多药耐药基因与肺癌氨柔比星耐药的相关性

目的探讨肺癌氨柔比星耐药与多药耐药基因(MDR1)的相关性。方法收集本院近年的肺癌标本,荧光定量PCR检测肺癌组织中MDR1基因的表达,MTT细胞毒实验检测氨柔比星对肺癌耐药细胞的生长抑制率。结果 MDR1基因在肺癌标本中的阳性表达率为37.5%,其中MDR1基因的表达在鳞癌和腺癌中高于小细胞肺癌(P<0.05),鳞癌与腺癌之间没有统计学差异(P>0.05),MDR1的表达在临床病理分级之间没有显著性差异(P>0.05),肺癌MDR1的表达量与氨柔比星对肺癌细胞的半数生长抑制浓度呈正相关(r=0.91)。结论肺癌对氨柔比星的耐药与MDR1基因的表达密切相关,MDR1基因可作为氨柔比星疗效果评价的一个生物分子标记。     

云南宣威昆明两地肺癌ras基因表达的异质性研究

目的云南省宣威市是我国的肺癌高发地区,具有显著的地域性特点,本研究通过比较ras基因在宣威及昆明两地肺癌中表达的差异性,分析ras基因在两地肺癌中的异质性。方法采用免疫组化染色技术,对45例宣威地区肺癌和45例昆明地区肺癌石蜡包埋组织标本中ras基因的表达进行检测,比较ras基因在两组肺癌组织中表达的差异。结果90例肺癌组织中55例ras基因表达阳性,其中宣威肺癌组31例,昆明肺癌组24例,两组相比,差异无统计学意义（62．0％vs48．0％,x2=2．291,P=0．130）。fas基因在宣威肺腺癌病例中的阳性表达率为78．3％（19／23）,在昆明肺腺癌病例中为47．8％（11／23）,宣威肺癌组高于昆明肺癌组,差异有统计学意义（78．3％vs47．8％,x2=4．572,P=0．032）。结论ras基因在两地肺腺癌病例中的表达存在着差异性,提示ras基因在两地肺腺癌中存在着异质性。     

上皮性卵巢癌中耐药相关基因的表达及临床意义

目的 通过测定多药耐药基因( MDR1)、多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药相关蛋白(LRP)在上皮性卵巢癌中的表达,了解其在上皮性卵巢癌化疗耐药中的作用.方法 采用逆转录-聚合酶链反应( RT-PCR)测定42例上皮性卵巢癌、40例良性卵巢肿瘤和30例正常卵巢组织中上述3项指标的表达,分析其临床分期、病理特征、化疗疗效等的关系.结果 ①在正常卵巢、良性卵巢肿瘤和卵巢癌组织中,MDR1 的阳性表达分别为:0％、0％、30.95％; MRP阳性表达率分别为:13.3％、12.5％、66.7％; LRP阳性表达率分别为:26.7％、52.5％、83.3％.卵巢癌组织中上述3项指标均明显高于正常卵巢和良性卵巢肿瘤,差异有显著性(P＜0.05),而正常卵巢和良性卵巢肿瘤比较,差异无显著性(P＞0.05).②MDR1和MRP在Ⅲ～Ⅳ期的阳性表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ期,LRP在Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期的阳性表达率无明显差异.③浆液囊腺癌的MDR1阳性表达率明显低于其他类型卵巢癌,差异有显著性(P＜0.05).低分化卵巢癌的MDR1、MRP和LRP的阳性表达率分别为47.4％、78.9％和84.2％,明显高于中高分化卵巢癌的17.4％、56.5％和82.6％,差异均有显著性(P＜0.05).④16例化疗有效者的MDR1、MRP和LRP的阳性表达率分别为6.25％、25％和75％,12例化疗无效者的阳性表达率分别为58.3％、83.3％和91.7％,两者相比,MDRI和LRP的差异均有显著性(P＜ 0.05).⑤与正常卵巢和良性卵巢肿瘤组织相比,卵巢癌组织中耐药相关基因的共同表达明显增加,差异有显著性(P＜0.05).14例化疗无效者的耐药相关基因共同表达率明显高于24例化疗有效者.结论 MDR1、MRP和LRP在上皮性卵巢癌组织的表达明显增高,同表达现象普遍,并与患者的临床分期、分化程度有关,MDR1和LRP还与化疗疗效有关.     

