神经营养因子与神经干细胞移植联合治疗缺氧缺血性脑损伤的实验研究

目的 观察神经营养因子与神经干细胞(NSCs)联合移植对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠的治疗效果.方法 取新生24 h的Wistar大鼠海马NSCs进行培养、鉴定.选7日龄Wistar大鼠制备HIBD动物模型,7 d后行损伤侧侧脑室移植.将实验大鼠随机分为9组正常组、模型组、磷酸盐缓冲液移植组、NSCs移植组、BDNF组、BDNF NSCs移植组、NT-3组、NT-3 NSCs移植组、BDNF NT-3 NSCs移植组.移植4周后进行功能实验,取脑组织进行免疫组化及免疫荧光检查.结果 从新生大鼠海马可成功培养出NSCs,并表达NSCs的标志物神经巢蛋白(neuroepithelial stem cell protein,Nestin),NSCs可分化为神经元及星形胶质细胞.Y迷宫实验NSCs移植组达到学会的次数(163±11.60)n,正确记忆次数(5.00±1.13)n;BDNF组(150.00±8.94,5.17±1.47)n;BDNF NSCs移植组(111.25±13.56,6.23±1.60)n;NT-3组(153.56±10.35,5.07±1.03)n;NT-3 NSCs移植组(117.27±11.4,6.30±1.1)n;BDNF NT-3 NSCs移植组(110±11.55,6.30±1.1)n.悬吊实验NSC移植组平均(30.10±11.8)s;BDNF组(36.25±10.98)s;BDNF NSCs移植组(43.6±10.56)s;NT-3组(34.95±10.15)s;NT-3 NSCs移植组(40.64±10.6)s;BDNF NT-3 NSCs移植组(42.20±6.25)s.斜坡试验NSCs移植组平均(20.3±8.25)s;BDNF组(14.33±2.88)s;BDNF NSC移植组(11.17±2.48)s;NT-3组(15.26±2.98)s;NT-3 NSC移植组(12.8±3.65)s;BDNF NT-3 NSCs移植组(12.9±5.18)s.说明各联合移植组大鼠学习记忆能力及神经功能与NSCs移植组比较,明显改善(P＜0.05),而NSCs组大鼠学习记忆能力及神经功能与HIBD组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).各联合移植组损伤侧皮层、海马存活的NSCs数量(BDNF NSC移植组9.31±0.71个,10.10±1.65个;NT-3 NSCs移植组6.18±1.83个,8.18±3.06个;BDNF NT-3 NSCs移植组为9.58±1.61个,11.45±1.36个)与NSCs组(3.33±0.24个,4.22±0.33个)比较明显增多(P＜0.05),且NSCs分化为神经元的比例明显增多,与NSCs移植组比较,有统计学意义(P＜0.05),但双因子联合移植组与其单因子移植组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 BDNF、NT-3与NSCs联合移植是治疗HIBD的有效方法.     

造血生长因子保护/修复新生儿缺氧缺血性脑损伤

造血生长因子是促进骨髓造血细胞分化增殖和定向成熟的一系列活性蛋白。近年研究发现,促红细胞生成素(EPO)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和血小板生成素(TPO)等造血生长因子不仅参与造血的调控,作为多功能的营养因子,对神经系统也具有直接保护作用。它们通过动员骨髓的内源性干细胞,参与损伤神经组织的修复,或通过其抗凋亡作用,在不同种类的神经损伤(如脑缺氧、血及蛛网膜下腔出血等)中发挥神经营养和神经保护功能,为神经系统疾病的治疗带来新的曙光,是保护/修复新生儿缺氧缺血性脑损伤的新希望。     

