精率、2PN率、胚胎率、优质胚胎率、临床妊娠率和胚胎种植率均无明显差异,3PN率r-ICSI组明显升高。结论对常规IVF失败(低下)患者进行早期-rICSI受精可以得到正常受精、胚胎发育及妊娠,为患者提供了更多的妊娠机会,可以考虑作为IVF实验室的常规操作。     

常规IVF受精失败后行补救ICSI与直接ICSI的临床比较分析

目的:探讨常规体外受精(IVF)失败后行补救性卵母细胞浆内单精子注射(Rescue ICSI)的临床价值。方法:回顾性分析2009年6-12月在我院生殖中心接受IVF-ET治疗,常规IVF受精完全失败行Rescue ICSI的患者共29个周期(Ⅰ组),与同期用男方射出精液直接行ICSI的70个周期(Ⅱ组)进行比较,两组患者均为首次接受体外受精/胚胎移植(IVF-ET)治疗。结果:Ⅰ组正常受精率、优质胚胎率、临床妊娠率分别为(80.8±16.2)%、(76.6±24.6)%、37.9%,Ⅱ组正常受精率、优质胚胎率、临床妊娠率分别为(82.9±15.9)%、、(72.7±24.4)%、41.4%,Ⅰ组与Ⅱ组相比差异无统计学意义(P>0.05);Ⅰ组卵裂率为(91.7±13.6)%,Ⅱ组为(97.4±6.8)%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补救ICSI可提高受精率,改善临床妊娠结局,可以作为常规IVF受精失败后的补救措施。     

部分卵子卵胞浆内单精子注射在辅助生殖技术中的应用价值

[目的]探讨部分卵子卵胞浆内单精子注射(half-ICSI)指征的选择及其在辅助生殖技术中挽救受精失败的意义.[方法]回顾性分析2007年1月至2008年12月在本院生殖中心实施采卵周期的常规体外受精(IVF)及half-ICSI患者的临床资料,比较两种方法的临床特征、受精率及妊娠率.[结果]half-ICSI组在不孕年限、不孕年限大于10年、原发性不孕及男方轻中度少弱畸精子症所占比例显著高于IVF组(P＜0.05);half-ICSI组低受精率及完全受精失败率较IVF组明显增高(P＜0.05),但Half-ICSI组中低受精组的妊娠率与常规IVF妊娠率相比差异无统计学意义(P＞0.05);half-ICSI组内IVF、ICSI均受精组各项精液参数均高于仅ICSI受精组,但仅在处理前精子总活率、处理前A级精子、处理前B级精子、处理后B级精子百分率上差异有统计学意义(P＜0.05);half-ICSI中根据移植胚胎来源分为IVF组、IVF+ ICSI及ICSI组,以移植IVF+ICSI混合胚胎的着床率及妊娠率为最高,差异有统计学意义(P＜0.05).[结论]对于原发性不孕、不孕年限大于10年、男方轻中度少弱畸精子症的患者,无论是单项或合并多项明确不孕原因存在可疑受精障碍,可考虑行half-ICSI治疗,避免完全受精失败及妊娠率低下.     

常规体外受精完全失败后补行卵胞浆内单精子注射的应用价值

目的：探讨IVF-ET周期中,对常规IVF完全受精失败的卵子补行卵胞浆内单精子注射精子（Rescue ICSI）的临床应用价值。方法：在常规IVF后18-22 h,对体外受精完全失败的12个周期、85个未受精MⅡ期卵行补行ICSI。以同时期进行ICSI的34个周期、226个MⅡ期卵为对照,比较ICSI结局。结果：补救ICSI组与对照组比较,基础内分泌指标,HCG日平均血清雌二醇和孕激素水平、子宫内膜厚度,获MⅡ期卵个数以及平均移植胚胎个数,无显著性差异。补救ICSI组受精率和卵裂率分别为78.82%、91.04%,与对照组（受精率为80.09%,卵裂率为95.58%）比较,差异无统计学意义。取卵后第3天,补救ICSI组卵裂球数≥5的优质胚胎比例占13.11%,低于对照ICSI组（73.99%）,差异有显著性（P〈0.05）。对照ICSI组妊娠率为38.24%,补救ICSI组无一例妊娠。结论：补行ICSI虽然可使常规IVF中未受精卵受精并获得胚胎,但是所得胚胎的发育潜能差,妊娠率极低,临床应用价值有限。     