小细胞肺癌多药耐药基因的检测及临床应用研究

目的：探讨多药耐药集团（MDR1）在小细胞肺癌化疗中的作用和地位，方法：采用逆转录－多聚酶链式反应技术（RT／PCR）和免疫细胞化学染色法，检测了32例（初治原发癌21例和复治转移癌11例）小细胞肺癌患者血液中的MDR1mRNA水平和多药耐药蛋白（P－170）的表达，并对两种方法进行了比较。结果：初治的原发癌MDR1基因阳性表达率为14．29％，P－170蛋白阳性表达为14．27％，复治转移癌的MDR1基因阳性表达率为72．73％，P－170蛋白阳性表达为63．64％（P＜0．01），有显著性差异。MDR1的基因和蛋白两种而检测方法具有一定的一致性，以RT／PTR方法具有更强的敏感性，结论：复治转移癌组比初治组具有更普遍的抗药性，且主要是获得性抗药，MDR1基因表达可作为临床合理地制定化疗方案，预测化疗效果的重要参考指标。     

Twist基因在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的：探讨转录调节因子Twist在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及临床意义。方法：应用兔抗人Twist多克隆抗体采用SP免疫组织化学方法检测45例NSCLC组织及12例癌旁正常肺组织中Twist蛋白表达情况。结果：在45例肺癌组织标本中,Twist基因阳性表达为31例（68．9％）,癌旁组织中为2例（16．7％）,两者比较差异有统计学意义（Х^2=10．599,P〈0．01）。Twist高表达与肺癌分化程度相关（P〈0．05）。结论：NSCLC组织中存在Twist基因的高表达,Twist基因表达的上调,对肿瘤的发生、发展起着重要作用。     

膜反应性溶解抑制因子在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的观察膜反应性溶解抑制因子（MIRL,CD59）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达,分析其表达与临床分期、化疗用药及预后的关系。方法免疫组织化学法检测8例NSCLC癌旁组织和36例NSCLC手术标本中MIRL的表达,分析临床资料。结果36例NSCLC标本中,共有10例（27．8％）表达MIRL,其中18例肺鳞癌中有4例（22．2％）表达,而16例肺腺癌中有6例（37．5％）表达,两者差异有统计学意义（P〉0．05）,而2例大细胞肺癌不表达;MIRL的表达与无病生存期无相关关系（P〉0．05）;术前行新辅助化疗的患者的MIRL表达率低于未行新辅助化疗组（P〈0．05）。结论NSCLC中有MIRL的表达,提示在NSCLC抗体治疗中应同时阻断MIRL的免疫抑制效应。     

采用组织芯片技术分析肺癌中缺氧诱导因子1α（HIF-1α）和甲状腺转录因子1（TTF-1）的关系

目的采用组织芯片技术对肺癌组织和正常组织中缺氧诱导因子1α（HIF—1α）和甲状腺转录因子1（TTF-1）进行检测．探讨两者在肺癌中的作用和相互关系。方法采用组织芯片技术,免疫组织化学染色方法对50例肺癌（鳞癌24例,腺癌18例．小细胞癌6例,大细胞癌2例）和同期正常组织及其他疾病50例作为对照组,进行HIF—1α和TTF-1进行检测。工作液溶度均为1：50．微波修复抗体,采用PBS缓冲液代替-抗做阴性对照。结果（1）HIF—1α基因在肺癌组织中阳性表达率为40．2％（21／50）较正常组织（10％）升高,小细胞（100％）〉腺癌、大细胞癌（55％）〉鳞癌（12％）,同时与TNM临床分期亦有关系。（2）TTF-1基因在腺癌组织中的阳性表达率：肺腺癌为77．8％（14／18）,小细胞癌为83．5％（5／6）,大细胞癌为50％（1／2）,鳞癌的为0％（0/24）,但与,TNM临床无关。结论HIF—1α在腺癌组织细胞中的阳性表达率高于正常对照组,在3、4期的表达率高于1、2期,对临床肺癌诊断和评估预后有积极意义。TTF-1在肺腺癌和小细胞癌中的表达率较高,而鳞癌中均未见阳性表达．两者差异有显著性,可为临床鉴别提供依据。     

APC蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达

目的 探讨抑癌基因APC蛋白在非小细胞肺癌发生及发展中的作用和意义。方法 应用免疫组织化学方法检测25例肺鳞癌、26例肺腺癌、12例肺其它癌及8例正常或非癌肺组织中APC基因蛋白产物的表达水平。结果 正常和非癌肺组织APC蛋白阳性率为100％（8／8）,肺鳞癌、腺癌和其它类型的肺癌组织中的APC蛋白阳性率分别为52．0％（13／25）,50．0％（13／26）和41．7％（5／12）。APG蛋白在正常或非癌肺组织中表达的阳性率,显著高于肺鳞癌、肺腺癌及其他类型肺癌组织（P〈0．05）。非小细胞肺癌组织中APC蛋白表达与组织类型、病理分级、分化程度无关。结论 APC蛋白表达缺失可能是非小细胞肺癌发生的重要原因之一。     