神经营养因子与神经干细胞移植联合治疗缺氧缺血性脑损伤的实验研究

目的观察神经营养因子与神经干细胞(NSCs)联合移植对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠的治疗效果。方法取新生24h的Wistar大鼠海马NSCs进行培养、鉴定。选7日龄Wistar大鼠制备HIBD动物模型,7d后行损伤侧侧脑室移植。将实验大鼠随机分为9组:正常组、模型组、磷酸盐缓冲液移植组、NSCs移植组、BDNF组、BDNF NSCs移植组、NT-3组、NT-3 NSCs移植组、BDNF NT-3 NSCs移植组。移植4周后进行功能实验,取脑组织进行免疫组化及免疫荧光检查。结果从新生大鼠海马可成功培养出NSCs,并表达NSCs的标志物神经巢蛋白(neuroepi-thelial stem cell protein,Nestin),NSCs可分化为神经元及星形胶质细胞。Y迷宫实验:NSCs移植组达到学会的次数(163±11.60)n,正确记忆次数(5.00±1.13)n;BDNF组(150.00±8.94,5.17±1.47)n;BDNF NSCs移植组(111.25±13.56,6.23±1.60)n;NT-3组(153.56±10.35,5.07±1.03)n;NT-3 NSCs移植组(117.27±11.4,6.30±1.1)n;BDNF NT-3 NSCs移植组(110±11.55,6.30±1.1)n。悬吊实验:NSC移植组平均(30.10±11.8)s;BDNF组(36.25±10.98)s;BDNF NSCs移植组(43.6±10.56)s;NT-3组(34.95±10.15)s;NT-3 NSCs移植组(40.64±10.6)s;BDNF NT-3 NSCs移植组(42.20±6.25)s。斜坡试验:NSCs移植组平均(20.3±8.25)s;BDNF组(14.33±2.88)s;BDNF NSC移植组(11.17±2.48)s;NT-3组(15.26±2.98)s;NT-3 NSC移植组(12.8±3.65)s;BDNF NT-3 NSCs移植组(12.9±5.18)s。说明各联合移植组大鼠学习记忆能力及神经功能与NSCs移植组比较,明显改善(P<0.05),而NSCs组大鼠学习记忆能力及神经功能与HIBD组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。各联合移植组损伤侧皮层、海马存活的NSCs数量(BDNF NSC移植组9.31±0.71个,10.10±1.65个;NT-3 NSCs移植组6.18±1.83个,8.18±3.06个;BDNF NT-3 NSCs移植组为9.58±1.61个,11.45±1.36个)与NSCs组(3.33±0.24个,4.22±0.33个)比较明显增多(P<0.05),且NSCs分化为神经元的比例明显增多,与NSCs移植组比较,有统计学意义(P<0.05),但双因子联合移植组与其单因子移植组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论BDNF、NT-3与NSCs联合移植是治疗HIBD的有效方法。     

葡萄糖转运体与新生儿缺氧缺血性脑损伤

葡萄糖转运体(glucose transporter,GLUT)是葡萄糖通过细胞膜所需要的运载工具,在脑内有8种亚型的GLIYI表达,每种亚型表达部位及功能不同.新生儿缺氧缺血性脑损伤时未成熟脑组织对葡萄糖的利用程度及其GLUT的表达量与成熟脑组织相比有所不同.该文将对未成熟脑内8种GLUT的分布、功能及新生儿缺氧缺血性脑损伤后GLUT表达部位及时相的动态变化、与日龄的关系及意义作一综述.     

缺氧缺血性脑损伤新生儿血清硫化氢动态变化的研究

目的探讨新生儿缺氧缺血性脑损伤时血清硫化氢(H2S)水平的变化情况。方法选取本院儿科2004年12月至2009年9月因缺氧缺血性脑病或颅内出血住院的新生儿为观察组,同期因怀疑咽下综合征入院、最终排除各种疾病的新生儿20例为对照组。观察组分别于生后1~2天(急性期)及7~10天(恢复期)、对照组于生后1~2天留取空腹静脉血,采用ELISA法检测血清中H2S水平。结果观察组(52例)急性期H2S水平较对照组明显升高[(4.6±2.9)μmol/L比(2.4±1.7)μmol/L,P=0.002],观察组恢复期(31例)H2S水平较急性期(31例)明显降低[(1.7±1.7)μmol/L比(4.6±3.4)μmol/L,P=0.000];观察组恢复期血清H2S水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。早产儿和足月儿、缺氧缺血性脑病组和颅内出血组H2S水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论新生儿缺氧缺血性脑损伤后血清中H2S水平增高,并随疾病恢复而降低,发生动态变化。     