体外受精-胚胎移植中精子形态与胚胎质量的相关研究

目的分析体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中男性精液精子形态与胚胎质量的相关性。方法选择行IVF-ET助孕治疗的112对不孕夫妇,以密度梯度离心法处理男方精液后运用Diff-Quick方法染色并按世界卫生组织精子形态学标准进行严格精子形态学分析,于体外受精后观察受精情况,受精后第3天观察胚胎卵裂情况。结果正常形态精子率、头部畸形精子率、中段畸形精子率及尾部畸形精子率与胚胎质量间均无显著相关性,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论精子形态与胚胎质量无明显相关性。     

取卵日男方精子形态及前向运动精子比例对体外受精-胚胎移植结局的影响

目的探讨取卵日男方精液处理前精子形态及前向运动精子比例对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的影响。方法回顾性分析2015年1月至2017年8月新鲜移植周期行IVF助孕的407例患者资料。根据世界卫生组织(WHO)《精液质量分析(第5版)》标准,按处理前正常精子形态(NSM)百分比及前向运动精子(PR)比例分为4组:弱畸精组(PR32%且NSM4%)、弱精组(PR32%且NSM≥4%)、畸精组(PR≥32%且NSM4%)、正常组(PR≥32%且NSM≥4%)。分别比较各组间的正常受精率、卵裂率、优质胚胎率、可用胚胎率、临床妊娠率及胚胎种植率。结果弱畸精组36例,弱精组35例,畸精组121例,正常组215例。弱畸精组与弱精组比较,结局差异无统计学意义(P0.05);弱畸精组与畸精组比较,除正常受精率差异有统计学意义外(P0.05),其他指标差异均无统计学意义(P0.05);弱畸精组与正常组比较,正常受精率、卵裂率、胚胎移植率差异均有统计学意义(P0.05),而优质胚胎率、可用胚胎率及临床妊娠率差异均无统计学意义(P0.05);弱精组与畸精组比较,除优质胚胎率外其他指标差异无统计学意义(P0.05);弱精组与正常组比较,正常受精率、卵裂率、优质胚胎率差异有统计学意义(P0.05);畸精组与正常组比较,正常受精率、卵裂率及可用胚胎率差异均有统计学意义(P0.05),其他指标差异无统计学意义(P0.05)。结论对于行IVF-ET助孕的患者,结合精子形态与前向运动精子比例能更好地预测其妊娠结局,而单纯分析正常形态精子百分率存在一定的片面性。     

人正常精子形态率对辅助生殖治疗结局的影响

目的:探讨人正常精子形态率对IVF或ICSI治疗结局的影响。方法:观察70周期正常精子形态率对IVF或ICSI后受精率、卵裂率、胚胎冷冻率、种植率、妊娠率及流产率的影响。结果:(1)精子形态异常组,精子的活动率和活动力也显著降低。(2)精子形态正常组IVF受精率、卵裂率显著高于异常组,而IVF的冷冻胚胎率、种植率、妊娠率、流产率及ICSI结局的各项指标两组间均无显著差别。结论:正常精子形态率对IVF受精率、卵裂率有显著影响,而对IVF或ICSI其他治疗结局尚无明显相关。     

Technique for rapid in vitro single-cell elastography

Statistically meaningful assays require scanning a large number of cells in a short time. Here we present a technique for rapid in vitro single-cell elastography. The technique is based on atomic force acoustic microscopy but (1) requires only a few minutes of scan time, (2) can be used on live cells briefly removed from most of the nutrient fluid, (3) does negligible harm or damage to the cell, (4) provides semiquantitative information on the distribution of modulus across the cell and (5) yields data with 1- to 10-nm resolution. We describe the new technique in detail, apply it to baby hamster kidney cells, verify the results and calibrate the images with atomic force microscope force-distance measurements. The technique enables rapid assessment of physical/biochemical signals on the cell modulus and contributes to current understanding of cell mechanics.     