环氧化酶-2及表皮生长因子受体在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨环氧化酶-2（COX-2）与表皮生长因子受体（EGFR）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及与肺癌发生发展的关系。方法采用免疫组化（SP）法检测56例NSCLC和20例正常肺组织中COX-2与EGFR表达。结果56例NSCLC组织中，COX-2与EGFR表达阳性率分别为64．2％，67．8％，显著高于正常肺组织（P〈0．01），COX-2与EGFR表达与临床分期、病理分级、组织学分型、淋巴结转移密切相关（P〈0．05），肿瘤分期愈晚，细胞分化越羞，淋巴结转移越高，COX-2与EGFR表达阳性率越高，腺癌中COX-2表达明显高于鳞癌，鳞癌中EGFR表达高于腺癌（P〈0．05）。结论COX-2与EGFR在NSCLC中异常表达说明其在肺癌发生发展中有重要作用．可作为判断NSCLC的生物学行为及估计预后的指标。     

肺腺癌患者GSTM1基因型与K-ras突变相关性分析

目的探讨肺腺癌患者谷胱苷肽-S-转移酶μ1（GSTM1）基因型与癌基因K-ras突变的相关关系。方法收集45例肺腺癌患者标本,抽提基因组DNA,PCR扩增GSTM1基因和K-ras基因的第12位密码子,利用PCR法来检测肺癌组织中GSTM1基因型和K-ras基因的突变情况,分析两者之间的相关性。结果在人的肺腺癌组织中,K-ras基因突变率为43．2％,GSTM1基因的缺失率迭52．6％,其中GSTM1基因缺失者与非缺失者的K-ras突变率分别为65．6％和13％,二者之间有显著性差异（P〈0．05）。结论在人肺癌组织中,GSTM1基因的多态性与K-ras基因突变明显相关,这些发现提示GSTM1基因的缺失导致肺腺癌易感性部分是K-ras基因的突变引起。     

胃癌细胞的体外药敏试验与多药耐药基因表达的关系

目的:分析胃癌细胞的体外药敏试验与多药耐药基因的表达之间的相关性。方法:采用MTT法测定化疗药物对胃癌肿瘤细胞的敏感性;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定胃癌组织中多药耐药基因(MDR1,MRP1,ABCG2,Topo-2mRNA)的表达水平。结果:单药组抑制率最高为5-FU(36.51%),联合用药组抑制率最高为DCF(56.80%);多药耐药基因(MDR1,MRP1,ABCG2,Topo-2mRNA在胃癌组织中的阳性率分别为33.3%,42.9%,52.4%,66.7%。结论:体外药敏试验测定并结合多药耐药基因表达的相关性可提高预测肿瘤的敏感性或发现其耐药性,为临床实现个体化治疗提供参考依据。     

槲皮素逆转人肝癌MDR相关基因的研究

摘 要 目的: 通过定量PCR芯片技术在基因转录水平上探讨槲皮素逆转人肝癌多药耐药( multi drug resistance, MDR)的作用机制。方法:采用体外培养人肝癌细胞Bel-7402及其耐5-氟尿嘧啶细胞Bel-FU, MTT法测定槲皮素的体外细胞毒性及浓度依赖的逆转耐药作用。定量PCR芯片检测BEL-7402细胞及Bel-FU细胞之间的差异基因,以及槲皮素作用于Bel-FU细胞前后的基因表达差异,实时定量PCR和western-blot法检测细胞中mdr1、H-ras基因以及P-gp蛋白的表达变化以验证基因芯片分析的结果。结果: 槲皮素对Bel-7402、Bel-FU细胞的IC10分别为59.2、58.2μM, IC50分别为226.7、193.9μM。16.5、33.0、49.5 μM 的槲皮素对Bel-FU 的耐药逆转倍数分别为1.14、1.68、2.38倍;与Bel-7402比较, Bel-FU细胞中的基因H-ras、Bcl-2、PDGFA、MDR1、BCRP表达上调（P＜0.05）表达上调。经槲皮素作用后,耐药细胞中基因H-ras、EGFR、FGF、VEGFA、PDGFA、MDR1、Erk1表达下调。实时定量PCR和western-blot证实了槲皮素可下调MDR1、H-ras基因以及P-gp蛋白在耐药细胞中高表达,与芯片检测到的基因水平变化一致。结论：槲皮素可逆转耐药细胞中耐药差异基因的高表达量,从而逆转人肝癌细胞的多药耐药性。     