高压氧防治缺氧缺血性脑损伤的研究进展

高压氧应用于缺氧缺血性脑损伤的争议甚多。在一定的压力、时间范围内，高压氧可能通过增加缺血周围脑组织氧供、防止能量衰竭、抗神经元凋亡、促进神经元存活等机制起脑保护作用，又可能通过增加氧自由基的大量释放和脑血管的强烈收缩而加重脑组织的损害。最近在如何阻止高压氧的不利效应方面取得新的进展，但高压氧应用于新生儿缺氧缺血性脑损伤还需做更多的研究。     

人神经干细胞移植治疗重度新生儿缺氧缺血性脑病一例

目的探讨人神经干细胞移植方法治疗重度新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）的可行性。方法一例出生75天的重度HIE后遗症患儿,智力运动发育严重滞后,肌张力异常,磁共振图像显示脑实质多发软化灶和萎缩。取孕11周人胚胎前脑细胞,经体外培养扩增为人神经干细胞（neural stem cells,NSCs）,并经患儿脑室穿刺注入。结果移植28天后患儿不仅肌张力显著改善,智力运动发育迅速追赶、接近正常同龄水平。PET显示顶颞叶放射性增加,细胞代谢明显增强,提示植入的细胞存活。结论本例人胚胎来源NSCS移植治疗重度新生儿HIE后遗症,近期临床疗效显著,远期疗效有待进一步观察。     

人脐血单核细胞移植对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠远期神经行为学功能发育的影响

目的 探讨人脐带血单核细胞(UCBMC)促进缺氧缺血性脑损伤(HIBI)新生大鼠神经行为学功能及脑组织恢复的效果.方法 HIBI模型采用Rice-Vannucci方法,缺氧缺血后24 h,HIBI+移植组大鼠腹腔内注入1×10 7人UCBMC(在500μl的0.9％NaCl中).应用早期神经反射、Morris水迷宫及步迹分析等评价神经行为学功能;头颅MRI、普通HE染色评价损伤脑组织的恢复.结果 HIBI鼠与正常对照组相比,出现了明显的脑萎缩,手术对侧肢体出现明显的偏瘫,即右侧步长[(7.67±0.46) cm比(8.22 ±0.50) cm,F=1.494]及趾间距[(0.93 ±0.06) cm比(1.12±0.55) cm,F=0.186]较左侧明显减小(P均＜0.01);UCBMC移植后的HIBI大鼠与HIBI+ NaCl组相比,生后14d的悬崖调转[(8.44 ±2.38)s比(14.22±5.07)s,t=4.618]及阴性趋地性反射时间[(7.26±2.00)s比(11.76±3.73)s,t=4.755]明显缩短(P均＜0.01);Morris水迷宫实验显示人UCBMC移植后的HIBI大鼠的逃避潜伏期[(23.11±6.64)s比(34.04±12.95)s,t=3.356]及游泳距离[(9.12±1.21) cm比(12.70±1.53) cm,t=17.095]明显短于HIBI+ NaCl组(P均＜0.01);人UCBMC移植大鼠生后10 d[(75.37±4.53)％比(67.17±4.08)％,t=-6.017]及67 d[(69.05±3.58)％比(60.83±3.69)％,t=-7.148]的头颅MRI上残存的脑容积较HIBI+ NaCl组明显增多(P均＜0.01);人UCBMC移植后大鼠缺血侧大脑皮层皮质水肿比HIBI+ NaCl组明显减少,神经细胞坏死不明显.结论 人UCBMC腹腔内移植可促进大鼠缺氧缺血后损伤脑细胞的恢复及神经行为学功能的发育.     