Methods for in vitro antifungal susceptibility testing

During the last years, a large amount of work has been completed to improve the methods used for in vitro antifungal susceptibility testing. Reference techniques are currently available both for yeasts and filamentous fungi, but in some instances, technical improvement are needed. Etest is another well standardized method that can be used as an alternative on a routine basis in the clinical microbiology laboratory. Studies of in vitro-in vivo correlations have led to the definition of susceptibility breakpoints for yeasts for fluconazole, itraconazole, and flucytosine.     

致病性镰刀菌体外药敏试验研究

目的 探讨用于镰刀菌敏感的抗真菌药物,为临床治疗提供参考。方法 通过对镰刀菌的体外药敏试验,按照美国临床实验室标准化委员会推荐的M38－P方案,用微量稀释法测定40株茄病镰刀菌及6株串株镰刀菌,对7种抗真菌药物即两性霉素B、酮康唑、氟康唑、伊曲康唑、5－氟胞嘧啶、咪康唑、特比萘芬的敏感性。结果 40株茄病镰刀菌：MIC50：两性霉素B4μg/ml、酮康唑16μg/ml、氟康唑64μg/ml、伊曲康唑16μg/ml、5－氟胞嘧啶64μg/ml、咪康唑16μg/ml、特比萘芬0．25μg/ml,MIC90：除两性霉素B及特比萘芬外,其余药物均与MIC50相同,两性霉素B8μg/ml,特比萘芬4μg/ml。6株串珠镰刀菌的MIC值两性霉素B、氟康唑与茄病镰刀菌MIC50相同外,其余各药均低于茄病镰刀菌MIC50。结论 特比萘芬MIC值较低,有望用于镰刀菌感染的治疗。     

Correction for bacterial loss in in vitro dilution models.

A new method to correct for bacteria lost to dilution in in vitro kinetic models is presented which includes the influence of the stationary bacterial growth phase. The method imposes an upper limit on bacterial density, in contrast to previous methods.     

Extracellular strontium substitutes for calcium in in vitro renin secretion

It has been shown previously that ouabain, vanadate, angiotensin II and 0 and 60 mM KCl media have Ca-dependent inhibitory effects on renin secretory rates of rat renal cortical slices. In the present experiments, replacing extracellular CaCl2 with SrCl2 did not impair the inhibitory effects on renin secretion in this preparation. Moreover, methoxyverapamil antagonized the inhibitory effect of K-depolarization. The inhibitory effects and methoxyverapamil-induced antagonism of the inhibitory effect of K-depolarization, suggest that increased intracellular Sr++ can lead to inhibition of renin secretion, perhaps directly or perhaps by causing the release or mobilization of Ca++ from intracellular sites of binding or sequestration. These results add to the growing evidence that Ca++ plays an inhibitory second messenger role in the renin secretory process.     

植入式微波消融猪离体乳腺

目的观察植入式微波在离体猪乳腺实质的消融形态和范围,为临床应用提供参考。方法采用KY-2000型微波消融治疗仪,通过不同时间及功率组合对离体猪乳腺组织进行消融,观察其消融范围及形态。结果在功率20～60W,时间3～10min时微波消融离体猪乳腺组织的形态均为水滴形,可获得(1.65±0.06)cm～(3.78±0.10)cm的长径范围、(1.08±0.05)cm～(2.70±0.00)cm的横径范围和(1.27±0.70)cm3～(15.07±0.21)cm3的体积范围,形态规则。结论应用KY-2000型微波消融治疗仪对猪离体乳腺组织进行消融,可以达到较理想的消融体积及消融形态。     

离体猪肝组织的高频超声成像研究

目的探讨高频超声成像在组织定征中的应用.方法用高频超声对猪的肝脏组织进行了成像和组织定征的研究,分析了正常和病变肝组织的图像和声参量的差异.结果高频背向散射系数较声速、声衰减更能反映组织结构的变化,高频超声图像具有高的分辨率.结论高频超声成像是生物组织定征的有效手段.