贲门癌组织中多药耐药基因和多药耐药相关蛋白基因表达的临床研究

目的 了解多药耐药基因(MDR1)和多药耐药相关蛋白基因(MRP)在贲门癌组织中的表达及其临床意义。方法 采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)。观察46侧贲门癌及癌旁组织中MDR1和MRP的表达。结果 癌组织中MDR1和MRP表达的阳性率分别为63%和50%,均高于癌旁组织(P<0.05);贲门癌术前化疗者MDR1 mRNA和MRP mRNA表达水平显著高于未化疗者(P<0.05);中低分化肿瘤MDR1和MRP两基因mRNA表达水平高于高分化肿瘤(P<0.05)。结论 贲门癌组织中具有内源和获得性耐药性;MDR1和MRP表达与肿瘤的TNM分期无关,其高表达状态可预示肿瘤组织的分化不良。     

急性白血病患者体外药敏结合多药耐药基因MDR1、MRP及LRP与临床疗效的相关性研究

目的:分析体外药敏结合多药耐药基因MDR1、MRP及LRP与急性白血病患者临床疗效间的相关性,并研究三者间的内在联系,为临床个体化给药提供依据。方法:前瞻性收集2010年2-7月收住我院血液科的急性白血病患者35例,同时采用ATP-TCA对其进行体外药敏试验和RT-PCR对其进行多药耐药基因MDR1、MRP及LRP的检测。结果:体外药敏与临床疗效的总符合率85.7%,阴性符合率50.0%,阳性符合率90.3%,灵敏度93.3%,特异度40.0%。MDR1、MRP及LRP均表达阴性者23例,占65.7%,MDR1、MRP及LRP均表达阳性者2例,占5.7%,其中MDR1阴性者有效率93.3%,MDR1阳性者有效率40.0%(P<0.01);MRP阴性者有效率89.7%,MRP阳性者有效率66.7%(P>0.05);LRP阴性者有效率92.6%,LRP阳性者有效率62.5%(P<0.05)。23例体外药敏敏感且MDR1、MRP及LRP均为阴性的患者中有21例临床缓解,临床有效率为91.3%(21/23),2例体外药敏耐药且MDR1、MRP及LRP均为阳性者无1例临床缓解,临床有效率为0(0/2)。结论:同时进行体外药敏和MDR1、MRP及LRP的检测可更好地预测急性白血病患者的预后,并作为急性白血病患者个体化给药的实验室依据。     

多药耐药基因在大肠癌组织中的表达和临床研究

目的探讨大肠癌组织中7种多药耐药因子的表达、共表达及与患者临床病理特征的相关性。方法采用微波EnVision免疫组织化学法联合检测63例大肠癌患者癌组织中P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S转移酶-π(GST-π)、DNA拓扑异构酶(TopoⅡ)、胸苷酸合成酶(TS)、甲基鸟嘌呤甲基转移酶(MGMT)、肺耐药蛋白(LRP)及多药耐药相关蛋白(MRP)的表达水平。结果P-gp、GST-π、TopoⅡ、TS、MGMT、LRP和MRP在大肠癌组织中的阳性表达率分别为54%(34例)、71%(34例)、62%(39例)、67%(42例)、57%(36例)、79%(50例)和30%(19例)。所有的多药耐药因子表达均与患者的年龄、性别无相关。MGMT、LRP的表达与淋巴结转移相关;P-gp、GST-π、TopoⅡ、MRP的表达与组织学分级相关;TS、MGMT、LRP的表达与临床分期相关;P-gp、MGMT的表达与生存期明显相关。结论大肠癌组织表达多种耐药因子,各耐药因子间共表达具有明显相关性。大肠癌耐药由多种耐药基因共同参与,联合检测多项耐药因子有重要的临床意义。     