新生儿缺氧缺血性脑病神经干细胞的研究进展

随着干细胞基础与临床研究的进展,干细胞具有的自我更新和多向分化潜能为新生儿缺氧缺血性脑病的治疗提供了一种新的方法.缺氧缺血性脑损伤后可以激活内源性神经干细胞,诱导其增殖、迁移、分化和凋亡,参与损伤后结构修复和功能重建.联合外源性的因素如干细胞移植术和神经营养因子等,将对干细胞应用于临床,治疗新生儿缺氧缺血性脑病具有重要意义.     

高压氧防治缺氧缺血性脑损伤的研究进展

高压氧应用于缺氧缺血性脑损伤的争议甚多。在一定的压力、时间范围内 ,高压氧可能通过增加缺血周围脑组织氧供、防止能量衰竭、抗神经元凋亡、促进神经元存活等机制起脑保护作用 ,又可能通过增加氧自由基的大量释放和脑血管的强烈收缩而加重脑组织的损害。最近在如何阻止高压氧的不利效应方面取得新的进展 ,但高压氧应用于新生儿缺氧缺血性脑损伤还需做更多的研究     

新生鼠脑缺氧缺血损伤后神经细胞再生增加(英文)

目的：许多研究已证实成年鼠脑缺血后神经细胞再生增加,但新生鼠脑缺氧缺血后神经细胞再生如何尚不太清楚。本文旨在调查新生鼠脑缺氧缺血后神经再生情况。方法：24只7日龄新生鼠分为对照组(n= 8)和缺氧缺血组(n=16),缺氧缺血组于缺氧后24h行MR扫描以证实脑梗塞灶产生。术后或缺氧后第2～6天每日腹腔注射1次BrdU标记新生的细胞,应用免疫荧光法检查缺血缺氧后1周和4周时神经再生情况。结果：缺氧缺血后1周或4周时缺血侧脑室管膜下区(SVZ)明显增宽。缺血侧SVZ的BrdU阳性细胞数在缺氧缺血后1周时显著高于对照组和非缺血侧(P<0.05),缺氧缺血后4周时较1周时下降,但仍显著高于对照组(P<0.05)。缺血侧海马齿状回颗粒细胞层下区(SGZ)的BrdU阳性细胞数在缺氧缺血后1周增高,明显高于对照组(P<0.05), 缺氧缺血后4周时较1周时减少,但仍显著高于对照组(P<0.05)。缺氧缺血后1周或4周时在皮质和纹状体梗塞坏死灶周围可见散在分布的BrdU阳性细胞。结论：新生鼠与成鼠类似,脑缺氧缺血后神经再生增强,提示不成熟脑具有一定自身修复能力。     

Abnormal corpus callosum in neonates after hypoxic-ischemic injury

Background  

Literature regarding callosal injury after hypoxic-ischemic injury (HII) is scant.     

早产儿缺血缺氧性脑损伤的CT与磁共振诊断

早产儿缺血缺氧性脑损伤是引起儿童致残的重要因素,它包括脑室周围白质软化( periventricu larleukomalacia ,PVL)、生发基质出血、脑室内出血及脑室周围出血性梗塞。早产儿缺血缺氧性脑损伤导致的颅内改变有别于足月儿,产生的后果也不相同,这些都与早产儿脑的解剖生理特点有关。影像学检查的目的是观察有无脑损害表现,了解脑损害的程度,同时正确判断预后,使临床医生及时对患儿作出恰当的处理,从而最大程度地降低患儿的致残率。1　早产儿缺血缺氧性脑损伤病理基础妊娠早、中期,脑室周围白质的血供主要来自脑表面向脑室方向走行的穿支血管,…     

围产期不良事件致新生儿急性缺氧缺血性脑损伤的类型分析

目的 探讨围产期不良事件致新生儿急性缺氧缺血性脑损伤（HIBI）的临床及影像学特征。方法 选取2004~2013 年46 例HIBI 患儿,对其临床及脑损伤类型进行分析。结果 足月儿组脑白质损伤为95%、皮层损伤90%、基底节- 丘脑损伤75% 和脑干损伤65%。早产儿组脑白质损伤73%、皮层损伤23%、基底节- 丘脑损伤19%、脑干损伤15%。早产儿灰质损伤发生率均低于足月儿组（P<0.05）;46% 的急性HIBI患儿伴有多器官功能受累,足月儿组临床表现较典型,95% 符合中、重度脑病,影像学改变多为混合型损伤,且以中、重度基底节- 丘脑损伤为主（68%）。多器官受累及动脉血pH 值小于7.1 与中、重度脑损伤的发生密切相关。结论 白质损伤是最常见的HIBI 类型,早产儿组也可见灰质损伤,但发生率低。中、重度脑病患儿的影像学损伤程度较重,且以基底节- 丘脑损伤为主。多器官受累、异常神经系统表现及早期血气分析对新生儿HIBI 诊断尤为重要。     

新生儿呼吸暂停与缺氧性脑损伤关系的研究

目的　探讨新生儿反复呼吸暂停与缺氧性脑损伤的关系。方法　对 78例反复呼吸暂停新生儿进行头颅CT扫描 ,其中足月儿 2 8例 ,早产儿 5 0例。观察缺氧性脑损伤的发生情况。结果　蛛网膜下腔出血 (SAH)2 5例 ,脑室内出血 (IVH) 10例 ,缺氧缺血性脑病 (HIE) 6例 ,HIE +SAH 8例 ,总阳性率为 6 2 .8%。早产儿组阳性率为 74% ,以颅内出血为主 ,足月儿组阳性率为 42 .8% ,以HIE及SAH为主。早产儿组与足月儿组比较差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。结论　新生儿反复呼吸暂停 ,是新生儿出生后缺氧性脑损伤的早期表现之一。对此类新生儿尤其是早产儿进行头颅CT扫描 ,有助于脑损伤的早期诊断与治疗。     

新生儿缺氧缺血性脑病脑电背景演变与脑损伤程度的相关性研究

目的 探讨新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)患儿脑电图(electroencephalogram,EEG)背景演变与脑损伤程度之间的相关性.方法 回顾性研究56例确诊为HIE并完善了连续视频脑电监测(continuous video electroenceph...     

Selective cortical alteration after hypoxic-ischemic injury in the very immature rat brain

Distinctive cerebral lesions with disruptions to the developing white matter are found in very low birth weight (VLBW) infants. Although hypoxia-ischemia (HI) is a causal pathway, the pathogenesis of cerebral white matter injury in the VLBW infant is not fully understood. Pertinent murine models would facilitate the investigation of the processes leading to these cerebral lesions and enable the evaluation of therapeutic strategies. Postnatal d 3 (P3) rats are at a stage of cortical oligodendroglial maturation and axonal outgrowth similar to very preterm infants. Our aim was to characterize the effects of a focal hypoxic-ischemic injury at P3 on subsequent cerebral development. Three groups of P3 Wistar rats were investigated: group I underwent right carotid ligation followed by 6% hypoxia for 30 min (HI), group 2 had carotid ligation only, and group 3 had no intervention. At P21, in the HI group, the right cortical area was reduced compared with controls (p < 0.01). There were no significant alterations in the size of the dorsal hippocampus, striatum, and thalamus. The cortical myelinated area was reduced in the HI animals compared with controls (p < 0.01). There was a corresponding loss of myelinated axons extending up into the cortex, with deep cortical neuronal and axonal architecture markedly disrupted. Glial fibrillary acidic protein immunohistology showed a reactive gliosis in the deep parietal cortex (p < 0.01). Moderate HI injury in the immature rat brain compromised cortical growth and led to a selective alteration of cortical myelinated axons with persistent gliosis. These alterations induced at P3 by unilateral HI share neuropathological similarities with the diffuse white matter lesions found in VLBW infants.     

Predicting outcome in hypoxic-ischemic brain injury.