急性白血病多药耐药性检测的临床应用

目的 探讨急性白血病（急白）患者多药耐药基因（ＭＤＲ１）表达的临床意义放应用。方法 对３５例初治急白患者采用Ｓ－Ｐ免疫组化染以法检测ＭＤＲ１表达产物,地部分患者进行动态观察并配合药敏测定,了解急白患者化疗前后耐药情况的变化。结果 本组３５例ＭＤＲ,表达阳性者１４例（４０％）,其中急性淋巴细胞白血病（急淋）９便,急性晨淋巴细胞白血病（急非淋）５例,两者无显著差异,１４例ＭＤＲ１表达阳性者,达完全缓解     

MUC1蛋白在非小细胞肺癌早期诊断中的临床价值

摘要：目的 探讨黏蛋白1（MUC1）在不同类型非小细胞肺癌（NSCLC）患者血清和癌组织中的表达情况,并分析 其在NSCLC患者临床早期诊断及治疗中的预测价值。方法 收集2017年12月—2018年12月宁夏医科大学总医院 收治的 34 例肺鳞癌、65 例肺腺癌和 20 例非肺癌患者外周血及肺组织。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清 MUC1蛋白表达。所收取肺组织标本均经HE染色证实符合病理要求后,采用免疫组织化学染色法检测MUC1蛋白 表达。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清中MUC1蛋白预测不同类型NSCLC患者的临床价值。结果 肺鳞 癌和肺腺癌患者血清及癌组织中MUC1蛋白表达水平均高于非肺癌组（P＜0.05）。血清MUC1蛋白诊断肺鳞癌的最 佳临界值为33.23 U/mL,其诊断敏感度为52.94%,特异度为100%;肺鳞癌患者血清及癌组织中的MUC1蛋白阳性表 达率与病理分化程度、TNM分期、年龄、性别均无关（P＞0.05）;血清MUC1蛋白诊断肺腺癌的最佳临界值为31.31 U/ mL,其诊断敏感度为61.54%,特异度为95%;肺腺癌组中-低组织分化、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期组患者血清及癌组织MUC1 蛋白阳性表达率分别高于高组织分化、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期组（P＜0.05）。结论 NSCLC患者中MUC1蛋白呈高表达, 其对肺腺癌临床早期诊断及治疗可能有预测意义,对肺鳞癌无明显预测意义。     

nm23在人非小细胞肺癌中表达的研究

为研究抑制基因ｎｍ２３表达产物二磷酸核苷激酶（ＮＤＰＫ）在人肺癌中的表达及其意义，应用ＬＳＡＢ免疫组化染色方法对１４６例人非小细胞癌进行了分析。结果显示：ｎｍ２３在人肺癌中有较高的表达，阳性率为７３．２３％。在鳞癌的表达随着肿瘤的增大临床分期的进展而减弱，Ⅰ＋Ⅱ高于Ⅲ＋Ⅳ，中～高分化的高于低分化的。在腺癌的表达中－高分化的高于低分化的。鳞癌、腺癌及腺鳞癌３组中ｎｍ２３原发灶的表达水平明显高于转移灶（淋巴结），癌旁正常细支气管粘膜和肺泡上皮组织明显高于癌组织。结果表明ｎｍ２３基因在肺癌的发生、发展和转移中起一定的调节作用，并可能在肺癌中作为一种抑制基因而起作用。     

Expression of multidrug resistance proteins and accumulation of cisplatin in human non-small cell lung cancer cells

In order to understand and overcome multidrug resistance (MDR) of human non-small cell lung cancer (NSCLC), mRNA and protein expression levels of P-glycoprotein (MDR1), multidrug resistance-associated protein 1 (MRP1), and lung resistance-related protein (LRP) were investigated and compared with the chemosensitivity and the intracellular/intranuclear cisplatin accumulation of three NSCLC cell lines (Ma-10, Ma-31, and Ma-46). Ma-31 was more resistant than Ma-10 and Ma-46 to cisplatin, carboplatin, etoposide, and paclitaxel. The mRNA level of MDR1 was extremely low, and MDR1 protein was not detected in all cell lines. MRP1 mRNA expression was highest in Ma-31 and lowest in Ma-10, but there was no notable difference between the MRP1 protein expression in three cell lines. LRP mRNA/protein was equally expressed in Ma-10 and Ma-31, but was nominal in Ma-46. The intracellular/intranuclear cisplatin accumulation of the cells was determined to be Ma-31>Ma-46>Ma-10. Thus, MDR1, MRP1, and LRP mRNA and protein expression levels were not correlated with the chemosensitivity or the intracellular/intranuclear cisplatin accumulation of each cell line. The present results indicate that MDR proteins (MDR1, MRP1, and LRP) may not play an important role in the chemoresistance and drug efflux of NSCLC cells.