Predicting the neurologic outcome of children after a hypoxic-ischemic event continues to be a challenge for intensivists and pediatric neurologists. Nevertheless, with accurate history taking, serial neurologic examination, and some ancillary studies, the clinician can predict accurately whether a child will die or have profound neurologic damage. Aggressive resuscitation should be offered to all children when found in CPA. A simple ingestion might have led to this clinical scenario, and complete neurologic recovery may be possible if effective resuscitation is implemented. In cases of drowning, several factors, if present, are consistent with profound neurologic sequelae or death. These include prolonged submersions with asystole, delayed onset of CPR, no spontaneous respirations on arrival to the emergency department, and low initial pH value. The options of withdrawal of life support or a DNR status should be offered to families of children who have survived a devastating hypoxic-ischemic event but who are in a PVS. If brain-death criteria have been fulfilled, the patient must then be disconnected from life support after organ donation has been discussed with the family.     

选择性头部降温治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤的初步评价

目的　研究选择性头部降温对足月新生儿窒息后缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemicbraindamage,HIBD）治疗的安全性和神经保护作用。方法　将18例中重度窒息的足月新生儿随机分为治疗组（11例）和对照组（7例）。治疗组采用选择性头部降温方法,维持鼻咽温度为(34.0±0.2)℃,持续72h;对照组不进行降温治疗。于生后62～72h采血检测肌钙蛋白-T、β2微球蛋白、D-二聚体,同时检测尿β2微球蛋白和脑脊液（CSF）神经烯醇化酶（NSE）等。于治疗前、生后7～10d和生后3个月进行常规16导联EEG检测,并分别采用新生儿神经行为评分（NBNA）、婴幼儿发育量表（CDCC）进行神经行为发育评价。结果　治疗组NSE为(18.1±2.1)μg/L,对照组为(24.6±5.3)μg/L（t＝2.04,P＜0.05）;治疗组患儿生后28dNBNA为(37±2)分,对照组为(32±3)分（t＝1.83,P＜0.05）。两组患儿血β2微球蛋白、肌钙蛋白-T、D-二聚体以及尿β2微球蛋白均明显升高,但两组差异无显著性（P均>0.05）。结论　初步研究显示,选择性头部降温对足月窒息新生儿具有神经保护作用,体温维持34.5℃以上是安全的。     

Pentoxifylline attenuates hypoxic-ischemic brain injury in immature rats

Inflammatory mediators are implicated in the pathogenesis of ischemic injury in immature brain. The phosphodiesterase inhibitor pentoxifylline inhibits production of tumor necrosis factor-alpha and platelet-activating factor. We hypothesized that pentoxifylline treatment would attenuate hypoxic-ischemic brain injury in immature rats. Seven-day-old rats (n = 79) underwent right carotid ligation, followed by hypoxia (FiO2 = 0.08). Rats received pentoxifylline immediately before and again after hypoxia (two doses, 25-150 mg/kg/dose, n = 34), or vehicle (n = 27). In separate experiments, rats received pentoxifylline treatment (40 mg/kg/dose, n = 8), or vehicle (n = 10) immediately and again 3 h after hypoxia-ischemia. Severity of injury was assessed 5 d later by visual evaluation of ipsilateral hemisphere infarction and by measurement of bilateral hemispheric cross-sectional areas. Pentoxifylline pretreatment reduced the incidence of liquefactive cerebral infarction, from 75% in controls to 10% with pentoxifylline, 40 mg/kg/dose (p<0.001, chi2 trend test). Quantification of hemispheric areas confirmed these findings. In contrast, posthypoxic-ischemic treatment with pentoxifylline resulted in only a modest reduction in cortical damage, without an overall reduction in incidence of infarction. Phosphodiesterase inhibition may be an effective strategy to use to decrease the severity of neonatal hypoxic-ischemic brain injury. Pretreatment regimens could be clinically relevant in settings in which an increased risk of cerebral ischemia can be anticipated, such as in infants undergoing surgery to correct congenital heart disease.